LC-MS/MS法定量测定马血浆中地塞米松浓度的研究

目的：建立快速、灵敏的ＬＣ-ＭＳ／ＭＳ法定量测定马血浆中的地塞米松浓度。方法：血浆样品经叔丁基甲基醚液液萃取后,使用ACE-C18色谱柱 (75mm×2.1mm, 3μm);采用ＥＳＩ离子源ＭＲＭ质谱扫描模式对血浆中的地塞米松浓度进行定量检测。结果：地塞米松血浆浓度测定方法的线性范围为0.01～1 0 ng.mL、日内／日间准确度分别为98.0%～120.0% 和104.0%～120.0%。日内／日间精密度分别为1.６～８.９％和２.２～９.７％。结论：该方法高效、准确、灵敏,可用于地塞米松在大动物模型中的药代动力学研究。     

Simultaneous analysis of flavonoids from Hypericum japonicum Thunb.ex Murray (Hypericaceae) by HPLC-DAD-ESI/MS

A novel and sensitive HPLC-UV method has been developed for the simultaneous determination of five major flavonoids in Hypericum japonicum hydroalcoholic extract. The chemical profile of five flavonoids, including taxfolin-7-O-alpha-L-rhamnoside (1), isoquercitrin (2), quercitrin (3), quercetin-7-O-alpha-L-rhamnoside (4) and quercetin (5) was acquired by using high-performance liquid chromatography-diode array detector coupled to an electrospray tandem mass spectrometer (HPLC-DAD-ESI/MS). The analysis was performed on a ZORBAX SB-C18 analytical column (5 microm, 250 mm x 4.6 mm, i.d.) with a gradient solvent system of acetonitrile-0.5% aqueous formic acid. The validation was carried out and the linearities (r(2)>0.9997) and recoveries (ranged from 98.4% to 99.8%) were acceptable. The limits of detection (LOD) of these flavonoids ranged from 0.5 to 7.5 ng. The results indicated that the contents of investigated flavonoids in H. japonicum varied significantly from habitat to habitat with contents ranging from 2.00 to 34.18 mg/g. The proposed method is simple, effective and suitable for the quality control of this traditional Chinese medicine (TCM).     

枳壳化学成分和代谢成分的UPLC-PAD-Q-TOF／MS分析

目的：建立寻找枳壳提取物活性成分的方法。方法：采用超高效液相色谱仪．质谱联用（UPLC-PAD—Q-TOF／MS）方法对枳壳水提液及其入血成分进行分析,通过紫外光谱、质谱数据等对化合物进行解析。结果：从枳壳水提液中鉴定了21个化合物,其中包括12个黄酮苷类化合物,9个多甲基黄酮类化合物;在小鼠血浆中检测到6种原型成分和4种代谢产物。结论：UPLC—PAD—Q—TOF／MS法可用于中药活性成分的鉴定。     

UPLC-MS/MS同时测定青钱柳中6种黄酮类成分

目的 建立UPLC-MS/MS同时测定青钱柳中芦丁、金丝桃苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素6种黄酮类成分的分析方法。方法 超高效液相法采用色谱柱为Agilent ZORBAX RRHD SB-C₁₈（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温40℃,进样量为1 μL;质谱法采用三重四级杆质谱,电喷雾离子源、负离子模式（ESI^-）,通过多重反应监测同时对青钱柳中6种黄酮类成分进行定量分析。结果 测定青钱柳中6种黄酮类成分芦丁、金丝桃苷、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素的线性范围分别为0.002~0.24 μg·mL^-1（R²=0.999 4）,0.049~4.91 μg·mL^-1（R²=0.999 5）,0.504~50.37 μg·mL^-1（R²=0.999 4）,0.051~5.12 μg·mL^-1（R²=0.999 4）,0.005~0.52 μg·mL^-1（R²=0.999 8）,0.052~5.17 μg·mL^-1（R²=0.999 9）,平均回收率分别为96.1%,98.4%,98.5%,97.3%,96.7%,96.5%,RSD分别为1.78%,1.22%,1.91%,1.08%,1.21%,1.29%; 16批青钱柳样品中6种黄酮的含量分别为0.019 8~0.253 7 ,0.923 5~15.568 0 ,12.987 8~130.510 9 ,0.122 9~12.101 1 ,0.007 4~0.573 9 ,0.387 7~12.456 7 mg·g^-1,其中槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷的含量最高,约占总量的78%。结论 所建立的分析方法简单、快速、灵敏度高、专属性好,可应用于青钱柳中黄酮类成分的含量测定及质量控制。     

LC-MS/MS同时测定人血浆中6种抗真菌药物浓度

目的 建立LC-MS/MS方法同时测定人血浆中氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、羟基伊曲康唑、卡泊芬净6种抗真菌药物的浓度。方法 向50 μL血浆样本中加入含同位素内标的甲醇沉淀蛋白后稀释进样分析。色谱柱为Kinetex C₁₈（3 mm×100 mm,2.6 μm）,流动相为0.1%甲酸-水（含5 mmol·L^-1乙酸铵）和0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min^-1,进样量为5 μL,分析时间为5 min。采用电喷雾离子源,正离子多反应监测模式扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 307.0→220.2（氟康唑）、m/z 350.1→224.1（伏立康唑）、m/z 701.4→683.2（泊沙康唑）、m/z 705.2→392.2（伊曲康唑）、m/z 721.5→408.3（羟基伊曲康唑）、m/z 547.4→131.1（卡泊芬净）。结果 6种抗真菌药物在0.1~20 μg·mL^-1内线性良好（r≥0.995 0）,准确度为90.35%~114.94%,仪器精密度RSD均<15%（定量下限处<20%）。提取回收率和基质效应分别为71.99%~90.38%和96.78%~134.17%。稳定性符合生物样本分析方法验证要求。应用本方法测定25例侵袭性真菌感染患者的血浆谷浓度,其中伏立康唑谷浓度0.70~12.94μg·mL^-1,氟康唑4.57~12.64 μg·mL^-1,个体间差异较大。结论 本方法操作简单快捷,准确度和灵敏度高,重现性良好,适用于临床治疗药物监测。     

LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中甘草酸和甘草次酸

目的：建立一种同时测定大鼠血浆中甘草酸和其代谢产物甘草次酸的高效液相色谱一串联质谱的（LC-MS／MS）分析方法。方法：采用汉邦VP—ODS（150min×2．1nun,5μm）色谱柱,流动相为甲醇和1％的甲酸水,梯度洗脱：21％水相（0-3．5min）,2％水相（3．5-8．2min）。简单的乙腈沉淀蛋白法处理血浆样品。以格列喹酮为内标,采用ESI源负离子模式、多反应检测进行测定。检测离子对分别为m／z821．4→350．9（甘草酸）、m／z526→401．1（格列喹酮）和m／z469．2→425．2（甘草次酸）。结果：甘草酸和甘草次酸的检测浓度分别在50－2000ng·mL-1、10-500ng·mL-1范围内线性关系良好。相关系数为0.9989和0．9981。日内及日间精密度RSD均小于15％。结论：方法专属性强．准确度好．适用于同时监测甘草酸和甘草次酸的浓度及进行药动学研究。     

LC-MS/MS法同时检测筋骨痛消胶囊中非法添加的醋酸泼尼松、双氯芬酸及布洛芬

目的:采用LC-MS/MS联用技术建立检测筋骨痛消胶囊中非法添加醋酸泼尼松、双氯芬酸及布洛芬的方法。方法:色谱柱为SHIMADZU shim-pack VP-ODS（250mm×4.6mm,5μm）,0.02mol·L^-1醋酸铵0.1%醋酸水溶液:乙腈（53:47）为流动相,流速1.0ml·min^-1;Agilent6310离子阱质谱仪,电喷雾离子源（ESI）,雾化气压力38psi,干燥气温度350℃,流速9ml·min^-1,扫描范围50～500m/z。结果:在高效液相色谱、质谱中,样品出现与醋酸泼尼松、双氯芬酸及布洛芬成分一致的色谱峰、质谱峰。结论:本方法选择性强,灵敏度高,可用于筋骨痛消胶囊中非法添加醋酸泼尼松、双氯芬酸及布洛芬的定性鉴别。     

8种黄酮类成分的LC-MS/MS分析

目的：为了探讨液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术在天然产物成分分析中的应用,以黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩素、黄芩素、射干苷、次野鸢尾黄素、芦丁、金丝桃苷等8个黄酮类化合物为研究对象,采用超高压液相色谱-三重四级杆串联质谱分析该8个黄酮类化合物的色谱、质谱特性.方法：色谱柱为ZORBAX SB-C18（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为0.3 ml·min-1,柱温为35℃,质谱离子源采用电喷雾离子源（ESI）.结果：8个黄酮化合物在色谱柱上的色谱保留行为与取代羟基及苷化的数目具有相关性,在质谱中野黄芩苷、射干苷、金丝桃苷在负离子模式下具有较好的响应,而黄芩苷、汉黄芩素、黄芩素、次野鸢尾黄素、芦丁在正离子模式下具有较好的响应.苷元的裂解以RDA裂解为主.结论：该8个黄酮化合物的色谱和质谱行为对于未知结构的黄酮化合物的结构解析具有一定的指导意义.     

Simultaneous Quantification of Baricitinib and Methotrexate in Rat Plasma by LC-MS/MS: Application to a Pharmacokinetic Study

Efficacy assessments using a combination of baricitinib and methotrexate necessitate the development of an analytical method for the determination of both drugs in plasma with precision. A high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method was developed for the simultaneous determination of baricitinib and methotrexate in rat plasma. Extraction of baricitinib, methotrexate, and tolbutamide (internal standard; IS) from 50 µL of rat plasma was carried out by protein precipitation with methanol. Chromatographic separation of the analytes was performed on the YMC pack ODS AM (150 mm × 4.6 mm, 5 µm) column under gradient conditions with methanol: 2.0 mM ammonium acetate buffer as the mobile phases at a flow rate of 1 mL/min. The precursor ion and product ion transition for both analytes and IS were monitored on a triple quadrupole mass spectrometer, operated with selective reaction monitoring in positive ionization mode. The method was validated over a concentration range of 0.5–250.00 ng/mL for baricitinib and methotrexate. Mean extraction recoveries for baricitinib, methotrexate, and IS of 86.8%, 89.4%, and 91.8% were consistent across low, medium, and high QC levels, respectively. Precision and accuracy at low, medium, and high quality control levels were less than 15% across the analytes. Benchtop, wet, freeze-thaw, and long-term stability were evaluated for both of the analytes. The analytical method was applied to support the pharmacokinetic study of simultaneous estimation of baricitinib and methotrexate in Wistar rats. Assay reproducibility was demonstrated by reanalysis of 18 incurred samples     

LC-MS/MS同时测定蓝芩口服液中6种化学成分的含量

目的 采用LC-MS/MS同时测定蓝芩口服液中6种化学成分（绿原酸、栀子苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、黄芩素、汉黄芩素）的含量。方法 采用Fortis Xi C₁₈柱（50 mm×2.1 mm,1.7 μm）,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1。质谱采用电喷雾离子源,多反应监测方式进行检测。结果 6个成分在考察的浓度范围内具有良好的线性关系（r>0.999 1）;回收率（n=9）在94.7%~103.3%内,RSD均<3.3%;3个批次的样品测定结果均符合国家标准的要求,但批次间6个成分的含量差异较大。结论 本方法简便、快速、选择性好,灵敏度高,可用于蓝芩口服液的质量控制。     

LC-MS/MS法测定动物血清中射干合剂多指标成分的浓度

目的:建立测定动物血清中射干合剂多指标成分的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法。方法:血清样品中加入内标（硫利达嗪）,甲醇直接沉淀;用Capcell C₁₈MGⅢ（2.0 mm×100 mm,5μm）;流动相为水:乙腈（95:5）梯度洗脱,流量为0.3 ml·min^-1,扫描方式为正离子多离子反应监测（MRM）,黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、射干苷、次野鸢尾黄素、盐酸麻黄碱和内标硫利达嗪的离子选择通道分别为m/z 447.2→271.2、271.2→123.2、285.2→270.2、463.2→301.2、387.1→357.1、166.2→148.2、371.2→126.2。结果:黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、射干苷、次野鸢尾黄素、盐酸麻黄碱的线性范围为0.01～500.00μg·L^-1,定量下限为0.01μg·L^-1,提取回收率均大于90%,批内、批间RSD均小于10%。结论:本法操作简便,特异性强,灵敏度高,取血量少,符合生物样品的分析要求,可用于射干合剂中多指标成分在动物体内的药动学研究。     

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS分析猪牙皂中化学成分

目的 建立液质联用分析方法全面、快速识别猪牙皂中的化学成分。方法 应用超高液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)对猪牙皂提取物进行成分分析;其流动相为0.1%甲酸(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1。在负离子模式下获得精确的分子离子质量及二级碎片信息,结合数据库及对照品进行结构鉴定。结果 共筛选出78种化合物(黄酮类化合物32个,酚酸类化合物15个,木脂素类22个,单萜酸类化学成分9个),潜在新化合物14个。结论 本研究全面分析了猪牙皂的化学成分,为该药物药效物质基础和质量标准的研究提供了依据。     

基于LC-MS/MS分析鹿角方的入血移行成分

目的：研究鹿角方的入血移行成分及规律,初步阐明其药效物质基础。方法：通过LC-MS/MS法分析大鼠含药血清,明确鹿角方的原型入血成分;及不同给药剂量下各移行成分相对峰面积与剂量的关系,解析移行规律。结果：通过与标准品保留时间、离子碎片信息的比对,鉴定鹿角方中13种成分（马钱苷、柚皮苷、橙皮苷、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷、补骨脂素、异补骨脂素、宝霍苷Ⅰ、红景天苷、莫诺苷、特女贞苷）均能以原型入血;随给药剂量上升,柚皮苷、橙皮苷、补骨脂素、异补骨脂素、特女贞苷的相对峰面积与剂量呈线性关系,而马钱苷、莫诺苷、红景天苷、宝霍苷Ⅰ呈非线性关系,其中马钱苷、莫诺苷、补骨脂素、异补骨脂素、宝霍苷Ⅰ、红景天苷易入血。结论：马钱苷、莫诺苷、补骨脂素、异补骨脂素、宝霍苷Ⅰ、红景天苷可能是鹿角方体内直接作用的主要物质,实验结果为鹿角方药效物质基础的研究提供借鉴。     

LC-MS/MS法同时测定人尿液中5-氟尿嘧啶和吉美嘧啶浓度及其尿药排泄研究

目的:建立5-氟尿嘧啶和吉美嘧啶尿药浓度的LC-MS/MS同时测定方法,研究胃癌患者口服替吉奥胶囊后其活性代谢物5-氟尿嘧啶和增效剂吉美嘧啶的人体尿药排泄特征.方法:尿液样品酸化后用异丙醇-乙酸乙酯(15:85)提取,采用Hedera ODS-2色谱柱分离,流动相为甲醇-0.01%的乙酸水溶液(35:65);质谱采用电喷雾离子源和负离子多反应离子监测方式.6名胃癌患者单次口服替吉奥胶囊60mg后,测定尿药浓度,评价其尿药排泄特征.结果:5-氟尿嘧啶和吉美嘧啶的最低定量下限分别为0.15μg·mL-1和0.10μg·mL-1;高、中、低浓度的日间与日内精密度均小于15%.6名胃癌患者单次口服替吉奥胶囊后尿液中5-氟尿嘧啶和吉美嘧啶的平均累积排泄率分别为4.9%和18.1%.结论:建立的LC-MS/MS分析方法适用于尿药排泄研究.     

Determination of pinostrobin in rat plasma by LC-MS/MS: application to pharmacokinetics

A rapid and sensitive method for the determination of pinostrobin in rat plasma was developed using liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) for the first time. Isoliquiritigenin was used as an internal standard in rat plasma. Chromatographic separation was performed on an HiQ Sil C₁₈ column with isocratic elution at a flow rate of 1 mL/min. The mobile phase consisted of water and methanol (9:91, v/v) containing 0.1% formic acid. The quantification limit was 10 ng/mL within a linear range of 10-1000 ng/mL (R = 0.9984). The intra- and inter-day assay precision ranged from 3.8-5.3% to 3.2-5.2%, respectively, and the intra- and inter-day assay accuracy was between 93.2-95.1% and 95.5-104.3%, respectively. Our results indicated that the LC-MS/MS method is effective for pharmacokinetic study of pinostrobin in rat plasma.     

LC-ESI-MS/MS同时检测人血浆氯沙坦和E3174的浓度及其在药代动力学研究中的应用

目的：建立LC-ESI-MS/MS法测定服药后人体血浆氯沙坦及E3174的浓度。方法：MI-CROMASS Quattro Micro API型液质联用仪,色谱柱为Inertsil ODS-3C18柱（2.1mm×150mm,5μm,Ja-pan）,流动相为0.1%甲酸-乙腈（3070,V/V）,流速为0.2mL/min,进样体积为5μL,柱温为40℃,样品室温度为15℃。结果：氯沙坦线性范围为2.2~1085.0ng/mL,E3174线性范围为2~1000.0ng/mL,氯沙坦及E3174最低检测限低于0.5ng/mL,方法灵敏、稳定、特异性高,并成功地应用到人体氯沙坦及E3174药代动力学研究。结论：该方法简便、准确、重复性好,可以准确定量服药后人体血浆氯沙坦及E3174的浓度。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆伊曲康唑和羟基伊曲康唑浓度

目的:建立同时测定人血浆伊曲康唑和羟基伊曲康唑浓度的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。方法:100μL血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水-冰醋酸(60:40:1.5)为流动相,经Neucleosil ODS柱(50 mm×2.0 mm,5μm)分离,采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/z 705→m/z 392(伊曲康唑),m/z 721→m/z 408(羟基伊曲康唑)和m/z 383→m/z 337(内标氯雷他定)。结果:测定血浆伊曲康唑和羟基伊曲康唑的线性范围分别为:10～2 500 ng.mL-1和20～4 000ng.mL-1,最低定量限(LLOQ)分别为:10和20 ng.mL-1。日内、日间精密度(RSD)均<15.0%,准确度(RE)在±7.8%以内。结论:该方法分析时间短、灵敏度高、专属性强,适用于伊曲康唑和羟基伊曲康唑的药动学研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛的质量浓度

目的建立一种简单、快速,可同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛药物质量浓度的LC-MS/MS方法。方法以罗红霉素为内标,血浆经乙腈沉淀蛋白、离心后进样分析;色谱柱为Hypersil GOLD aQ;流动相为1mL·L-1甲酸溶液-乙腈;梯度洗脱;流速为0.4mL·min-1;离子源为可加热电喷雾离子源(HESI);检测方式:正离子检测;扫描方式为多反应监测(MRM),紫杉醇、多西他赛和罗红霉素的检测离子对分别为m/z854.3→509.1,808.3→527.1和837.6→679.3。结果每份含紫杉醇和多西他赛的样品分析时间为6min,血浆中紫杉醇和多西他赛的药物质量浓度在0.005~1.000μg·mL-1范围内线性关系良好,最低定量限为0.005μg·mL-1,两药测定的日内和日间精密度RSD<15%,提取回收率分别为94.97%~101.95%和96.07%~112.86%,基质效应分别为101.14%~115.59%和82.40%~95.77%。紫杉醇和多西他赛血浆样品在反复冻融3次、4℃保存2h和-80℃保存1个月的条件下稳定。结论该研究建立的LC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏和准确,能同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛的质量浓度。     

Determination of steroidal glycosides in Yucca gloriosa flowers by LC/MS/MS

An high-performance liquid chromatography (HPLC) coupled with tandem mass spectrometry (MS/MS) method, was developed for the quantitative analysis of the steroidal glycosides occurring in Yucca gloriosa flowers. The HPLC experiments were performed by means of an octadecyl-modified reversed-phase C-18 column and a binary mobile phase system under gradient elution conditions. The fragmentation patterns of steroidal saponins were analyzed by ESI–MSⁿ in positive ion mode and a specific multiple reaction monitoring MS/MS detection was developed for their quantitative determination. The described method provides high sensitivity and specificity for quantitative determination of the steroidal glycosides in Y. gloriosa flowers. Quantification was performed against an external calibration line obtained using each pure steroidal glycoside. Short- and long-term repeatabilities of the methods were better than 3 and 6%, respectively. The method was validated according to EMEA guidelines and applied to real samples.     

LC-MS/MS同时测定人血浆中洛匹那韦和利托那韦浓度

目的建立一种快速、灵敏并同时测定人体血浆中洛匹那韦（LPV）和利托那韦（RTV）浓度的液相色谱.质谱联用检测方法。方法采用Agilent Eclipse Plus C18柱（4．6mm×l50mm,3.5μm）,流动相为乙腈－水（含0．005tool·L＾-1甲酸铵,0．1％甲酸）（90：10）;流速：0．5mL·min＾-1,柱温：40℃,以乙酸乙酯为提取剂。采用选择反应监测（SRM）LPV（m／z629．5→155．1）、RTV（m／z721．4→296．1）和内标茚地那韦（IDV）（m／z614．5→465．4）进行测定。结果LPVN（10000μg·L＾-1）、中（1000μg.L＾-1）、低（40lag·L＾-1）3个浓度的平均方法回收率RSD均〈15％;线性范围为：20～20000μg·L＾－1,回归方程为Y＝1．6699X-0．0013,r=O．9984（n=7）,定量下限为20μg·L＾-1。RTV高（2500μg·L＾-1）、中（250μg·L。）、低（10μg·L＾-1）3个浓度的平均方法回收率RSD均〈15％;线性范围为5～5000μg·L＾-1,回归方程为Y＝1．7237X-3．2748×10-4,r=0．9987（n=7）,分析方法的定量下限为5μg·L＾-1。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于LPV和RTV同时应用时两者的临床血药浓度监测和药动学研究。