优化治疗神经胶质瘤复方抗瘤丸的实验研究

目的:通过实验研究,优化治疗神经胶质瘤中药复方抗瘤丸(KLW)的组成,得出最佳处方配伍。方法:采用大鼠神经胶质瘤C6细胞BALB/c裸鼠移植瘤模型,将模型裸鼠按瘤块体积随机分为10组(模型组,阳性药对照组(替莫唑胺TMZ组),KLW-1、KLW-2、KLW-3、KLW-4高、低剂量组,每组7只裸鼠。)连续给药15 d,检测各组裸鼠体重、瘤块体积、瘤块重量、微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、凋亡细胞、Bcl-2,Bax蛋白表达水平。结果:与模型组比较,KLW-1高、低剂量组,KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组瘤体积显著减小(P<0.05);KLW-4高剂量组,TMZ组移植瘤的MVD值明显降低(P<0.05);KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组移植瘤VEGF灰度值明显增高(P<0.05);KLW-1、KLW-2、KLW-4高剂量组,TMZ组细胞凋亡率显著增高(P<0.05);各给药组Bcl-2/Bax的比例增加。结论:处方KLW-1高、低剂量组,KLW-2、KLW-4高剂量组对C6移植瘤的生长具有较好的抑制作用。     

丹瓜方对ApoE－/－糖尿病模型小鼠脑组织Caspase-3蛋白及Bcl-2、Bax mRNA表达水平的影响

目的研究丹瓜方对糖尿病模型Apo E－/－小鼠糖脂代谢、脑组织胱冬肽酶－3（Caspase-3）蛋白表达及β淋巴细胞瘤基因－2（Bcl-2）、Bax mRNA表达水平的影响。方法采用链脲佐菌素（streptozo tocin,STZ）注射法对Apo E－/－小鼠制备糖尿病模型。将成模后的32只小鼠按体重分层,再按血糖水平排序,采用随机数字表分为模型组［无菌水（SW）,15 mL/（kg·d）］、丹瓜方组［丹瓜方（DGR）, 15 mL/（kg·d）］、联合组［吡格列酮（PG） 4.3 mg/（kg·d）＋DGR 15 mL/（kg·d）］及吡格列酮组［PG, 4.3 mg/（kg·d）］,每组8只。另选血糖正常的8只同龄同品系C57小鼠作为对照组。灌胃干预12周。监测空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）,测定血清TC、LDL-C水平;实时荧光定量PCR（qPCR）法检测Apo E－/－小鼠脑组织Bcl-2、Bax mRNA表达,采用Western blot法测定脑组织Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组Apo E－/－小鼠血清FBG、TC、LDL-C及脑组织Caspase-3表达水平升高（P<0.01）;与模型组比较,丹瓜方组FBG、TC及LDL-C水平降低,Bcl-2、Bax mRNA水平升高（P<0.01, P<0.05）。丹瓜方组Caspase-3蛋白表达水平低于模型组、联合组及吡格列酮组各组（P<0.01）;联合组Bcl-2/Bax 比值高于模型组（P<0.05）,丹瓜方组高于吡格列酮组（P<0.01）。结论丹瓜方可调节糖尿病糖脂代谢及脑组织Caspase-3蛋白及Bcl-2、Bax mRNA表达,可能对糖尿病造成的脑组织细胞凋亡有一定的防治作用。     

善胃Ⅰ号方对胃癌前病变大鼠胃黏膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的：通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,从细胞凋亡角度探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法：将80只健康Wistar大鼠随机分为四组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃黏膜中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：善胃Ⅰ号方组Bcl-2蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物对照组（P〈0.05）均降低,较正常对照组明显增高（P（0.05）,善胃Ⅰ号方组Bax蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物对照组明显增高（P（0.05）。结论：善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Bcl-2蛋白的表达并促进Bax蛋白的表达,从而促进胃癌前病变细胞凋亡对胃癌前病变的发展进行干预的。     

扶正抑瘤汤对胶质瘤裸鼠肿瘤生长抑制的影响

目的探讨扶正抑瘤汤联合INF-γ基因修饰的BMSCs在体内抗肿瘤作用。方法构建INF-γ基因慢病毒表达载体并在体外转染BMSCs,BALB/C裸鼠腋下接种胶质瘤细胞造模,裸鼠随机分为正常组、模型组、BMSCs组、INF-γ+BMSCs组、扶正抑瘤汤组、扶正抑瘤汤+INF-γ+BMSCs组,连续灌胃给药14 d。qRT-PCR验证BMSCs转染INF-γmRNA表达,激光共聚焦观察INF-γ转染的BMSCs在裸鼠瘤体中荧光分布,测量荷瘤裸鼠肿瘤长径和短径,ELISA检测血清中INF-γ水平;免疫组化检测裸鼠瘤体组织凋亡蛋白Bax/Bcl-2表达。结果激光共聚焦显微镜发现BMSCs在裸鼠瘤体组织中呈明显集聚分布。给药14 d后,与模型组比较,扶正抑瘤汤组和扶正抑瘤汤+INF-γ+BMSCs组肿瘤体积增值较少(P<0.05),血清INF-γ水平增加(P<0.05),Bax蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论扶正抑瘤汤能够协同INF-γ基因转染的BMSCs发挥抗肿瘤作用,其作用可能与血清INF-γ、Bax/Bcl-2途径诱导细胞凋亡有关。     

大黄素联合吉西他滨抑制体内外胰腺癌生长及其机制研究

目的探讨大黄素联合吉西他滨对体内外胰腺癌生长的影响及其机制。方法采用吉西他滨(20μmol/L)、大黄素(40μmol/L)单独及联合作用胰腺癌细胞株SW1990后,CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Westernblot检测Bax及Bcl-2蛋白表达。建立人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,分别给予大黄素、吉西他滨单独及联合用药,监测移植瘤体积变化;免疫组化法检测移植瘤组织中Ki-67、Bax及Bcl-2表达。结果与吉西他滨组及大黄素组比较,联合用药组显著降低SW1990细胞存活率,提高细胞凋亡率(P<0.05);与对照组比较,大黄素组及联合用药组明显上调SW1990细胞中Bax蛋白表达水平,抑制Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。与对照组比较,大黄素组及联合用药组可显著抑制裸鼠胰腺癌皮下移植瘤生长,提高Bax在肿瘤组织中阳性表达,明显降低Ki-67和Bcl-2的阳性表达(P<0.05),以联合用药组作用最佳(P<0.05)。结论大黄素可能通过上调Bax表达和下调Bcl-2表达增强吉西他滨对体内外胰腺癌的抑制作用。     

补肾养血方对卵巢早衰小鼠凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的：探讨补肾养血方对免疫性卵巢早衰（POF）小鼠卵巢凋亡调节基因B细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的影响。方法：以小鼠透明带3（Zp3）为抗原,皮下多点注射免疫 BALB/c雌性小鼠,14 d后强化免疫,建立免疫性卵巢早衰模型。设补肾养血方低、中、高剂量（5.1,10.2,20.4 g·kg^-1）进行治疗,以补佳乐（戊酸雌二醇0.6 mg·kg^-1）为阳性对照,于造模后15 d开始灌胃给药1次/d,连续6周（每1周休息1 d）。放射免疫法检测小鼠血清激素水平,Western法检测卵巢组织 Bcl-2,Bax蛋白的表达。结果：与空白对照组相比,模型组小鼠卵巢Bcl-2蛋白的表达减少,Bax蛋白表达增加,（P<0.05）,模型组小鼠卵巢Bcl-2/Bax下降（P<0.01）,提示模型组卵泡Bcl-2蛋白的低表达、Bax蛋白的高表达可能加速了卵泡的凋亡,导致卵巢早衰;与模型组相比,补肾养血方高、中、低剂量组及西药组小鼠卵巢Bcl-2蛋白的表达明显增加（P<0.01,P<0.05）,卵巢Bax蛋白的表达均减少（P<0.05）,Bcl-2/Bax明显降低（P<0.05）。结论：卵泡凋亡过快可能导致卵巢早衰,补肾养血方可能通过上调卵泡及卵巢间质Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,抑制卵泡的过快凋亡,从而改善卵巢功能。     

抗瘤丸对裸鼠神经胶质瘤凋亡因子表达的影响

目的:探讨中药复方抗瘤丸治疗神经胶质瘤的诱导凋亡作用机制。方法:制备裸鼠神经胶质瘤模型分为模型组、抗瘤丸高、中、低剂量组和阳性药(替莫唑胺)组,TUNEL染色法检测肿瘤细胞凋亡率,Western blot方法检测细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)的表达变化。结果:与模型组比较,给药20天后,抗瘤丸低剂量组和阳性药组肿瘤细胞凋亡率明显增加;与模型组比较,所有给药组均能明显下调Bcl-2的表达(P0.05),抗瘤丸低剂量组,阳性药组能显著上调Bax的表达(P0.05),各给药组Bcl-2/Bax的比值减小(P0.05)。结论:抗瘤丸可降低肿瘤凋亡蛋白比值,促进肿瘤细胞的凋亡。     

增免抑瘤方联合顺铂对铂类耐药卵巢癌抑瘤率影响的实验研究

目的观察增免抑瘤方对顺铂耐药卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用顺铂耐药人卵巢癌细胞株COC1/DDP构建裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为中药高、中、低剂量组,顺铂组,联合组(顺铂联合中药),对照组(生理盐水),连续给药3周,剥取瘤体计算瘤重及抑瘤率;定量RT-PCR及免疫组化测定Bcl相关X连锁蛋白(Bcl-associated x protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)的表达;电镜观察瘤体细胞超微结构。结果联合组抑瘤率最高,为(59.26±6.86)%,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR结果显示:促凋亡基因Bax mRNA联合组表达最高,对照组表达最低(P<0.01)。抑凋亡基因Bcl-2mRNA对照组表达最高,中药高剂量组表达最低,联合组Bcl-2mRNA的表达低于顺铂组(P<0.01)。免疫组化结果显示:联合组Bax蛋白的表达最高,Bcl-2蛋白的表达最低,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。电镜下中药各剂量组与联合组均可见凋亡中、晚期的表现。结论增免抑瘤方辅助化疗可逆转耐药卵巢癌裸鼠对顺铂的耐药性,增强其抑瘤作用。其机制与上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,促进耐药卵巢癌细胞的凋亡有关。     

莪术油对宫颈癌荷瘤裸鼠凝血功能及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察莪术油对宫颈癌荷瘤裸鼠凝血功能及Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响。方法:选取SPF级Balb/c裸鼠60只,建立宫颈癌荷瘤裸鼠动物模型,眼球取血,用SYSMEX CA-7 000全自动血凝仪检测各组裸鼠纤维蛋白原(Fib)和D-二聚体(D-dimer)的水平;免疫组化检测Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白表达情况。结果:莪术油中剂量组用量在16 mg·kg-1即显示降低荷瘤裸鼠Fib和D-dimer的水平(P0.05),莪术油高剂量组用量在32 mg·kg-1时与模型组间差异具有显著性(P0.01),且已经接近正常组;莪术油中剂量组和莪术油高剂量组可下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达,激活Caspase-3,且优于模型组(P0.05或P0.01)。结论:莪术油用量在16 mg·kg-1~32 mg·kg-1可改善宫颈癌荷瘤裸鼠的血液高凝状态,发挥抗血栓形成作用,下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达,减低Bcl-2/Bax比值,提升Caspase-3值。     

善胃I号方对胃癌前病变大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的：通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,从细胞凋亡角度探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法：将80只健康Wistar大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、阳性药物组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：善胃Ⅰ号方组Bcl-2蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物组均明显降低（P〈0．05）,而其Bax蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物组明显增高（P〈0．05）。结论：善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃粘膜Bcl-2蛋白的表达,且促进Bax蛋白的表达,从而促进癌前病变细胞的凋亡,对胃癌前病变的发生、发展进行干预。     

PPARs激动剂罗格列酮对大鼠癫痫持续状态海马神经元的保护作用

目的探讨罗格列酮（RSG）对大鼠癫痫持续状态（SE）后海马神经元凋亡的影响及其可能作用机制。方法采用免疫组化法对氯化锂-匹罗卡品诱发癫痫大鼠模型脑内Bcl-2、Bax及TUNEL阳性细胞的表达进行测定,并研究RSG对癫痫影响及可能机制。结果模型组（M组）海马区TUNEL、Bcl-2、Bax较对照组（N组）明显增多（P〈0.05）;RSG组Bax、TUNEL较M组明显减少（P〈0.05）,Bcl-2阳性细胞、Bcl-2/Bax比率较M组明显增多（P〈0.05）。结论SE后脑内TUNEL、Bcl-2、Bax表达明显增加;RSG能够减轻海马TUNEL、Bax的表达,增加海马Bcl-2的表达从而增加Bcl-2/Bax比率。RSG可能具有减轻癫痫发作和保护神经元的作用。     

灯盏花素对肾损害小鼠肾组织细胞凋亡及相关蛋白的影响

目的:观察灯盏花素对顺铂致小鼠肾损害肾组织细胞凋亡及相关蛋白的影响。方法:将昆明种小鼠随机分为对照组、模型组、灯盏花素25,50 mg.kg-1组。除对照组外,其余各组腹腔注射顺铂8 mg.kg-1制备小鼠肾损害模型,灯盏花素组分别灌胃给药,连续7 d。给药结束后收集小鼠尿液进行尿蛋白(Upr)/尿肌酐(Ucr)及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG-U)测定。原位末端标记法(TUNEL)检测小鼠肾脏细胞凋亡状况,免疫组化法检测肾脏相关凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:模型组小鼠Upr/Ucr及NAG-U较对照组明显升高,肾组织的凋亡指数增加,肾组织细胞凋亡蛋白Bax及Bcl-2表达增强,Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05,P<0.01),而2个灯盏花素实验组Upr/Ucr、NAG-U较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01),其中灯盏花素50 mg.kg-1小鼠较模型组肾组织细胞凋亡指数、Bax表达、Bax/Bcl-2减少,Bcl-2的表达增强(P<0.05,P<0.01)。结论:Upr/Ucr与NAG-U可作为顺铂肾损害的评估指标。灯盏花素减轻顺铂肾损害的机制可能与增强凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,降低Bax表达及Bax/Bcl-2的比值有关。     

左归降糖舒心方对糖尿病心肌病MKR鼠心肌细胞损伤和凋亡的影响＊

目的 观察左归降糖舒心方对糖尿病心肌病（Diabetic cardiomyopathy， DCM）模型鼠心肌细胞损伤和凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法 以转基因2型糖尿病小鼠（MKR鼠）为实验对象，通过链脲菌素（streptozotocin， STZ）腹腔注射+持续高脂喂饲建立DCM模型，分为模型组、中药组、阳性药物组，另设C57小鼠为空白对照组。中药组给予左归降糖舒心方14.27 g生药/（kg·天）灌胃，阳性药物组给予二甲双胍250 mg/（kg·天）+依那普利4.5 mg/（kg·天）灌胃，连续给药4周。采用电化学法血糖仪测定空腹血糖（fasting blood glucose， FBG），光镜和透射电镜观察小鼠心肌组织形态学变化，ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I， cTnI）、乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase， LDH）水平，免疫组化法检测I型胶原蛋白（Collagen-I）、III型胶原蛋白（Collagen-III）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein， Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（Caspase-9）、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）的蛋白表达，TUNEL法检测心肌细胞凋亡。结果 模型组FBG较空白对照组显著升高，经左归降糖舒心方干预后明显降低（P<0.01）。与模型组比较，中药组和阳性药物组的心肌组织病理形态明显改善，Collagen-I、Collagen-III蛋白表达减弱（P<0.01），血清cTnI、LDH水平明显降低（P<0.01），细胞凋亡阳性表达减弱（P<0.01），Bax、Caspase-9表达减弱（P<0.01），Bcl-2表达增强（P<0.01）。中药组下调Collagen-I和Collagen-III表达、减少心肌细胞凋亡、下调Bax和Caspase-9表达等作用弱于阳性药物组（P<0.01），但上调Bcl-2表达的作用强于阳性药物组（P<0.01）。结论 左归降糖舒心方对糖尿病心肌病MKR鼠的心肌细胞损伤和凋亡具有保护作用，其作用机制可能与降糖、改善心肌纤维化、抑制促凋亡因子Bax和Caspase-9表达、促进抗凋亡因子Bcl-2表达等有关。     

降尿酸方对尿酸性肾病大鼠肾脏细胞凋亡的影响

目的 观察降尿酸方对尿酸性肾病（UAN）大鼠肾脏细胞凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法 32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、别嘌醇组和降尿酸方组,每组8只。采用氧嗪酸钾（1 500 mg/kg）和腺嘌呤（100 mg/kg）混合灌胃制备UAN大鼠模型,造模同时别嘌醇组和降尿酸方组分别予别嘌醇（25 mg/kg）和降尿酸方（16 g/kg）灌胃,正常组和模型组予等体积生理盐水灌胃,连续4周。HE染色观察肾组织病理变化,六胺银染色检测肾组织尿酸盐结晶含量,透射电镜观察肾小管上皮细胞超微结构,Westernblot检测肾组织p53、Caspase-3、Bax蛋白表达,免疫荧光检测肾组织Bcl-2蛋白表达,TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 与正常组比较,模型组大鼠肾小管管壁变薄,管腔扩张,有炎症细胞浸润,肾小管损伤评分明显增加（P<0.001）,尿酸盐结晶含量明显增加（P<0.001）,肾小管上皮细胞损伤,p53、Caspase-3、Bax蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）,Bcl-2蛋白表达有降低趋势,肾小管上皮细胞凋亡率明显升高（P<...     

黄芩汤体外诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及其对凋亡相关因子表达的影响

目的：研究黄芩汤对人结肠癌SW620细胞凋亡的作用及其机制。方法：CCK-8和MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;酶标免疫测定Caspase-3和Caspase-8的相对活性。结果：与对照组相比,不同浓度黄芩汤处理的细胞增殖抑制率显著增加（P<0.05或P<0.01）,细胞凋亡率升高（P<0.05或P<0.01）,抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2表达降低而促细胞凋亡蛋白Bax表达明显增高（P<0.05或P<0.01）,Caspase-3和Caspase-8活性增强（P<0.05或P<0.01）,并呈量效依赖关系。结论：黄芩汤能够有效的促进结肠癌SW620细胞凋亡,其机制可能与抑制Bcl-2表达而促进Bax表达并增强Caspase的活性有关。     

祛瘀生肌法对糖尿病大鼠创面新生肉芽组织凋亡相关基因的动态影响

目的探讨祛瘀生肌法对糖尿病溃疡大鼠创面愈合中凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA表达的影响。方法48只SD大鼠采用四氧嘧啶造成糖尿病模型后,剪去背部局部全层皮肤造成糖尿病溃疡。将大鼠随机分成生肌化瘀方1组、生肌化瘀方2组、生肌化瘀方3组和生理盐水对照组。分别于创面修复第3天、11天取材,采用实时PCR法检测新生肉芽组织中凋亡相关基因Bax和Bcl-2mRNA变化。结果创面修复第3天,生肌化瘀方1组和生肌化瘀方2组Bcl-2拷贝数及Bax/Bcl-2比值均高于生理盐水对照组（P〈0.05）;创面修复后第11天,生肌化瘀方1组Bcl-2拷贝数和Bax/Bcl-2比值仍高于生理盐水对照组（P〈0.05）,而生肌化瘀方2组Bax/Bcl-2比值与生理盐水对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论祛瘀生肌中药调节糖尿病溃疡大鼠模型新生肉芽组织中凋亡相关基因Bax和Bcl-2mRNA表达是促进创面愈合的原因之一。早期重用化瘀药物能抑制细胞凋亡,有利于创面愈合,而晚期重用生肌药物能促进细胞凋亡,有利于减少疤痕形成。     

红芪多糖对线粒体途径介导的膀胱癌细胞凋亡的影响

目的：观察红芪多糖对线粒体途径介导的膀胱癌细胞凋亡的影响,并探讨可能机制。方法：取对数期T24细胞,随机分为对照组（常规培养）、红芪多糖组（加入红芪多糖0.8 μg/L）、SP600125组（加入SP600125 10 μmol/L）、联合组（加入红芪多糖0.8 μg/L、SP600125 10 μmol/L）。MTT法检测细胞增殖能力;双染法检测细胞凋亡率;JC-1法检测细胞线粒体损伤;免疫印迹法检测细胞相关蛋白表达。结果：与对照组比较,红芪多糖组24、48、72 h吸光度值、线粒体膜电位、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白表达量降低;凋亡率,Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）蛋白表达量,p-c-Jun氨基末端激酶（JNK）/JNK、p-c-Jun/c-Jun升高（均P<0.05）。SP600125组24、48、72 h吸光度值,线粒体膜电位、Bcl-2蛋白表达量升高;凋亡率,Bax、Caspase-3蛋白表达量,p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun降低（均P<0.05）。与红芪多糖组比较,联合组24、48、72 h吸光度值、线粒体膜电位、Bcl-2蛋白表达量升高;凋亡率,Bax、Caspase-3蛋白表达量,p-JNK/JNK、p-c-Jun/c-Jun降低（均P<0.05）。结论：红芪多糖可抑制膀胱癌T24细胞增殖,并通过介导线粒体途径促进其凋亡,作用机制可能与激活JNK/c-Jun信号通路有关。     

益精方对不育症大鼠睾丸生精细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察益精方对腺嘌呤法不育症大鼠睾丸生精细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法Wistar大鼠75只随机分为空白组,模型组,益精方高、中、低剂量组,每组15只。除空白组外,其余各组均以腺嘌呤连续灌胃10天;从第11天开始,空白组及模型组用等量生理盐水灌胃,益精方高（3.38 g/100 g）、中（1.69 g/100 g）、低剂量（0.85 g/100 g）组分别以益精方各剂量灌胃,每天1次,连续20天。实验结束后将大鼠全部处死,摘取睾丸,采用原位缺口末端标记法（TUNEL）和免疫组化SABC法分别检测各组动物生精细胞的凋亡情况及Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,细胞凋亡数升高,差异均有统计学意义（P〈0.01）。与模型组比较,三个剂量组Bcl-2蛋白表达均升高（P〈0.01,P〈0.05）,高、中剂量组Bax蛋白表达均降低（P〈0.01,P〈0.05）,中剂量组细胞凋亡数降低（P〈0.01）。结论益精方能够通过调控睾丸组织Bcl-2及Bax蛋白的表达,抑制生精细胞的凋亡。     

姜黄素联合FOLFOX诱导胃癌细胞发生凋亡及其机制研究

目的观察姜黄素联合FOLFOX（folinic acid fluorouracil oxaliplatin）对胃癌细胞株BGC-823生长的影响,并探讨其可能的发生机制。方法设立空白对照组、姜黄素组、FOLFOX组［5-FU（0.1 mmol/L）+奥沙利铂（5 μmol/L）］及姜黄素联合FOLFOX组。CCK8法检测细胞活性,Hoechst染色观察细胞凋亡,Caspase-3试剂盒检测Caspase-3活性, 实时荧光定量PCR法测定Bcl-2、Bax mRNA表达的变化,Western blot法测定Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果各用药组均能抑制BGC-823细胞增殖、诱导细胞凋亡、增加Caspase-3的活性、降低Bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白表达而增加Bax mRNA及Bax蛋白表达,且姜黄素联合FOLFOX组疗效优于姜黄素组及FOLFOX组,差异有统计学意义（P<0.01）。结论姜黄素联合FOLFOX组能够明显抑制BGC-823细胞的增殖,其联合作用可能通过促进Bax的表达及Caspase-3的活性、抑制Bcl-2表达,从而加速肿瘤细胞的凋亡。     

健脾解毒方对裸鼠皮下移植瘤Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察中药复方健脾解毒方对裸鼠皮下移植瘤Bax及Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用HCT8/V细胞制作裸鼠皮下移植瘤,将32只造模成功的裸鼠随机分为4组,每组8只。空白组予0.9%Na Cl溶液腹腔注射,化疗组予长春新碱腹腔注射,中药组予健脾解毒方灌胃,联合组予长春新碱腹腔注射和健脾解毒方灌胃。测量各组皮下移植瘤的瘤重及抑瘤率,光镜观察肿瘤组织病理情况,并采用Real-time PCR法测定Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果与空白组比较,化疗组、中药组、联合组瘤重明显降低,差异有统计学意义(P0.01);与化疗组比较,中药组、联合组瘤重均降低,差异有统计学意义(P0.01);相对于空白组,化疗组、中药组、联合组瘤体抑制率分别为22.84%、38.44%、51.53%,以联合组抑瘤效果最佳。与空白组比较,化疗组、中药组、联合组Bax mRNA表达水平显著升高(P0.05,P0.01),Bcl-2 mRNA表达水平均显著降低(P0.01);与化疗组比较,中药组、联合组Bax mRNA相对表达量高于化疗组(P0.05,P0.01),中药组、联合组Bcl-2 mRNA相对表达量均低于化疗组(P0.01)。结论健脾解毒方通过上调Bax mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达,促进肠癌细胞的凋亡,且与化疗药具有协同作用。