生殖道尖锐湿疣患者HPV的基因分型检测及评价

目的评价妇女生殖道尖锐湿疣（CA）患者人乳头瘤病毒（HPV）基因亚型的感染状况及临床意义。方法采用基因芯片法检测87例CA患者病损组织或脱落细胞中HPV的23种基因型的感染率。结果87例CA患者标本中检出HPV阳性76例,总的阳性检出率为87．4％;共检出13种HPV基因型别,包括5种低危型别HPV6、11、42、43、44和8种高危型别HPV16、18、31、33、45、51、52、58。检出以HPV11为主,占31．0％,其次是HPV6,占20．7％;单一型别阳性检出率为67．1％,混合型感染阳性检出率为32．9％,其中以HPV6＋11感染为主,其次是HPV16＋18。结论CA患者的生殖道HPV感染情况普遍,故CA患者HPV基因型别检测具有重要的临床意义。     

绵阳地区食管鳞癌患者人乳头瘤病毒感染及基因型别分析

目的：了解绵阳地区食管鳞癌感染与人乳头瘤病毒（HPV）的关系,探讨HPV在食管癌病因学中的作用。方法收集食管组织标本166例（试验组为食管癌患者活检标本114例,对照组为食管良性疾病活检标本52例）,提取组织标本DNA,采用表面等离子谐振法,检测组织标本HPV感染情况及感染HPV基因型别。结果114例食管癌组HPV检出率为40．4％,对照组HPV检出率为5．8％,HPV感染基因型从高到底依次为16、18、58、6、31、33、35、51、11型,食管鳞癌感染HPV主要的基因型为16（23／114）、18（10／114）型,在食管鳞癌HPV阳性病例中混合感染10例占21．7％,16型混合感染7例占15．2％（7／46）,18型混合感染3例占6．52％。结论绵阳地区食管癌活检组织中有HPV存在,HPV感染可能和绵阳地区食管癌的发生存在相关,可能是本地区食管鳞癌发病的危险因素之一。     

人乳头瘤病毒不同基因型检测的临床应用

目的分析本地区人乳头瘤病毒（HPV）各基因型的感染情况。方法应用反向斑点杂交法（RDB）对在本院妇科门诊和住院的宫颈疾病患者进行23种HPV基因型筛查。结果781例患者标本中,HPV检出率为46．09％（360／781）,共检出18种HPV型别,其中单一型感染者为76．39％（275／360）;二型感染14．44％（52／360）;三型和三型以上感染9．17％（33／360）,感染的HPV型别排前5位的是HPV11、6、16、18、58型。结论本地区宫颈疾病患者中,HPV的感染率较高。RDB法能在同一样本中同时检测23种HPV型别,为HPV感染的诊断和宫颈癌防治提供重要依据。     

尖锐湿疣患者及高危人群HPV DNA分型检测结果分析

目的分析尖锐湿疣（CA）患者及高危人群人乳头瘤病毒（HPV）的DNA分型检测结果。方法应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对448倒CA患者及高危人群进行HPVDNA分型检测。结果448例检测总阳性率为47．77％,男、女阳性率分别为44．85％和50．00％,其中6／11型181例,16／18型20例,6／11与16／18型13例。126例CA疣体中HPV阳性率为98．41％,其中男、女HPV阳性率分别为98．33％和98．48%。322例高危人群HPV阳性率为27．95％,其中男、女HPV阳性率分别为20．90％和34．57％,二者差异有统计学意义（P〈0．05）。性伴侣或配偶患CA者、CA治疗后复查者、非CA患者及自检者的HPV阳性率分别为32．76％、36．25％、18．99％和25．71％。结论CA患者及高危人群检测中HPV以6／11型最多。荧光定量PCR可作为CA患者早期诊断的指标。CA高危人群HPV检出率均较高,且女性高于男性,应重视对这些高危人群的HPV常规检测。     

基因芯片检测技术在女性生殖道HPV分型感染中的应用

目的探讨女性生殖道人乳头瘤病毒（HPV）各种基因分型感染的情况。方法采用HPV分型基因芯片检测系统,同时检测5种低危型HPV亚型和18种高危型HPV亚型。结果测定250例标本中HPV阳性92例（36．8％）,20～35岁的年龄阶段检出率最高（占总阳性数73．9％）,其中感染单一亚型57例（61．9％）,感染2种亚型28例（30．4％）,感染3种亚型及以上7例。低危型主要为HPV6、11,其次为43;高危型主要为16、18、33、35、45、31、58等亚型。结论基因芯片对于检测HPV的多种型别和HPV多型别混合感染具有重要意义,可为HPV感染和宫颈癌的防治提供重要依据。     

外阴尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒分型研究

目的了解外阴尖锐湿疣（CA）患者人乳头状瘤病毒（HPV）感染情况及基因型特点。方法应用导流杂交基因芯片技术对64例外阴CA患者病损组织或宫颈脱落细胞进行21种HPV基因分型检测。结果64例患者中HPV感染率为73．44％,其中单一型感染率为46．88％,以HPV11型、6型为主;多重感染率为26．56％,其中含高危型的感染率为21．88％。共检出14个亚型,感染率最高为HPV11（37．5％）,其次为HPV6（26．56％）和HPV16（14．06％）,其余各型别感染率为1．56％-9．38％,低危型感染率高于高危型,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论南宁地区外阴CA患者HPV感染以单-6、11型为主,高危型感染率较高,且表现为多重感染。     

新疆地区妇女宫颈病变组织中HPV感染与分型研究

目的探讨人乳头瘤状病毒（human papillomavirus,HPV）型别在宫颈病变中分布情况。方法采用基因芯片技术对239例宫颈癌前病变或宫颈鳞癌患者的石蜡组织标本进行23种HPV基因型别检测。结果检测出20种基因型,HPV总感染率为90．0％（215／239）;单一感染中高危型HPV16感染率为84．2％（117／139）,低危型中HPV11感染检出1例;多重感染率为35．3％（76／215）,64例为HPV16与其他高危病毒的复合感染,5例为HPV16与低危病毒（6,11,43）的复合感染,7例为低危病毒与低危病毒的复合感染。结论高危型HPV16感染是新疆地区妇女宫颈病变中常见亚型,多重感染可能与宫颈病变进展无关。     

PCR-酶谱分型检测宫颈癌活检组织中人乳头瘤病毒和疱疹病毒基因型

[目的] 探讨病毒病原学因素（人乳头瘤病毒和疱疹病毒基因型）与宫颈癌发病的相互关系。[方法] 采集390例宫颈癌，136例尖锐湿疣，176例宫颈糜烂病人宫颈活检组织，对照组94例正常妇女宫颈分泌物，应用PCR-核酸内切酶分型检测活检组织和阴道分泌物中人乳头瘤病毒（HPV）和疱疹病毒（HSV1，HSV2，CMV，EBV）基因型。[结果] 在390例宫颈癌活检组织中检出高危型HPV（16、18、35型）阳性152例（38．9％），HSV2型135例（34．6％）；176例宫颈糜烂病人检出高危型HPV（16、18、35型）阳性56例（31．8％），HSV2型33例（18．7％）；136例尖锐湿疣病人检出低危型HPV（6、11型）阳性80例（58．8％）；对照组94例正常妇女宫颈分泌物检出HPV和HSV阳性率均为3．2％。核酸内切酶分型检测结果：宫颈癌病人HPV16，18，35型和HSV2型阳性率分别为23．3％，14．6％，1．0％，34．6％，尖锐湿疣病人HPV6，11型阳性率分别为36．0％和22．8％。两组比较有显著性差异（P〈0．001）。[结论] 高危型HPV（16，18，35型）和疱疹病毒HSV2型与宫颈癌发病密切相关。     

基因芯片对尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的检测和基因分型

目的研究尖锐湿疣患者皮损HPV感染的基因型分布状况。方法采用基因芯片检测和分型方法,对该市175例尖锐湿疣患者的皮损组织进行HPV检测和分型。结果 175例尖锐湿疣组织标本中HPV阳性为167例,总阳性检出率为95.4%。各HPV炎型检出率最高依次为HPV11、6、16型。56例患者存在多重感染,占感染总数的32.0%。结论 HPV11、6、16型感染是尖锐湿疣发病的主要基因型,且HPV感染趋于多重化。     

尖锐湿疣患者病损部位高危型人乳头瘤病毒的检测及其临床意义

目的 了解尖锐湿疣（CA）患者高危型（16、18型）人乳头瘤病毒（HPV）的感染情况及其临床意义。方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）对41例CA患者（扁平形16例，乳头形／菜花状25例）病损部位进行HPV16、18型DNA检测，又根据其发病次数分为初发和复发2组，分别有29例和12例，观察高危型HPV的感染率、病毒DNA含量及各组间的差异。结果 CA患者高危型HPV的感染率为43．90％，与对照组（3．85％）比较差异有显著性（P〈0．01）。扁平形和乳头形／菜花状CA患者高危型HPV的阳性率分别为18．75％和60．00％，2组比较也有明显差异（P〈0．01）；2组间病毒DNA含量比较差异无显著性（P〉0．05）。初发和复发者HPV16、18型感染率及其DNA含量检测结果差异均无显著性（P〉0．05）。25例乳头形／菜花状CA患者的疣体组织阳性率为36％，其表面分泌物的阳性率为52％。结论 CA患者高危型HPV的感染率显著高于普通人群。乳头形／菜花状CA中高危型HPV感染率较扁平形明显升高。CA的复发与否可能与高危型HPV的感染无必然联系。同时检测疣体组织和分泌物的高危型HPV可提高检出率。     

复发尖锐湿疣患者感染人乳头瘤病毒基因型的荧光偏振检测

目的　检测复发尖锐湿疣患者的人乳头瘤病毒 (HPV)基因型 ,以探讨尖锐湿疣复发的机理 ,并指导治疗。方法　以蛋白酶K消化法提取 81例复发尖锐湿疣组织临床样本DNA ,以各型HPVDNA通用引物行PCR扩增 ,将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应 (TDI FP)结合 ,应用HPV 6B ,11,16 ,18各型特异探针杂交延伸反应对扩增产物进行HPV分型 ,并分别以含HPV 6B ,11,16 ,18L1质粒的阳性及不含待测靶基因的同源质粒的阴性标准品为参照。结果　 81例尖锐湿疣组织块中HPV检出率 10 0 % ,其中两型混合感染 2 9例 ,占 36 .6 % ,三型混合感染 7例 ,占 8.6 %。结论　本组 81例复发尖锐湿疣患者的HPV的多重感染率高达 4 5 % ,可能与该病的反复复发有一定相关性。     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒检测的临床意义

目的探讨尖锐湿疣（CA）患者人乳头瘤病毒（HPV）DNA定量测定及HPV分型。方法用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对133例CA患者疣体组织进行HPV分型和HPV DNA定量检测。结果133例CA患者经二氧化碳激光治疗后有93例治愈,40例复发。HPV亚型分析显示,133例标本中检出HPV DNA阳性131例（98.50%）,110例（82.71%）基因型为HPV6/11,12例（9.02%）为HPV16/18,9例（6.77%）为HPV6/11合并HPV16/18。对131例HPV DNA阳性患者治疗前病毒载量进行分组比较,病毒载量为10^3-10^5拷贝/mL的患者50例,有11例患者复发;病毒载量10^5-10^7拷贝/mL的患者39例,有14例患者复发;病毒载量为〉107拷贝/mL的患者42例,有15例患者复发。HPV6/11有23例复发,HPV16/18有10例复发,HPV6/11合并HPV16/18有7例复发。结论CA检测HPV DNA能区分高危型HPV和低危型HPV感染,可对CA复发及癌变进行预测。     

PCR在检测女阴尖锐湿疣HPV.DNA的应用

我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对２８例女性生殖道尖锐湿疣标本中ＨＰＶ６和１１型进行检测。结果表明：１７例具有典型组织学特征（空化细胞）和８例组织学特征非典型标本中均检出ＨＰＶ６和（或）１１型病毒。３例原病理诊断为假性湿疣标本中有１例也检出ＨＰＶ６型病毒。本文结果证明ＰＣＲ是诊断尖锐湿疣快速，简便，高敏感和特异性强的方法。病因不明的假性尖锐湿疣的发生与ＨＰＶ感染也有一定的关系。     

HPV 16型L2全长原核融合蛋白的交叉反应特性研究

目的 研究HPV 16型L2全长蛋白在HPV6、11、16和18型别间的交叉反应特性.方法 收集108例尖锐湿疣患者、156例宫颈癌患者和100名健康对照者的血清标本,采用PCR法从宫颈癌患者组织DNA中扩增HPV16 L2全长基因,将其克隆至原核表达载体PGEX-4T-1中,构建重组质粒PGEX-4T-1-HPV16 L2,将鉴定正确的重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和WB鉴定;进一步通过WB检测HPV16 L2全长融合蛋白与HPV6、11、16和18型DNA检测阳性的患者血清的特异性结合能力.以镍螯合亲和层析柱(Nj-NTA Agarose)纯化HPV16 L2融合蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA法检测3组标本中的HPV血清特异性IgG抗体.结果 成功构建了重组质粒PGEX-4T-1-HPV16 L2,含有HPV16 L2的融合蛋白在原核表达体系中呈较高效表达,表达量为27.2%;SDS-PAGE和WB检测结果显示在约相对分子质量82 000处可见特异性阳性信号条带;以HPV6、11、16和18 DNA阳性患者血清为一抗的WB结果显示,HPV16 L2全长融合蛋白在相对分子质量82 000处均出现特异性阳性信号条带.ELISA结果显示,尖锐湿疣组、宫颈癌组和健康对照组血清抗体A值分别为0.825±0.409、0.808±0.376、0.128±0.15,阳性率分别为92.6%、92.3%和6.0%.3组间血清抗体A值及阳性率差异均具有统计学意义(H=207.292,x2=251.846,P均＜0.01),而尖锐湿疣组与宫颈癌组之间的血清抗体均值(0.825和0.808)差异无统计学意义(H=0,P＞0.05).结论 HPV16 L2全长原核融合蛋白具有较强的抗原性,与HPV6、11、16和18型别间具有交叉反应,可进一步用于HPV感染及其相关肿瘤ELISA血清学检测试剂的通用型靶抗原研究.     

196例肛门及肛管尖锐湿疣病变中HPV感染的研究

目的 探讨南京地区肛门及肛管尖锐湿疣病变中人乳头瘤病毒(HPV)不同基因型别的感染情况及其临床意义.方法 从196例肛门及肛管尖锐湿疣(CA)石蜡组织标本中提取23种HPV DNA,采用基因扩增芯片杂交技术对其进行HPV基因型别的检测,并对患者进行临床病理资料分析.结果 196例肛门及肛管CA病变组织标本中检出HPV总阳性率为67.86%(133/196),其中单一型别的阳性率为55.61%(109/196);单一型别的感染中HPV6型阳性率为28.06%(55/196),是最主要的感染型别,其次为HPV11型,阳性率为27.04%(53/196);混合型HPV感染阳性率为12.25%(24/196),其中HPV6型与11型混合感染占50.00%(12/24),是混合型感染的主要型别,此外还有5例4种型别的混合感染,占混合感染的20.83%(5/24).结论 基因扩增芯片检测技术是一种比较适合临床进行HPV分型检测的、敏感性高、特异性好的诊断方法,尤其适合开展某种病变中HPV感染的分子流行病学的研究.     

Human papillomavirus DNA in condylomata acuminata from Japanese males

We examined condylomata acuminata from Japanese males for the presence of human papillomavirus (HPV) genomes by Southern blot hybridization. HPV 6/11-related DNA was found in 91% (32/35) of the condylomata. HPV 6a DNA was found in 40% (14/35), HPV 6c DNA in 6% (2/35), and HPV 11a DNA in 37% (13/35). HPV 6-related DNA, which had an unusual PstI-cleavage pattern, was detected in one sample. Types and subtypes of HPV DNA in the samples studied (HPV 6a, 6c, and HPV 11a DNA) were not correlated with the patients' ages nor outcomes of the disease. HPV 16 DNA was not detected in any condyloma acuminatum.     

691例女性外阴尖锐湿疣组织HPV感染基因分型的研究

目的探讨691例江苏省南京市及镇江市女性外阴尖锐湿疣(CA)组织中人乳头瘤病毒(HPV)感染基因型分布状态和分型的临床意义。方法采用基因扩增结合基因芯片技术对江苏省南京市665例及镇江市26例女性外阴尖锐湿疣组织标本进行23种HPV分型检测,并对患者的相关资料进行分析。结果 691例女性外阴尖锐湿疣患者检出HPV感染者597例,总HPV感染率为86.40%(597/691),其中一型感染率为51.38%(355/691),以11、6和16型最为常见,分别占一型感染51.55%(183/355)、41.97%(149/355)和3.38%(12/355)。多型感染率为35.02%(242/691),以6+11型、11+18型、6+16型和11+16型为主,其分别占多型感染9.92%(24/242)、9.09%(22/242)、4.96%(12/242)和4.13%(10/242)。结论南京市及镇江市女性外阴CA组织中HPV感染,以低危型感染为主,高危型感染为辅,行外阴CAHPV分型检测,对我国女性外阴CA和宫颈病变的防治具有十分重要的意义。     

249例尖锐湿疣及湿疣样病变形态学及HPV原位杂交对照观察

收集２４９例临床诊断或怀疑为尖锐湿疣的活检标本作病理形态学观察，组织学诊断为尖锐湿疣１４８例，可疑１８例，炎性增生８３例。抽取其中３０例尖锐湿疣、１０例可疑尖锐湿疣、１５例炎性增生作地高辛标记的ＨＰＶ６Ｂ／１１ＤＮＡ原位杂交。结果：尖锐湿疣组均阳性，可疑组１例阳性，炎性增生组均阴性。本文对尖锐湿疣的病理诊断及鉴别诊断进行了讨论。本组材料中的９２．８％的病例在组织学上得到了确诊，并且和ＨＰＶ６Ｂ／１１原位杂交结果相符，仅７．２％病例组织学列为可疑，需进一步作ＨＰＶ检测。     

女性外阴尖锐湿疣组织中HPV感染型别的回顾性研究

目的探讨女性外阴尖锐湿疣(外阴CA)组织中人乳头瘤病毒(HPV)感染型别的分布状况及临床意义。方法采用基因芯片结合聚合酶链式反应(PCR)技术对322例外阴CA组织行23种HPV基因型检测,并分析患者的临床病理资料。结果 322例外阴CA组织中检出HPV阳性者279例,HPV感染率为86.65%(279/322),单一型感染率56.52%(182/322),多型感染率30.12%(97/322)。结论 HPV感染与外阴CA的发病密切相关,HPV 11和6型是单一型感染最主流的型别,而11+18、11+16、6+11和6+16型是多型感染最常见型别。基因芯片联合PCR技术适用于临床开展HPV分型诊断,敏感性好、特异性高,对女性外阴CA的临床诊断、治疗及其疫苗研究意义重大。