硒酸锌金属自显影技术检测游离锌离子在小鼠肾脏的分布

目的研究游离锌离子在小鼠肾脏的定位分布。方法应用硒酸锌金属自显影技术(ZnSeAMG)检测小鼠肾脏内的游离锌离子分布。结果游离锌离子在肾脏内分布广泛,皮质中有大量AMG反应阳性颗粒,髓质中的AMG阳性颗粒较少。其中,近曲小管、远曲小管、近直小管和远直小管上皮细胞近腔侧均分布有大量的棕黑色AMG阳性颗粒,肾小体、细段和集合管上皮细胞中AMG阳性颗粒较少。结论小鼠肾脏内含有丰富的游离锌离子,锌离子可能参与肾脏的功能。     

游离锌离子在小鼠颈上神经节的分布

目的研究游离锌离子在小鼠交感节后神经元中的分布。方法应用ZnSe金属自显影技术和透射电镜检测硒酸钠注射1.5和24 hr后小鼠颈上神经节内的游离锌离子。结果注射硒酸钠1.5 hr后的小鼠颈上神经节中几乎所有的神经元均有锌阳性反应产物分布,透射电镜下观察锌离子主要分布于神经元细胞核周围的高尔基复合体和小泡状结构内。注射硒酸钠24 hr后有锌阳性反应的神经元约为10%,提示锌离子在交感节后神经轴突内进行轴突运输。结论小鼠颈上神经节神经元胞体内含有丰富的游离锌离子,游离锌离子在轴突内进行轴突运输。     

游离锌离子在小鼠视网膜的定位研究

目的研究游离锌离子在小鼠视网膜的定位分布。方法应用ZnSe金属自显影技术(AMG)检测硒酸钠注射40 m in后小鼠视网膜内的锌离子。结果注射硒酸钠40 m in后发现游离锌离子主要分布于小鼠视网膜的色素上皮细胞层、光感受器的内节、外核层、外网层、内核层、内网层和神经节细胞层。在色素上皮细胞层、光感受器的内节和内核层与内网层交界处AMG阳性反应最为明显,在光感受器外节和神经纤维层几乎没有AMG阳性反应产物。结论小鼠视网膜内锌离子,在视网膜神经元视觉信息的传导和形成过程中可能起着重要作用。     

ZnT7及游离锌离子在小鼠室管膜和脉络丛细胞的分布

目的 研究锌转运体7（ZnT7）和游离锌离子在小鼠脊髓室管膜和脉络丛上皮细胞中的分布.方法 应用ZnSe金属自显影技术（AMG）检测硒酸钠注射1.5h后小鼠脊髓室管膜细胞及脑室脉络丛上皮细胞的游离锌离子;应用免疫组织化学SABC法检测小鼠脊髓室管膜细胞及脑室脉络丛上皮细胞中ZnT7的表达.结果 光镜下观察AMG染色的切片,小鼠脊髓室管膜细胞及脑室脉络丛上皮细胞中均有游离锌离子的分布;免疫组织化学结果表明,脊髓室管膜细胞及脉络丛上皮细胞中均有ZnT7的表达,且与游离锌离子分布区域基本一致.结论 锌离子可能在脊髓室管膜细胞及脉络丛上皮细胞内发挥重要作用,脊髓室管膜细胞及脉络丛上皮细胞可能在脑脊液锌转运过程中发挥重要的作用.     

ZnT1及游离锌离子在小鼠骺板软骨细胞的定位研究

目的研究锌转运体-1(Zinc transporter 1,ZnT1)和游离锌离子在小鼠骺板软骨细胞的定位分布,探讨ZnT1影响骺板软骨细胞锌离子代谢从而参与骨骼生长的可能机制。方法应用浸入式金属自显影技术(AMG)观察锌离子在小鼠肋骨骺板内的定位分布;应用免疫组织化学SABC法检测ZnT1在小鼠骺板软骨细胞的表达。结果金属自显影技术显示游离锌离子在小鼠肋骨骺板肥大带、增殖带和静止带三层区域结构内有不同程度的表达,其中肥大带软骨细胞层锌离子含量最高;ZnT1免疫阳性反应产物主要定位于软骨细胞膜附近,在小鼠肋骨骺板三层区域结构内有不同程度的表达,从肥大带到静止带,软骨细胞膜上的ZnT1免疫反应逐渐减弱。结论小鼠肋骨骺板内存在大量的游离锌离子和ZnT1蛋白,提示ZnT1可能参与锌离子在软骨细胞的转运和代谢,在骨的形成和发育过程中发挥作用。     

锌离子在小鼠肺组织分布的TSQ荧光研究

目的研究游离锌离子在小鼠肺组织的定位分布。方法应用TSQ荧光技术检测小鼠肺组织内的锌离子。结果荧光显微镜下可见被TSQ荧光标记的锌离子广泛的分布在肺叶支气管壁粘膜、粘膜下及软骨,肺内小支气管基膜,肺泡上皮和肺内血管平滑肌,尤其以肺叶支气管粘膜以及软骨中荧光染色最为明显。结论小鼠肺组织内含有丰富的锌离子可能参与肺泡上皮细胞以及肺各级支气管软骨细胞中某些蛋白质的合成和组装。     

氯碘羟喹对小鼠海马苔藓纤维内游离锌离子螯合作用的研究

目的研究金属螯合剂氯碘羟喹（Clioquinol,CQ）对小鼠大脑海马苔藓纤维内游离锌离子的螯合作用。方法3月龄雄性C57BL／6小鼠42只,随机均分为3组：正常对照组,溶剂对照组,CQ组。CQ组和溶剂对照组腹腔注射药物2h后与正常对照组一起断头取脑,制备小鼠海马冰冻切片,应用N-（6-甲氧基-8-喹啉）-P-甲苯磺胺（TSQ）荧光探针技术和金属自显影技术检测各组小鼠大脑海马苔藓纤维游离锌离子的分布和含量。结果CQ处理组小鼠海马苔藓纤维的TSQ荧光强度在CA3区及齿状回均明显低于正常对照组和溶剂对照组（P〈0．01）,而两对照组之间无差别。CQ处理组小鼠大脑金属自显影阳性反应强度在皮层、海马CA3区、齿状回均明显低于正常对照组和溶剂对照组（P〈0．01）,而两对照组之间无差别。结论金属螯合剂CQ对小鼠大脑内游离锌离子有明显的螯合作用,提示CQ可能作为锌离子诱导的神经细胞死亡疾病（如脑缺血和阿尔茨海默病）的潜在治疗药物。     

锌离子和锌转运蛋白3在小鼠海马苔藓纤维的共存

目的研究锌离子与锌转运蛋白3(ZNT3)抗体进行双标的可行性。方法应用TSQ荧光技术以及普通荧光技术在小鼠海马苔藓纤维双重标记锌离子和ZNT3蛋白。结果在小鼠海马苔藓纤维,锌离子和ZNT3蛋白被各自标记,荧光反应阳性。而合并后的图片表明,两者实现完全共区域化。结论TSQ作为一种锌离子特殊荧光染色是可以和普通荧光染色的抗体进行双重标记的。     

锌缺乏导致小鼠睾丸游离锌离子和附睾精子数量减少

目的研究锌缺乏对小鼠睾丸游离锌离子和附睾精子数量的影响。方法锌缺乏饲养小鼠5周后,应用ZnSe金属自显影技术对小鼠睾丸和附睾进行染色,观察睾丸和附睾锌离子的分布,同时计数附睾精子数量,并与对照组小鼠的精子数量做对比。结果缺锌喂养后的小鼠睾丸游离锌离子明显减少,并且睾丸生精小管管腔狭小,生殖细胞层厚度增加,此外,附睾精子数量也明显低于对照组。结论睾丸和附睾内游离锌离子减少是锌缺乏小鼠精子数量下降的原因,本结果有助于改善男性生殖健康的状况。     

显示Alzhdmer病大脑老年斑的金属自显影术探讨

<正>大脑皮质出现Ap老年斑是Alzheimer(AD)病的主要神经病理学症状之一,越来越多的研究表明Ap老年斑的形成与脑内锌离子过量密切相关。锌离子可能在启动Ap多肽     

游离锌离子在APP/PS1转基因小鼠嗅球内的定位

目的研究锌离子在APP/PSI转基因小鼠嗅球内的定位,为锌离子参与阿尔茨海默病发病的相关性研究提供重要的形态学依据。方法应用浸入式金属自显影技术(AMG)检测锌离子在野生型小鼠和APP/PSI转基因小鼠嗅球内的分布。结果在野生型小鼠和APP/PSI转基因小鼠嗅球内,AMG反应产物呈棕黑色,嗅球的5层结构清晰可见,其中颗粒层锌离子含量最高。在APP/PSI转基因小鼠嗅球内,还可见锌离子聚集在老年斑内,AMG阳性的老年斑主要分布于含锌量较高的颗粒层,其它各层仅见散在分布。野生型小鼠嗅球内未见AMG阳性的老年斑。结论APP/PSI转基因小鼠嗅球的老年斑内含有大量的锌离子,提示锌离子在嗅球Aβ老年斑的形成过程中发挥重要作用,参与AD的发病和进展。     

Zinc ions in beta-cells of obese, insulin-resistant, and type 2 diabetic rats traced by autometallography

Zinc ions in the secretory granules of beta-cells are known to glue insulin molecules, creating osmotically stable hexamers. When the secretory granules open to the surface, the zinc ion pressure decreases rapidly and pH levels change from acid to physiological, which results in free insulin monomers and zinc ions. The released zinc ions have been suggested to be involved in a paracrine regulation of alpha- and beta-cells. Since zinc is intimately involved in insulin metabolism and because zinc homeostasis is known to be disturbed in type 2 diabetes, we decided to study the ultrastructural localisation of zinc ions in insulin-resistant and type 2 diabetic rats as compared to controls. By means of autometallography, the only method available for demonstrating zinc ions at ultrastructural levels, we found zinc ions in the secretory granules and adjacent to the plasma membrane. The membrane-related staining outside the plasma membrane reflects release of zinc ions during exocytosis. No apparent difference was found in the ultrastructural localisation of zinc ions when we compared the obese Zucker (fa/fa) rats, representing the insulin resistance syndrome, and the GK rats, representing type 2 diabetes, with controls. This suggests that the ultrastructural localisation of zinc ions is unaffected by the development of type 2 diabetes in rats in a steady state of glycaemia.     

Silver Acetate Autometallography: An Alternative Enhancement Technique for Immunogold-Silver Staining (IGSS) and Silver Amplification of Gold,Silver, Mercury and Zinc in Tissues

Abstract

Silver lactate autometallography in immunogold silver staining (IGSS) usually requires development in darkness to avoid excessive background staining. Our alternative method of silver enhancement of IGSS on paraffin sections from Bouin's or formalin fixed pancreas uses silver acetate in combination with hydroquinone in low pH buffer. The modification was tested with a range of antibodies in normal and diseased tissues (all routinely fixed and paraffin embedded), in acetone postfixed cryostat sections, and in semithin sections of glutaraldehyde fixed and resin embedded tissues. Silver acetate autometallography was also tested in various systems for the visualization of tissue metals like sulfides and selenides of mercury and zinc, silver, and gold. Comparisons between sections exposed to silver lactate and the silver acetate developer showed no significant difference in the number of structures stained. The degree of background staining was often lower when silver acetate was to used as the ion donor, especially with IGSS. The advantage the technique described here is that the development process can be controlled, using normal bright field light microscopy. (The J Histotechnol 11:213, 1988.)     

锌缺乏对小鼠海马长时程增强的影响

目的探讨锌缺乏对小鼠海马区域锌离子含量以及长时程增强(LTP)的影响。方法 3周龄CD-1小鼠饲以低锌饲料(0.85mg/kg)和去离子水5周进行实验。应用金属自显影技术(AMG)检测低锌饲料喂养对小鼠海马游离锌离子含量的影响;在小鼠海马齿状回的苔藓纤维层插入刺激电极,在CA3区锥体细胞层插入记录电极,记录高频刺激后海马苔藓纤维CA3区引起的峰电位(PS)和兴奋性突触后电位(f-EPSP)的变化,分析锌缺乏对小鼠海马LTP形成的影响。结果 AMG结果显示锌缺乏小鼠海马CA1,CA3和齿状回区域的锌离子含量明显降低(P<0.05-0.01);电生理检测结果表明锌缺乏小鼠在高频刺激后海马苔藓纤维的PS和f-EPSP均显著下降(P<0.01),提示锌缺乏抑制小鼠海马长时程增强的形成。结论锌缺乏使小鼠海马游离锌离子含量下降,参与对海马长时程增强形成的抑制。