RP-HPLC法测定大鼠血浆的普鲁托品浓度及其药代动力学研究

普鲁托品 (ｐｒｏｔｏｐｉｎｅ ,Ｐｒｏ)又名ｆｕｍａｒｉｎｅ ,是从罂粟科 (Ｐａｐａｖｅｒａｃｅａｅ)的夏天无、紫金龙等植物中提取的一种异喹啉生物碱。现代药理学研究表明 ,Ｐｒｏ有抗血小板聚集[1] 、解痉镇痛[2 ] 、舒张血管平滑肌[3 -5]及抗实验性心律失常[6] 等作用 ,但有关Ｐｒｏ在生物体内处置及药代动力学研究未见报道。本研究建立了Ｐｒｏ的ＲＰ ＨＰＬＣ测定法 ,并研究了Ｐｒｏ在大鼠的体内过程及其药代动力学参数 ,为临床应用提供实验资料。材料和方法　　试剂　盐酸普鲁托品 (ｐｒｏｔｏｐｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ…     

RP-HPLC法测定家兔血浆中甲苯喹哌浓度和药代动力学参数

本文建立了以紫外230nm波长检测的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定家兔血浆中甲苯喹派浓度。填料使用LiChrosorb RP-C18,流动相为甲醇—水—三乙胺—磷酸(63:37:1:0.8 v/v),血样(或尿样)经碱化后用乙醚提取,再以0.2 mol/L硫酸回提,进样。方法回收率为99.84±3.10(SD)%;天内、天间精密度平均CV为4.12%及3.95%(n=5);最低检测限3ng.经提取的标准线性浓度在25～2000 ng/ml范围内,Y=0.002865X-0.01346,r=0.9999,内源性物质及可能的合并用药不干扰色谱测定。文内用质谱法鉴定血样中甲苯喹哌色谱峰纯度,并由尿样分析对其主要代谢物予以初步验证。本法可应用于药代动力学参数测定。家兔按8mg/kg静注后,药—时曲线符合二室模型T_(1/2)=4.8008±1.1522(SD)h。     

RP-HPLC法测定家兔血浆中甲苯喹哌浓度和药代动力学参数

本文建立了以紫外230nm波长检测的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定家兔血浆中甲苯喹派浓度。填料使用LiChrosorb RP-C18,流动相为甲醇—水—三乙胺—磷酸(63:37:1:0.8 v/v),血样(或尿样)经碱化后用乙醚提取,再以0.2 mol/L硫酸回提,进样。方法回收率为99.84±3.10(SD)%;天内、天间精密度平均CV为4.12%及3.95%(n=5);最低检测限3ng.经提取的标准线性浓度在25～2000 ng/ml范围内,Y=0.002865X-0.01346,r=0.9999,内源性物质及可能的合并用药不干扰色谱测定。文内用质谱法鉴定血样中甲苯喹哌色谱峰纯度,并由尿样分析对其主要代谢物予以初步验证。本法可应用于药代动力学参数测定。家兔按8mg/kg静注后,药—时曲线符合二室模型T_1/2=4.8008±1.1522(SD)h。     

RP-HPLC法测定大鼠血浆中丹参酮IIA浓度及其药代动力学研究RP-HPLC法测定大鼠血浆中丹参酮IIA浓度及其药代动力学研究

目的建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中丹参酮IIA浓度的方法。方法血浆样品经液-液萃取后,用HPLC法进行分析。色谱柱为YMC C¹⁸(5 μm,ID 3.0 mm×150 mm);流动相为乙腈-水-冰醋酸(74∶26∶1);流速0.3 mL·min^-1;检测波长270 nm;内标为4-氯联苯。结果线性范围为0.05 mg·L^-1～6.40 mg·L^-1,最低检测浓度为0.05 mg·L^-1。高、中、低3种浓度的平均方法回收率分别为98.9%,102.1%和100.4%。日内、日间精密度(RSD)均小于5%。结论本方法稳定、简便、可靠,可用于丹参酮IIA的血药浓度分析及其药代动力学研究。     

RP-HPLC法测定人血浆中奥美拉唑浓度及其在健康男性志愿者药代动力学研究

目的:建立人血浆中奥美拉唑的含量测定方法,用于其血药浓度测定并进行临床药代动力学研究。方法:1ml血浆样品以二氯甲烷提取,采用反相高效液相二极管阵列检测器分离测定血浆中的奥美拉唑浓度。色谱条件:krumasilC18柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相为乙睛:三蒸水(含0.01mol·L-1磷酸氢二钠,三乙胺调pH7.5)=4555(v/v);流速:1.3ml·min-1,检测波长302nm,进样量30μl。9例健康志愿者单剂量口服40mg奥美拉唑肠溶胶囊,用高效液相色谱法测定给药后不同时间点血浆中奥美拉唑的浓度,计算其药动学参数。结果:奥美拉唑在10～2000μg·L-1浓度范围内呈良好的线性关系,最低检测浓度为10μg·L-1。高、中、低浓度的方法回收率分别为92.35%、96.90%、100.04%,RSD均小于15%。健康人体药动学研究证明,奥美拉唑的药时曲线符合一室模型。结论:本方法灵敏度高、专属性强、准确、简便,适用于奥美拉唑的人体药代动力学研究。     

HPLC法测定喷昔洛韦在健康人血浆浓度及其药代动力学研究

目的建立高效液相色谱法测定健康人血浆中喷昔洛韦（抗病毒药）浓度的方法，并研究其在健康人体的药代动力学。方法色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18（4．6mm×150mm，5μm）。流动相为甲酸溶液和乙腈，用梯度洗脱方式，流量为1．0mL·min^-1。用该法研究10名健康受试者静脉滴注喷昔洛韦250mg的药代动力学。结果线性范围：血浆样品为0．05～5．00μg·mL^-1（7=0．9999）；尿样为0．1～20．0μg·mL^-1（7=0．9998）。血样及尿样的日内、日间皆RSD〈3％。其体内过程符合二室模型，其药代动力学参数：Cmax为（3．63±0．72）μg·mL^-1，AUC0-t为（7．67±1．10）μg·h·mL^-1。为（1．79±0．26）h，24h尿药累积排泄率为（73．9±15．6）％。结论此方法准确、简便、灵敏度高、专属性强，适用于临床药代动力学研究。     

HPLC法测定健康人血浆中莫雷西嗪浓度及其药代动力学研究

目的建立测定人血浆中莫雷西嗪(抗心律失常药)浓度的高效液相色谱法。方法色谱柱HypersilODS(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-三乙胺(70∶30∶0.4,pH6.8);检测波长:268nm;氯氮平作为内标,用HPLC法测定人血浆中的莫雷西嗪浓度。结果莫雷西嗪浓度线性范围为0.04～4μg.mL-1,回归方程Y=11.42X 1.44,γ=0.9992;回收率>85%,日内和日间RSD均<15%。结论本方法简便、快速、准确,适用于莫雷西嗪药代动力学研究及血药浓度监测。     

RP-HPLC法测定人血浆中穿琥宁含量及药代动力学研究

目的:研究穿琥宁在人体内的药代动力学过程并建立人生物样品的高效液相色谱方法。方法:采用液-液萃取的方法从生物样品中提取出穿琥宁后用Diaminsil-C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)柱进行分离,采用的流动相为:乙腈-磷酸盐缓冲液[0.5 g.L-1磷酸二氢钾,用磷酸调节pH至2.5(±0.05)](43∶57,v/v)。结果:穿琥宁在人体内静脉给药200 mg后药代动力学符合二室模型,统计距参数为:Cmax为(9.796±2.306)μg.mL-1、Tmax(1.382±0.231)h、T1/2z(1.678±0.509)h。结论:此方法快捷、灵敏、简便,适合于穿琥宁的药代动力学研究。     

RP-HPLC法测定癫痫患者血浆中奥卡西平血药浓度和药动学研究

目的建立人血浆中奥卡西平药物浓度的RP-HPLC检测方法,并研究其在人体内的药动学。方法采用液–液萃取法,用萃取液甲基叔丁基醚萃取癫痫患者血浆中的奥卡西平后,以阿普唑仑为内标。色谱柱为Kromasil 100A C18(250mm×4.6 mm,5μm),柱温40℃,流动相为甲醇–乙腈–水–磷酸(30∶30∶40∶0.04),体积流量1.0 mL/min,紫外检测波长243 nm,固定进样量20μL。以3p97软件计算10名受试者清晨空腹单剂量口服奥卡西平片600 mg后的平均药动学参数。结果血浆中内源性杂质对样品测定无干扰,奥卡西平在21.6~2 160.0μg/L(r=0.999 2)线性关系良好,最低定量限21.6μg/L;方法回收率为95.45%~107.69%;日内RSD值为4.97%~7.35%,日间RSD值为4.81%~11.27%。含药血浆经3次冻融后稳定性良好。结论本方法操作快速、简便、灵敏度高、准确度好,可用于含奥卡西平血样的即时检测分析和临床药动学研究。     

格列吡嗪血药浓度测定及中国健康人体药物动力学研究

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中格列吡嗪浓度的方法,以及研究格列吡嗪片在中国健康人体的药物动力学。方法以KiomasalC18(4.6mm×125mm,5μm)为分析柱,乙腈0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(38∶62,v/v)为流动相,流速为1.0mL·min-1,二极管阵列检测器(DAD)检测波长为225nm,艾司唑仑为内标,测定血浆中格列吡嗪的浓度。结果在浓度20.4～2040ng·mL-1,格列吡嗪和内标峰面积比值与浓度呈良好的线性关系(r=0.9993)。格列吡嗪高、中、低3个浓度的平均回收率分别为(105.2±4.4)%、(92.9±5.0)%、(109.4±8.4)%;日内、日间RSD均小于10%。药物动力学研究表明,格列吡嗪体内过程符合一室模型,体内药物tmax、cmax、t1/2(Ke)、AUC0～24分别为(1.6±0.3)h、(728.5±229.7)ng·mL-1、(3.3±0.9)h、(4130.5±1383.0)ng·h·mL-1。结论方法简便、快速准确、重现性好,可用于格列吡嗪的药物动力学研究。     

反相高效液相色谱测定紫杉醇在小鼠的血药浓度

目的建立一种快速测定紫杉醇(抗肿瘤药)血药浓度的方法。方法用Waters Nova-parkC18柱(4μm,150mm×3.9mm),流动相为乙腈-水=42∶58,流量为1.0mL·min-1,紫外检测波长为227nm;以多西紫杉醇为内标,采用固相萃取法,用RP-HPLC法测定昆明小鼠尾静脉单次注射紫杉醇18mg·kg-1后的血药浓度。结果紫杉醇和多西紫杉醇的保留时间分别是10.3、8.1min;标准曲线为Y=4×10-4X-4.4×10-3,相关系数γ=0.9995,在50～3200ng.mL-1内呈良好的线性关系,最低检测浓度为12.5ng.mL-1(S/N=3),符合检测要求;绝对回收率为101.82%～106.98%,相对回收率为94.3%～108.1%;日内及日间RSD均小于6%(n=5)。其体内过程符合二室模型,t1/2α为(0.59±0.03)h,t1/2β为(1.33±0.09)h,AUC0→∞为(80.1±3.20)h.μg.mL-1,Vd为(9.08±0.51)mL。结论本方法快速、准确、简便,能够满足快速检测紫杉醇的药代动力学要求。     

RP-HPLC法测定大鼠血浆中多烯紫杉醇的含量

目的建立大鼠血浆样品中多烯紫杉醇的液-液萃取RP-HPLC测定法。方法大鼠血浆样品经乙腈-氯代正丁烷(体积比为1∶4)提取,以地西泮(diazepam)为内标物,流动相采用水-甲醇-四氢呋喃-氨水(甲酸调pH)系统进行梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),UV检测波长为232 nm。结果多烯紫杉醇在50~10 000μg.L-1内线性关系良好,定量下限为50μg.L-1,提取回收率为70.2%~79.0%。结论HPLC法适用于大鼠血浆中多烯紫杉醇浓度的测定及药物动力学研究。     

司氟沙星血药浓度测定及药动学研究

目的:建立测定血浆中司氟沙星浓度的反相高效液相色谱法,并用此方法对正常人口服司氟沙星片进行药动学研究。方法:血浆标本经乙腈沉淀蛋白后,以5％冰醋酸(pH 2.8)-甲醇-乙腈(80:10:10)为流动相,以紫外分光光度计305nm波长处检测。结果:线性范围:31.25～4 000.00ng·mL~(-1),日内RSD为2.83％～5.61％,日间RSD为2.30％～7.05％;平均回收率(98.06±3.78)％,最低检测浓度20ng·mL~(-1)。结论:此方法简便可靠,灵敏度高,可用于司氟沙星药动学研究。     

反相高效液相色谱法测定血浆中的帕珠沙星

目的:建立反相高效液相色谱法测定人血浆中帕珠沙星浓度,用于帕珠沙星人体药动学研究.方法:采用YMC C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,柱温为35℃,流动相为乙腈-0.025 mol·L-1醋酸钠(醋酸调pH 2.6)(13:87),流速为1 mL·min-1.以盐酸芦氟沙星为内标,检测波长249 nm.结果:标准曲线线性范围78.125～2 000μg·mL-1;萃取回收率66.76%～72.76%;方法回收率97.85%～110.9%;日内RSD在5.1%～9.9%;日间RSD在4.8%～6.2%.结论:本方法快速、灵敏、准确、简便,适用于帕珠沙星血药浓度测定及药动学研究.     

高效液相色谱法测定吡美拉唑血药浓度及其药代动力学

目的 建立测定吡美拉唑血药浓度的高效液相色谱(HPLC)方法,并初步考察其在人体内的药代动力学特性。方法 受试者口服吡美拉唑10 mg后,分别于给药前,给药后0.5, 1, 1.5, 2, 4, 8, 12, 21, 36, 48, 60和72 h采集血样,通过HPLC吡美拉唑的血药浓度,并应用3P87软件拟合并计算药代动力学参数。结果 吡美拉唑的线性范围为25~4000 μg·L^-1,最低检测浓度为25 μg·L^-1,回收率95.2%~107.7%,日内精密度均<6.9%,日间精密度<10.2%。吡美拉唑的主要药代动力学参数:t_1/2为(22.58±1.59)h, AUC_0-72为(29 089±8886)μg·h·L^-1, Cl/F为(338.9±114.0)L·h^-1, t_max为(2.67±1.54)h, c_max为(1585±469)μg·L^-1。结论 吡美拉唑在人体内吸收快,半衰期较长,有效作用时间长,疗效好。     

UPLC法快速测定栀子复方制剂中栀子苷和西红花苷-1含量

目的建立快速测定栀子复方制剂复方牛黄消炎胶囊、清胃黄连丸和龙泽熊胆胶囊中栀子苷和西红花苷-1的方法。方法采用UPLC法。色谱柱为BEH C18柱(50mm×2.1mm,1.7μm);流动相:甲醇-水以不同梯度洗脱;流速:0.3mL·min~(-1);检测波长:0~7min为238nm,7~20min为440nm;柱温:30℃;进样量为2μL。结果 3种复方制剂中栀子苷在0.010~1.000mg·mL~(-1)范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率分别为98.2%,99.9%和100.3%,RSD分别为1.3%,1.4%和1.0%;西红花苷-1在0.1~10.0μg·mL~(-1)范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9)。平均回收率分别为99.6%,97.4%和98.3%,RSD分别为1.3%,1.4%和1.5%。结论栀子苷和西红花苷-1在20min内获得良好分离,该方法简便、准确、快速,可用于栀子复方制剂中栀子苷和西红花苷-1的测定。     

RP-HPLC法测定人体血浆中愈创木酚的浓度

目的建立测定人血浆中的愈创木酚浓度的RP-HPLC法。方法采用Hypersil ODS柱,以质量分数为0.5%H3PO4和质量分数为0.5%三乙胺的水溶液-乙腈(体积比为100∶50)为流动相,流速为1 mL.min-1,检测波长220 nm。结果愈创木酚的线性范围为0.580 8~87.12 mg.L-1,最低定量限为0.580 8 mg.L-1,回归方程Y=22 494.27X-6 906.97,r=0.999 4(权重1/c4×103);平均回收率为(99.78±3.85)%,日内及日间精密度分别为2.99%和2.59%(n=6)。结论该方法简便、快速、准确,适用于临床上呱西替柳体内的研究,为呱西替柳的临床研究提供可靠的动力学依据。