脑血管紧张素能AT1受体对侧脑室注射胆碱能激动剂后促钠排泄反应和肾神经元型一氧化氮合酶活性的影响

目的:探讨大鼠侧脑室注射胆碱能激动剂氨甲酰胆碱后肾排钠量和肾脏神经元型一氧化氮合酶表达的变化以及阻断脑血管紧张素能AT1受体对上述变化的影响。方法:实验于2003-05/2004-08在大连医科大学生理教研室完成。选用健康雄性SD大鼠48只,实验前5～7d于侧脑室埋置导管,1周后待动物恢复健康即进行实验。实验时随机分为4组,每组12只:①生理盐水组:侧脑室先注射0.85%NaCl5μL,20min后再注射0.85%NaCl5μL。②氨甲酰胆碱组:侧脑室先注射0.85%NaCl5μL,20min后再注射0.5μg氨甲酰胆碱5μL。③洛沙坦预处理组:侧脑室先注射20μg洛沙坦5μL,20min后再注射0.5μg氨甲酰胆碱5μL。④洛沙坦组:侧脑室先注射20μg洛沙坦5μL,20min后再注射0.85%NaCl5μL。侧脑室注药后用整体实验、免疫组织化学方法和图像分析技术,检测各组大鼠肾排钠量及肾神经元型一氧化氮合酶免疫反应阳性颗粒的平均灰度。结果:48只大鼠均进入结果分析。侧脑室注射氨甲酰胆碱(0.5μg)后1h,大鼠肾排钠量为(5.48±0.49)μmol/(min·kg),肾近曲小管上皮细胞内神经元型一氧化氮合酶免疫反应阳性颗粒平均灰度为(177.50±8.34),明显高于生理盐水组[(1.33±0.72)μmol/(min·kg),(126.88±11.34),P<0.05];洛沙坦预处理后肾排钠量为(2.49±0.67)μmol/(min·kg),肾近曲小管上皮细胞内神经元型一氧化氮合酶免疫反应阳性颗粒平均灰度为(151.30±5.69),明显低于氨甲酰胆碱组(P<0.05)。结论:侧脑室给予氨甲酰胆碱后,肾促钠排泄反应增强,肾小管上皮细胞内神经元型一氧化氮合酶免疫反应活性增强,洛沙坦预处理可下调氨甲酰胆碱在肾脏诱导的上述变化。     

胃动素在中枢神经系统及外周肠肌间神经丛神经元的表达

目的：观察大鼠脑、小肠肌间神经丛神经元和血浆内胃动素的表达．探讨胃动素在水浸加束缚应激性胃溃疡中的作用。 方法：实验于2004—10／2005—10在青岛大学医学院完成。选择健康雄性Wister大鼠76只，随机分为水浸加束缚组10只；侧脑室注射胃动素组32只；皮下注射N-硝基精氨酸酯＋侧脑室注射胃动素组8只和相应的3个对照组：正常对照组10只；侧脑室注射生理盐水组8只；皮下注射N-硝基精氨酸酯＋侧脑室注射生理盐水组8只。采用放射免疫分析、荧光免疫组化双染和神经生理学等实验方法，观察脑、小肠肌间神经丛和血浆内胃动素的表达，探讨胃动素对大鼠束缚加水浸诱导的应激性胃溃疡的影响。 结果：76只大鼠均进入结果分析。①在正常大鼠小肠肌间神经丛内和原代培养的肠肌间神经结神经元均可见有胃动素样免疫反应阳性物的表达，且胃动素与一氧化氮合酶共同表达于同一神经元内，但胃动素不与消化道感觉性神经元内特有的钙结合蛋白共存。②在大鼠应激性胃溃疡产生的同时，其血浆内胃动素的含量明显少于正常对照组[（162．86&;#177;25．25），（221．54&;#177;31．82）ng／L，P〈0．05]，而下丘脑、延脑、垂体和肌间神经丛神经元内胃动素的含量明显高于正常对照组[（127．66&;#177;9．61），（74．34&;#177;19．63）ng／g；（40．56&;#177;3．17），（17．26&;#177;6．55）ng／g；（28．97&;#177;3．24），（11．42&;#177;1．25）ng／g；（27．97&;#177;2．20），（13．81&;#177;1．05）ng／g，P〈0．05～0．01]。③侧脑室注射胃动素大鼠应激性胃溃疡的产生明显减少，且呈明显的量效依赖关系，（P〈0．05～0．01），但经皮下注射一氧化氮合酶抑制剂N-硝基精氨酸酯后，脑室注射胃动素，胃动素的胃黏膜细胞保护作用消失（溃疡数：89．00&;#177;12．61．81．12&;#177;11．39．P〉0．05）。 结论：胃动素与一氧化氮共存表达于肠肌间神经丛一氧化氮合酶神经元；应激性胃溃疡时神经系统和血浆内胃动素的表达发生变化；中枢胃动素对胃黏膜细胞具有保护作用，且呈明显的量效依赖关系。胃动素的细胞保护作用可能与一氧化氮的合成有关。     

神经型一氧化氮合酶在早期糖尿病大鼠肾组织中的表达

目的：观察早期糖尿病大鼠肾组织内神经型一氧化氮合酶的表达变化。 方法：实验于2005-03／10在锦州医学院科学实验中心与组织胚胎学实验室完成。60只两三月龄大鼠随机数字表法分成糖尿病模型组和正常对照组，每组30只。禁食12h后糖尿病组一次性腹腔注射链脲佐菌素50mg／kg，建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型，对照组注射相同体积的柠檬酸缓冲液。分别在第1，2，4周3个时间点处死动物，取肾组织，采用亚硝酸还原酶法检测一氧化氮的含量；采用免组织化学染色法检查致密斑处神经型一氧化氮合酶的表达，采用Mivnt细胞图像分析系统测定一氧化氮合成酶在致密斑处阳性细胞的灰度值。． 结果：在实验过程中，无动物死亡。全部进入结果分析。（1）1周时糖尿病模型组大鼠肾组织神经型一氧化氮合成酶含量明显低于正常对照组，差异有显著性意义【（1068．01&;#177;61．61），（2329．99&;#177;200．62）mmol／L，P〈0．05】；2，4周时糖尿模型病组大鼠肾组织神经型一氧化氮合成酶含量逐渐升高，2周时与对照组差异无显著性意义[（2334．59&;#177;192．40），（2372．11&;#177;193．34）mmol／L，P〉0．05]；4周时差异有显著性意义[（4939．51&;#177;133．44），（2407．30&;#177;174．94）mmol／L，P〈0．05]。②1周病程时糖尿病模型组大鼠肾皮质一氧化氮水平低于正常对照组。差异有显著性意义[（8．56&;#177;1．25），（11．23&;#177;2．08）μmol／L，P〈0．05]，2周病程时高于同期正常对照组，差异有显著性意义【（13．71&;#177;1．86），（9．93&;#177;2．01）μmol／L，P〈0．05】，4周病程时显著高于同期正常对照组，差异有极显著性意义[（16．29&;#177;2．46），（10．99&;#177;1．64）μmol／L，P〈0．01]。③各病程糖尿病模型组大鼠血糖均高于正常对照组大鼠。差异有显著性意义（P〈0．01）。 结论：在糖尿病大鼠肾脏病变的早期，肾组织内一氧化氮合成减少。可能主要是由于神经型一氧化氮合酶合成减少造成的。     

运动结合补充葛根素干预糖尿病大鼠一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的：分析有氧运动结合补充葛根素对链脲佐菌素所致糖尿病大鼠血清及肝脏中的一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响。方法：实验于2005—08／2006—01在江西师范大学体育学院完成.①选取8周龄雄性Sprague-Dawley大鼠60只，随机数字表法分为5组：正常对照组、模型对照组、运动组、葛根素组、运动＋葛根素组，12只／组：②除正常对照组外，其余各组均喂以高脂饲料，腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。血糖值≥14．7mmol／L且尿糖为＋＋～卌者确定为造模成功。正常对照组仅以普通饲料喂养，腹腔注射等体积0．1mmol／L的枸椽酸盐缓冲液。③造模后，运动组进行跑台训练，跑台坡度为0&;#176;，每天以10-15m／s的速度运动30min，共训练8周。葛根素组每天按500mg／kg体质量给予葛根素灌胃，共8周。运动＋葛根素组跑台训练的同时给予葛根素灌胃：正常对照组、模型对照组不进行任何干预：各组均以普通饲料喂养。④分别于造模后第3天、造模后第8周末对各组大鼠尾静脉取血测定空腹血糖。造模后第8周末，各组大鼠乙醚麻醉，心脏取血，离心取上层无溶血血清，硝酸还原酶法测定一氧化氮含量。取新鲜肝脏组织1g，用40mmol/L的磷酸钾缓冲液制成匀浆，离心取上清检测一氧化氮合酶活性。结果：共54只大鼠进入结果分析。①空腹血糖检测结果：造模后第3天～第8周末，各模型组空腹血糖值均明显高于正常对照组（P〈0．01）。与模型对照组比较，造模后第3天葛根素组、运动组、运动＋葛根素组空腹血糖值无明显变化[（18．3&;#177;4．7），（18．6&;#177;3．0），（18．9&;#177;4．6），（19．1&;#177;2．9）mmol／L，P〉0．051，第8周末均不同程度下降，尤以运动＋葛根素组明显f（22．3&;#177;4．2），（9．4&;#177;2．0）mmol／L，P〈0．01]。②造模后各组大鼠血清中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的比较：与模型对照组比较，运动组、葛根素组一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性均明显降低（P〈0．01或0．05），运动葛根素组降低的幅度尤为显著[（58．58&;#177;8．97），（30．80&;#177;14．80）μmol／L；（2．0&;#177;0．23），（0．92&;#177;0．13）μkat/K;P均〈0．01]。③造模后各组大鼠肝脏组织中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的比较：与模型对照组比较，运动组、葛根素组、运动＋葛根素组一氧化氮合酶活性略有下降，但差异无显著性意义[（0．26&;#177;0．02），（0．23&;#177;0．03），（0．21&;#177;0．01），（0．19&;#177;0．03）μkat／L，P〉0．05]；运动组、葛根素组一氧化氮含量均明显降低[（4．21&;#177;0．83），（2.86&;#177;0．64），（3．39&;#177;0．86）μmol／L，P〈0．051，运动＋葛根素组降低至（1．75&;#177;0．31）μmol／L，差异尤为显著（P〈0．01）：结论：有氧运动结合补充葛根素，能够有效降低糖尿病大鼠血清及脏肝中一氧化氮含量及一氧化氮合酶的活性。     

刺五加皂甙对缺氧复氧性神经元损伤的保护作用

目的：从细胞分子水平研究刺五加皂甙(acanthopanax senticosus saponins，ASS)对培养神经元缺氧复氧损伤的保护作用及其机制。方法：取孕13～15d ICR胎鼠大脑皮质神经元进行原代分离培养，建立缺氧复氧诱导的皮质神经元损伤模型。随机分成正常对照组、缺氧复氧组及ASS组；用MTT法测定神经元存活率，用硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中一氧化氮合酶(NOS)的含量，用流式细胞仪检测神经元凋亡率。结果：神经元缺氧2，4，6，8h复氧24h后，存活率分别为(0．604&;#177;0．022)％，(0．592&;#177;0．017)％，(0．543&;#177;0．037)％，(0．534&;#177;0．021)％；缺氧8h复氧24h后，神经元凋亡率由(4．13&;#177;0．87)％增加至(31．34&;#177;0．85)％，NOS含量由(5．23&;#177;0．28)μmoL／L增加至(11．39&;#177;0．21)μmoL／L(P&;lt;0．01)；ASS组神经元存活率、神经元凋亡率、NOS含量分别为(0．636&;#177;0．021)，(16．37&;#177;0．66)％，(8．02&;#177;0．18)μmoL／L，与缺氧8h复氧24h比较差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：ASS对缺氧复氧引起的神经元损伤有保护作用；ASS可能是通过抑制一氧化氮的释放、抑制神经元凋亡来拮抗神经元损伤。     

大鼠性别及去势对基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元形态与数量及学习记忆功能的影响

目的：比较正常雌、雄大鼠以及去势大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的变化，为阐明学习记忆的神经内分泌学特点提供形态学资料。方法：实验于2001—03／2002—03在广州中山大学基础医学院人体解剖教研室脑研究室完成。将60只成年健康SD大鼠随机分为6组，正常雌性组、去卵巢2周组、去卵巢4周组、正常雄性组、去睾丸2周组、去睾丸4周组，每组10只。应用组织化学染色法观察各组大鼠基底前脑的内侧隔核、斜角带垂直支及斜角带水平支的一氧化氮合酶阳性神经元形态和数目。结果：60只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元形态变化：组织化学染色法显示一氧化氮合酶阳性神经元的胞体和突起均呈紫蓝色，胞体多为圆形，椭圆形、双极形或多极形，常由胞体发出1～3支初级树突，但轴突未被染色。各组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元的胞体和树突均相似。②各组大鼠基底前脑的内侧隔核、斜角带垂直支及斜角带水平支的一氧化氮合酶阳性神经元数目：经组织化学染色法观察，正常雄性、雌性大鼠内侧隔核，斜角带垂直支及水平支的一氧化氮合酶阳性神经元数基本一致[（38．5&;#177;4．0）个／切片，（33．0&;#177;3．1）个／切片；（45．5&;#177;6．0）个／切片，（42．8&;#177;4．9）个／切片；（63．8&;#177;8．1）个／切片，（58．9&;#177;7.8）个／切片，（P〉0．05）]。去睾丸2周组内侧隔核、斜角带垂直支的一氧化氮合酶阳性神经元数明显高于去卵巢2周组[（45．8&;#177;5．8）个／切片，（18．9&;#177;3．8）个／切片；（58．4&;#177;7．2）个／切片，（28．3&;#177;5．0）个／切片，（P〈0．01）]；而去睾丸2周组斜角带水平支的一氧化氮合酶阳性神经元数高于去卵巢2周组[（60．3&;#177;8．5）个／切片，（45．8&;#177;6．2）个／切片，（P〈0．05）]。去睾丸4周组内侧隔核、斜角带垂直支及水平支的一氧化氮合酶阳性神经元数依然高于去卵巢4周组[（35．1&;#177;5．5）个／切片，（23．1&;#177;4．2）个／切片；（45．7&;#177;8．0）个／切片，（27．8&;#177;6．5）个／切片；（53．5&;#177;6．3）个／切片，（40．2&;#177;7．2）个／切片，（P〈0．05）]。结论：不论去势与否，一氧化氮合酶阳性神经元脑体和树突的形态变化不存在性别差异。正常雌雄大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元数不存在性别差异，但去势后一氧化氮合酶阳性神经元数则出现性别差异。这种差异不仅与卵巢雌激素和睾丸雄激素在雌雄个体中所发挥的不同作用密切相关，而且还有可能是促使雌雄个体表现出特征性的学习记忆功能性别差异的形态学基础。     

自发性高血压大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的：观察自发性高血压大鼠脑尾壳核内神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化。 方法：实验于2003—05在暨南大学人体解剖教研室完成，取自发性高血压大鼠（实验组）和京都种威斯特大鼠（对照组）各30只，分别于3月龄，6月龄和12月龄测血压并处死，ABC免疫细胞化学方法观察大鼠脑内神经元型一氧化氮合酶阳性神经元，实验组使用兔抗神经元型一氧化氮合酶多克隆抗体。阴性对照用0．01mol／L磷酸盐缓冲液替代-抗体。每只大鼠计数20～30片，取其均数计数尾壳核的神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的数目，代表其密度。 结果：各组大鼠在实验过程中无死亡，全部进入结果分析。①对照组3，6，12月龄大鼠血压分别为[（97．5&;#177;12．0）、（107．3&;#177;9．8）、（113．3&;#177;12．8）mmHg（1mmHg=0．133kPa）]，差异无显著性意义；实验组3，6，12月龄自发性高血压大鼠血压逐渐升高，分别为[（116．3&;#177;13．5）、（151．5&;#177;8．3）、（177．0&;#177;9．0）mmHg]，差异有显著性意义（P〈0．05）；实验组大鼠血压均高于同鼠龄对照组大鼠，差异均有显著性意义（P〈0．05）。②大鼠尾壳核的神经元型一氧化氮合酶阳性神经元中等大小，突起较多较长，还可见阳性神经纤维呈网状分布。大鼠尾壳核内的神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的密度改变：对照组和实验组3月龄无明显变化，实验组6月龄和12月龄明显减少。③对照组3，6和12月龄京都种威斯特大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元无明显变化[（9．41&;#177;0．77），（8．64&;#177;1．28），（8．51&;#177;0．77）个／mm^2]；实验组自发性高血压6，12月龄大鼠神经元型一氧化氮合酶阳性神经元呈逐渐减少的趋势，与3月龄比较，差异有显著性意义[6个月（6．59&;#177;0．70），12个月（7．30&;#177;0．96），3个月（8．90&;#177;1．09）个／mm^2, P〈0．05]，实验组6，12月龄大鼠神经元型一氧化氮合酶阳性神经元均低于同鼠龄对照组大鼠，差异均有显著性意义（P〈0．05）。 结论：自发性高血压大鼠为模拟人类原发性高血压的良好动物模型，自发性高血压大鼠的血压随月龄而有不同。自发性高血压大鼠尾壳核内神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的改变有可能是通过影响血压调节中枢的交感活性而间接调控高血压的发生。     

脑梗死及血管性痴呆患者血清血管紧张素转换酶活性与脑功能的相关性分析

目的：研究血清血管紧张素转换酶(anngiotensin-convertry enzyme，ACE)活性在脑梗死及血管性痴呆患者血清中的水平及与脑功能的相关性。方法：采用毛细管电泳法测定47例血管性痴呆(vasenlar disese，VD)患者、43例脑梗死患者、30例健康对照者（HC)血清ACE活性。结果：与健康受试者(22．62&;#177;5．44)μmol／（min&;#183;L)比较，脑梗死患者血清ACE活性(19．26&;#177;5．11)μmol／(min&;#183;L)显著降低(t=2.32，P&;lt;0．05)，尤其是伴发高血压患者(18．42&;#177;5.20)μmol／（min&;#183;L)及男性患者(19．71&;#177;4．99)μmol／(min&;#183;L)；而VD患者血清ACE活性(21.95&;#177;7．19)μmol／(min&;#183;L)虽亦稍低于脑梗死受试者，但无统计学意义。结论：脑梗死可致血清ACE活性降低，与脑组织损伤程度有关，与脑功能状态有关。     

雌性大鼠去势后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元的表达

目的：观察雌性大鼠行卵巢切除术后下丘脑视上区反映动物功能状态的一氧化氮合酶阳性神经元形态和数量的变化。方法：实验于2003-07／2004-01在山西医科大学神经解剖学科研室进行。将20只Wistar雌性大鼠随机分为两组：对照组和卵巢切除术后组，每组10只。将大鼠麻醉后取完整脑组织，制备冰冻切片，在光学显微镜下对两组大鼠下丘脑视上核的一氧化氮合酶阳性神经元进行形态观察和细胞计数，采用图像分析系统测定一氧化氮合酶阳性神经元免疫反应产物的平均灰度值。结果：20只大鼠均进入结果分析。①大鼠下丘脑视上区的一氧化氮合酶阳性神经元分布和形态观察：对照组分布广泛，以视上核的一氧化氮合酶阳性神经元表达较强，大量胞体呈椭圆形，密集成簇。卵巢切除术后组视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目显著增多，胞体的截面积显著增大，轮廓很清晰；胞体上发出的突起粗且长，有个别纤维可见到明显的髓鞘。②下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目：卵巢切除术后组明显多于对照组[（18．00&;#177;4．09）个／视野，（9．00&;#177;3．15）个／视野。t=5．514，P〈0．0001]。③下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性产物的平均灰度值：卵巢切除术后组与对照组基本接近[82．00&;#177;10．48，90．00&;#177;3．15，（t=0．985，P〉0．5）]。结论：雌性大鼠卵巢切除术后下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元数目反应性增多。     

诱导型一氧化氮合酶对大鼠心肌梗死后心室重构的影响

目的：应用诱导型一氧化氮合酶特异性阻滞剂氨基胍阻滞急性心肌梗死后大鼠诱导型一氧化氮合酶的表达，分析其诱发的大量一氧化氮在心肌梗死后心室重构中的作用。 方法：实验于2002-07／2003—05在郑州大学医学院药理实验室完成。选择Wistar大鼠60只，随机分为3组，即盐酸氨基胍组、急性心肌梗死模型组及空白对照组，每组20只。①盐酸氨基胍组，即急性心肌梗死模型大鼠（异丙肾上腺素剂量为80mg／kg，腹腔注射）应用氨基胍600mg／（kg&;#183;d）腹腔注射。②急性心肌梗死模型组，即急性心肌梗死模型大鼠用同等容量的生理盐水腹腔注射。③空白对照组，即正常大鼠腹腔注射同等容量（10mL／kg）生理盐水。各组给药时间均为4周。给药结束后，采用硝酸还原法测定血清一氧化氮、结构型一氧化氮合酶以及诱导型一氧化氮合酶的表达情况；记录左心室内压及左心室压力最大上升、下降速率等血液动力学指标；测定组织学指标包括左心室／体质量比及心肌细胞直径。 结果：60只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①急性心肌梗死模型组大鼠诱导型一氧化氮合酶及一氧化氮表达水平显著高于盐酸氨基胍组和空白对照组（F=56．231，32．560，P〈0．01）。②急性心肌梗死模型组大鼠的左心室／体质量比值显著高于盐酸氨基弧组、空白对照组[（2．62&;#177;0．035，2．42&;#177;0．038，2．42&;#177;0．039）mg／g（F=47．842，P〈0．01）]。急性心肌梗死模型组大鼠的心肌细胞直径显著大于盐酸氨基胍组、空白对照组[（10．54&;#177;0．56，7．41&;#177;0.33，7．26&;#177;0．37）μm（F=31．140，P〈0．01）]。 结论：诱导型一氧化氮合酶在急性心肌梗死后高表达及诱发大量一氧化氮促进心室重构的发生。     

临床护士心理压力源与工作满意度调查分析

目的了解临床护士面临的主要心理压力源,为护理管理者有效地帮助护士减轻和消除心理压力提供依据。方法采用自评式问卷调查的方法 ,对内江市2所三级乙等医院287名从事临床护理工作的护士进行问卷调查。结果临床护士的心理压力源依次来源于工作强度、职业需求、工作环境、人际关系、家庭经济收入等方面。其中来源于工作强度、人际关系及家庭方面的压力源,不同年龄组护理人员在其压力程度上差异有统计学意义(P0.05)。结论从事临床护理工作的护士存在着多种心理压力源,这些压力源是导致护士工作不满意的主要原因,也是护理的安全隐患之一,护理管理者应予以足够的重视,并定期针对不同的人群进行心理健康知识培训,建立有效的支持系统,及时帮助他们调整心理状态,减轻和消除压力,从而提高护士对本职工作的满意度和患者对护理服务的满意度。     

精神疾病患者家属教育的情况分析

目的：通过对精神疾病患者家属教育的调查，探讨家属教育的内容和教育方式。方法：采用自拟问卷对参加系列教育的家属进行调查分析。结果：患者和家属接受教育次数越多，对疾病知识了解越多；在患者的亲属中患者的父母参加教育比率较大。结论：家属教育对治疗疾病起着积极的作用，应更具有针对性，同时还应该注意教育方式。