Fas-FasL在NOD小鼠胰岛炎中的作用

目的分析Fas-FasL在NOD小鼠胰岛炎中的作用。方法取32只分属不同周龄的雌性NOD小鼠,观察其血糖、胰岛HE染色、免疫组织化学染色———检测胰岛素、CD8、Fas、FasL的表达。在分析NOD小鼠胰岛炎中以胰岛或相关细胞为研究单位,从而减少了混杂因素的影响。结果雌性NOD小鼠自6周龄起出现胰岛炎,其评分逐渐增加(P<0.0005),14周龄出现糖尿病。随着胰岛炎的加重:胰岛素阳性细胞减少(P<0.0005),与胰岛炎评分呈负相关(P<0.05);Fas 胰岛细胞增加(P<0.0005),与评分呈正相关(P<0.01);FasL 胰岛细胞出现并逐渐增加(P<0.0005),与评分呈正相关(P<0.01);浸润细胞表达FasL、CD8,均逐渐增加(P<0.0005)。胰岛细胞的Fas与胰岛素表达之间呈负相关、胰岛素与FasL呈负相关、Fas与FasL呈正相关,浸润细胞的CD8与FasL表达呈正相关,P值均小于0.01。结论在NOD小鼠胰岛炎中,Fas-FasL可能参与β细胞损伤及自身免疫负调节。     

NOD小鼠胰岛分离与纯化的方法研究

OBJECTIVE: To investigate the method of isolating and purifying islets in non-obese diabetic (NOD) mice. METHODS: The isolation of adult NOD mice pancreatic islets was carried out by stationary digestion after pancreatic ductal injection of collagenase solution. A discontinuous Ficoll solution (25%, 23%, 20.5%, 11%) was applied to the purification of the islets. The specificity of the islets was determined by dithizone(DTZ) staining, and the function was evaluated by the glucose stimulating insulin releasing test. RESULTS: The yield and activity of the islets varied with different concentration collagenase and digesting times. After incubation of the pancreas with 1.0 mg.ml-1 Type XI collagenase for 40 min, each pancreas could yield (195 +/- 8) islets, with viability > 90% and purity > 90%. The islets were red and intact after DTZ staining. The insulin from the islets fed with high concentration glucose was 2 times that with low concentration. CONCLUSION: The modified method of pancreatic ductal collagenase injection, followed by stationary digestion and purification of islets with a discontinuous Ficoll solution, can reproducibly yield various and pure islets.     

exendin-4对链脲佐菌素造模糖尿病小鼠的药效观察

目的　观察exendin- 4对链脲佐菌素 (STZ)造模糖尿病小鼠血糖的影响。方法　 8周龄的雄性C5 7BL/6种小鼠 6 0只 ,均分为 6组 ,即注射用水组、exendin 4 0 .1μg/g体重组、STZ +注射用水组、STZ +exendin 4 0 .1μg/g体重组、STZ +exendin -4 0 .2 μg/g体重组、STZ +exendin- 4 0 .4 μg/g体重组 ,记录给药期间(1～ 10d)和实验第 12、15、18、2 4天血糖及第 30天时 (观察阶段 )腹腔葡萄糖耐量试验 (IPGTT)的结果。结果　注射用水组和exendin -4 0 .1μg/g体重组给药期间及治疗后观察阶段血糖的差异无显著性(P >0 .0 5 )。STZ +不同剂量exendin 4治疗组在给药期间和治疗后观察阶段血糖较STZ +注射用水组明显降低 (P <0 .0 5 ) ;给药期间不同剂量exendin 4治疗组中 ,STZ +exendin 4 0 .1μg/g体重组的效果优于其他两组 ,其血糖值与注射用水组的差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;治疗后观察期间 3种治疗剂量组血糖的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。实验 30d时 ,STZ +不同剂量exendin 4治疗组与STZ +注射用水组IPGTT结果的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　exendin- 4对正常小鼠没有致低血糖作用 ,对STZ造模的糖尿病小鼠的血糖有改善作用 ,停药后仍有一定的后续作用 ,药效与剂量不成依赖性。     

GAD对NOD小鼠β细胞淋巴细胞性炎症的防护作用

目的：了解GAD对NOD小鼠的1型糖尿病是否具有预防作用并探讨其免疫作用机制。方法：用猪脑GAD50μg和不完全全弗氏佐剂（FIA）50μl混合后给4周龄雌性NOD小鼠腹腔注射（ip)(n=32),同时单独注射等量FIA作为对照组（n=19),8周龄时环磷酰胺（CY）250mg/kg ip以加速糖尿病。每周测定体重、血糖20周龄处死小鼠后测定血清C－肽、观察胰腺病理和超微结构变化。结果：20周龄时，FIA对照组的糖尿病总发病率为73．58％，而GAD组仅有6．25％小鼠发生糖尿病（P＜0．01），发病时间也明显延缓，GAD组的胰岛炎症分数较FIA组明显降低，且炎症程度减轻（P＜0．05）；GAD组的C-p水平也明显高于对照组（P＜0．05）；FIA组残存胰岛的β细胞数目稀少，有核膜和内浆网扩张、核糖体脱颗粒、分泌颗粒空泡样变等超微结构异常，而GAD组胰岛β细胞数显著多于对照组（P＜0．05），且无上述超微异常。结论：独脑GAD可预防NOD小鼠胰岛炎发生，且有保护其岛β细胞超微结构的作用。     

己酮可可碱对NOD小鼠胰岛B细胞caspase表达的影响

目的：观察己酮可可碱（PTX）对自发1型糖尿病模型NOD小鼠的早期干预治疗效果，探索其保护B细胞作用的分子生物学机制。方法：8周龄、雌性NOD小鼠随机分为2组：PTX组32只，对照组33只。实验开始后第1天和第14天时，NOD鼠均腹腔注射1次环磷酰胺（200mg／kg）。PTX组按给药剂量为每次5mg／kg，于实验的第0～3天、第13～16天每日注射3次；第4～12天、第17～26天时每日2次。     

营养素对STZ糖尿病小鼠血糖的影响

目的:观察多种营养素组合对链脲佐菌素(STZ)糖尿病小鼠血糖的影响,寻找有效改善1型糖尿病血糖控制的营养素组合.方法:以STZ140mg/kg诱导小鼠轻度糖尿病并随机分为对照组,糖尿病治疗1组(1组),糖尿病治疗2组(2组),糖尿病治疗3组(3组).另取正常小鼠作为正常对照组,每组20只.糖尿病治疗采用不同营养素复合制剂灌胃:1组以L-精氨酸盐酸盐+维生素A+尼克酰胺灌胃;2组以牛磺酸+维生素E+维生素C+尼克酰胺灌胃;3组以L-精氨酸盐酸盐+牛磺酸+生物素+尼克酰胺灌胃,每日早、晚各1次共4wk.营养素干预7d空腹8h,氧化酶法观察各组空腹血糖变化,于第28日进行糖耐量试验.28d空腹8h取胰腺,酸性乙醇提取胰岛素,间接放免法测定其浓度.Trizol法提取总RNA,经RT-PCR,电泳,凝胶成像分析系统成像并定量前胰岛素原mRNA水平.免疫组化染色以图像分析系统进行β细胞总量分析;WesternBlot法检测PDX-1蛋白表达.结果:营养素干预7d,空腹血糖1,2组小鼠未有显著改变,3组小鼠空腹血糖降至(6.65±1.34)mmol/L;在14,21,28d,糖尿病治疗3组空腹血糖分别为(6.32±1.36...     

甲壳低聚糖对NOD鼠糖尿病的预防作用

目的 :探讨甲壳低聚糖对NOD鼠糖尿病的预防作用机制。方法 :将 5周龄未发病的NOD小鼠分为糖尿病预防组和对照组。预防组用 3 %甲壳低聚糖溶液作饮用水 ,对照组用冷开水作饮用水 ,连续 15周 ,定期测血糖 ,称体重 ,实验末计算糖尿病的发病率 ,HE染色观察胰岛炎。结果 :对照组 12周龄即出现高血糖 ,而预防组至实验结束仅有少数出现高血糖 ,两组相比具有显著差异性 (P <0 0 1)。NOD鼠预防组糖尿病发病率 (2 5% )低于对照组 (79% ) (P <0 0 5) ,同时减轻胰岛炎的严重程度 (P <0 0 5)。结论 :甲壳低聚糖对NOD鼠糖尿病的确有预防作用 ,其机制可能与甲壳低聚糖的非特异性免疫调节作用 ,及抗氧化等有关。     

中国被毛孢发酵物对 NOD 小鼠1型糖尿病的预防作用

目的 观察中国被毛孢发酵物对自发性1型糖尿病 NOD 小鼠的预防作用。方法 利用 NOD 小鼠1型自发性糖尿病模型,连续 10 周 ig 给予 1 g/kg中国被毛孢发酵物后,观察 NOD 小鼠的体质量、血糖、发病率、谷氨酸脱羧酶 (GAD) 抗体水平、胰岛病变和胰腺纤维化的变化。结果 NOD 小鼠给予 1 g/kg 中国被毛孢发酵物后,第6～10周时血糖和发病率明显降低 (P＜0.05、0.01),小鼠血清中 GAD 抗体明显降低 (P＜0.01),小鼠胰岛病变和胰腺纤维化评分值显著降低 (P＜0.05、0.01),胰腺结构较为清晰,胰岛有少量炎症细胞浸润,胰岛β细胞未见异常。结论 中国被毛孢发酵物有较好的预防 NOD 小鼠1型糖尿病发生的作用。     

NOD/SCID雌性小鼠动情周期的观察

目的：观察NOD/SCID小鼠动情周期及卵巢切除术后阴道涂片的变化。方法：连续观察9天NOD/SCID鼠,每日进行两次阴道涂片,计算动情周期时间及发生率。卵巢切除后,阴道涂片并观察阴道涂片变化。结果：NOD/SCID小鼠动情周期为4-6天。有规律动情的小鼠占80%。阴道口状态与动情周期无明显相关。卵巢切除术后,阴道涂片呈动情后期或动情间期改变。结论：采用阴道脱落细胞涂片法可判断NOD/SCID雌性小鼠的动情周期及特点,NOD/SCID雌性小鼠卵巢切除手术有效。     

黄芪多糖对NOD小鼠1型糖尿病的预防作用

目的 探讨黄芪多糖对NOD小鼠1型糖尿病的预防作用。方法 比较APS预免疫组NOD小鼠和NS对照组NOD小鼠DM发病率、血清C-P和GAD-Ab水平、脾脏T细胞亚群比例、胰岛组织病理学和免疫组化。结果 APS组与NS组比较,DN发病率显著降低,血清C-P水平显著增高,胰岛炎症程度减轻,CD8T细胞亚群比例显著增高,CD4/CD8比值显著降低。结论 早期应用黄芪多糖预免疫可以预防或延缓NOD小鼠1型糖尿病的发病。     

NOD小鼠1型糖尿病的自然发病特性

1型糖尿病由于自身免疫的损害造成胰岛β细胞破坏,引起胰岛素绝对缺乏,呈现高血糖症状。目前仍无有效的根治方法。非肥胖型糖尿病小鼠(NOD)能自然发生1型糖尿病,是目前研究1型糖尿病的主要动物模型。该品系小鼠有独特H2g7单倍体(Kd、I Ag7、I Enull、Db),通常于4～5周龄开始出现胰岛炎,进行性破坏胰岛β细胞,于12周龄时出现明显糖尿病症状,至30周龄时雌性小鼠累计发病率可达到80%,而雄性小鼠则不到20%。     

细粒棘球蚴抗原B对NOD小鼠1型糖尿病的预防作用

目的探讨细粒棘球蚴抗原B(抗原B)对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠1型糖尿病免疫机制的影响。方法将造模成功的20只NOD小鼠依据随机数字表法分为抗原B处理组和生理盐水处理组,各10只。记录并比较两组小鼠初始/成模后/用药后1、2、3周的体质量和血糖变化值。运用酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中白细胞介素(IL)2/IL-10的水平;运用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测胰腺组织中两种细胞因子的表达量。结果在用药后3周各组小鼠之间体质量比较差异有统计学意义(P<0.05),生理盐水处理组体质量下降明显;生理盐水处理组血糖上升水平较抗原B处理组高(P<0.05)。酶联免疫吸附测定结果显示,抗原B处理组IL-2水平较生理盐水处理组低,血清IL-10水平高于生理盐水处理组(P<0.05)。荧光定量PCR结果:抗原B处理组IL-2 mRNA表达量较生理盐水处理组显著下调,IL-10显著上调(P<0.05)。结论细粒棘球蚴抗原B可以降低IL-2水平,升高IL-10水平,暂可认为使Th1/Th2细胞发生免疫偏移,向着有利于胰岛保护的方向,细粒棘球蚴抗原B可能有预防或治疗1型糖尿病的作用。     

糖尿病肾病小鼠模型的研究现状

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）已成为导致终末期肾病的主要原因之一。小鼠是研究人类疾病最常用的实验动物优势明显。目前常用的DN小鼠模型难以完全模拟人类DN病变,限制了DN发病机制和治疗措施的进展。近年来应用基因工程技术和杂交技术建立了一些新的DN小鼠模型,其中部分模型能较好地模拟人类DN的典型病变。本文总结常见DN小鼠模型特点的基础上,对新建立的DN小鼠模型疾病表现、肾病特点及应用进行了分析,从而有助于DN发病机制的深入认识及DN研究中动物模型的合理选择。     

早孕母胎界面固有模式识别受体NOD1/NOD2的表达

【目的】 明确早期妊娠母胎界面中固有模式识别受体NOD1/NOD2的表达情况?【方法】 分别用免疫组织化学法及Real-Time PCR法检测12例早孕期绒毛及蜕膜组织中NOD1/NOD2表达?【结果】免疫组织化学结果显示绒毛组织中NOD1/NOD2主要定位于绒毛滋养细胞胞质中,蜕膜组织也检测到NOD1/NOD2分子的表达?在mRNA水平上,绒毛组织中NOD1/NOD2的表达量高于蜕膜基质细胞(DSC),分别为P = 0.03和P = 0.009;DSC中NOD1的表达量高于NOD2,P = 0.029,差异具有显著性?绒毛组织中NOD2的表达高于NOD1,差异无统计学意义(P > 0.05)?【结论】 NOD1/NOD2在早孕期母胎界面中绒毛组织有表达,可能参与胚泡的着床?     

哺乳期营养状况对小鼠性发育启动时间的影响

选用近交系BALB/c小鼠,按每只母鼠哺乳出生后小鼠数量的多少分成营养过剩、营养均衡和营养不良3组,研究哺乳期营养状况对小鼠性发育启动时间的影响,以阴门开启和阴茎包皮分离分别作为雌鼠和雄鼠性发育启动的指标。雌小鼠性发育启动年龄:营养过剩组<营养均衡组<营养不良组(P<0.002),但是,3组小鼠性发育启动时的体重没有明显差异。雄小鼠性发育年龄:营养过剩组<营养均衡组<营养不良组(P<0.01);而发育时体重:营养过剩组>营养均衡组>营养不良组(P<0.01)。哺乳期营养状况对小鼠性发育启动时间有重要影响,但影响方式存在性别差异。     

防冻剂种类以及投入液氮时温度对昆明小鼠胚胎冷冻保存效果的影响

分别以2mol/L的甘油,二甲基亚砜和乙二醇做防冻剂对昆明小鼠桑椹胚和早期囊胚进行冷冻保存,并在同剂量防冻剂中分别添加了0.5mol/L蔗糖进行对照实验;将胚胎在-20、-25、-30℃投入液氮,观察其对胚胎冷冻效果的影响。结果表明:2mol/L乙二醇和2mol/L甘油 0.5mol/L蔗糖处理组冷冻效果最好;在-30℃时投入液氮的胚胎成活率最高;将解冻后的胚胎移植给7只受体雌鼠,共得到26只仔鼠。     

IRM-2近交系小鼠的遗传监测

目的 观察IRM-2小鼠基因纯合性和遗传质量。方法用电泳法对IRM-2近交系小鼠进行了生化标记基因检测,并做了毛色基因和皮肤移植试验。结果分析测定了第23代小鼠13条染色体上25个基因位点和第38代的13个生化标记基因,所查基因位点全部纯合;同系异体问背部皮肤移植100d后,未见排斥现象,为同系组织遗传性;与BALB／c白化系小鼠交配进行的毛色基因测试,杂交第一代小鼠的毛色与IRM-2小鼠一致,均为浅桂皮色,基因型为AAbbCCDD。结论可以认为,IRM-2小鼠是遗传上高度纯合的近交系小鼠。     

翻白草对实验性糖尿病大鼠治疗作用的研究

目的:观察翻白草对实验性糖尿病大鼠治疗作用.方法:给动物灌胃给药,用四氧嘧啶制备实验性糖尿病大鼠模型.应用免疫组织化学方法观察胰岛B细胞形态学改变,比色分析法检测血糖、胆固醇及甘油三酯的含量.结果:翻白草对四氧嘧啶性糖尿病大鼠的胰岛B细胞有明显的修复作用并可以降低血糖、胆固醇及甘油三酯的含量.结论:翻白草对实验性糖尿病大鼠具有治疗作用.