Foxp3及其调控的CD4~+CD25~+Treg细胞在肺腺癌患者中表达的规律及对患者生存的影响

目的探讨Foxp3及其调控的CD4~+CD25~+Treg细胞在肺腺癌患者中表达的规律及对患者生存的影响。方法 Western-blot法检测正常肺组织、肺腺癌、鳞癌组织(按Ⅰ、Ⅱ、Ⅲa分期分层)中Foxp3水平。免疫组化方法观察小细胞肺癌、腺癌、鳞癌中Foxp3蛋白表达情况;流式细胞法检测临床各期肺腺癌患者和健康人群血清中表达Foxp3的CD4~+CD25~+Treg细胞计数,并观察化疗及手术对肺腺癌患者血清中Foxp3水平的影响。使用Kaplan-Meier生存曲线分析血清中CD4~+CD25~+Treg细胞计数与肺腺癌患者生存周期之间的关系。结果肺腺癌各期患者Foxp3表达水平和血清中CD4~+CD25~+Treg细胞计数均明显高于健康人群,与肿瘤分期呈正相关,经手术或化疗干预后患者外周血清中细胞计数下降明显。细胞计数低于平均值或化疗后细胞计数变化值高于平均值的患者平均生存周期明显高于细胞计数值高于平均值或化疗后细胞计数变化值小于平均值的患者。结论 Foxp3调控的CD4~+CD25~+Treg细胞在肺腺癌的发生发展中可能起着重要的作用,对其深入研究将有助于肺腺癌的早期诊断,并可将其作为常规检查及监测患者预后的指标之一。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞和Foxp3的表达

目的探讨慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞及Foxp3的表达及意义。方法采用病例-对照研究,选取2013年6月至2015年3月在我院就诊的105例慢阻肺患者作为病例组,另选健康人群108例作对照组。对受试者进行肺功能测定;流式细胞术检测外周血Treg表达;ELISA检测血清浓度;RT-PCR检测Foxp3 mRNA表达,并进行相关统计分析。结果与对照组比较,慢阻肺患者FEV_1、FEV_1/FVC水平,IL-10、TGF-β浓度,Foxp3 mRNA及蛋白的表达,CD_4~+Treg、CD_4~+CD_(25)~+Treg的表达和CD_4~+CD_(25)~+Treg所占CD_4~+Treg比例显著降低(P0.01);Foxp3 mRNA和蛋白与肺功能指标FEV_1(%)和FEV_1/FVC(%)以及蛋白与血清细胞因子IL-4、IL-10、IFN-α、IFN-γ和TGF-β均呈一定的正相关(P0.05)而与FVC(%)和PEF(%)无显著相关性(P0.05)。结论慢阻肺患者CD_4~+CD_(25)~+调节性细胞数量减少且血清浓度降低,Foxp3基因表达降低。     

急性冠脉综合征病人外周血Th17细胞与CD_4~+CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞水平变化及临床意义

目的观察急性冠脉综合征(ACS)病人外周血辅助性T细胞(Th17细胞)、CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg调节性T细胞(Treg细胞)水平。方法选择105例冠心病病人,包括稳定型心绞痛(SA,30例)、非ST段抬高型急性冠脉综合征(NSTEACS,45例)、ST段抬高型急性心肌梗死(STEAMI,30例),另选取30例冠状动脉造影正常病人作为对照组。采用流式细胞仪分析4组Th17细胞、CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞水平,采用ELISA法检测4组转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)水平,并分析Th17细胞、CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞比例与TGF-β、IL-10、IL-6水平的相关性。结果 STEAMI组和NSTEACS组外周血Th17细胞比例、IL-6水平升高,CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞比例、TGF-β、IL-10降低(P0.05)。与SA组和对照组比较,STEAMI组和NSTEACS组Th17/CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg升高,且STEAMI组高于NSTEACS组,NSTEACS组高于SA组(P0.05)。NSTEACS组和STEAMI组Th17细胞比例与TGF-β、IL-10水平呈负相关(P0.05);Gensini评分和C反应蛋白与IL-6呈正相关(P0.05);CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞比例与TGF-β和IL-10水平呈正相关(P0.05),与IL-6呈负相关(P0.05)。NSTEACS组和STEAMI组Gensini评分、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C-反应蛋白与CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞比例呈负相关(P0.05),与Th17细胞比例呈正相关(P0.05)。结论 STEAMI和NSTEACS病人血Th17/CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg比例失衡,Th17、CD_4~+ CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞可能通过影响TGF-β、IL-10、IL-6水平影响ACS的发生发展。     

非小细胞肺癌外周血CD_3~+、CD_4~+等T淋巴细胞亚群水平及意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周CD_3~+、CD_4~+等T淋巴细胞亚群的表达及意义。方法选取2014年3月至2016年2月在我院治疗的NSCLC患者92例,采用流式细胞仪检测两组T淋巴细胞亚群。结果Ⅲ-Ⅳ期患者CD_3~+、CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞明显低于Ⅰ-Ⅱ期(P0.05),而CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞明显高于Ⅰ-Ⅱ期(P0.05);治疗有效组患者治疗后CD_4~+CD_(25)~+Treg淋巴细胞较治疗前降低(P0.05);治疗无效组患者治疗后CD_3~+和CD_4~+T淋巴细胞明显低于治疗前(P0.05),而CD_8~+细胞明显高于治疗前(P0.05);治疗有效组患者治疗后CD_3~+和CD_4~+T和淋巴细胞高于治疗无效组(P0.05),而CD_8~+和CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞明显低于治疗无效组(P0.05)。结论 NSCLC患者存在免疫功能抑制,T细胞亚群与临床分期有一定的关系,对NSCLC治疗有一定的指导作用。     

肺结核合并糖尿病患者CD_4~+CD_(25)~+ Treg细胞与血糖的相关分析

目的探讨肺结核合并糖尿病患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞比例与血糖水平的相关性。方法纳入活动性肺结核合并糖尿病患者40例、活动性肺结核患者38例、糖尿病患者35例、健康体检正常者30例,检测各组患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞比例、空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2h PBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c),分析外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞与血糖的相关性。结果活动性肺结核合并糖尿病组外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞比例高于活动性肺结核组、糖尿病组、健康对照组(t值分别为2.71、2.41、3.23,P值均0.05);相关性分析提示活动性肺结核合并糖尿病组患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞比例与FBG、2h PBG水平无明显相关性(P值均0.05),但与HbA1c水平与呈正相关(相关系数r值为0.293,P=0.014)。结论活动性肺结核合并糖尿病患者CD_4~+CD_(25)~+Treg细胞比例升高,且与Hb A1c水平正相关,在两病并存的发生发展中起到一定作用。     

稳定型心绞痛和急性冠脉综合征患者外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg水平变化及其与粥样硬化斑块易损性的相关性研究

目的分析稳定型心绞痛(SAP)和急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg水平变化及其与粥样硬化斑块易损性的相关性。方法选取2013年3月—2015年12月广西壮族自治区人民医院心内科收治的冠心病患者43例作为病例组,同期因胸部非典型疼痛或不适、行冠状动脉造影检查结果阴性者15例作为对照组。根据疾病类型将病例组患者分为SAP组21例和ACS组22例;根据斑块稳定性将病例组患者分为易损斑块组23例和稳定斑块组20例。比较对照组、SAP组及ACS组受试者,易损斑块组与稳定斑块组患者外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg占CD_4~+T细胞百分比。结果 ACS组患者外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg占CD_4~+T细胞百分比低于SAP组及对照组,SAP组患者外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg占CD_4~+T细胞百分比低于对照组(P0.05)。易损斑块组外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg占CD_4~+T细胞百分比低于稳定斑块组(P0.05)。Spearman秩相关分析结果显示,外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg占CD_4~+T细胞百分比与冠心病患者粥样硬化斑块易损性呈负相关(P0.05)。结论冠心病患者外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg水平明显降低,且ACS患者外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg水平低于SAP患者,外周血CD_4~+CD_(25)~+FOXP_3~+Treg水平与冠心病患者粥样硬化斑块易损性呈负相关,可作为反映冠心病患者动脉粥样硬化斑块不稳定程度的灵敏指标。     

特发性肺纤维化患者CD_4~+CD_(25)~+Foxp_3~+调节性T细胞存在异常

背景和目的:T细胞在特发性肺纤维化(IPF)发病机制巾的作用存在着争议.CD_4~+ CD_(25)~+Foxp_3~+调节性T细胞(Treg细胞)在维持免疫稳态方面发挥重要作用,该研究旨在探讨Treg细胞在IPF发病机制中的作用.     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞对慢性淋巴细胞白血病预后的影响

目的:探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)表达及其与预后的相关性。方法:采用流式细胞仪检测50例健康者(对照组)及30例CLL患者(CLL组)治疗前后CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg水平。结果:初诊CLL组患者外周血T淋巴细胞数量、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,CLL组患者外周血T淋巴细胞数量、CD4+CD25+Foxp3+Treg水平显著降低,与初诊时比较差异有统计学意义(P0.05),但仍高于对照组(P0.05)。CLL患者中,Binet临床分期A期患者CD4+CD25+Foxp3+Treg水平显著低于B/C期患者,差异有统计学意义(P0.05)。Spearman相关分析结果显示,Binet临床分期与CD4+CD25+Foxp3+Treg水平呈正相关(r=0.511,P0.05)。结论:CD4+CD25+Foxp3+Treg水平可能是评估CLL患者预后的有效指标。     

肺结核CD_4~+T淋巴细胞计数与X线胸片表现

本文作者对HIV(人类免疫缺陷病毒)感染患者中肺结核X线胸片表现与CD_4~+T淋巴细胞计数(简称CD_4~+细胞计数)间的关系进行研究分析,目的为感染患者的早期诊断、治疗与隔离提供一实验方法。方法对35例患者的X线胸片,CD_4~+细胞计数和临床病历进行回顾分析。所有患者均为HIV血清阳     

激素抵抗性哮喘患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞及IL-10、TGF-β1的变化及意义

目的 观察激素抵抗性哮喘(SRA)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)及白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的变化,分析其在SRA发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测40例SRA患者(激素抵抗组)外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+ Treg数目,并计算CD4+CD25+Foxp3+ Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其血清IL-10、TGF-β1水平,并与激素敏感性患者(激素敏感组,46例)及正常体检者(正常组,30例)进行对比.结果 激素抵抗组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值及血清IL-10、TGF-β1水平均明显低于激素敏感组与正常组(P＜0.01,P＜0.05);激素敏感组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比、CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对值及血清TGF-β1水平明显低于正常组(P＜0.01,P＜0.05),血清IL-10无明显差异(P＞0.05);CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与血清IL-10、TGF-β1水平呈明显正相关(P＜0.01).结论 SRA患者外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg数目减少及IL-10、TGF-β1含量减低可能与SRA的发生、发展有关.     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在不同月龄小鼠中的变化及与肺癌关系

目的 探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞在衰老过程中的变化及与肺癌的关系.方法 建立Lewis肺癌模型,36只C57BL/6小鼠分成6组,青年健康组、中年健康组、老年健康组以及青年肿瘤组、中年肿瘤组、老年肿瘤组.通过流式细胞分析法测定6组小鼠脾脏细胞中CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的百分比来反映CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞含量,通过实时荧光定量PCR法测定Foxp3mRNA的含量.结果 与健康组相比,肺肿瘤鼠脾脏中CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞和Foxp3 mRNA的含量明显增高(均P＜0.05);在健康组内,各年龄段CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞(F=47.70,P=0.000)和Foxp3mRNA(F=6.56,P=0.009)差异有统计学意义,老年鼠脾脏细胞中含有高数量的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和Foxp3mRNA,最高组是老年肺肿瘤鼠.结论 CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和其功能基因Foxp3含量的改变与增龄和肺肿瘤的发生和发展存在密切的关系.

Abstract：

Objective To explore the change of CD4+CD25+Foxp3+ regulatory T (Treg) cells during aging and the relation with lung tumor. Methods The Lewis lung cancer model was set up in C57BL/6 female mice, and the 36 mice were divided into young health group, middle-aged health group, elderly health group, young tumor group, middle-aged tumor group and elderly tumor group. The percentages of CD4+CD25+Foxp3+ Treg in CD4+ T cells in mice spleen cells were measured by flow cytometry, for reflecting the quantity of CD4+CD25+Foxp3+ Treg cells. And the level of Foxp3 mRNA in splenocyte was tested by real-time PCR method. Results The level of CD4+CD25+Foxp3+/CD4+ T cells and the quantity of Foxp3 mRNA were higher in tumor groups than in healthy groups(both P＜0.05 ). Besides, in the healthy groups, there were statistical differences in the level of CD4+CD25+Foxp3+/CD4+ T cells (F=47.70, P=0.000) and the quantity of Foxp3 mRNA among the different months groups. Accumulation of the CD4+CD25+Foxp3+ Treg cells was accompanied with aging, the elderly mice contained a significantly larger population of CD4+CD25+Foxp3+ Treg cells in their spleen when compared with the younger counterparts, and the highest was the elderly tumor group. So it was with the functional gene Foxp3 mRNA (F=6.56, P=0.009). Conclusions The results suggest a close relationship of the change of CD4+CD25+Foxp3+Treg cells with aging and the genesis and development of lung tumor.     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量和Foxp3mRNA的表达水平与疾病活动性的相关性

目的 研究系统性红斑狼疮(SEE)患者CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞的数量及其功能基因Foxp3 mRNA的表达水平与SLE疾病活动性和肾脏损伤的相关性.方法 采用四色流式细胞术以Foxp3-异硫氰酸荧光素(FITC )/CD25-藻红蛋白/CD4-多甲藻叶绿素蛋白(PerCP)/CD3-藻蓝蛋白7抗体组合检测40名健康对照者及42例SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞的数量,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达水平,并分析其与SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)、补体C3及血清抗双链DNA(dsDNA)抗体的关系.统计学方法采用t检验和Spearman相关分析.结果 活动期SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量显著低于健康对照组[(4±3)％与(7±4)％,P＜0.05],稳定期与健康对照组差异无统计学意义(P＞0.05);活动期SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量及CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞/CD4+比值显著低于稳定期患者[(4±3)％,(9±6)％与(5±4)％,(10±6)％,P均＜0.05];活动期SLE患者外周血Foxp3 mRNA的表达水平明显低于稳定期和对照组(P＜0.01,P＜0.05);SLE患者并发肾病组外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量及CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞/CD4+比值显著低于SLE非肾病组(P＜0.05).相关分析显示,SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量与SLEDAI呈负相关(r=-0.5782,P＜0.05);CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞/CD4+比值与SLEDAI呈负相关(r=-0.4913,P＜0.05),与补体C3呈正相关(r=0.3687,P＜0.05);SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞数量与Foxp3 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.6142,P＜0.0l).结论 SLE患者外周血CD4+CD25highFoxp3+调节性T细胞和Foxp3 mRNA的变化可能是导致SLE疾病发生和发展的关键因素之一,与疾病的活动性有密切关系.     

CD4+CD25-Foxp3+T淋巴细胞的表型鉴定及其在初发系统性红斑狼疮中的意义

目的 对初发系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血异常表达CD4+CD25-Foxp3+T淋巴细胞进行表型鉴定,并探讨其临床意义.方法 对初发SLE患者外周血CD4+T淋巴细胞进行细胞表面分子[CD25、CD127、CCR4、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)、细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CT-LA-4)]和胞内分子(Foxp3)标染,流式细胞仪检测,并研究CD4+各细胞亚群与狼疮肾炎和疾病活动度(SLEDAI)相关性.结果 SLE患者外周血CD4+CD25-Foxp3+T淋巴细胞表面 GITR、CTLA-4和CCR4表达率与活化T淋巴细胞(CD4+CD25+Foxp3-)相比差异无统计学意义(P均>0.05),而显著低于调节性T淋巴细胞(CD4+CD25+Foxp3+)(P均<0.01);CD4+Foxp3+CD25high,CD4+Foxp3+CD25low和CD4+Foxp3+CD25-细胞中CD127low-百分率分别为(93.8±,3.5)%,(93.7±2.3)%,(92.0±2.1)%,三者之间差异无统计学意义(P>0.05);在CD4+细胞亚群中,当CD127low-时,Foxp3+在CD25high,CD25low和CD25-中表达率分别为 (91.4±2.6)%,(71.9±3.3)%,(9.0±2.2)%,三者之间差异均有统计学意义(P<0.01);SLE患者外周血CD4+CCR4+CD25highT淋巴细胞百分率与SLEDAI呈显著负相关(r=-0.695,P<0.001),狼疮肾炎患者(1.10±0.17)%显著低于SLE无肾炎组[(1.61±0.23)%,P<0.01]和健康对照组[(1.75±0.10)%,P<0.01];狼疮肾炎患者外周血CD4+ CCR4+CD25low-T淋巴细胞百分率显著高于健康对照组[(11.5 ±2.3)%与(8.0±1.0)%,P<0.01)].结论 初发SLE中异常升高的CD4+CD25-Foxp3+T淋巴细胞的表型类似早期活化效应T淋巴细胞.可以用CD4+CD25highCD127low-T淋巴细胞替选CD4+CD25highFoxp3+调节性T淋巴细胞.CCR4+调节性T淋巴细胞可能参与狼疮肾炎发病.     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在慢性乙型肝炎患者中的作用

目的 探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与乙型肝炎慢性化和病毒清除之间的关系.方法 收集慢性活动性乙型肝炎(CAH)患者19例、HBV携带者(AsC)21例、HBV感染恢复者12例和健康对照者15例.通过流式细胞术分析外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的表型和频率,磁珠分选(MACS)CD4+CD25+T细胞,实时荧光定量PCR方法 分析Foxp3 mRNA基因在CD4+CD25+T细胞的表达水平.统计学处理采用单因素方差分析或非参数检验.结果CAH或AsC组外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率以及CD4+CD25+T细胞中Foxp3 mRNA的表达水平显著高于健康对照组或HBV感染恢复者(F=6.8,F=3.72,均P<0.05).免疫组织化学染色发现,CAH患者肝组织Foxp3'T细胞浸润累积较对照组明显增高,但AsC较CAH减少.HBeAg阳性患者(包括CAH和AsC)CD4'CD25'T细胞频率显著高于HBeAg阴性患者(t=2.3,P<0.05),抗-HBe阴性患者显著高于抗-HBe阳性患者(t=2.4,P<0.05).CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率与慢性乙型肝炎患者血清中HBV病毒载量存在正相关(r=0.56,P<0.01).结论 慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞异常与乙型肝炎慢性化和病毒清除有关.     

CD+4 CD+25调节性T细胞抑制持续性丙型肝炎病毒感染患者CD+4T细胞反应

目的探讨CD+4 CD+25调节性T细胞(CD+4 CD+25Treg细胞)在持续性HCV感染患者CD+4 T细胞下调中的意义.方法流式细胞术检测慢性丙型肝炎患者外周血中CD+4 CD+25Treg细胞的数量以及细胞内因子的合成;与正常人或患者CD+4 CD-25 T细胞共同培养,检测其抑制功能;RT-PCR检测Foxp3的mRNA表达.结果 CD+4 CD+25Treg细胞约占慢性丙型肝炎患者外周血中CD+4 T细胞的(13.5±1.8)%,高于正常对照(5.3±0.8)% (P=0.004);主要合成IL-10,高表达Foxp3;CD+4 CD+25Treg细胞显著抑制CD+4 T细胞的增殖,以及合成IFNγ,并且抑制活性较正常人增高(P=0.034),这种作用不依赖IL-10和转化生长因子β.结论持续性HCV感染患者CD+4 CD+25Treg细胞表达增加,抑制活性增强,特异性抑制Th1反应.     

尖锐湿疣患者外周血Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的 了解尖锐湿疣患者外周血Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平,探讨其在尖锐湿疣发生发展机制中的作用.方法 分别收集30例尖锐湿疣患者(复发15例,初发15例)及20例健康者外周抗凝静脉血,分离出外周血单个核细胞.藻红蛋白(PE)标记抗CD4单抗,异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗CD25单抗,细胞破膜后PE标记的抗Foxp3单抗行细胞内染色,三色流式细胞术分析Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞比例.组间比较采用ANOVA检验.结果外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞水平在尖锐湿疣患者组为(3.4±1.0)%,在复发组为(4.7±1.2)%,均显著高于健康对照组的(1.2±0.5)%(P<0.01).外周血Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞水平在初发组为(2.1±1.0)%,高于健康对照组,但差异无统计学意义,而在复发组明显高于初发组(P<0.05).结论 尖锐湿疣患者外周血Foxp3+CD4<"+>CD25+调节性T细胞数量增加,这种细胞免疫功能失调可能与其免疫学发病机制有关.     

CD4+CD25+Treg细胞与支气管哮喘

CD4+ CD25+ Treg细胞的主要作用表现为免疫无能性和免疫抑制性,是外周免疫耐受形成机制的主要组成部分.其主要作用机制为分泌抑制性细胞因子(IL-10和TGF-β)、表达细胞表面分子(CTLA-4、GITR等)及Foxp3等.支气管哮喘患者外周血CD4+ CD25+ Treg功能及数量存在异常,这可能是支气管哮...     

系统性红斑狼疮患者CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞中Foxp3的表达及免疫抑制功能研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SEE)外周血中调节性T细胞不同标志以及调节性T细胞在SLE发病中的作用;探讨CD127与Foxp3的相关性,明确CD127定义调节性T细胞的特异性;鉴定CD4~+CD25~+CD127~(low/-)T淋巴细胞免疫抑制功能.方法 ①采用四色直接荧光素标记法和多参数流式细胞术检测40例SLE患者(19例初发和21例缓解)及15名健康对照外周血CD4~+CD25~+T淋巴细胞、CD4~+CD25~+CD127~(low-)T淋巴细胞、CD4~+CD25~+Foxp3~+T淋巴细胞、CD4~+CD25~(high)T淋巴细胞、CD4~+CD25~(high)CD127~(low/-)T淋巴细胞、CD4~+CD25~(high)Foxp3~+T淋巴细胞以及CD4~+CD127~(low/-)Foxp3~+T淋巴细胞占CD4~+T淋巴细胞的比率,并且将7种调节性T细胞比率与外周血抗双链DNA(dsDNA)等抗体及SLE疾病活动指数(SLEDA1)评分等进行相关性分析.②以流式细胞分选术结合细胞培养技术,检测和分析3例SLE患者和4名健康人外周血中CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞对CD4~+CD25~-效应性T细胞增殖的抑制作用.采用两样本均数的t检验,重复测量的方差分析,Pearson相关与Spearman相关分析进行统计学处理.结果 ①SLE患者组7种调节性T细胞比率分别为(6.1±1.7)%,(3.1±1.3)%,(2.1±1.0)%,(1.6±0.3)%,(0.97±0.28)%,(0.69±0.23)%和(0.71±0.35)%.与健康对照组比较:SLE患者组前6种调节性T细胞比率均低于健康对照组(P<0.05).②SLE患者组:CD4~+CD25~+Foxp3~+、CD4~+CD25~(high)Foxp3~+T淋巴细胞比率与IgA呈正相关;CD4~+CD25~(high)CD127~(low/-)T淋巴细胞比率与抗SSB抗体呈正相关.③SLE患者初发组和缓解组比较:SLE患者初发组7种调节性T细胞中除CD4~+CD127~(low/-)Foxp3~+T淋巴细胞比率外,其余均低于缓解组(P<0.05).④SLE患者初发组治疗前后比较:激素治疗前6种调节性T细胞比率均低于激素治疗后(P<0.05).⑤SLE患者初发组、缓解组和对照组中,CD4~+CD25~+T淋巴细胞及CD4~+CD25~(high)T淋巴细胞中Foxp3的表达与CD127低表达均呈正相关.⑥SLE患者、健康人CD4+CD25-效应性T细胞的体外增殖都可以被自身CD4~+CD25~+CD127~(low/-)调节性T细胞所抑制,但SLE患者的抑制率明显低于健康对照.结论 SLE的免疫异常可能与调节性T细胞的数量和功能缺陷有关;CD127可能代替Foxp3作为调节性T细胞特异性的表面标记物.     

Foxp3 expression on normal and leukemic CD4+CD25+ T cells implicated in human T-cell leukemia virus type-1 is inconsistent with Treg cells

Foxp3 is a master gene of Treg cells, a novel subset of CD4⁺ T cells primarily expressing CD25. We describe here different features in Foxp3 expression profile between normal and leukemic CD4⁺CD25⁺ T cells, using peripheral blood samples from healthy controls (HCs), human T-cell leukemia virus type-1 (HTLV-1)-infected asymptomatic carriers (ACs), patients with adult T-cell leukemia (ATL), and various hematopoietic cell lines. The majority of CD4⁺CD25⁺ T cells in HCs were positive for Foxp3, but not all CD4⁺CD25⁺ T cells in ACs were positive, indicating that Foxp3 expression is not always linked to CD25 expression in normal T cells. Leukemic (ATL) T cells constitutively expressing CD25 were characteristic of heterogeneous Foxp3 expression, such as intra- and inter-case heterogeneity in intensity, inconsistency with CD25 expression, and a discrepancy in the mRNA and its protein expression. Surprisingly, a discernible amount of Foxp3 mRNA was detectable even in most cell lines without CD25 expression, a small fraction of which was positive for the Foxp3 proteins. The subcellular localization of Foxp3 in HTLV-1-infected cell lines was mainly cytoplasmic, different from that of primary ATL cells. These findings indicate that Foxp3 has two facets: essential Treg identity and molecular mimicry secondary to tumorigenesis. Conclusively, Foxp3 in normal T cells, but not mRNA, is basically potent at discriminating a subset of Treg cells from CD25⁺ T-cell populations, whereas the modulation of Foxp3 expression in leukemic T cells could be implicated in oncogenesis and has a potentially useful clinical role.     

结核性胸膜炎患者外周血CD4CD25调节性T细胞水平及Foxp3mRNA表达的分析

目的观察结核性胸膜炎患者外周血单个核细胞（PBMCs）中CD4 CD25调节性T细胞(CD4 CD25 Treg)水平及Foxp3 mRNA表达的变化,探讨CD4 CD25 Treg在结核性胸膜炎发病中的作用。方法采用流式细胞仪检测58例结核性胸膜炎患者和51例健康志愿者（正常对照组）PBMCs中CD4 CD25 Treg的比例;RT-PCR检测PBMCs中Foxp3 mRNA的表达。结果结核性胸膜炎患者PBMCs中CD4 CD25 Treg的比例明显高于正常对照组(P<0.05);Foxp3 mRNA的表达明显高于正常对照组(P<0.05)。 结论结核性胸膜炎患者外周血中具有免疫抑制活性CD4 CD25 Treg的数量增加,功能增强,可能是结核性胸膜炎发生发展的一个因素。