血清钠离子浓度、脑脊液结核分枝杆菌耐药基因及腺苷脱氨酶在早期老年结核性脑膜炎患者诊疗中的应用价值

目的 探讨血清钠离子浓度、脑脊液结核分枝杆菌耐药基因检测(Gene X-pert MTB/RIF)、脑脊液ADA在早期老年结核性脑膜炎患者诊疗中的应用价值。方法 选取老年中枢神经系统感染患者99例，其中40例结核性脑膜炎患者为观察组，59例非结核性脑膜炎患者为对照组。对所有患者行血清钠离子的浓度、脑脊液结核分枝杆菌耐药基因检测及脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)检测，分析比较2组检测结果，分析老年结核性脑膜炎患者临床特点及治疗前后检测结果。结果 结核性脑膜炎组相比较非结核性脑膜炎组脑脊液ADA、脑脊液蛋白升高(P<0.05),脑脊液氯化物、血清钠离子的浓度降低(P<0.05);结核性脑膜炎组脑脊液结核分枝杆菌耐药基因检测阳性率明显高于脑脊液浓缩集菌抗酸菌检测及脑脊液结核菌培养(P<0.05);接受抗结核治疗1个月后，结核性脑膜炎组患者脑脊液ADA、脑脊液蛋白降低(P<0.05),脑脊液氯化物、血清钠离子的浓度升高(P<0.05)。结论 老年结核性脑膜炎临床症状不典型，血清钠离子的浓度、脑脊液X-pert、脑脊液ADA在早期老年结核性脑膜炎患者中有一定的诊断价值，在...     

II型糖尿病并发结核病小鼠模型的建立及评价

目的 建立II型糖尿病并发结核病小鼠模型,对其肺组织病变过程进行评价。方法 高脂高糖饲料喂养C57BL/6J小鼠,腹腔注射STZ,建立II型糖尿病小鼠模型。采用滴鼻的方式将结核分枝杆菌H37Rv接种至糖尿病小鼠体内,建立糖尿病并发结核病小鼠模型。分别于感染后的1-8周、10周及12周解剖小鼠,肉眼观察小鼠肺脏病变情况,活菌菌落计数,肺组织行HE及抗酸染色,镜下观察病理学改变。结果 肉眼观察发现,随着感染时间的增长肺部感染情况逐渐加重,至第8周时病灶达到全肺的80%,第10周时病变范围开始缩小;感染8周后HE染色肺组织出现典型的肉芽肿结构,至第10周部分病变肺组织出现修复现象;抗酸染色可见结核分枝杆菌。结论 从大体病变、菌落计数及病理改变等方面对小鼠模型进行评价,发现糖尿病并发结核病小鼠模型较单一的结核病小鼠模型具有发病早,病程进展快等特点,与临床患者表现类似,因此实验构建的糖尿病并发结核病小鼠模型基本成功。     

小鼠结核分枝杆菌耐药模型的建立与评价

目的建立小鼠结核分枝杆菌耐利福平株静脉感染小鼠模型。方法 30只BALB/c雌性小鼠经尾静脉感染结核分枝杆菌耐利福平株每只106CFU,观察小鼠一般状况,并分别在感染后6周、10周、14周处死小鼠,进行脾、肺组织病理切片、抗酸染色、计脏器荷菌数。结果感染后小鼠体重呈逐渐上升趋势,脏器病理变化随时间推移由急性炎症逐渐转为慢性炎症反应,抗酸染色均为阳性,脏器荷菌数与感染剂量相对应,并至少可持续14周。结论成功建立了小鼠结核分枝杆菌耐利福平株静脉感染动物模型,为其进一步用于结核病防治研究奠定了一定的基础。     

气雾攻击法感染结核病小鼠模型的建立及其综合评价

目的模拟自然感染方式建立结核病小鼠模型,并对其病理变化进行综合评价。方法通过气雾攻击方式将结核分枝杆菌H37Rv接种至C57BL/6J小鼠体内。在感染后的4周、6周、8周对小鼠进行micro-CT活体动态扫描,无菌分离肺脏和脾脏,肉眼观察病变情况,活菌菌落计数,组织病理检测(HE和抗酸染色)。结果肉眼观察和micro-CT扫描发现,不同时间小鼠肺部感染情况逐渐加重,至感染后第8周时病变弥漫至整个肺部；HE染色肺组织出现弥漫性肉芽肿样实变；抗酸染色可见结核分枝杆菌。结论通过大体病变、病理、影像、菌落计数几个方面对建立的小鼠模型进行综合分析,证明利用气雾攻击法感染的结核病小鼠模型建立成功；该模型在形成病变时与结核患者的情况存在一定差异,对其完善的综合评价有助于在相关研究中对该小鼠模型的合理应用。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌在结核性脑膜炎诊断中的价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌在结核性脑膜炎诊断中的价值。方法对181例临床确诊的结核性脑膜炎患者、可疑结核性脑膜炎患者和非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本采用涂片、实时荧光定量PCR 2种方法进行检测,对其结果进行对比分析。结果 181例脑脊液标本中,脑脊液涂片检测阳性率为2.21%(4/181),PCR检测阳性率为12.15%(22/181);脑脊液涂片、PCR法检测51例临床确诊的结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为5.88%(3/51)和25.49%(13/51);检测80例临床可疑结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为1.25%(1/80)和11.25%(9/80),2种方法的阳性检测率比较差异有统计学意义(χ2=10.654,P<0.05)。50例非结核性脑膜炎患者脑脊液标本涂片及PCR检测均为阴性。结论实时荧光定量PCR法检测结核分枝杆菌具有较高的临床价值,可作为临床结核病检测诊断的有效方法之一。     

系统性红斑狼疮合并结核性脑膜炎5例临床分析

目的通过分析系统性红斑狼疮（SLE）合并结核性脑膜炎的临床特征和实验室特点以及治疗,提高对SLE合并结核性脑膜炎的认识。方法对5例SLE合并结核性脑膜炎患者进行回顾性分析。结果5例患者均以发热和头痛为首发症状,3例出现恶心呕吐和颈抵抗,奥本海姆征阳性,1例出现神志淡漠;5例脑脊液（CSF）常规检查均为葡萄糖浓度降低（1.18-3.29mmol/L）,氯化物浓度在115-131.2mmol/L之间,蛋白定量590-1245mg/L,CSF细胞数（20-380）×10^9/L,未见隐球菌;3例患者CSFγ-干扰素（γ-IFN）〉400mg/L,2例腺苷脱氨酶（ADA）〉5U/L,1例CSF分枝杆菌快速荧光培养示抗酸分枝杆菌生长;5例患者均予异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇和喹诺酮类药物（利复星或左旋氧氟沙星）五联抗痨治疗,全部患者发热和头痛症状2周后缓解。结论SLE患者出现发热、头痛、恶心呕吐和神志淡漠时,及时行CSF检查,CSFγ-IFN和ADA升高有助于诊断结核性脑膜炎,及早联合抗痨治疗有利于病情的控制。     

结核性脑膜炎继发癫的临床护理

结核病在许多国家和地区仍然是危害人民健康的主要传染性疾病,随着耐药结核分枝杆菌感染的增多,结核性脑膜炎的发病率呈逐渐上升趋势。结核性脑膜炎病情重,主要表现为低热、盗汗、乏力、消瘦等结核中毒症状及头痛、呕吐、视乳头水肿等颅压增高的征象,部分患者也出现意识障碍、肢体瘫痪、     

GeneXpert MTB/RIF检测结核性脑膜炎患者脑脊液标本的临床应用价值

目的 探讨GeneXpert MTB/RIF（以下简称“GeneXpert”）检测结核性脑膜炎患者的脑脊液应用价值。方法 选取2014 年12 月至2019 年12 月在沈阳市第十人民医院住院治疗的初诊为结核性脑膜炎患者120 例作为研究对象,收集患者的脑脊液标本,进行脑脊液抗酸杆菌涂片检测、脑脊液结核分枝杆菌960 培养及脑脊液GeneXpert 检测,分析GeneXpert 的检测效能。结果 脑脊液抗酸杆菌检测阳性9 例,阴性111 例;脑脊液结核分枝杆菌960 培养阳性40 例,阴性80 例;脑脊液GeneXpert 检测阳性39 例,阴性81 例。以脑脊液涂片为标准,GeneXpert检测的灵敏度及特异度分别为100.00%和72.97%;以脑脊液960 培养为标准,GeneXpert 检测的灵敏度及特异度分别为97.50%和100.00%;以临床诊断为标准,GeneXpert 检测的灵敏度及特异度分别为95.12%和100.00%。结论 脑脊液GeneXpert 检测灵敏度和特异度较高、检测时间短,有利于临床早期诊断结核性脑膜炎。     

结核分枝杆菌感染小鼠的脾脏和肺脏组织荷菌量与病理变化

目的分析结核急性感染小鼠脾脏和肺脏的组织荷菌量以及病理的动态变化。方法以3×105CFU结核分枝杆菌标准株H37Rv尾静脉途径感染雌性C57BL/6J小鼠,测定感染后1 d、1周、2周、3周、4周、6周和8周肺脏及脾脏组织的荷菌量,脾脏和肺脏组织经HE染色分析病理变化。结果感染动物的脾脏荷菌量在前3周逐步提高,在4～8周脾脏荷菌量维持稳定,肺脏组织在2～8周组织荷菌量逐步升高。病理分析显示动物感染3周后肺脏和脾脏出现肉芽肿,在6～8周病理损伤加重。结论小鼠经尾静脉感染高剂量结核分枝杆菌在8周前表现为急性感染状态,适用于抗结核药物的体内药效学评价。     

应用MPT64为靶标快速检测结核分枝杆菌生长的研究

目的探讨应用MPT64作为快速检测结核分枝杆菌生长指示的可能性,以期建立一种准确、快速、简便、易于普及开展的结核分枝杆菌生长检测方法。方法应用BACTEC MGIT960分枝杆菌快速培养仪器系统培养法对4株结核分枝杆菌1 mg/mL纯培养物菌液进行10倍稀释共7个稀释浓度的32例菌悬液、64例涂片抗酸染色阳性样本及98例非选择性临床送检样本进行培养。同时,对菌悬液,高浓度MPT64检测阳性时,即对下一浓度每天进行1次MPT64检测,对涂片阳性样本培养管每天进行1次MPT64检测,阴性者检测至培养阳性出现或至培养42 d;对非选择性临床送检样本每周定时进行1次MPT64检测,阴性者检测至培养6周。结果(1)4株结核分枝杆菌1 mg/mL纯培养物菌液稀释试验显示:应用MPT64作为快速检测结核分枝杆菌生长指示的最小菌量为10-7～10-6mg/mL,仪器系统培养法为10-6～10-5mg/mL。(2)64例涂片抗酸染色阳性样本63例培养阳性,其中菌种鉴定为结核分枝杆菌的58例样本中56例MPT64检测阳性,检出时间为3～16 d,平均7.8 d,其培养阳性检出时间为6～30 d,平均13.7 d。其余5例非结核分...     

减毒结核分枝杆菌H37 Ra感染小鼠模型的实验研究

目的：：研究减毒结核分枝杆菌(M. tb)H37Ra 感染小鼠模型及其病理损伤的机制。方法：将清洁级Balb/c小鼠分为对照组和M. tb模型组,各3只。将H37Ra按照每只小鼠1×106 CFU的剂量,经尾静脉注射感染小鼠,分别于感染7、14和21 d后,无菌操作取小鼠肺和脾脏组织,测量肺和脾脏的脏器系数,匀浆后行活菌培养;肺和脾脏组织冷冻切片,行HE染色观察病理损伤情况。结果：小鼠感染M. tb 14和21 d后,脾脏脏器系数均较感染7 d后显著升高(P<0.01和P<0.05)。感染7 d后,肺和脾脏组织匀浆均可检出活菌,脾脏组织H37Ra活菌量明显高于肺脏,并随感染时间逐渐增加;感染14 d后,肺组织病理观察可见明显感染性病变损伤。结论：M. tb H37Ra 经尾静脉注射感染小鼠模型可造成部分结核病样病理性损伤。     

小鼠棘阿米巴性脑炎模型的建立

[目的]建立小鼠棘阿米巴性脑炎模型.[方法]经鼻腔滴注给ICR小鼠接种赫氏棘阿米巴,感染后每天观察病程变化并记录死亡例数.取死亡小鼠一半的脑组织匀浆置于铺了灭活处理大肠杆菌的琼脂培养基上培养,观察棘阿米巴的生长情况;取另一半脑组织行HE染色观察病理学改变.[结果]棘阿米巴感染后1周开始可见死亡小鼠,实验组小鼠脑组织中可观察到棘阿米巴生长.脑组织HE染色观察可见棘阿米巴滋养体浸润,其周围有炎性细胞浸润.[结论]应用鼻腔滴注法成功建立了棘阿米巴性脑炎模型.     

利福平依赖结核病小鼠模型的建立

目的建立利福平依赖结核病小鼠模型,为深入研究依赖结核病产生机制及其治疗提供技术平台。方法随机选取120只6-8周BALB/c小鼠,分为15组,采用临床分离结核菌利福平依赖株和敏感株以高低剂量分别感染BALB/c小鼠建立攻毒模型,以不同利福平给药频次治疗6周,观察小鼠体征、肺脾病变程度,测定肺脾重量指数、肺组织荷菌量及结核菌利福平依赖性。结果依赖株高剂量感染每周给药2次组病变程度重、范围广,肺、脾重量指数（WI）升高,肺组织荷菌量多,且87.5%分离株在含利福平2-10μg/ml的匡氏琼脂培养基中明显依赖利福平生长。结论采用临床分离的利福平依赖株,感染剂量在2×105-2×106CFU之间,给予每周2次利福平胃饲,持续6周,可形成稳定的利福平依赖结核病小鼠。     

人巨细胞病毒AD169株引起小鼠脑部畸形的初步探讨

目的：探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)感染昆明小鼠的敏感性，建立HCMV致畸的动物模型。方法：昆明系小鼠40只，随机分为两组：对照组(8只)和接种病毒组(32只)，病毒感染途径为脑内注射。在接种病毒7，15，30，60d后不同时期分别以病理学方法观察动物脑部发育特点，以免疫组织化学方法检查病毒抗原，PCR方法检测动物脑组织中HCMV基因。结果：接种HCMV AD169株的小鼠脑组织在不同时期发生了病理改变和脑部发育畸形，用免疫组织化学方法和PCR方法在脑组织细胞内检获HCMV抗原和基因。结论：HCMV ADl69株可引起小鼠脑部发育畸形，这对研究HCMV感染致畸的机制提供了有价值的参考依据。     

H37Rv结核标准菌株构建豚鼠膝关节滑膜结核模型的研究

目的探索利用H37Rv结核标准菌株构建豚鼠膝关节滑膜结核病理模型的方法。方法对经过福氏佐剂免疫和致敏的豚鼠,行膝关节腔H37Rv菌株两种菌量(1×107/mL,50μL及100μL)的注射感染,观察豚鼠感染结核菌后膝关节滑膜组织及关节软骨与骨的病理变化,并行膝关节滑膜集菌培养。结果豚鼠膝关节在行两种菌量的H37Rv菌株感染后,局部肿胀均较明显,但动物的全身反应都较轻微。两组动物的膝关节滑膜病理切片均显示有典型的结核结节及其内的干酪样坏死灶形成;切片抗酸染色均检出有抗酸染色阳性的分枝杆菌;两组动物的关节滑膜匀浆培养均有结核分枝杆菌生长。结论通过在经预先免疫与致敏豚鼠的膝关节局部进行适当剂量的H37Rv结核菌株的注射感染,可以构建出与人类滑膜结核病理变化相似的豚鼠膝关节滑膜结核。     

黄连提取物抑制结核分枝杆菌的机理初探

目的 研究黄连提取物在体内及体外对结核分枝杆菌的抑制作用及部分机理.方法 本实验用体外抑菌试验和体内造模实验检测黄连提取物抑制结核分枝杆菌(-H37Ra)的作用及机理.抑菌试验:将黄连提取物按不同浓度添加到分枝杆菌固体培养基中,在培养基表面滴加H37Ra菌液,设空白组、利福平组做为对照,37℃培养2个月,观察有无菌落生...     

人巨细胞病毒AD169株引起小鼠脑部畸形的初步探讨

目的 :探讨人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus ,HCMV)感染昆明小鼠的敏感性 ,建立HCMV致畸的动物模型。方法 :昆明系小鼠 4 0只 ,随机分为两组 :对照组 (8只 )和接种病毒组 (32只 ) ,病毒感染途径为脑内注射。在接种病毒 7,1 5 ,30 ,6 0d后不同时期分别以病理学方法观察动物脑部发育特点 ,以免疫组织化学方法检查病毒抗原 ,PCR方法检测动物脑组织中HCMV基因。结果 :接种HCMVAD1 69株的小鼠脑组织在不同时期发生了病理改变和脑部发育畸形 ,用免疫组织化学方法和PCR方法在脑组织细胞内检获HCMV抗原和基因。结论 :HCMVAD1 69株可引起小鼠脑部发育畸形 ,这对研究HCMV感染致畸的机制提供了有价值的参考依据     

六种结核杆菌培养基的制作及生长情况的比较

目的比较结核杆菌在六种培养基上的生长速度,建立实验教学中快速培养结核杆菌的方法。方法制备六种结核杆菌培养基各20支,每支接种TB菌液（10-2mg/ml）0.5ml,观察结核杆菌生长情况。结果结核杆菌在Middlebrook 7H10培养基上生长最快,接种6天有3株出现了菜花状菌落,第13天20支培养基斜面上有19支均长满菜花样菌落,阳性率达95%,其次是新鲜马铃薯鸡蛋培养基和马铃薯粉、鸡蛋培养基在第6天出现1株和第8天出现2株典型菜花状菌落,在第27天和25天20支培养基中各有18和17支菜花样菌落均长满斜面培养基,阳性率达90%和85%。结论结核杆菌在Middlebrook 7H10培养基上生长最快,培养时间最短,其次是新鲜马铃薯鸡蛋培养基和马铃薯粉鸡蛋培养基,可作为理想的实验教学用结核杆菌培养方法。     

普托马尼对利福平依赖结核菌感染小鼠的作用及其机制研究

目的 探究普托马尼（PA-824）对利福平（RFP）依赖结核菌感染小鼠的作用及其机制研究。方法 将32只SD雄性小鼠随机分为RFP治疗组、PA-824治疗组、联合治疗组和对照组，每组8只。所有小鼠以结核分枝杆菌RFP依赖株攻毒，复制RFP依赖结核病小鼠模型，RFP治疗组给予65 mg/（kg·d）RFP，PA-824治疗组给予25 mg/（kg·d）PA-824，联合治疗组给予上述2种药物，对照组予以等量生理盐水灌胃。治疗6周后观察小鼠脾、肺组织重量，脏器致病指数，脾、肺组织荷菌量及肺组织病理学变化。结果 与对照组比较，RFP治疗组的肺重量、脾重量、脾菌量、肺菌量均升高（P <0.05），PA-824治疗组和联合治疗组的肺重量、脾重量、脏器致病指数评分、脾菌量、肺菌量均降低（P <0.05）；与联合治疗组比较，RFP治疗组和PA-824治疗组的肺重量、脾重量、脏器致病指数评分、脾菌量、肺菌量均升高（P <0.05）；与RFP治疗组比较，PA-824治疗组的肺重量、脾重量、脏器致病指数评分、脾菌量、肺菌量均降低（P <0.05）。结论 PA-824在抑制MTB对RFP依赖性的同时，对RFP依赖结核菌感染小鼠具有较好的抑制作用，同时对改善病变范围与病变程度均有一定的效果。