谷氨酸钠及持续灌注停搏液心肌保护作用的实验研究

为了探讨谷氨酸钠的心肌保护作用以及持续灌注心停搏液在防治心肌缺血／再灌注损伤中的作用机理及效果。方法实验采用离体鼠心缺血／再灌注模型，通过在停搏液中加入谷氨酸钠，以及停搏液间断和持续灌注对比研究。结果谷氨酸钠组的乳酸生成量，肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）释放量明显减少，持续灌注组心肌含水量较少，超微结构损害较轻，丙二醛／超氧化物歧化酶（ＭＤＡ／ＳＯＤ）比例较小。结论谷氨酸钠有良好的心肌保护作用；持续灌注技术对防治心肌缺血／再灌注损伤比间断灌注显示出较大的优越性；二者联合应用，可起到心肌保护的协同作用     

超极化停搏与高钾停搏对心肌保护效果的比较

目的 比较观察超极化停搏与高钾停搏的心肌保护效果,并评价低温对心脏超极化停搏的影响。方法 １８条犬分为三组,每组６条。低温高钾组、常渐超极化组和低温超极化组,分别以４℃标准Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液（Ｋ＾＋１６ｍｍｏｌ／Ｌ）、含吡那地尔５０μｍｍｏｌ／Ｌ的３７℃Ｓｔ．Ｔｈｏｍａｓ液（Ｋ＾＋５ｍｍｏｌ／Ｌ）和含吡那地尔５０μｍｏｌ／Ｌ的４℃Ｓｔ．Ｔｈｏｍｓａ液（Ｋ＾＋５ｍｍｏｌ／Ｌ）为心停搏液。结果 低温     

红细胞停跳液的心肌保护作用及对心肌微血管通透性的影响

目的制作一种新的停跳液--红细胞停跳液(EC),并观察它的心肌保护作用以及同全血停跳液(BC)和去白细胞停跳液(DC)的差异.方法用滤器去除大鼠(24只)血液中的白细胞和血小板,配制红细胞停跳液,并应用Langendorff离体心模型,测定心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、心肌最大收缩速度(Dp/Dtmax)、冠状动脉流量(CF);灌流流出液中的肌酸激酶(CK)、乳酸、葡萄糖含量以及心肌组织内的伊文思蓝(EB)的含量和湿干比值.结果红细胞停跳液组HR、LVSP的恢复率[BC(64.0±14.1)%、DC(55.4±11.9)%、EC(75.3±14.2)%];CF的恢复率[BC(62.49±14.69)%,DC(66.63±7.54)%,EC(79 15±12.18)%]、乳酸、葡萄糖、伊文思蓝的含量[EC(80.11±21.13)μg/g,DC(129.80±39.4)μg/g,BC(186.03±11.89)μg/g]和湿干比值(BC5.91±1.30,DC4.96±0.24,EC4.58±0.36)与对照组间比较差异有显著性(P＜0.05).结论红细胞停跳液较全血停跳液和去白细胞停跳液具有更好的心肌保护作用.     

外源磷酸肌酸强化停搏液对婴幼儿的心肌保护作用

目的　探讨外源磷酸肌酸在小儿先天性心脏病矫治术中的心肌保护作用。方法　 1999年6月至 2 0 0 0年 3月 ,4 0例先天性心脏畸形矫治术 (男、女各 2 0例 )病儿随机分为两组 :冷高钾停搏液组及10mmol/L外源磷酸肌酸强化的冷高钾停搏液组。术前两组间性别、年龄、体重、身高、畸形种类、心胸比率及射血分数 (EF)无明显区别。分别于主动脉插管前、开放循环后 30min、6、12、2 4、4 8、72、96、12 0、14 4h采病儿静脉血 ,检测血中CK MB、LDH、cTnI,并同时记录心率 (律 )、血压及血管活性药物的用量。结果　磷酸肌酸强化组术后无明显心律失常 ,再灌注后 2 4hCK MB及cTnI明显低于单纯高钾停搏液组(P <0 0 5 ) ,72h后逐渐恢复接近正常水平。结论　磷酸肌酸作为有效的停搏液成分 ,可增强St.Thomas停搏液在小儿先天性心脏病矫治术中的心肌保护作用。     

左旋精氨酸心脏停搏液对心肌的保护作用

目的：研究左旋业氨液对缺血／再灌注损伤心肌的保护机制。方法：１４例进行双瓣膜替换术的患者，随机分成两组，对照组（单晶体停搏液）和试验组（晶体停搏液中加入左旋精氨酸）于主动脉阻断前，开放后测定血浆亚硝酸盐／硝酸盐，乳酸，丙二醛，超氧化物歧化酶和黄嘌呤氧经酶，各组患者于心脏阻断后即刻，主动脉开放前１分，取左心房心肌做电镜检查，结果：对照组主动脉开放后，亚硝酸盐／硝酸盐浓度即下降，３０分起与阻断前有明显     

Cariporide在不同pH停搏液中心肌保护作用的比较

目的 研究特异性Na^＋，H^＋交换抑制剂卡立泊来德（cariporide）在不同pH停搏液中的心肌保护作用。方法64只SD雄性大鼠随机分成8组（每组8只），对照组4组，停搏液为pH值分别为6．2、7．0、7．4、7．8的改良St．Thomas Ⅱ停搏液；实验组4组，停搏液为加入cariporide，pH值分别为6．2,7．0、7．4、7．8的改良St．Thomas Ⅱ停搏液。离体鼠心在改良Langendorff灌注模型上30min预灌注，60min停搏，30min再灌注，监测心脏缺血前及复灌后血流动力学变化，心肌酶CK-MB、LDH变化，电镜观察心肌超微结构改变，评价心肌保护效果。结果再灌注后，实验组不同pH值停搏液与对照组相应pH值停搏液比较，可显著促进低温缺血心肌的功能恢复，降低心肌酶CK-MB、LDH的漏出（P〈0．05或P〈0．01），明显减轻心肌超微结构损伤。实验组中pH值分别为6．2、7．0、7．4的停搏液与pH值7．8的停搏液相比，低温缺血心肌功能恢复更好，心肌酶CK-MB、LDH的漏出量更低（P〈0．05或P〈0．01），心肌超微结构损伤更小，尤以pH值为7．0的更佳。对照组中，pH分别为6．2、7．0、7．4的停搏液比pH值7．8的停搏液更有助于低温缺血心肌的功能恢复，降低心肌酶CK-MB、LDH的漏出量（P〈0．05），心肌超微结构损伤较轻。结论特异性Na^＋／H^＋交换抑制剂eariporide加入弱酸性的St．ThomasⅡ停搏液更有助于低温缺血心肌的功能恢复，对心肌的保护作用更强。     

心脏停搏液对未成熟心肌的保护作用

使用离体心灌注模型，比较Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓＩ号停搏液在１５℃、３０℃时对兔成熟（３～４月）和未成熟（３～４周）心肌的保护效果。１５℃时，两组观察指标无明显差异；３０℃时，未成熟心肌的冠脉流量恢复率较１５℃时明显下降，心肌ＣＫ及ＬＤＨ漏出率、细胞内Ｎａ＋、Ｃａ＋＋含量明显增加（Ｐ＜０．０１）；而成熟心肌与１５℃相比无明显差异。未成熟心肌超微结构１５℃时的病理改变亦较成熟心肌明显。结果显示，Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓＩＩ号停搏液对兔未成熟心肌的保护效果不如成熟心肌。     

顺行灌注冷晶体停搏液及温血停搏液对心肌的保护作用

目的研究冷晶体及温血停搏液对心肌的保护作用。方法将９６只猫随机分为体外循环（ＣＰＢ）组（Ⅰ）、损伤组（Ⅱ）、冷晶保护组（Ⅲ）及温血保护组（Ⅳ）。观测各组心功能、膜ＡＴＰ酶活性和膜蛋白颗粒的变化。结果组Ⅰ各时间点各项指标无变化。缺血期间,组ⅡⅣＮａＫＡＴＰａｓｅ活性下降（Ｐ＜０．０１）;组Ⅱ、ⅢＣａＭｇＡＴＰａｓｅ活性下降,膜蛋白颗粒数减少（Ｐ＜０．０５）,组Ⅳ无减少（Ｐ＞０．０５）。复灌后,组Ⅳ心功能、ＣａＭｇＡＴＰａｓｅ活性恢复正常,ＮａＫＡＴＰａｓｅ活性和膜蛋白颗粒数恢复稍差。结论单纯ＣＰＢ对心功能、膜蛋白无损伤作用;温血停搏液心肌保护作用较好,但仍需完善。     

光量子冷血停搏液的心肌保护作用

目的 探讨光量子冷血停搏液的心肌保护效果。方法 建立离体兔心工作模型，将实验动物分为冷晶体停搏液组、冷血停搏液组、光量子冷血停搏液组和温血停搏液组，每组８只。心脏停搏３０分钟，复灌３０分钟。结果 复温复灌１０分钟及３０分钟时，光量子冷血组的冠脉流出量、心肌含水量、心肌内ＡＴＰ和磷酸肌酸（ＣＰ）含量的变化均明显优于冷晶体组和冷血组（Ｐ〈０．０５）。结论 光量子冷血停搏液能够改善心肌本身循环，增加氧的     

四氢生物蝶呤的心肌保护作用及对细胞间黏附分子-1表达的影响

目的 探讨四氢生物蝶呤(BH4)对缺血再灌注心肌的保护作用及对细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法 建立Langendorff离体心脏灌注模型，60只Wistar大鼠随机分为实验组(BH4停搏液)和对照组(St．ThomasⅡ液)，每组30只。分别于相应的时间点测定两组心脏功能恢复。心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的含量变化及ICAM-1的表达。结果 BH4能显著提高心脏功能恢复，增强缺血再灌注后NOS的活性，增加NO的产量，抑制ICAM-1的表达并降低MDA的产生(P均＜0．05)。结论 BH4具有显著的抗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用。     

缺血再灌注对大鼠肺细胞间粘附分子-1表达的影响

目的 观察缺血再灌注（Ｉ／Ｒ）对肺组织细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）表达的影响，分析ＩＣＡＭ－１表达与肺内中性粒细胞浸润的关系。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠单肺原位热缺血再灌注损伤模型分７组，左肺缺血９０ｍｉｎ，再灌注时间分别为０、１、２、４、８、１６、２４ｈ。逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法检测肺组织ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ及蛋白表达，测定各组肺组织髓过氧化物酶活性     

6%羟乙基淀粉血液稀释对大鼠全脑缺血/再灌注后ICAM-1表达的影响

目的 研究6％羟乙基淀粉(贺斯,200/0.5)血液稀释对大鼠全脑缺血/再灌注期血管内皮细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法84只Wistar大鼠分为假手术组(S组)、缺血/再灌注组(Ⅰ组)和6％贺斯血液稀释组(H组),其中Ⅰ组和H组又各分为缺血10分钟再灌注2h、4h、8h和12h组,采用免疫组织化学方法检测脑组织ICAM-1的表达。结果Ⅰ组和H组再灌注2h、4h、8h和12h时ICAM-1的表达均较S组高(P均<0.01);H组再灌注2h、4h、8h和12h ICAM-1的表达均较Ⅰ组相应时间点低(P均<0.05)。结论(1)脑缺血/再灌注时血管内皮细胞ICAM-1的表达增加;(2)6％贺斯血液稀释降低再灌注早期阶段脑组织血管内皮细胞ICAM-1的表达。     

肠缺血再灌注损伤大鼠小肠运动功能的变化与细胞间黏附分子1表达的关系

目的 探讨肠缺血再灌注(intestinal ischemia reperfusion,IIR)损伤大鼠小肠运动功能的变化及其与细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的关系.方法 将Wistar大鼠30只随机分为ⅡR组、ICAM-1单抗组和假手术组,ⅡR组采用夹闭-放开肠系膜上动脉的方法建立IIR损伤模型,ICAM-1单抗组于阻断肠系膜上动脉血供同时静脉给予ICAM-1单克隆抗体1 mg/kg.用荧光分光光度法测定各组大鼠小肠传输功能,多导生理仪测定环行肌条收缩能力的变化,RT-PCR法检测小肠肌层ICAM-1 mRNA的表达量,免疫组化法检测ICAM-1蛋白表达,图像分析系统计数小肠肌层浸润白细胞数量,比色法测定小肠肌层组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的活性.结果 ICAM-1单抗组较ⅡR组大鼠小肠传输功能明显改善,几何中心分别为8.4±0.7和3.4±0.5;两组环形平滑肌条收缩力为(1.81±0.28)g/mm2·s-1和(0.52±0.09)g/mm2·s-1;浸润白细胞数量为(5.6±2.2)c/f和(18.2±3.1)c/f;MPO活性为(2.03±0.56)U/g和(6.41±1.25)U/g,两组各项指标之间比较差异均有统计学意义(P＜O.05).两组小肠肌层ICAM-1 mRNA的表达量为1.69±0.57和1.76±0.32,差异无统计学意义(P＞0.05).IIR组和ICAM-1单抗组小肠肌层均有大量棕色颗粒样染色.结论IIR损伤上调小肠肌层ICAM-1 mRNA的表达,介导中性粒细胞的黏附和浸润,导致小肠运动功能的障碍.

Abstract：

Objective To evaluate the relationship between the intestinal motility alterations and intercellular adhesion molecule-1 ( ICAM-1 ) expression within the rat intestinal muscularis after ischemia reperfusion. Methods Thirty Wistar rats were divided randomly into IIR, monoclanal anti-ICAM-1 and sham group (n = 10), HR models were established by clamping-releasing the superior mesenteric artery. Gut transit was measured in vivo and intestinal circular muscle contractions were measured in an organ bath. The expression of ICAM-1 mRNA was detected by RT-PCR and immunohistochemisty. Leukocyte infiltration and myeloperoxidase (MPO) activity were quantified in sham and ischemia/reperfusion rats with and without monoclonal anti-ICAM-1 antibody treatment. Results The gut transit of monoclonal anti-ICAM-1 group was improved obviously as compared with IIR group. Circular smooth muscle contractility stimulated by ICAM-1 mRNA expression was 1.69 ± 0. 57 and 1.76 ± 0. 32 within the muscularis; Leukocyte infiltration into the muscularis was (5.6 ±2. 2) c/f and ( 18. 2 ±3. 1 ) c/f. MPO activity was (2. 03 ±0. 56) U/g and (6. 41 ± 1.25 ) U/g respectively. The differences were all statistically significant between IIR and treatment groups ( P ＜ 0. 05 ). The expression of ICAM-1 protein in IIR and anti-ICAM-1 groups was not significantly different (P ＞ 0. 05). Conclusions The up-regulated expression of ICAM-1 after ⅡR injury calls forth local infiltration of PMN within the intestinal muscularis, leading to intestinal motility dysfunction.     

细胞间粘附分子-1的反义寡核苷酸在异种心脏移植中的作用

目的探讨细胞间粘附分子1的反义寡核苷酸(ICAM1ASO)在小鼠→大鼠的异种心脏移植中对ICAM1表达以及排斥反应的作用。方法BALB/c小鼠和Lewis大鼠分别作为供者和受者,随机配对建立小鼠→大鼠的异种心脏移植模型。按照供者术前处理不同分为双蒸馏水对照组、寡核苷酸对照组和ICAM1ASO组。各组供者术前6h分别从右颈外静脉注射双蒸馏水、寡核苷酸和ICAM1ASO。术后48h各组取5只受者切取供心进行病理学检查;采用免疫组织化学方法对供心组织ICAM1的表达进行观察;半定量逆转录聚合酶链(RTPCR)法对ICAM1mRNA的表达进行定量分析。每组中余下5只受者继续观察直至供心停跳,记录供心存活时间。结果双蒸馏水对照组和寡核苷酸对照组在移植后48h可观察到供心心跳减慢,出现不同程度的心律不齐、心律紊乱,供心搏动无力;供心病理学检查显示心脏组织中广泛间质充血、水肿、出血及血栓形成,部分心肌髓样变性及溶解并伴有炎性细胞浸润;与移植前BALB/c小鼠心脏对比,内皮细胞和心肌细胞ICAM1表达明显增强;ICAM1mRNA表达也明显增加;供心存活时间分别为(53.6±3.58)h和(55.0±3.16)h。ICAM1ASO组供心ICAM1在蛋白水平和mRNA水平的表达均减弱;排斥反应程度也明显减轻;供心存活时间为(66.4±2.61)h;与寡核苷酸对照组和双蒸馏水对照组比较,差异有统计学意义。结论ICAM1ASO能明显抑制异种移植中供心ICAM1的表达,抑制异种移植后排斥反应的发生和发展,延长移植物的存活时间,其作用具有高度序列特异性。     

细胞间粘附分子-1的反义寡核苷酸在小鼠心脏移植中的作用

目的 探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的反义寡核苷酸(ICAM-1-ASO)在小鼠心脏移植中对ICAM-1表达以及在排斥反应中的作用.方法 以BALB/c小鼠为供者,C57小鼠为受者,建立颈部异位心脏移植模型,移植后将受者随机分为3组,每组10只.分别为单纯移植组、对照寡核苷酸组(对照ODN)和ICAM-1-ASO组.各组移植后24 h开始经受者静脉分别注射双蒸水0.3 ml、对照ODN 10 mg/kg和ICAM-1-ASO 10 mg/kg,每天1次,连续5 d.移植后第8天各组随机取5只受者切取移植心,进行病理学检查;采用免疫组织化学方法对移植心组织中ICAM-1的表达进行观察;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对ICAM-1mRNA表达进行定量分析.每组中余下的小鼠继续观察直至移植心停跳,记录各组移植心的存活时间.结果 单纯移植组心脏移植后第8天可观察到明显的排斥反应,移植心心跳减慢、心律不齐、心律紊乱、搏动无力;病理学检查可见大量的淋巴细胞浸润,心肌间质水肿及大片心肌坏死;与移植前对比,内皮细胞和心肌细胞ICAM-1表达明显增强;ICAM-1mRNA表达也明显增加;移植心存活时间平均为(9.8±1.48)d.对照ODN组与单纯移植组差异无统计学意义.而ICAM-1-ASO组与单纯移植组相比,移植心ICAM-1的表达明显减弱,淋巴细胞浸润明显减少,排斥反应程度减轻;移植后第9天心律基本规整,偶有心律不齐,心跳力度较单纯移植组增强;移植心存活时间明显延长至(14.6±1.14)d.结论 ICAM-1-ASO抑制移植心组织中ICAM-1的表达和淋巴细胞的浸润,抑制移植后排斥反应的发生和发展,改善移植物的功能,延长移植物的存活时间,其作用具有序列特异性.     

大鼠肝缺血再灌注损伤NF-kB与ICAM-1在脑组织的表达及意义

目的：观察大鼠在肝脏缺血再灌注（IR）过程中肝脏炎性细胞因子TNF-α、IL-1βmRNA表达与脑组织NF-kB、ICAM-1表达之间的关系，探讨肝脏IR是否可导致脑组织损伤及其可能的机制。方法：选健康雄性Wister大鼠48只，随机分为对照组、缺血30min组（I组）、缺血30min再灌注组（IR组）、缺血30min再灌注后1h组（IR1h组）、缺血30min再灌注后2h组（IR2h组）、缺血30min再灌注后4h组（IR4h组），每组8只。应用免疫组化法分别检测各组大鼠肝脏TNF-α及脑皮质、海马和下丘脑区NF-kB、ICAM-1的表达情况，应用原位杂交的方法检测肝脏IL-1βmRNA表达情况。结果：肝脏IR导致肝脏明显的损伤，表现为血清GPT、AKP、γ-GT升高（P〈0．01），肝组织中TNF-α、IL-1βmRNA表达显著增N（P〈0．01），肝细胞水肿，炎性细胞浸润，甚至细胞坏死。随着再灌注时间的延长，脑组织HE染色可见脑细胞水肿，甚至个别脑细胞坏死。与对照组比较，I组和IR组大鼠脑皮质、海马和下丘脑中NF-kB、ICAM-1表达的差异无统计学意义（P〉0．05），IR1h组、IR2h组和IR4h组的差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。IR1h、IR2h、IR4h组与对照组、I组、IR组比较，各部位脑组织NF-kB、ICAM-1的表达显著增N（P〈0．05或P〈0．01）。各组大鼠不同部位脑组织间NF-kB、ICAM-1表达无统计学意义（P〉0．05）。结论：肝脏IR对脑组织可产生损伤性影响，NF-kB、ICAM-1介导的炎性细胞反应，参与了脑组织损伤的发生机制。     

Mild hypothermia reduces expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and the accumulation of neutrophils after acid-induced lung injury in the rat

BACKGROUND: The pathophysiology of the acute phase of acid-induced lung injury (AILI) has been elucidated. However, once acute respiratory distress syndrome (ARDS) develops, the mortality rate remains high and there is, as yet, no effective therapy. There are reports that application of mild hypothermia is an effective treatment for ARDS. In this study, we hypothesize that mild hypothermia inhibits activation of neutrophils and expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) in an injured lung. We studied the effects of mild hypothermia on the expression of ICAM-1 and the accumulation of neutrophils after AILI in the rat. METHODS: Male Sprague-Dawley rats were randomly allocated to one of the four groups: control normothermic group, induced mild hypothermia group, acid-instilled normothermic group, and acid-instilled group with mild hypothermia. At 6 h after instillation of acid, lungs were removed to measure neutrophil activity and to detect the expression of ICAM-1 in each group. RESULTS: Oxygenation in acid-instilled rats was significantly impaired as compared to that in non-instilled groups, but induction of mild hypothermia gradually improved oxygenation. Expression of ICAM-1 was enhanced in the acid-instilled normothermic group. By contrast, no overexpression of ICAM-1 and its mRNA was detected in the acid-instilled hypothermic group. In addition, accumulation of neutrophils was markedly inhibited after exposure to mild hypothermia irrespective of the instillation of acid. CONCLUSION: Our data suggest mild hypothermia can inhibit the adhesion, activation, and accumulation of neutrophils during the acute phase of AILI in the rat and may have the potential to reduce ongoing inflammation of ALI or ARDS.     

丙酮酸乙酯对脓毒症肺损伤大鼠细胞间粘附分子-1的影响

目的研究丙酮酸乙酯对脓毒症肺损伤大鼠细胞间粘附分子1(ICAM1)的影响,探讨丙酮酸乙酯保护大鼠脓毒症肺损伤的作用机制。方法采用盲肠结扎穿孔术复制脓毒症肺损伤动物模型,30只Wistar大鼠随机分为假手术组、脓毒症肺损伤组和丙酮酸乙酯(40mg/kg,腹腔内注射)治疗组,每组10只。所有大鼠12h后活杀,用免疫组织化学方法检测肺组织中ICAM1的分布和表达,用免疫印迹法检测肺组织ICAM1蛋白水平的表达,检测支气管肺泡灌洗液白细胞计数、肺湿/干重比和肺组织髓过氧化物酶(MPOase)活性。结果与脓毒症肺损伤组比较,丙酮酸乙酯治疗组免疫印迹法和免疫组织化学法显示肺组织ICAM1的表达显著降低,肺泡灌洗液白细胞计数、肺湿/干重比和MPOase活性降低(P<0.01)。结论丙酮酸乙酯通过抑制肺组织ICAM1的表达,对脓毒症肺损伤大鼠具有保护作用。