CD4+Treg细胞在再生障碍性贫血中的变化及其意义

目的 研究再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)外周血调节性T细胞(Treg细胞)的变化及其临床意义.方法 采用直接免疫荧光法,应用流式细胞术检测CD4+ CD25+T细胞、CD4+ FOXP3+T细胞分别占CD4+T细胞的比例,实验组为初次诊断AA患者20例,健康对照组22例.结果 AA初治组CD4+...     

再生障碍性贫血与T细胞亚群及调节性T细胞的相关性分析

目的 对再生障碍性贫血患者的T细胞亚群与调节性T细胞进行分析,探讨再生障碍性贫血和T细胞亚群及调节性T细胞的关系。 方法 选择浙江省人民医院再生障碍性贫血患者30例为再生障碍性贫血组,30例健康者作为对照组,再生障碍性贫血组分为重型再生障碍性贫血组和非重型再生障碍性贫血组,比较各组患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和T细胞亚群的表达情况。 结果 再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low的表达低于对照组(P＜0.05),再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25+CD127high的表达高于对照组(P＜0.05)。再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD4+和CD4/CD8低于对照组(P＜0.05),再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD8+的表达高于对照组(P＜0.05)。重型再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127low的表达低于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05),重型再生障碍性贫血组患者外周血CD4+CD25+CD127high的表达高于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05)。重型再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD4+和CD4/CD8低于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05),重型再生障碍性贫血组患者外周血CD3+CD8+的表达高于非重型再生障碍性贫血组(P＜0.05)。 结论 再生障碍性贫血患者存在T细胞亚群和调节性T细胞的异常,再生障碍性贫血的发病和严重程度可能和T细胞亚群和调节性T细胞水平相关。      

再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的检测及临床意义

目的 研究再生障碍性贫血(AA)患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞水平的变化及临床意义.方法 采用流式细胞仪对40例AA患者(AA组)及40例正常人(正常对照组)外周血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平进行检测.结果 与正常对照组相比,AA组CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+比值及CD16+/56+自然杀伤(NK)细胞百分比明显降低(P＜0.05),CD8+T淋巴细胞百分比明显升高(P＜0.01),CD3+T淋巴细胞与CD19+B细胞百分比与正常对照组比较,无统计学差异(P＞0.05).AA患者外周血中CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25high调节性T细胞比例均明显低于正常对照组(P＜0.01).结论 AA患者细胞免疫功能明显异常,调节性T细胞减少可能与AA免疫发病机制有关.淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平检测在评价AA疗效及判断预后方面具有一定的临床价值.     

流式细胞术检测慢性再生障碍性贫血患者T细胞活化的研究

[目的]探讨T细胞活化在再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)发病机制中的作用。[方法]通过流式细胞术检测CD25/CD3~+CD4~+、CD69~+/CD3~+CD4~+、HLA-DR/CD3~+CD4~+、CD25~+/CD3~+CD8~+、CD69~+/CD3~+CD8~+、HLA-DR/CD3~+CD8~+T细胞在慢性AA组患者外周血中的表达水平,并取61例患者为AA组与30例非血液系统疾病对照人群为对照组予比较。[结果]AA组CD25~+/CD3~+CD4~+T细胞比例为8.04%,对照组为6.75%,P<0.05,有统计学意义。AA组HLA-DR/CD3~+CD8~+T细胞比例为15.90%,显著高于对照组6.40%(P<0.01)。[结论]T细胞异常活化可能在再障发病或病情进展过程中发挥重要作用。     

免疫调节T细胞在再生障碍性贫血细胞免疫功能紊乱中的作用

目的 探讨免疫调节T细胞在再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)细胞免疫功能紊乱中的作用.方法 选择初发再生障碍性贫血(AA)40例.分组:(1)初发AA,20例,临床诊断符合小儿AA的诊疗建议,且入院前未接受相关治疗.(2)缓解期AA,20例患者再生障碍性贫血经免疫治疗后,临床指标提示造血恢复.(3)对照组,选取与之匹配的正常儿童20例.检测外周血CD4+、CD8+、NK及Treg细胞群数量及比例.结果 初发组CD4+及Treg细胞比例(26.8±3.2、3.3±1.1)较缓解组(36.6±3.0、5.9±1.4)及对照组(38.7±7.2、6.0±1.5)低(P<0.05),而CD 8+的细胞的比例(38.4±6.2)、较缓解组(32.1±4.5)及对照组(28.7±7.5)高(P<0.05);初发AA CD4-/CD8+的值为(0.74±0.2)较缓解组(1.2±0.3)及对照组(1.4±0.5)低(P<0.05);缓解组与对照组细胞比例差异无统计学意义.初发组(15.7±4.0)、缓解组(18.2±3.2)与对照组(19.2±5.3)的NK细胞比例差异无统计学意义.结论 本研究显示AA患者的造血功能的衰竭与T细胞亚群比例失衡有关,支持了细胞免疫功能紊乱参与AA发生.     

再生障碍性贫血患者外周血CD4+CD25+ T细胞的检测

目的:通过对外周血CD4+CD25+ T细胞的检测,初步探讨CD4+CD25+ T细胞水平与再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)发病和预后的关系。方法:流式细胞术分别检测20例正常对照、30例初发AA患者、10例治疗有效AA患者和10例治疗无效AA患者的CD4+CD25+ T细胞和CD4+CD25highT细胞水平。结果:4组患者CD4+CD25+ T细胞比例差异无统计学意义(P>0.05);初发AA和治疗无效组AA患者CD4+CD25highT细胞比例均低于正常对照组(P<0.01和P<0.05),但与治疗有效AA患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CD4+CD25highT细胞比例下降是造成AA患者免疫耐受破坏的原因之一,CD4+CD25+ T细胞比例可能并不能反映AA患者的预后状况。     

再生障碍性贫血患儿外周血T淋巴细胞亚群分析

目的 探讨再生障碍性贫血 (AA)患儿的免疫学发病机制。方法 采用流式细胞仪检测32例AA初诊患儿及20例健康儿童 (对照组 )外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞。 结果 AA患儿CD8 +T淋巴细胞、CD4+ /CD8+ 比值与对照组比较差别均有非常显著性意义 (t=3.73, -4.70,P<0.01) ;重型AA(SAA)与慢性AA(CAA)患儿T细胞亚群比较差别均无显著性意义 (均P>0.05)。 结论 AA患儿存在T淋巴细胞亚群紊乱 ,CD8+T淋巴细胞增多及CD4 +/CD8+比值降低可能是其重要的免疫学发病机制。     

CTLA-4Ig抑制再生障碍性贫血患者T淋巴细胞

研究细胞毒性T淋巴细胞相关抗原 4融合蛋白（CTLA 4Ig）诱导再生障碍性贫血（AA）患者骨髓T淋巴细胞免疫耐受的作用。方法：采用免疫荧光标记法、流式细胞术分析CTLA 4Ig阻断前后AA患者骨髓T淋巴细胞表型CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、CD4+CD25+和CD8+CD25+的变化。结果：再障试验组与对照组相比，重型再障（SAA）和非重型再障(NSAA)患者骨髓CD3+、CD25+比值、CD4+和CD8+细胞中CD25+细胞比值均明显减低(P＜0.05),CTLA 4Ig对重型再障的抑制作用高于非重型再障，对CD4+细胞的抑制作用高于CD8+群体。结论：CTLA 4Ig能够抑制再生障碍性贫血患者骨髓局部的异常自身免疫反应，降低骨髓T淋巴细胞对丝裂原的异常反应。     

再生障碍性贫血患者 NK 和 CIK细胞与疗效的关系

目的：探讨再生障碍性贫血（ AA）患者外周血NK细胞及CIK细胞与疗效的关系。方法应用流式细胞仪检测51例AA患者[急性AA（ AAA）30例,慢性AA（ CAA）21例]治疗前后与40例健康对照组NK细胞、CIK细胞的表达。结果（1） AA患者外周血CD4＋、CD4＋／CD8＋、NK细胞的比例显著低于对照组（ P＜0.05）, CD8＋、CIK细胞的比例显著高于对照组（P＜0.05）,AAA组与CAA组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）疗效好的患者NK细胞比值升高,CIK细胞比值无明显下降。结论 AA患者存在多种免疫异常,多种因素参与AA的发病机制。检测免疫细胞将有助于评估AA的病情及疗效。     

Th17细胞及其相关因子 IL －17和 IL －6在再生障碍性贫血患者中的表达及意义

目的：观察Th17细胞及其相关因子白细胞介素（ IL）－17、IL－6在再生障碍性贫血（ AA）患者中的表达,并探讨其临床意义。方法50例AA患者分为急性再生障碍性贫血（AAA）组（n＝24）和慢性再生障碍性贫血（CAA）组（n＝26）,选择同期25例门诊健康体检者作为对照组。采用流式细胞术检测各组PBMCs Th17／CD4＋细胞比例,采用ELISA法检测各组血清IL－17和IL－6表达水平,并分析血清IL－17、IL－6表达水平与Th17细胞的相关性。结果 AAA组及CAA组患者PBMCs的Th17／CD4＋细胞比例均明显高于对照组（P＜0.05）,而AAA组与CAA组Th17／CD4＋细胞比例比较差异无统计学意义（P＞0.05）;AAA组及CAA组患者血清IL－17和IL－6表达水平均明显高于对照组（P＜0.05）,而AAA组与CAA组血清IL－17和IL－6表达水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）;AA患者PBMCs Th17细胞比例与血清IL－17、IL－6表达水平呈正相关（r1＝0.714,r2＝0.675,P＜0.05）。结论 Th17细胞及其相关因子IL－17和IL－6在CAA和AAA免疫发病机制中均占有重要地位。     

再生障碍性贫血患者T细胞亚群临床检测的价值

目的:探索再生障碍性贫血患者T细胞亚群临床检查价值,为临床治疗再生障碍性贫血提供参考.方法:选取我院于2014年11月至2015年11月间收治的60例再生障碍性贫血患者作为临床研究对象,将其随机分为观察组和对照组,每组各30例,其中给予对照组患者临床常规治疗,在常规治疗的基础上给予观察组患者免疫抑制治疗,借助三色免疫荧光抗体标记法以及流式细胞术检测方法,对两组患者外周血、T淋巴细胞亚群以及CD4+/CD8+比值进行测定,参照对照组正常水平,将患者分为比值正常型与比值倒置型以及比值超高型三种免疫亚型,对比不同亚型间病情、疗效之间的差异.结果:经统计分析,再生障碍性贫血患者和正常人T细胞亚群表达对比中,其CD3+与CD8+的百分比均显著高于正常人(P<0.05),而CD4+/CD8+比值明显低于正常人(P<0.05),且均具有统计学意义.而CD4+的百分数则无明显差异(P>0.05),差异无统计学意义.患者个体之间的各项指标标准差均非常高,说明个体间离散程度大.此外,T细胞亚群CD4+/CD8+比值对比中,比值倒置型和比值超高型的分别低于正常范围和高于正常水平.结论:再生障碍性贫血患者其CD4+/CD8+比值均存在较为严重的失调,CD4+/CD8+比值异常升高或者降低同时存在,且免疫异常同再生障碍性贫血发病具有一定的联系,借助T细胞亚群的临床检查有助于制定科学、合理的治疗方法,提高临床治疗再生障碍性贫血疾病的效果.     

免疫抑制治疗对小儿重型再生障碍性贫血CD4+CD25+T细胞及相关细胞因子表达的影响

目的 探讨免疫抑制治疗对小儿重型再生障碍性贫血CD4+CD25+T细胞及相关细胞因子表达的影响.方法 选取2017年1月至2019年4月本院收治的重型再生障碍性贫血患儿74例,采用随机数字表法分为对照组和研究组,每组37例.对照组采用环孢素A(CsA)治疗,研究组在对照组基础上采用抗淋巴细胞球蛋白(ALG)治疗,比较两组CD4+CD25+T细胞和T淋巴细胞亚群表达,血清IL-10、IL-35、TGF-β水平及治疗效果.结果 研究组CD4+T、CD25+T、CD4+CD25+T、CD4+CD25+T/CD4+T均低于对照组,血清IL-10、IL-35、TGF-β水平均低于对照组(P<0.05);研究组总有效率高于对照组(P<0.05).结论 在对小儿重型再生障碍性贫血进行治疗的过程中,免疫抑制治疗效果较为理想,对相关细胞因子的表达以及CD4+CD25+T细胞具有一定的影响,值得临床推广应用.     

血复生浸膏对重型再生障碍性贫血患者骨髓T细胞表面CD28和CTLA4表达的影响

目的:研究血复生对再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者骨髓T细胞表面分化决定簇28(cluster of differentiation 28, CD28)和(或)细胞毒T细胞相关抗原4(cytotoxic T cell antigen 4, CTLA4)表达的影响,探讨血复生治疗AA的作用机制.方法:将2006年6月至2008年6月江苏省中医院血液科门诊及住院的30例重型AA患者随机分为两组,治疗组使用血复生加环孢菌素治疗,对照组单用环孢菌素治疗.10名自愿者骨髓为正常对照组.观察时间为3个月,双色免疫荧光法测定治疗组及对照组治疗前后及正常对照组骨髓T细胞表面CD28、CTLA4表达的变化.结果:AA患者治疗前CD28的水平较正常人显著升高,差异有显著性(P<0.05),CTLA4水平有所上升,但差异无显著性(P>0.05).治疗组及对照组CD28水平较用药前显著下降(P<0.05),治疗组较对照组下降更显著(P<0.05).结论:血复生可增强环孢菌素的免疫调节作用,对AA的治疗起到增效作用.     

妊娠期高血压疾病妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达分析

目的 分析妊娠期高血压疾病(PIH)妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达变化。方法 连续选择近期住院确诊的PIH 妇女27例(PIH组),入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD+4CD+25 Treg 和CD+4CD+25 Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测,并与同期住院正常怀孕产妇 (对照组,20例)相同测试结果进行比较。结果 调节性T细胞数据中,PIH组血清CD+4CD+25 Treg和CD+4CD+25 Foxp3+ Treg水平明显低于对照组(P均<0.05～0.01)。辅助性T细胞中,PIH组血清CD+4/CD+8表达水平明显高于对照组,而CD+8表达水平则显著低于对照组(P均<0.05～0.01)。结论 PIH患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

再生障碍性贫血患者IL－17、IFN－γ及 T淋巴细胞亚群表达的研究

目的探讨再生障碍性贫血（AA）患者外周血白介素－17（IL－17）、干扰素（IFN）－γ水平及T淋巴细胞亚群表达及其在AA发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪检测28例AA患者[初治11例,复治17例;急性AA（AAA）7例,慢性AA（CAA）21例]和15例正常对照组T淋巴细胞表达,以酶联免疫吸附法测定IL－17、IFN－γ水平。结果（1）AA患者外周血IL－17、IFN－γ的水平显著高于对照组（P＜0．05）,初治组高于复治组（P＜0．05）,复治组与对照组间比较,差异无统计学意义（P＞0．05）;IFN－γ水平AAA高于CAA（P＜0．05）,IL－17水平AAA与CAA比较差异无统计学意义（P＞0．05）。（2）AA患者外周血CD4＋、CD4＋／CD8＋、NK细胞的比例显著低于对照组（P＜0．05）,CD8＋的比例显著增高（P＜0．05）,AAA与CAA之间的差异有统计学意义（P＜0．05）。（3）CD4＋、CD4＋／CD8＋、IL－17与IFN－γ与血象呈负相关关系（P＜0．05）,CD8＋与血象呈正相关关系（P＜0．05）。结论AA患者存在不同程度免疫异常,可能与疾病状态有关,多种因素参与AA的发病机制。联合检测免疫细胞及细胞因子可能有助于评估AA病情、疗效及预后。     

再生障碍性贫血患者血清IFN-γ、IL-4和T细胞亚群的表达

目的 探讨再生障碍性贫血患者血清IFN-γ、IL-4和T细胞亚群的表达.方法 采用酶联免疫双抗体夹心法和单克隆抗体对40例再生障碍性贫血患者(A组)血清IFN-γ、IL-4和T细胞亚群的表达进行检测,同期选择40例门诊健康体检者作为对照组(B组).观察各组血清IFN-γ、IL-4和T细胞亚群的表达水平.结果 A组血清IFN-γ、IL-4表达水平及Th1/Th2明显高于B组(P＜0.05);A组CD4、CD4/CD8比值明显低于B组(P＜0.05),而CD3和CD8明显高于B组(P＜0.05).结论 再生障碍性贫血患者发病与免疫功能异常密切相关,Th1偏移和T淋巴细胞亚群失调在发病机制中发挥着重要作用.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在骨髓造血系统疾病中的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory Tcell,Treg)是具有独特免疫调节功能的T细胞亚群。天然CD4+CD25+Treg起源于胸腺,外周血中CD4+CD25-T细胞亦可诱导产生。其分子表面表达特异性的转录抑制因子Foxp3,还表达CD4、CD25、CTLA-4(CD152))、GITR、CD103、CD62L、CD69、CD134、CD71、CD54、CD45RA、TGF-β1、IL-10、半乳糖结合蛋白(glactin)-1、神经菌毛素(neuropilin)-1等膜分子,具有免疫抑制和免疫无能作用。近年来研究发现,急性髓细胞白血病(acute myeloid leuke-mia,AML)、慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)、高危骨髓异常增生综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者Treg表达异常增高,而在再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者表达明显降低,其异常表达还与急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的发生发展密切相关。文中就Treg在白血病、aGVHD、AA、MDS、多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)等骨髓造血系统疾病中的研究进展作一综述。     

青蒿素抑制CD133+HepG2细胞对γδ T细胞的耐受性及其机制研究

目的探讨青蒿素是否能抑制CD133+肝癌细胞HepG2对γδT细胞的耐受性及研究其机制。方法 LDH释放实验检测γδT细胞及青蒿素共培养对CD133+及CD133-HepG2的杀伤活性;Western blot实验检测γδT细胞及青蒿素共培养对CD133+HepG2细胞MCL-1表达水平、Caspase-9、Caspase-3活化水平和细胞色素C释放水平的影响;流式细胞技术检测γδT细胞及青蒿素共培养对CD133+HepG2细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。结果 LDH释放实验结果显示,在相同数量γδT细胞处理下,CD133+HepG2细胞LDH释放率显著低于CD133-HepG2细胞,表明CD133+HepG2细胞对γδT细胞治疗存在耐受性;同时,γδT细胞+青蒿素组CD133+HepG2的LDH释放率显著高于γδT细胞组和青蒿素+γδT细胞+MCL-1质粒组[(55.3±6.1)%比(18.7±2.6)%、(24.2±2.8)%,P0.05]。流式细胞实验结果显示,γδT细胞+青蒿素组CD133+HepG2的凋亡率显著高于γδT细胞组和青蒿素+γδT细胞+MCL-1质粒组[(38.2±3.5)%比(10.5±1.1)%、(14.3±1.2)%,P0.05]。Western blot实验结果显示,青蒿素处理能显著抑制CD133+HepG2细胞MCL-1蛋白表达水平。流式细胞实验结果显示,γδT细胞+青蒿素组CD133+HepG2相对线粒体膜电位显著高于γδT细胞组和青蒿素+γδT细胞+MCL-1质粒组[(0.21±0.02)比(0.78±0.05)、(0.71±0.05),P0.05]。Western blot实验结果则显示,γδT细胞+青蒿素组CD133+HepG2的活化Caspase-9、Caspase-3及细胞色素C的释放均显著高于γδT细胞组和青蒿素+γδT细胞+MCL-1质粒组。结论青蒿素可能通过抑制CD133+肝癌细胞MCL-1表达水平抑制其对γδT细胞的耐受性。     

多发性硬化患者外周血γδT细胞与CD_4~+CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞比例的变化

目的探讨多发性硬化(MS)患者外周血γδT细胞与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例的变化。方法采集37例MS患者(MS组)及25例健康对照者(NC组)的外周静脉血,分离外周血单个核淋巴细胞,以流式细胞术检测γδT细胞及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例。结果 MS组外周血γδT细胞比例较NC组显著升高,且活动性患者较非活动性患者进一步升高;MS组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例较NC组显著降低,而活动性患者较非活动性患者进一步降低。MS组外周血γδT细胞与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例呈显著负相关(P<0.05)。结论 MS患者外周血γδT细胞比例的升高可下调CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例,从而促进疾病的发生。     

再生障碍性贫血患者外周血CD55、CD59表达分析

<正>再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)是一种多原因引起的血液疾病,近年来T细胞免疫诱导的重要性在再障发病机制中逐渐被揭示[1-2],本课题前期亦证实AA患者外周血存在T细胞的异常活化[3-4]和调节性T细胞的异常[5],但体液免疫在AA发病机制的作用仍然存在争论,因此我们通过检测AA患者外周血粒、红细胞表面CD55和CD59的表达和补体的变化,探讨补体系统在AA发生过程中的作用。