高效液相色谱荧光法测定人血浆氯沙坦浓度

目的:建立测定人血浆氯沙坦浓度的高效液相色谱荧光法。方法:以β-萘酚为内标,血浆用乙酸乙酯提取处理;采用AgilentZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm*4.6 mm,5μm);柱温:20℃;流动相:乙腈-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液=49:51(V/V);流速:1.0 m l.m in-1;荧光检测激发波长:308 nm,发射波长:380 nm。结果:血浆内源性杂质对样品测定无干扰,氯沙坦最低定量浓度为5 ng.mL-1,在5~200 ng.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998)。氯沙坦的日内、日间精密度RSD均<15%,样品多次冻融及提取后稳定性好。结论:该法准确、快速、灵敏、简便,可作为人血浆氯沙坦浓度的测定方法。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中头孢丙烯顺式和反式异构体

目的 建立人血浆中头孢丙烯顺式(Z)异构体和头孢丙烯反式(E)异构体的高效液相测定法.方法 血浆样品经沉淀法处理后,进行HPLC分析.结果 顺式(Z)和反式(E)异构体的线性范围分别为0.1003～16.0400μ gmL-1和0.0200～1.6032μgmL-1,定量下限分别为0.1003μg/ml和20.0ng/ml,提取回收率分别为98.1%～101.9%和89.9%～96.1%,准确度及精密度均符合测定要求.结论 本方法灵敏、准确、简便,适用于血浆中头孢丙烯两种异构体的测定.     

高效液相色谱法测定人血浆中紫杉醇浓度

目的;建立人血浆中紫杉醇的高效液相色谱测定法。方法：血浆中紫杉醇用醋酸乙酯提取后在Ｃ１８柱上以甲醇－水为流动相,检测小长２２７ｎｍ以峰面积外标法定量。结果：该法萃取上率为９４．５８％,方法回收率为９９．９％,日内、日间ＲＳＤ均小于４％,应用本法测定了两例癌症患者静脉输注紫杉醇的经时血药２符合二开放模型,结论：本法操作简便,灵敏高,志属性强。     

人血浆萘哌地尔浓度的高效液相色谱法测定

目的 研究人血浆萘哌地尔的高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定。方法 血浆样品依次用６ｍｏｌ／ＬＨＣｌ，ＮａＯＨ处理，乙醚提取２次，色谱分析柱为粒径５μｍ，填料为ＥｃｏｓｐｈｅｒｅＣ１８，内标为美托洛尔，流动相为甲醇－乙腈－水－０．０２ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４（５５：２０：２２：３）ｐＨ４．１０。荧光检测器激发波长２９０ｎｍ，发射波长３４０ｎｍ。结果 最低检测浓度为１．０ｎｇ／ｍｌ天内及天间的变异系数为１     

高效液相色谱法测定人血浆中芬太尼的浓度

目的　建立高效液相色谱 (HPLC)法测定芬太尼血药浓度的方法。方法　本实验以乙腈 :水 (0 .0 15mol/LNaH2 PO4,pH =5 ) =4 0 :6 0为流动相 ,流速 1.5ml/min ,紫外吸收波长为 2 2 0nm。 结果　本法对血浆中药物的最低检测浓度为 5 μg/ml,线形范围 5～ 10 0 μg/ml。对芬太尼方法回收率均大于 95 % ,日间日内相对标准偏差均小于10 .0 %。结论　本法简便、准确 ,能满足临床对芬太尼血药浓度的测定。     

高效液相色谱法同时测定人血浆丙泊酚和利多卡因浓度

目的 探索一种简易的同时测定人血浆丙泊酚和利多卡因的血药浓度分析方法,为临床研究两种药物之间的相互作用提供科学依据.方法 用环己烷提取血浆中的丙泊酚和利多卡因,用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定丙泊酚和利多卡因的含量.以Shim-pack VP...     

反向高效液相色谱测定法同时测定人血浆中5种镇静催眠药浓度

目的：建立人血浆中地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑的反向高效液相色谱测定法（RP-HPLC）。方法：以血浆为基质,配制含有5种镇静催眠药的混合标准品,取1 mL样品加入50 mg/L卡马西平10 μL为内标,乙酸乙酯萃取后用100 μL流动相溶解,进样20 μL,通过高效液相色谱仪检测人血浆基质中5种镇静催眠药浓度。色谱条件：色谱柱为C18柱（4.6 mm×250 mm）,柱温30 ℃,流动相为甲醇:水（65∶35）,流速1.0 mL/min,紫外检测波长为230 nm。结果：地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑在5～1 200 μg/L 范围内线性关系良好(r≥0.9966, P<0.05) ,加样回收率在95.5%~105.6%,萃取回收率均在75%以上,日内及日间变异相对标准偏差(RSD)均小于10%（n=5）。 结论：RP-HPLC方法简便、准确、灵敏,适用于人血浆中地西泮、硝西泮、奥沙西泮、艾司唑仑和阿普唑仑的血药浓度的同时检测。     

高效液相色谱法测定人血浆中芬太尼的浓度测定分析

目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定芬太尼血药浓度的方法。方法本实验以乙腈：磷酸盐（0．015ol／LNaH2PO4,pH=5）=40：60为流动相,流速3ml／min,紫外吸收波长为200nm。结果高效液相色谱法对血浆中药物的最低检测浓度为1ng／ml,线形范围6-300ng／ml。对芬太尼方法回收率均大于95％,日间日内相对标准偏差均小于10．0％。结论高效液相色谱法简便、准确,能满足临床对芬太尼血药浓度的测定。     

高效液相色谱-荧光检测法测定血浆总同型半胱氨酸浓度

目的 :建立测定血浆总同型半胱氨酸的高效液相色谱 (HPLC) 荧光检测分析方法。方法 :用TCEP将血浆中各种形式的同型半胱氨酸 (Hcy)还原成总同型半胱氨酸 (tHcy) ,以光胺作内标 ,巯基特异性荧光衍生剂SBD F对Hcy ,胱胺等含巯基化合物进行柱前衍生 ,然后行HPLC 荧光检测。结果 :本方法所检测的Hcy浓度在 2 .5～ 16 0 μmol·L- 1 范围具有良好的线性关系 (r =0 .9975 ) ,Hcy最低检测限 0 .6 2 5 μmol·L- 1 ,批内变异小于 5 .5 % ,批间变异小于 9.0 % ,平均回收率 98.87%。结论 :本法简便、灵敏、精确、稳定     

HPLC—MS同时测定人血浆中阿莫西林和克拉维酸的浓度

目的 :同时测定人血浆中阿莫西林及克拉维酸的浓度 ,并用本法研究 Augmentin(阿莫西林∶克拉维酸钾 =7∶ 1 )干混悬剂的人体相对生物利用度。方法 :色谱柱为 Kromasil ODS 1 5 0 mm× 4 .6 mm ID,5μm,检测器为四极质谱检测器。内标为头孢羟氨苄 ,血浆样品通过 Microcon YM-1 0超滤膜超滤制备。结果 :阿莫西林、克拉维酸的线性范围分别为 0 .0 4～ 4 0 μg/ ml和 0 .0 2～ 2 μg/ ml,方法的回收率大于 80 %。 2 0名志愿者随机交叉口服单剂量 Augmentin的干混悬剂和分散片后 ,以本法测定其体内血药浓度经时过程。两种制剂的 AUC0→ 8,Cmax,Tmax均无显著性差异。结论 :阿莫西林和克拉维酸血药浓度的同时测定结果表明两种制剂生物等效 ,干混悬剂对分散片两成分的相对生物利用度分别为 1 0 1 .7%和 99.2 %。     

毛细管电泳电化学法（CE-ECD）检测人全血中的同型半胱氨酸（Hcy）、半胱氨酸（Cys）和还原型谷胱甘肽（GSH）

 目的 建立毛细管电泳电化学技术(capillary electrophoresis with electrochemical detection,CE-ECD)检测人全血中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酸(cysteine,Cys)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的方法。考察缓冲液的浓度、酸碱度、分离电压、进样时间和检测电压等参数对分离和检测的影响,确定最佳的实验条件。方法 以直径为500 μm的铂圆盘电极作为检测电极,用长度为50 cm的熔融石英毛细管对一系列待检物标准溶液和人全血样本进行毛细管电泳电化学检测。结果 在最优条件下,当电极电位为+1.05 V(相对饱和甘汞电极)、分离电压为18 kV时,Hcy、Cys和GSH于100 mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH 7.8)中在10 min内获得理想分离。检测下限(S/N=3)在0.29～0.80 μmol/L范围内,且在3倍数量级浓度范围内,3种组分的浓度与峰电流呈良好线性关系。对0.5 mmol/L的混合标准溶液连续检测7次,Hcy、Cys和GSH峰高的相对标准偏差（relative standard deviation,RSD)分别为3.7%、3.1%和2.9%。结论 CE-ECD方法可对Hcy、Cys和GSH等3种生物活性巯基化合物进行高效分离及检测,具有分析速度快、成本低、灵敏度高、试剂及样品用量小等优点,因此在生物医药领域具有广泛的应用前景。本实验采用的铂圆盘电极具有污染少、重复性好的特点。     

高效液相色谱法测定人血浆中汉防己甲素

本文建立了人血浆中汉防己甲素的高效液相色谱测定法。采用C18柱 ,以含 0 0 3%三乙胺的甲醇∶水 (80∶2 0 )为流动相 ,检测波长 2 82nm ,安定为内标 ,样品用乙醚提取。汉防己甲素线性范围 0 2 89～ 4.6 18μg·ml-1,平均加样回收率 95 8% ,日内及日间变异少于 5 %。方法简便、快速、可靠 ,可用于汉防己甲素的生物样本分析。     

一种新的柱前衍生法测定血浆同型半胱氨酸

目的建立一种新的高效液相柱前衍生法,准确、快速测定血浆同型半胱氨酸(HCY)浓度.方法血中结合态的HCY经三丁基膦还原为游离HCY后,与衍生试剂7-氟苯唑-2-氧-1,3-二唑-4-磺酸胺(ABD-F)进行柱前衍生反应,衍生物经反相C18色谱柱,用0.15mol/L磷酸盐缓冲液(pH=4.2)与甲醇按85∶15配制的混合液洗脱.荧光检测激发λ=385nm,发射λ=515nm.结果在3.125～100.00μmol/L范围内,HCY浓度与荧光强度的线性关系良好,γ=0.9998,测定的批内、批间变异系数分别为3.13%和5.10%,高低2种浓度的回收率分别为98.5%和92.7%,健康人血浆HCY的参考值为8.12±2.72μmol/L.结论本法测定血浆HCY准确快速、特异性高、分离效果好,适用于临床血浆HCY测定的常规需要.     

反相高效液相色谱法同时检测人血浆利多卡因和罗哌卡因

目的：建立人血浆利多卡因和罗哌卡因的高效液相色谱分析方法。方法：高效液相色谱仪为Agilent 1100系列;血浆碱化后经乙酸乙酯萃取浓缩,以ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm,5μm,Agilent,USA）为色谱柱;以乙腈∶0.02 mol·L^-1 KH2PO4（16∶84,V/V）为流动相,流速为1.0 ml·min^-1;检测波长为210 nm;内标为布比卡因。结果：利多卡因和罗哌卡因浓度在0.05～10 mg·L^-1范围内线性关系良好（r=0.999）;最低检测限为0.05 mg·L^-1;两种药物高、中、低3个浓度的平均相对回收率分别为（99.79±2.94）%和（100.32±2.95）%;平均绝对回收率分别为（68.36±4.63）%和（70.87±4.88）%;日内精密度变异系数分别为（0.86±0.43）%和（1.36±0.77）%,日间精密度变异系数分别为（2.07±1.45）%和（1.43±0.23）%.结论：本方法快速、简便、灵敏、准确可靠,适用于血浆利多卡因和罗哌卡因的同时测定及其临床药代动力学研究。     

HPLC法同时检测血浆中半胱氨酸/胱氨酸和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽的氧化还原电势

目的本研究拟探讨一种比较敏感、能同时检测血浆中半胱氨酸(cysteine,Cys)/胱氨酸(cystine,CySS)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)/氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)含量及相应的氧化还原电势(Eh)的方法。方法取大鼠全血,去除红细胞及蛋白后用碘乙酸封闭自由的巯基,通过丹磺酰氯衍生化后,利用高效液相色谱(highperformance liquid chromatography,HPLC)进行分离,根据能斯特方程计算相应的氧化还原电势。结果本方法可同时测定体内GSH/GSSG和Cys/CySS的含量及相应的氧化还原电势,灵敏度高、准确性强。结论本研究提供了一种简便有效地检测血浆中氧化还原状态的方法,可能为诊断与氧化应激相关疾病提供新的依据。     

高效液相色谱法测定兔血浆间硝苯地平浓度

目的：测定兔血浆中间硝苯地平的浓度。方法：采用高效液相色谱内标定量法，粒径为３μｍ的Ｃ１８色谱柱，流动相为９５％甲醇：水（４５：２０，ｖ／ｖ），紫外检测波长为５３５０ｎｍ，使兔血浆中的间硝苯地平得到良好分离。结果：间硝苯地平的相对保留时间为７ｍｉｎ，最低检测浓度为１０ｎｇ／ｍｌ，血浆药物浓度在０￣５７６０ｎｇ／ｍｌ范围内具良好线性关系，日内变异系数为２．１％￣７．０％，日间变异系数为３．７％￣９．     

高效液相色谱法同时测定四种抗癫痫药物的血药浓度

目的 建立用HPLC同时测定血清中多种抗癫痫药物卡马西平(carbamazepine,CBZ)、苯巴比妥(phenobarbital,PB)、硝西泮(nitrazepam,NTZ)、氯硝西泮(clonazepam,CNZ)等的方法. 方法 用一定方法处理血清样本,色谱柱为Nova-pak C18柱(150 mm ×3.9 mm,4μm);流动相为0.01 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH 2.15)-乙腈(29∶71,V/V),监测波长223 nm;流速1 ml/min,柱温30℃. 结果 样品血清经处理,所留杂质不干扰被检测药品.在该色谱条件下以上药物能良好分离,在0.01-10 mg/L范围浓度与峰面积呈良好的线性关系(r＞0.999 0),方法回收率均大于90％,日内、日间RSD均小于10％.结论 该方法快速、准确、简便、实用,适用于以上治疗药物的治疗监测.     

高效液相色谱法定量检测大肠癌组织中核黄素实验研究

目的 定量测定大肠癌组织和正常组织中核黄素.方法 采集40例大肠癌手术切除的大肠组织,对其中的癌组织和边缘正常组织采用高效液相色谱仪定量检测核黄素含量.结果 正常组织和癌组织中核黄素含量分别为(786±91)ng/g和(609±57)ng/g,癌组织中核黄素含量均低于边缘正常组织含量,P<0.001,差异有显著性.结论 本方法 简便,取样少、灵敏度高、精密度好、结果 准确可靠,可以用于癌组织内核黄素含量的测定,对肿瘤自体荧光机制研究有重要意义.     

人血浆百草枯浓度的高效液相色谱测定法

目的建立高效、灵敏的百草枯血浆浓度高效液相色谱检测法。方法流动相为乙腈-水(8:92),水相中含3.0 mmol.L-1辛烷磺酸钠、0.1 mol.L-1磷酸,二乙胺调pH值为3.0,流速为1.0 mL.min-1;检测波长258 nm;柱温28℃;内标物为Ethyl Viologen Dibromide。血浆沉淀蛋白处理后,进行高效液相色谱分析。结果色谱图基质干扰少,峰形好,线性范围0.1~10μg.mL-1,最低检测线0.01μg.mL-1,方法回收率96.65%~99.42%。结论高效液相色谱内标检测法适用于百草枯中毒患者的血药浓度检测。