芍药苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中脑细胞凋亡的影响

目的 观察芍药苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中脑细胞凋亡的影响,并探讨其脑保护的作用机制.方法 30只7日龄SD大鼠,随机均分成假手术组、缺氧缺血模型组、芍药苷低、中、高剂量治疗组.通过结扎左颈总动脉和吸入8%低氧混合气制备缺氧缺血性脑损伤(HIBD)动物模型.假手术组不进行缺氧缺血处理,各组新生鼠均于缺氧缺血后48 h处死,取大脑皮层及海马区组织进行HE染色及TUNEL法凋亡细胞检测.结果 假手术组大鼠的大脑皮层及海马区组织、细胞形态正常;缺氧缺血模型组的大脑皮层及海马区组织水肿,细胞周围间隙增宽,胞体肿胀变圆、变大、胞浆染色变浅;各芍药苷组的神经元细胞胞体肿胀及组织水肿情况较缺氧缺血模型组明显好转.假手术组的大脑皮层及海马CA1区未见凋亡细胞;缺氧缺血模型组的可见较多凋亡细胞;各芍药苷组的凋亡细胞较相应时点缺氧缺血模型组的减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 芍药苷能减轻新生大鼠HIBD时的脑病理损伤,抑制大鼠HIBD时的脑细胞凋亡,对新生大鼠HIBD脑损伤具保护作用.     

孕酮对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠血脑屏障通透性及脑水肿的影响

目的研究孕酮(PROG)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠血脑屏障(BBB)通透性和脑水肿的作用,并进一步探讨其潜在的机制。方法 7 d龄SD大鼠96只,随机分成4组:正常组、假手术组、缺氧缺血(HI)组和PROG组。建立HIBD动物模型,HI后24 h,伊文思蓝示踪剂检测BBB;干/湿法测定脑含水量;免疫组织化学法观察大脑皮质水孔通道蛋白4(AQP4)表达。结果正常组和假手术组BBB通透性、脑含水量和脑皮质AQP4的表达差异无显著性(P>0.05);HI组BBB通透性、脑含水量和脑皮质AQP4的表达明显高于假手术组(P<0.01);PROG组BBB通透性、脑含水量和脑皮质AQP4的表达明显低于HI组(P<0.05)。结论 PROG通过减轻BBB破坏和脑水肿对HIBD新生大鼠起脑保护作用,PROG的脑保护作用可能与下调新生大鼠脑皮质AQP4的表达有关。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤AQP-4表达及依达拉奉治疗效果的研究

目的：探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）后脑组织水通道蛋白-4（AQP-4）的表达变化及依达拉奉（edaravone）对其治疗效果的影响。方法：将7日龄Wistar大鼠120只随机分为3组：假手术组、缺氧缺血模型组（HIBD组）及依达拉奉治疗组,每组各40只。每组根据处死的时间不同又分5个亚组：6、24h、3、5、7d组,每亚组各8只,各组分别于不同时间点处死动物,测脑组织含水量,并采用免疫组化方法检测AQP-4的表达。结果：AQP-4在缺氧缺血6h即增强,3d达高峰,5～7d逐渐降低（P〈0.01）;治疗组各时间点AQP-4表达水平较HIBD组明显降低（P〈0.01）。结论：AQP-4参与了HIBD脑水肿的发生发展过程,依达拉奉可降低AQP-4的表达,从而减轻脑水肿,这可能是其脑保护作用机制之一。     

奥拉西坦对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后AQP-4表达的影响

目的:探讨奥拉西坦对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后AQP-4表达及脑水肿的影响.方法:将120只Wistar大鼠采用随机分组的方法分为假手术组,HIBD组和奥拉西坦干预组.除假手术组以外的两组大鼠均需制备缺氧缺血模型.每组再根据标本采集时间的不同随机分为6h组、12h组、24h组、3d组和5d组,每亚组8只.各组给药情况如下:将奥拉西坦用生理盐水稀释成0.3mg/mL,干预组于HIBD后即刻给予腹腔注射奥拉西坦2mg/kg,每24h给药一次,假手术组及HIBD组不做处理.在各时间点取样测定各组大俗的脑组织含水量和AQP-4的表达情况.结果:三组大鼠在各个时间点的脑组织含水量均表现为假手术组最低,HIBD组最高,奥拉西坦干预组居中,与HIBD组相比奥拉西坦干预组在各采样时间点AQP-4免疫阳性细胞的平均灰度值均明显偏高(P＜0.01).结论:奥拉西坦可在一定程度缓解脑水肿,提高AQP-4的表达量,提示其缓解脑水肿的机制可能为通过促进AQP-4蛋白的表达实现.此外本次研究还发现AQP-4表达与脑组织含水量呈正相关.     

黄芩苷的耐缺氧作用

为探讨黄芩苷对心肌缺血有无治疗作用 ,用小白鼠制备模型进行了耐缺氧研究。本文采用常压耐缺氧法 ;对抗异丙肾上腺素法 ;对抗亚硝酸钠法 ;断头法 ;失血性休克法研究了黄芩苷对小鼠耐缺氧作用的影响。结果表明 ,黄芩苷能非常显著延长常压耐缺氧条件下小白鼠的存活时间 (P<0 0 1) ;能非常显著延长腹腔注射异丙肾上腺素的小白鼠在常压缺氧条件下的生存时间 (P <0 0 1) ;能非常显著缩短失血性休克小鼠心跳时间 (P <0 0 1) ;对小白鼠的亚硝酸钠中毒无显著的缓解作用 (P >0 0 5 ) ;对断头小鼠的呼吸时间无显著影响 (P >0 0 5 )。这些结果提示因黄芩苷可拮抗儿茶酚胺类化合物 ,所以对心肌氧供不足及因心肌耗氧增加引起的心肌缺氧均有非常显著的改善作用 (P <0 0 1) ;对脑缺氧无显著的改善作用 (P >0 0 5 ) ;对亚硝酸钠引起的组织中毒性缺氧无显著的缓解作用 (P >0 0 5 )。     

头孢曲松对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用研究

目的探讨头孢曲松对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用,并考察其作用机制。方法新生SD大鼠随机分为假手术组、模型组和头孢曲松组,每组各48只,各组依据造模成功后观察时间点又分为6 h、12 h、24 h、3 d、5 d、7 d 6个亚组,每个亚组各8只。假手术组只做颈部切开和右颈总动脉分离术,不结扎。模型组、头孢曲松组均制备新生大鼠HIBD模型。假手术组、模型组于术后ip生理盐水10 m L/kg,1次/d,连续3 d;头孢曲松组于术后ip注射用头孢曲松钠200 mg/kg,1次/d,连续3 d。热板法测试记录新生大鼠热板测试时间;HE染色后观察皮质脑组织病理变化;Western blotting法测定FADD表达量;免疫组化法检测FADD阳性表达细胞数。结果与模型组比较,头孢曲松组的热板测试时间在3、5 d时明显缩短,差异具有统计学意义(P0.05)。通过光学显微镜观察发现头孢曲松组脑组织细胞排列尚规则,体积稍大,呈轻度水肿改变。与模型组比较,头孢曲松组在各个时间点的FADD表达量和阳性表达细胞数明显降低(P0.05)。结论头孢曲松可下调HIBD新生大鼠脑皮质FADD表达,减少凋亡发生,改善行为学表现,发挥神经保护作用。     

神经生长因子对新生大鼠缺氧缺血脑皮质保护作用的实验研究

目的探讨缺氧缺血脑损伤对新生大鼠缺氧缺血脑损伤(HIBD)脑皮质NO含量,fasL蛋白表达的影响,及神经生长因子(NGF)对新生大鼠HIBD的干预治疗作用以及有关分子机制。方法建立HIBD动物模型后分NO含量测定组,fasL免疫组化测定组。每组又分为神经生长因子干预组、生理盐水对照组,假手术组,根据检测需要,在缺氧缺血后24h、3d、7d作脑皮质匀浆NO含量测定,fasL蛋白免疫组化SP法测定。结果假手术组、生理盐水组、NGF干预组脑皮质匀浆NO含量(pmol/L)测定依次为24h(4128±356)、(15963±432)、(12315±429);3d(4201±362)、(30122±459)、(5305±426);7d(4082±342)、(5126±428)、(4636±349)。FASL蛋白表达阳性率24h(805±358)、(1222±611)、(2108±512);3d(821±311)、(877±590)、(1350±422);7d(801±280)、(833±289)、(827±284)。结论新生大鼠HIBD后,结扎侧脑皮质NO含量增高,fasL蛋白的表达增高,神经生长因子能减少NO的产生量,抑制fasL蛋白的表达,对缺氧缺血脑皮质有保护作用。     

单唾液酸四己糖神经节苷酯对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的治疗

目的:探讨单唾液酸四己糖神经节苷酯(GM1)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBI)的治疗作用.方法: 选用7 d龄SD大鼠54只,分为假手术组6只(分离但不结扎右侧颈总动脉)、GM1治疗组24只(分离并结扎右侧颈总动脉,置缺氧舱取出后每24 h腹腔注射GM1 10 mg&#8226;kg 1,直至处死)、HIBI组24只(与GM1治疗组同样造成缺血缺氧后,腹腔注射与GM1治疗组同体积0.9%氯化钠溶液),监测不同时间脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、NO、ATP酶水平.结果:与HIBI组相比,GM1治疗组中SOD水平均明显升高,NO水平均明显降低,各种ATP酶均明显增高(P＜0.05).结论:GM1对新生大鼠HIBD有明显的治疗作用.     

二氮嗪对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠不同脑区神经保护作用研究

目的 探讨ATP敏感性钾通道(KATP通道)开放剂二氮嗪对宫内窒息所致新生大鼠缺氧缺血性脑损伤不同脑区的神经保护作用.方法 采用夹闭妊娠21 d的SD大鼠子宫动静脉方法制作宫内窒息模型,仅分离而不夹闭子宫动静脉剖宫产新生鼠为对照组,夹闭孕鼠子宫动静脉剖宫产新生鼠采用随机数字法随机分为窒息组、二氮嗪组、二氮嗪+格列苯脲组及溶剂组,每组16只.窒息组和对照组不予以药物干预,其余各组分别在宫内窒息后并行剖宫产后0、12、24h腹腔内注射相应干预药物.新生鼠生后72 h处死,以2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色方法检测脑梗死面积,以HE染色方法观察皮质、海马、小脑、丘脑和脑干的组织病理学变化并计算脑损伤梯度评分,以反转录-聚合酶链反应方法检测不同脑区KATP通道亚单位mRNA表达量.结果 窒息组脑梗死面积(51.7±10.4)％与对照组(0.3±0.1)％、二氮嗪组(17.0±2.7)％与窒息组(51.7±10.4)％、二氮嗪+格列苯脲组(31.0±8.5)％与二氮嗪组(17.0±20.7)％比较差异均有统计学意义(P＜0.05),窒息组脑梗死面积大,经二氮嗪干预后脑梗死面积减小；窒息组内五部分脑区神经细胞损伤梯度评分差异有统计学意义(P＜0.05),其中海马(4.60±0.52)和皮质(4.50±0.53)损伤最严重,其次是小脑(4.20±0.63)；表达量海马和皮质,Kir6.2mRNA在二氮嗪组(2.56 ±0.88、2.48±0.41)与对照组(3.27±0.38、3.06±0.81)比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新生SD大鼠宫内窒息后海马和皮质损伤最严重,其次是小脑,最后是丘脑和脑干.二氮嗪对五个脑区均有神经保护作用,且对损伤最严重脑区海马及皮质的神经保护作用最强.     

丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织SOD、MDA的影响

目的 观察丹参素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织SOD、MDA的影响及探讨丹参素的脑损伤保护作用机理.方法 7日龄SD新生大鼠78只,随机分成5组:假手术组(n =6);缺氧缺血模型组(n =18);丹参素低剂量组(n =18);丹参素中剂量组(n =18);丹参素高剂量组(n =18).通过结扎左颈总动脉和吸入8%低氧混合气制备缺氧缺血性脑损伤(HIBD)动物模型.假手术组不进行缺氧缺血处理.丹参素各治疗组按低、中、高剂量分别于造模后0、24 h两个时点按15 mg/kg、30 mg/kg、60 mg/kg腹腔注射用生理盐水稀释至0.5 ml的丹参素注射液.缺氧缺血模型组及假手术组于相应时点腹腔注射生理盐水0.5 ml.假手术组于缺氧缺血后6 h,HIBD组与各丹参素组于缺氧缺血后6 h、24 h、48 h断头取脑,测定脑组织匀浆SOD、MDA.结果 与假手术组比较,缺氧缺血模型组新生大鼠大脑中MDA水平升高,SOD活性降低;应用丹参素治疗后MDA水平回降,SOD活性回升,且呈剂量效应.差异有统计学意义(P<0.05).结论 丹参素有减轻新生大鼠缺血再灌注时氧自由基引起的氧化损伤作用,从而发挥脑保护作用.     

黄芩苷对Neuro2A细胞氧糖剥夺的保护作用

目的观察黄芩苷对体外培养小鼠神经母细胞瘤Neuro2A细胞株氧糖剥夺所致损伤的保护作用。方法利用体外培养的Neuro2A细胞,通过去除培养液中的糖和氧气来模拟脑缺血缺氧,用不同浓度的黄芩苷作用于Neuro2A细胞,应用Annexin V-FITC/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡,应用四唑盐(MTT)法检测细胞的活性。结果黄芩苷在6.25,12.5,25μmol.L-1的浓度范围之内,可对缺血缺氧Neuro2A细胞起到保护作用,主要是减少细胞早期凋亡。结论在一定浓度范围之内黄芩苷可保护缺血缺氧Neuro2A细胞,提示对缺血性脑损伤有保护作用,值得进一步研究。     

肾上腺髓质素对新生大鼠缺氧缺血再灌注性脑损伤的保护作用

目的：观察外源性肾上腺髓质素（ad-renomedullin,AM）对新生大鼠缺氧缺血再灌注性脑损伤（hypoxic-ischenmia reperfusion brain damage,HIRBD）的保护作用。方法：40只7日龄SD新生大鼠随机分为正常对照组、缺氧缺血再灌注（HIR）组、AM干预组（缺氧缺血后即刻0、6、12h分别给于AM腹腔注射,1.0mg/kg）,每组8只,于术后48h处死。取耳间线前2mm水平做冠状位脑组织切片,观察脑组织病理学变化,同时检测脑组织匀浆一氧化氮合酶（NOS）、谷胱甘肽（GSH）、髓过氧化物酶（MPO）的含量。结果：HIR、AM12h干预组新生大鼠脑病理改变明显,AM0、6h干预组的脑病理改变明显减轻。AM0、6h干预组脑组织中结构型一氧化氮合酶（cNOS）、GSH的水平较HIR组显著增高,而诱导型一氧化氮合酶（iN-OS）、MPO的水平较HIR组显著降低。结论：缺氧缺血再灌注后0～6h予外源性AM干预对新生大鼠HIRBD有不同程度的保护作用,这种作用与其增加体内抗氧化物质GSH的活性、NO的释放及抑制中性粒细胞对脑组织的浸润有关。     

转化生长因子β_1与新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的实验研究

目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)在新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)中的表达变化及其两者的关系。方法48只7日龄Wistar大鼠随机分为2组:正常对照组,HIBD模型组,根据处死动物的时间不同HIBD模型组又随机分为HIBD后12,24,72h,5,7d共5个亚组,每组8只。用免疫组织化学方法检测各组大鼠大脑皮层TGF-β1表达。结果TGF-β1的表达随着缺血缺氧性损伤的时间延长呈现出先上升后下降的趋势,高峰在损伤后的72h。结论TGF-β1可能与HIBD有关,也可能是脑组织病理损伤严重程度的又一标志。     

羟丁酸钠减轻新生大鼠缺血缺氧后脑损伤

目的:观察羟丁酸钠对新生大鼠缺血缺氧后脑损伤的影响。方法:60只新生7dSD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、羟丁酸钠3个剂量组采用Rice法制作缺血缺氧性脑损害模型。模型对照组缺血缺氧后即刻腹腔注射生理盐水;羟丁酸钠3个剂量组分别注射用生理盐水稀释的羟丁酸钠50,100和200mg·kg-1·次-1,均每日3次,共7d缺血缺氧21d后每组各取6只大鼠作左侧大脑半球重量、含水量测定;另取6只大鼠观察左侧海马CA1区锥体神经元存活数量。结果:(1)模型对照组大鼠左大脑半球重量低于假手术组、羟丁酸钠50mg·kg-1组,差异有显著意义(P<0.05)。(2)各组左侧大脑半球含水量无显著差异(P>0.05)(3)高倍镜下CA1区海马锥体神经元存活数目,模型对照组为每个高倍视野(26±s7)明显低于假手术组(114±27),P<0.01;羟丁酸钠50mg·kg-1100mg·kg-1和200mg·kg-1组每个视野分别为(61±12),(79±24),(58±18),明显高于模型对照组,P<0.01。结论:羟丁酸钠具有改善缺血缺氧后脑损伤作用。     

缺氧缺血性脑损伤大鼠miR-200b对Rac-1的调控作用研究

目的 分析缺氧缺血性脑损伤动物模型miR-200b及Rac-1 mRNA表达,以及转染miR-200b后Rac-1 mRNA表达变化,并探讨miR-200b对Rac-1 mRNA可能存在的调控关系.方法 采用氧糖剥夺策略建立缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型,取全脑片分为4组:空白对照组、缺氧缺糖组、miR-200b转染组、...     

积雪草苷对大鼠缺血再灌注脑组织损伤的保护作用研究

目的 探讨积雪草苷对大鼠缺血再灌注脑组织损伤的保护作用及机制.方法 将60只15日龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、积雪草苷低、高剂量组,每组15只.采用"线栓法"建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,模型制作完成后积雪草苷低、高剂量组立即腹腔内注射积雪草苷(10、20 mg/kg),对照组和模型组腹腔内注射等体积生理盐水,1/...     

亚低温治疗新生兔缺氧缺血性脑损伤脑温监测的研究

目的探讨缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生兔头皮温度与颅内温度之间的关系。方法选择HIBD模型动物12只，作为探针动物。将探针动物置于亚低温治疗仪内，在降温过程中，监测从初始温度（35℃）开始降温达到不同颅内温度的时间和相应的头皮温度，并进行分析。结果颅内温度从35℃降至28℃所需的平均时间为37．5min，头颅温度与头皮温度呈良好的直线正相关关系（r=0．934，P〈0．05）。结论在一定的温度范围内，实验动物头皮温度与颅内温度有较强的直线正相关关系，可通过对头皮温度的测定，间接推断动物的颅内温度。     

黄芩苷调节细胞周期对缺氧神经细胞的保护作用研究

摘要：目的:观察黄芩苷（BL）对缺氧神经细胞的保护及细胞周期调节作用,并对其机制进行探讨。方法:以人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞为研究模型并培养于正常环境（NE）中,三气培养箱构建缺氧环境（OGD）,设立NE组、OGD组及BL+OGD组。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,蛋白印记实验检测P53、Cdc25a及Cyclin A蛋白表达变化。结果:与NE组相比,OGD组细胞活力明显降低（P<0.01）,5,10,25,50μmol·L-1BL处理24 h均能显著增强OGD组的细胞活力（P<0.01）,其中BL 25μmol·L-1浓度组作用最强。与NE组相比,OGD组细胞凋亡率和S期细胞比例明显升高（P<0.01）;而与OGD组相比,OGD+BL组（25μmol·L-1）细胞凋亡率和S期细胞比例明显降低（P<0.05或P<0.01）。与NE组相比,OGD组细胞P53蛋白表达明显上调（P<0.01）,Cdc25和Cyclin A蛋白表达明显下调（P<0.01）;而与OGD组相比,OGD+BL组细胞P53蛋白表达明显下调（P<0.01）,Cdc25和Cyclin A蛋白表达明显上调（P<0.01）。结论:BL对缺氧神经母细胞瘤SKN-SH细胞具有保护作用,该作用可能与其减缓细胞S期阻滞从而降低细胞凋亡有关。     

脑欣口服液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤谷氨酸、一氧化氮合酶、钙离子影响的实验研究

目的：探讨脑欣口服液治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的机理。方法：将50只7d龄SD大鼠随机分为5组，即假手术组、模型组、大剂量组、中剂量组、小剂量组，每组10只，造模后按要求灌服相同体积的生理盐水和大、中、小剂量的脑欣口服液。结果：模型组与假手术组比较，GLU、NOS、Can含量升高，P〈0．05；大剂量组与模型组比较，GLU、NOS、Ca^2＋含量显著下降，P〈0．05；中剂量组与模型组比较，GLU、Ca^2＋均显著降低，P〈0．05；小剂量组与模型组比较，Ca^2＋水平显著降低，P〈0．05。结论：脑欣口服液抑制新生大鼠缺氧缺血性脑细胞凋亡的机理与降低GLU、NOS及Ca^2＋有关。