大鼠冷保存供肝肝移植模型的建立及评价

目的 建立稳定的大鼠供肝冷保存肝移植模型,为冷保存再灌注损伤及再生研究奠定基础.方法 大鼠原位肝移植模型参照Kamada的双袖套法并加以改进.雄性SD大鼠分为4组,观察不同的冷保存时间对大鼠生存率及损伤与再生状况的影响.结果 模型的平均无肝期为15 min左右,肝移植对照组、冷冻保存8、12、16 h组术后168 h存活率分别为100%、80%、50%、20%.冷冻保存12 h组与肝移植对照组相比,大鼠存活率明显降低(P＜0.05).冷冻保存12 h组肝脏组织术后24 h可观察到明显的片状坏死,继而肝细胞有丝分裂相显著增多.结论 对SD大鼠而言,冷保存12 h的供肝肝移植是研究肝脏损伤与再生修复的良好模型.     

供肝丹参多酚酸盐预处理减轻受体大鼠肝移植术后胆道损伤

目的观察丹参多酚酸盐预处理供肝对受体大鼠肝移植术后胆道损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法根据供体肝脏保存方法,受体大鼠随机分为UW液组、丹参多酚酸盐预处理组(UW液+0.4 mg/ml丹参多酚酸盐)、生理盐水对照组(UW液+等量生理盐水)。大鼠行胆道持续外引流肝动脉化原位肝移植,观察移植术后1、6、24 h胆汁流量及胆汁酸盐分泌量。大鼠行肝动脉化大鼠原位肝移植,移植术后2周检测各组大鼠血清碱性磷酸酶、胆汁酸盐及总胆红素水平,观察胆道并发症发生率;采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹法分别检测肝脏移植物内胆汁酸盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)基因及蛋白的表达。结果与UW液组及生理盐水对照组相比,丹参多酚酸盐预处理组大鼠术后早期胆汁流量及胆汁酸盐分泌量明显增加(P<0.05);术后2周血清碱性磷酸酶、胆汁酸盐及总胆红素水平明显降低(P<0.05),胆汁淤积等胆道并发症发生率明显降低(P<0.01);肝脏移植物内BSEP mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05)。结论UW液内加入丹参多酚酸盐保存供肝可明显减轻受体大鼠肝移植术后胆道损伤,降低术后胆道并发症的发生,可能与其促进移植肝内B...     

肝星状细胞的激活在大鼠供肝冷缺血损伤中的作用

目的：在大鼠全肝移植模型的基础上,检测大鼠全肝移植中,肝星状细胞的激活在供肝冷缺血损伤中所起的作用．方法：建立大鼠全肝移植模型,按冷缺血时间,分为冷缺血1h组和冷缺血5h组．观察两组7d生存率;术后6,48h处死大鼠,取下肝脏标本,应用d—SMA抗体进行免疫组织化学染色以测定肝星状细胞(hepatic stellate cell)的激活程度．结果：成功建立了大鼠全肝移植模型;冷缺血1h组和冷缺血5h组7d生存率分别为91．7％(11／12)和25％(3／12);两组间比较,在各时间点上,冷缺血5h组d-SMA的表达均高于同一时间点冷缺血1h组d-SMA的表达,表明冷缺血5h组HSC激活的程度总体上高于冷缺血1h组．结论：在大鼠全肝移植中,肝星状细胞的激活与供肝冷缺血损伤密切相关．     

短时间多次缺血预处理对大鼠移植肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨短时间多次缺血预处理(ischemic preconditioning,IP)对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的保护作用。方法:采用SD大鼠原位肝移植动物模型,供肝冷保存120 min,无肝期14 min。54只SD大鼠随机分成5组：对照组(A组,n=6),不做肝脏移植手术;肝移植组(B组,n=12),供体大鼠肝脏4℃乳酸林格液保存2 h后,采用双袖套法行原位肝移植;缺血预处理肝移植组(C1、C2、C3组,每组12只)：将供肝进行缺血预处理后切除供体大鼠肝脏,4℃乳酸林格液保存2 h,行原位肝移植,根据阻断第一肝门5 min,开放再灌注5 min为1个循环,处理1～3个循环分别命名为C1、C2和C3组。术后检测各组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,每分钟胆汁量,免疫组化检测肝细胞Bcl-2表达,TUNEL法检测细胞凋亡,电镜观察细胞超微结构的改变。结果:术后B组血清ALT、AST、LDH活性明显高于A组,每分钟胆汁量明显低于A组(P<0.01);C组ALT、AST、LDH活性虽明显高于A组(P<0.01),但比B组明显降低(P<0.05);随着IP次数增加,C1、C2、C3组ALT、AST、LDH活性递减,而每分钟胆汁量逐渐增加。细胞形态学检查发现,与B组比较,C组供肝组织细胞结构改变较小,Bcl-2表达增加,凋亡指数降低(P<0.01或P<0.05)。结论:IP对大鼠供肝缺血再灌注损伤具有保护作用,短时间多次IP对肝脏的保护作用更强。     

冷保存时间对部分肝移植肝再生影响的实验研究

目的：建立大鼠部分肝移植模型基础上,研究不同冷保存时间对移植肝再生相关细胞因子表达的影响。方法：实验分为：冷保存30mim部分肝移植组、冷保存4h部分肝移植组和冷保存10h部分肝移植组,观察各组生存率并分别于术后1、2、4天取肝组织,免疫组化检测各组增殖细胞核抗原（PCNA）、TNF-α、IL-6的表达。结果：冷保存30mim部分肝移植组、冷保存4h部分肝移植组和冷保存10h部分肝移植组存活率分别为79％、71％、29％,和其他实验组相比：冷保存10h部分肝移植组PCNA、TNF-α、IL-6表达降低（P〈0．05）。结论：随着冷保存时间的延长,降低了部分肝移植术后的肝再生能力和生存率。冷保存时间影响移植肝TNF-α和IL-6的表达,移植物中细胞因子TNF-α和IL-6的表达对移植肝肝再生过程中起重要的调控作用。     

苦参碱防治肝血窦内皮细胞冷缺血-再灌注损伤

目的：探讨苦参碱对大鼠原位肝移植中肝血窦内皮细胞冷缺血-再灌注损伤的保护作用及其机制。方法：应用大鼠原位肝移植模型，供肝保存5h，168只大鼠随机分为对照组、小剂量治疗组、大剂量治疗组和假手术组，分别检测移植术后1、2、4、24h血透明质酸(HA)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量，并观察肝血窦内皮细胞形态学的改变。结果：与对照组比较，治疗组术后各时间点的HA和ICAM-1表达均显著减少，NO含量增加，TNF—α、MDA、SOD水平均明显降低，肝血窦内皮细胞形态出现改善。结论：苦参碱对大鼠原位肝移植冷缺血-再灌注中肝血窦内皮细胞损伤具有保护作用。     

丹参对大鼠移植肝脏再灌注损伤中TNF α及IL 1水平的影响

目的探讨丹参对大鼠原位肝移植供肝缺血-再灌流损伤中肿瘤坏死因子α(TNF α)及白介素1(IL 1)的影响。方法将40只SD大鼠分为对照组、丹参组及假手术组,建立原位肝移植模型,在供肝灌注冷保存时,以4?℃乳酸林格氏液为基液,丹参组灌注保存液中加丹参注射液(60?mL/L),对照组不加丹参。保存5?h后置入受体。移植后6?h处死大鼠取样,检测血清中AST、ALT水平;测定肝组织中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF α)及白介素1(IL 1)的含量,并对比观察病理形态学的改变。结果对照组、丹参组较假手术组肝移植术后AST、ALT明显升高,肝组织中MDA含量、TNF α和IL 1明显升高,但丹参组上述指标的异常变化均明显减轻,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。丹参组较对照组肝组织的再灌注损害程度明显减轻。结论丹参可以降低大鼠移植肝脏再灌注损伤中TNF α及IL 1水平,对移植肝脏缺血-再灌注损伤具有保护作用。     

苦参碱对大鼠肝脏冷保存再灌注损伤中枯否细胞的作用研究

目的探讨苦参碱对大鼠原位肝移植供肝冷保存再灌注损伤中枯否细胞的影响及其作用机制。方法本实验应用延长保存的大鼠原位肝移植模型,将160只大鼠随机分为对照组、苦参碱小剂量治疗组、大剂量治疗组和假手术组,分别检验移植术后血中内毒素和肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,并观察移植肝脏病理形态学的改变。结果与对照组比较,治疗组术后各时点肝组织内的TNF-α的含量均明显降低,内毒素血症明显减轻,枯否细胞增生活跃程度明显减轻,同时肝细胞和肝内皮细胞损伤的病理表现也明显改善。结论苦参碱可以通过减轻再灌注后内毒素治疗,有效抑制枯否细胞激活及释放TNF-α等炎症性损伤介质,保护肝细胞及肝窦内皮细胞,从而减轻供肝冷保存再灌注损伤。     

川芎嗪对大鼠供肝冷保存再灌注损伤中肝细胞凋亡及调控基因表达的影响

目的 探讨川芎嗪对大鼠原位肝移植供肝冷保存再灌注损伤中肝细胞凋亡及调控基因表达的影响。方法雄性SD大鼠180-250g，共24只。配成12对，随机分成2组：实验组和对照组。用自配川芎嗪乳酸钠林格氏液作为实验组供体大鼠肝脏的灌注液和保存液；对照组则用不含川芎嗪的乳酸钠林格氏液，供肝获取后均将其保存在4℃的保存液中4h。然后行大鼠原位肝移植术。术后6h处死受体大鼠，检测血浆中AST、ALT、LDH水平。取肝脏组织，流式细胞法分析肝细胞的凋亡百分比，TUNEL法检测肝细胞的凋亡情况。免疫组化法检测bel-2的表达。结果实验组AST、ALT、LDH水平显著低于对照组。流式细胞法分析实验组凋亡百分比显著低于对照组。TUNEL法检测显示实验组凋亡情况显著轻于对照组。免疫组化显示实验组肝脏中bcl-2表达明显，而对照组则为阴性。结论川芎嗪可能通过促进抑制凋亡基因bcl-2的表达来抑制冷保存再灌注导致的肝细胞凋亡。     

肝移植过程中枯否细胞产生肿瘤坏死因子α参与供肝损伤

目的研究肝移植早期供肝缺血再灌注损伤的发生机理。方法供肝在4℃乳酸林格氏液中保存45min（对照组）、4h、6h后进行大鼠原位肝移植，术后1、2、4及24h分别取肝上下腔静脉血测肿瘤坏死因子α（TNF—α）活性，术后2h取供肝组织进行TNF-α免疫细胞化学定位，术后24h取供肝进行常规病理学检查。结果①在原位肝移植过程后早期肝后血TNF-α活性显著升高，且在血管再通后2h达到高峰（4h组为3．81U／mL，6h组为7．96U/mL），其升高程度与供肝的损伤程度有关；②6h组可见TNF-α阳性染色的多角形或梭形细胞，散在分布于肝窦中，4h组染色较弱，对照组无染色。结论冷存可使供肝枯否细胞激活，产生TNF-α参与供肝的损伤过程。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。