幽门螺杆菌感染诱导胃黏膜上皮细胞凋亡及端粒酶逆转录酶表达

目的研究幽门螺杆菌（Hp）根除前后胃黏膜上皮细胞凋亡和端粒酶逆转录酶（hTERT）表达及其与bcl-2、c-myc蛋白表达的关系。方法采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术及免疫组化染色方法检测39例却Hp性患者根除治疗及21例却阴性患者对症治疗前后胃黏膜上皮细胞凋亡、hTERT、bcl-2、c—myc蛋白表达的变化。结果治疗前却阳性者胃黏膜上皮细胞凋亡指数为16．2％，显著高于却阴性者（P〈0．05）；却阳性者hTERT、c—myc蛋白表达显著高于却阴性者（53．8％比23．8％；53．8％比28．6％，P〈0．05）。邯根除者治疗后胃黏膜上皮细胞凋亡、hTERT及bcl-2、c—myc蛋白表达与根除前相比均显著下降（16．9％比9．0％；59．3％比22．2％；59．3％比25．9％；59．3％比14．8％，P〈0．01），且与却阴性对照组相比差异无统计学意义（P〈0．05）；而邯未根治组及对照组上述指标均无显著变化。治疗前bcl-2、c—myc蛋白与hTERT呈显著正相关，秩相关系数r分别为0．269、0．474（P〈0．05）。结论却感染诱导细胞凋亡及hTERT过度表达，使胃黏膜不稳定性增加。根除却可纠正细胞凋亡失调，使hTERT表达下降或消失，从而降低胃癌发生的可能性。bcl-2及c—myc蛋白对hTERT表达可能具有调控作用。     

不同食管病变中端粒酶活性与端粒酶RNA组分、端粒酶逆转录催化亚单位的相关性及其意义

目的　探讨不同食管病变中端粒酶活性 (TA)、端粒酶RNA组分 (hTR)及端粒酶逆转录催化亚单位 (hTERT)的表达 ,彼此间相关性及其预后意义。方法　采用TRAP 银染、原位杂交及免疫组化技术检测TA、hTR及hTERT在 38例食管鳞癌组织、15例不典型增生及 12例正常食管粘膜中的表达情况。结果　食管鳞癌TA、hTR及hTERT的阳性表达率分别为 84 2 1%( 32 /38)、71 0 5 %( 2 7/38)及 81 5 8%( 31/38) ,不典型增生组织中TA、hTR及hTERT阳性表达率分别为 6 0 0 0 %( 9/15 )、33 33%( 5 /15 )及 40 0 0 %( 6 /15 ) ,与正常组织比较 ,具有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,TA与hTR及hTERT的表达具有相关性 (P <0 0 5 )。TA、hTR及hTERT的表达与临床病理因素无关 (P >0 0 5 )。结论　TA、hTR及hTERT在食管癌的发生发展中起着重要作用 ;hTR及hTERT能够反应端粒酶活性 ,三者均为食管鳞癌恶性表型增高的标志 ;hTR及hTERT具有独立的预后意义。     

端粒酶逆转录酶和c-myc基因在肺癌中表达的研究

目的　研究端粒酶逆转录酶 (hTERT)和c myc基因在肺癌中的表达及其与端粒酶活性的关系。方法　采用端粒重复序列扩增 (TRAP)法对肺癌组织以及癌旁非癌肺组织的端粒酶活性进行测定。用原位逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学技术分别检测上述组织标本中hTERTmRNA与c myc蛋白表达。结果　端粒酶活性在肺癌组织中阳性率为 73 .2 % (3 0 /4 1) ,在癌旁非癌肺组织为 6.3 % (2 /3 2 ) ,P <0 .0 1。肺癌及癌旁非癌肺组织中hTERTmRNA阳性表达率分别为 78.0 % (3 2 /4 1)和 9.4% (3 /3 2 ) ,P <0 .0 1,c myc蛋白阳性表达率分别为 80 .5 % (3 3 /4 1)和 15 .6% (5 /3 2 ) ,P <0 .0 1。肺癌组织hTERTmRNA表达与端粒酶活性呈显著正相关 (r =0 .70 7,P <0 .0 1) ,同时c myc蛋白与hTERTmRNA表达亦呈明显正相关 (r =0 .60 9,P <0 .0 1)。 结论　hTERTmRNA表达增强不仅参与肺癌的发生 ,而且可能是调节肺癌端粒酶活性的限速步骤。c myc蛋白可能通过激活hTERTmRNA表达而促进肺癌的形成     

H pylori感染在胃癌前病变中对端粒酶相关基因及细胞增殖与凋亡的影响

目的:分析胃癌前病变中端粒酶RNA(hTR)、端粒酶逆转录酶(Htert)、c-Myc、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及相互关系,并探讨H pylori感染致胃癌前病变的可能机制.方法:33例胃癌前病变中H pylori阳性19例,H pylori阴性14例.采用原位杂交法检测胃黏膜活检标本中hTR表达; 免疫组织化学SP法检测hTERT、c-Myc、PCNA表达; TUNEL法检测细胞凋亡.结果:H pylori阳性胃癌前病变组h TR、hTERT、c-Myc阳性率均显著高于H pylori阴性胃癌前病变组(63.2% vs 28.6%,68.4% vs21.4%,47.4% vs 7.1%,均P<0.01); 增殖指数及凋亡指数在H pylori阳性组分别为17.5±5.4、17.7±3.9,H pylori阴性组分别为8.3±3.6、9.2±5.2,两组相比均有显著性差异( P<0.01).胃癌前病变中hTERT与hTR、hTERT与c-Myc表达均呈显著正相关性( rs = 0.45,0.54,均P<0.01).结论:H pylori感染可诱导胃癌前病变中端粒酶相关基因及c-Myc过度表达,促进细胞增殖与凋亡,引起胃黏膜上皮细胞动力学紊乱.     

survivin和hTERT在大肠黏膜癌变中表达及其与c-myc关系

目的研究survivin和端粒酶催化亚单位(hTERT)在大肠黏膜癌变中表达及其与c—myc关系。方法采用原位杂交和免疫组化(SP法)检测hTERTmRNA、survivin、c—myc蛋白在45例大肠腺癌、20例腺瘤、10例正常组织的表达，并对各指标阳性率和相关性分析。结果肠腺癌中stirvivin阳性率66．7％，hTERTmRNA85％，c—myc53％，三者在腺瘤中分别为30％、45％、20％，正常黏膜为0％、10％、0％，stirvivIn和hTERTmRNA表达与大肠癌的分化程度及临床参数无明显相关性，与c—myc明显相关，Survivin与hTERTmRNA呈正相关性(x^2=10．235，P=0．001)。结论Survivin和hTERT在大肠癌中高表达，非癌组织中低表达，可成为诊断治疗的新靶点，但不能作为肿瘤进展的标志物，survivin、hTERT、myc可能在大肠癌变中起协同作用。     

胃癌前组织和胃癌中hTERT、Bcl-2蛋白的表达及其相互关系

目的 探讨胃癌前组织及胃癌中人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)的表达状况及其与Bcl-2蛋白表达的关系。方法 应用免疫组织化学技术检测45例慢性胃炎和19例胃癌中hTERT和Bcl-2蛋白的表达。结果 hTERT蛋白表达率在萎缩性胃炎、肠化生、异形增生和胃癌等不同胃黏膜癌变过程中呈递增趋势;hTERT蛋白的表达率在胃癌组织中显著高于异形增生、肠化生和萎缩性胃炎组织(P<0.05);在异形增生组织中显著高于肠化生和萎缩性胃炎组织(P<0.05);在肠化生组织中显著高于萎缩性胃炎组织(P<0.05)。Bcl-2蛋白表达率在萎缩性胃炎、肠化生、异形增生和胃癌等不同胃黏膜癌变过程中呈递增趋势;Bcl-2蛋白的表达率在胃癌组织中显著高于异形增生、肠化生和萎缩性胃炎组织(P<0.05);在异形增生组织中显著高于萎缩性胃炎组织(P<0.05),亦高于肠化生,但是相差无显著性;在肠化生组织中显著高于萎缩性胃炎组织(P<0.05)。Bel-2蛋白阳性患者hTERT蛋白表达率为71.43％,Bcl-2蛋白阴性患者hTERT蛋白表达率34.44％,hTERT蛋白表达率在Bcl-2蛋白阳性患者中显著高于Bcl-2蛋白阴性患者(P<0.01)。结论 在胃癌和胃癌前病变阶段,端粒酶(telomerase)与Bcl-2均可能发挥重要作用,促进了胃癌的发生、发展;Bcl-2表达增加可能是胃     

人端粒酶在宫颈癌组织中的表达及意义

目的探讨端粒酶表达量改变成为宫颈癌的早期诊断及治疗依据的可能性。方法本研究通过RT-PCR方法检测人端粒酶RNA（hTR）、端粒酶协同蛋白（hTP1）和端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA在正常宫颈（NCE）组织,宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织及宫颈浸润癌（ICC）组织中的表达水平。结果不同组织类型中hTR及hTP1 mRNA阳性表达比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,hTERT mRNA阳性表达比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。CIN组织与ICC组织不同分期hTERTmRNA阳性表达比较无统计学差异（P〉0.05）。结论hTERT表达的检测可能成为宫颈癌早期筛查、判断病情进展及预后的一个生物学指标。     

急性白血病患者端粒酶催化亚单位和p16基因表达与端粒酶活性的关系

目的 :探讨端粒酶催化亚单位 (hTERT)和p 16基因表达与端粒酶活性的关系及其在急性白血病发生过程中的作用。方法 :采用TRAP和RT PCR法分别检测 5 2例急性白血病患者 (白血病组 )及 2 0例非白血病且骨髓象正常者 (对照组 )的端粒酶活性与hTERTmRNA表达。用免疫细胞化学SP法测定上述对象的P 16蛋白表达。结果 :白血病组端粒酶活性与hTERTmRNA的阳性率分别为 75 .0 %和 80 .8%,而对照组均为阴性。白血病组hTERTmRNA表达与端粒酶活性呈显著正相关 (r =0 .6 5 ,P <0 .0 1)。白血病组及对照组P 16蛋白阳性表达率分别为 34 .6 %和 95 .0 %,二者比较差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。白血病组P 16蛋白表达与端粒酶活性呈显著负相关 (r =- 0 .81,P <0 .0 1)。结论 :hTERTmRNA表达和p 16基因失活可能在急性白血病发生发展过程中有一定作用 ,急性白血病细胞端粒酶激活可能与hTERTmRNA表达及p 16基因失活有关。     

端粒酶及端粒酶逆转录酶在良、恶性胸腔积液中的表达及意义

目的 研究端粒酶及端粒酶逆转录酶(hTERT)在良、恶性胸腔积液中的表达,为临床诊断提供实验依据.方法 选择21例恶性胸腔积液(恶性组)及23例良性胸腔积液患者(良性组),应用重复序列扩增法-ELISA(TRAP-EUSA)法及免疫组化方法检测积液中端粒酶、hTERT及癌胚抗原(CEA)表达.结果 良性组和恶性组端粒酶表达阳性率分别为39.13%、76.19%,P<0.01;hTERT表达阳性率分别为0、80.95%,P<0.01.hTERT检测恶性胸腔积液的特异度(100%)显著高于端粒酶(60.87%),敏感度(80.95%)显著高于CEA(47.62%).结论 hTERT检测恶性胸腔积液的敏感度和特异度均较高,且其免疫组化检测方法简便易行,值得临床借鉴.     

大肠癌组织端粒酶各组分基因表达及其与端粒酶活性的关系

目的　探讨大肠癌组织端粒酶各组分基因 (hTR、TP1、hTERT)表达及其与端粒酶活性的关系。方法　分别采用原位逆转录聚合酶链反应和端粒重复序列扩增法 ,检测 46例大肠癌及其相应正常组织中的端粒酶各组分基因表达及端粒酶活性。结果　hTR或TP1mRNA在大肠癌与其相应正常组织中表达比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,而hTERTmRNA在大肠癌组织中表达显著高于其相应正常组织 (P <0 .0 5 )。大肠癌组织端粒酶活性亦显著高于其相应正常组织端粒酶活性 (P <0 .0 5 )。端粒酶活性与hTERTmRNA表达显著相关 (r =0 .848,P <0 .0 5 ) ,而与hTR或TP1mRNA表达无相关性 (P >0 .0 5 )。结论　hTERTmRNA在端粒酶活性调节中可能起关键作用 ,hTERTmRNA表达水平可作为大肠癌诊断指标之一     

幽门螺杆菌感染和端粒酶活性以及c-myc、p16基因的表达在胃黏膜癌变中的相关性研究

幽门螺杆菌(H.pylori)是胃癌的主要致病因子,H.pylori、端粒酶和肿瘤相关基因的关系在胃黏膜癌变发生过程中研究很少。目的:观察H.pylori感染和端粒酶活性以及c-myc、p16基因在胃癌中的关系。方法:通过胃镜活检和外科手术获取171例胃组织标本,快速尿素酶试验和H.pylori培养确定有无H.pylori感染;酶联免疫法检测H.pylori感染患者的血清CagA-IgG水平;聚合酶链反应.酶联免疫吸附测定(PCR-ELISA)法检测端粒酶活性;免疫组化法检测c-myc、p16基因的表达。结果:胃癌(GC)组端粒酶表达率显著高于其他各组(P<0.01);慢性萎缩性胃炎(CAG)伴中、重度肠化(IM)组端粒酶和c-myc表达率显著高于CAG伴轻度IM组(P<0.05);而慢性浅表性胃炎(CSG)和CAG伴轻度IM组p16表达率显著高于CAG伴中、重度IM、异型增生(Dys)和GC组(P<0.05)。在CAG伴轻、中、重度IM组中,H.pylori阳性组端粒酶活性比阴性组高:无论有无H.pylori感染,胃癌组端粒酶活性都非常高。在CAG伴中、重度IM、Dys和GC组中,H.pylori阳性亚组c-myc表达显著高于阴性亚组(P<0.01),而在ECAG伴中、重度IM和Dys组中,H.pylori阳性亚组p16基因表达显著低于阴性亚组(P<0.01)。结论:H pylori感染很可能主要通过c-myc基因的激活和p16基因的失活以及其他基因的变化来诱导CAG伴中、重度     

Effect of H pylori infection and its eradication on hyperammo-nemia and hepatic encephalopathy in cirrhotic patients

AIM: To investigate the relationship between H pylori infection, blood ammonia concentration and hepatic encephalopathy (HE), and the effect of H pylori eradication in cirrhotic patients.METHODS: From July 2003 to January 2005, 457 cirrhotic patients in five regions of Zhejiang Province were enrolled. Patients were evaluated for demographics, number connection test, H pylori infection, liver impairment, blood ammonia concentration and HE. Patients with H pylori infection were given 1 wk therapy with omeprazole plus clarithromycin and tinidazole. 14C urea breath test was performed and mental symptoms and blood ammonia level were reassessed after bacterium eradication.RESULTS: Overall H pylori infection rate was 60.6%, and HE occurred in 47.5% of cirrhotic patients. Subclinical HE (SHE) was detected in 55 of 117 cirrhotic patients. Blood ammonia concentration in H pylori negative (n = 180) and positive (n = 277) cirrhotic patients was 53.8 ± 51.4 and 78.4 ± 63.6 nmol/L, respectively (P < 0.01), which was significantly reduced to 53.5 ± 37.7 nmol/L after bacterium eradication (n = 126) (P < 0.01). Blood ammonia was 97.5 ± 81.0 nmol/L in H py/ori-positive cirrhotic patients, and this did not significantly change in those with persistent infection after H pylori eradication (n = 11). HE was more frequently observed in patients with H pylori infection than in those without (58.5% vs 30.6%, P < 0.01). HE rate significantly dropped to 34.1% after H pylori eradiation (P < 0.01). H pylori prevalence significantly differed among cirrhotic patients with HE (74.4%), SHE (69.1%), and those without HE (53.2%) (P < 0.05). Blood ammonia level was significantly different among cirrhotic patients with HE (94.5 ± 75.6 nmol/L), SHE (59.9 ± 49.2 nmol/L), and without HE (47.3 ± 33.5 nmol/L) (P < 0.05). Logistic regression analysis showed that blood ammonia concentration, Child-Pugh stage, upper gastrointestinal bleeding, electrolyte disturbance, and urea nitrogen were risk factors for HE.CONCLUSION: H pylori infection is an important factor for inducing high blood ammonia concentration and HE in cirrhotic patients. H pylori eradication may be helpful for treatment and prevention of HE.