防己诺林碱对去卵巢小鼠骨代谢及骨微结构的影响

目的探讨防己诺林碱对去卵巢小鼠骨质疏松的保护作用。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为空白(假手术)对照组、模型(去卵巢)组、阳性(雌二醇,E2)对照组、防己诺林碱组共4组,每组10只。连续腹腔给药7周后处死小鼠,取股骨及外周血清,通过ELISA法检测骨代谢相关血清学指标:抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAc P)、I型胶原羧基末端肽(CTX)及I型胶原氨基末端肽(NTX);通过Micro-CT评估各组小鼠骨组织微结构相关指标:骨小梁百分比(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)和骨小梁厚度(Tb.Th);通过实时荧光定量PCR检测小鼠骨质疏松骨吸收相关基因的表达情况,包括TRAc P、组织蛋白酶K(Cathepsin K)、活化T细胞核因子1(NFATc1)以及降钙素受体(CTR)。结果与去卵巢模型组比较,防己诺林碱治疗组小鼠BV/TV、Tb.N、Tb.Th显著升高,Tb.Sp明显降低,骨代谢相关指标(TRAc P、CTX、NTX)显著降低,破骨细胞标志基因(TRAc P、Cathepsin K、NFATc1以及CTR)表达水平明显下降。结论防己诺林碱对去卵巢小鼠骨质疏松有保护作用,有望为骨质疏松的临床用药提供新思路。     

应用microCT技术对中药干预去卵巢小鼠骨组织微结构的分析

目的应用micro CT技术观察健骨颗粒对C57小鼠去卵巢骨质疏松模型骨组织骨量、骨微结构及生物力学的影响。方法将4周龄清洁级C57小鼠30只随机分为三组(假手术组10只、卵巢切除小鼠两组各10只),两组卵巢切除小鼠术后1周开始,分别用健骨颗粒和生理盐水进行灌胃,假手术组用生理盐水灌胃。2个月后,小鼠左胫骨行micro CT检测及图像分析、右胫骨行生物力学三点抗压最大载荷检测。结果与假手术组比较,去卵巢组BMC、BMD、Mean、BV、BS显著下降(P0.01),TMC下降(0.01P0.05);与去卵巢组比较,去卵巢中药组BMC、BMD、Mean指标显著提高(P0.01);图像分析结果显示去卵巢组较假手术组骨皮质薄,骨小梁数量少,形态细小、不连续呈扭曲或断裂状等明显骨质疏松病理特征,去卵巢中药组介于两者之间。生物力学结果显示三组胫骨三点抗压最大载荷均具有明显差异(P0.01)。结论去卵巢2月成功建立小鼠绝经后骨质疏松症模型;健骨颗粒抗骨质疏松作用明显,主要通过增加骨量和改善骨小梁微结构来最终提高骨强度;micro CT对骨质疏松参数分析简洁、高效,图像多维、全面,与传统的检测方法相比,具有一定的优势。     

异补骨脂素对去卵巢大鼠骨代谢的影响研究

目的研究异补骨脂素对去卵巢大鼠骨代谢的影响。方法取3月龄雌性SD大鼠40只,随机分为4组,假手术对照组,模型组,雌二醇组(苯甲酸雌二醇0.2 mg/kg,皮下注射,每周1次),异补骨脂素组。手术6 w后,异补骨脂素组用25 mg/kg(此浓度经过前期浓度筛选得到)异补骨脂素灌胃,每天1次,1周停止1次,模型组灌胃与用药组等体积生理盐水,假手术组正常饲养。12 w后双能X骨密度仪检测全身骨密度后处死,分离骨组织,于AG-X系列台式电子万能试验机检测左侧股骨和椎骨生物力学指标,血清中骨钙素(osteocalcin,OC)和抗酒石酸性磷酸酶5b(tartrate resistant acid phosphatase 5b,TRACP5b)检测,右侧股骨护骨素(osteoprotegerin,OPG),RANKL免疫组织化学染色,剥离心、肝、脾、肺、肾、肾上腺和子宫称重,计算器官指数,并做常规病理学检测。结果与假手术组比较,模型组大鼠体质量、全身骨密度、股骨骨密度、腰椎骨密度及血清OC、TRACP 5b,胫骨微组织结构和股骨生物力学性能差异极显著,有统计学意义(P0.01),说明骨质疏松造模良好;与模型组比较,异补骨脂素组大鼠体质量、全身骨密度、股骨骨密度、腰椎骨密度及血清OC、TRACP 5b,胫骨微组织结构和股骨生物力学性能显著差异有统计学意义(0.01P0.05)。与模型组比较,阳性对照组大鼠全身与股骨骨密度、血清OC、TRACP 5b和股骨生物力学性能极显著差异有统计学意义(P0.01)。药物处理组与阳性对照相比无统计差异。结论 25 mg/kg的异补骨脂素能增加SD大鼠骨密度,改善骨组织微结构,有效提升骨生物力学性能,促进骨形成,降低骨质疏松骨折发生的风险。     

护骨胶囊对去卵巢大鼠血清骨代谢指标的影响

目的观察去卵巢大鼠血清骨代谢指标的改变及护骨胶囊(HG)的调节作用。方法采用去卵巢(OVX)模型,分假手术(Sham),去卵巢(OVX),仙灵骨葆(Pos)和护骨胶囊低、中、高剂量组(HG-L、HG-M和HG-H)。术后2d连续灌胃给药3个月,取血清检测骨代谢指标。结果1与Sham组比较,OVX组骨形成指标ALP、BALP、UcOC、PINP和骨吸收指标CTX均显著升高,但TRAP5a,TRAPb水平降低;OPG和OPG/RANKL比值显著降低。2与OVX组比较,HG-L、H组进一步升高ALP,HGH组也升高BALP,HG-L、HG-M组降低BALP;Pos组降低ALP和BALP水平。HG和阳性药物给药组降低了UcOC和PINP水平,同时也降低CTX水平。HG-L组的TRAP5a升高;HG-L、HG-M和Pos组使TRAP5b升高。OPG在HG-H和Pos组增加;OPG/RANKL比值HG和阳性药物给药组均升高。结论OVX使部分骨形成和骨吸收指标增加,表现为骨高转换,HG和仙灵骨葆都能降低这些指标。由于HG能在OVX基础上进一步升高ALP,HG-H也升高BALP,而仙灵骨葆没有进一步提高ALP和BALP水平,提示护骨胶囊刺激成骨的作用较强。     

坚骨颗粒对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨密度和股骨力学性能的影响

目的 进一步研究中药坚骨颗粒的抗骨质疏松作用。方法 采用以卵巢切除后雌激素缺失诱导的骨质疏松大鼠模型,用DEXA法分析股骨骨密度,用生物力学技术分析动物股骨的力学性能参数,对比观察了模型组、雌激素组、中药组动物股骨骨密度和股骨力学参数的变化。结果 用药4个月后雌激素组和中药组大鼠股骨的骨矿含量、骨密度、最大载荷、破坏载荷、能量吸收参数与造模对照组比较有显著提高(P<0.05)。结论 中药坚骨颗粒可拮抗模型动物的骨量丢失,维持造模后动物骨骼抵抗外力冲击的能力,改善骨质疏松大鼠骨的韧性,降低骨折发生的危险性。     

中药葛根对去卵巢大鼠骨代谢生化指标的影响

目的　研究中药葛根对去卵巢大鼠骨代谢生化指标的影响 ,探讨葛根治疗骨质疏松症的药理作用。方法　采用去卵巢大鼠模型 ,分A去势组、B假手术组、C去势服葛根组、D去势服西药组 (阳性对照组 ,程序治疗 ) ,去势 1个月后C、D组服药 50d ,放免法测定血清雌二醇 (E2 )、邻甲酚酞络合酮法测定尿钙 ,ELISA法测定尿脱氧吡啶啉 (Dpd) ,放免法测定血清骨钙素 (BGP)水平 ,组间进行比较。结果　E2 测定B、C、D组高于A组 (P <0 0 0 1 ) ,C、D组低于B组 (P <0 0 1 ,P <0 0 0 1 )。尿钙测定B、C、D组低于A组 (P <0 0 1 )。Dpd测定B、C、D组低于A组 (P <0 0 0 1 ) ,C、D组低于B组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1 )。BGP测定B组低于A组 (P <0 0 1 ) ,C、D组高于A组 (P <0 0 1 ,P <0 0 5) ,同时高于B组(P <0 0 0 1 )。结论　中药葛根有增加E2 ,抑制骨吸收 ,促进骨形成 ,对骨质疏松症有治疗作用     

密骨颗粒对去卵巢大鼠TGF-β1表达的影响

目的 观察密骨颗粒对去卵巢大鼠TGF-β1表达的影响，探讨其对绝经后骨质疏松症的预防机制。方法 运用切除大鼠双侧卵巢方法建立骨质疏松症模型，应用中药密骨颗粒防治12周，采用双能X线骨密度测定法、Elisa、免疫组化SABC法、反转录聚合酶链方法，分别观察其对实验鼠离体骨密度、血清TGF-β1活性及其在骨组织中的蛋白和mRNA表达的影响。结果 中药密骨颗粒可以显著升高骨密度，提高血清TGF-β1活性，上调其在骨组织中的mRNA和蛋白表达水平，其蛋白广泛表达于胫骨干骺端。结论 中药密骨颗粒可通过调节TGF-βI活性及其mRNA表达水平而对去卵巢大鼠骨质疏松有预防或延缓发生的作用。     

壮骨颗粒对去卵巢骨质疏松模兔BMD和血清TRAP、BALP影响的实验研究

目的本文从骨密度（BMD）和血清TRAP、BALP的角度探讨壮骨颗粒对原发性骨质疏松症的作用机制。方法建立6月龄雌性兔卵巢摘除骨质疏松模型，模型成立后随机分成壮骨颗粒组、钙尔奇-D组和生理盐水组，分别喂服壮骨颗粒、钙尔奇-D和生理盐水。喂药12周后处死取材，检测BMD和血清TRAP、BALP等浓度。结果壮骨颗粒组BMD明显高于对照组，兔血清TRAP活性均较对照组降低，而BALP较对照组升高。结论壮骨颗粒可以提高骨质疏松模兔的BMD，抑制破骨细胞活性，提高成骨细胞的活性。     

益肾补骨汤调节去卵巢大鼠骨代谢的作用研究

目的 研究益肾补骨汤对去卵巢大鼠骨代谢的调节作用.方法 取51只大鼠建立去卵巢大鼠模型,另取10只大鼠设置为假手术组.将建模成功的大鼠随机分为尼尔雌醇组、高剂量益肾补骨汤组、中剂量益肾补骨汤组、低剂量益肾补骨汤组及空白模型组,每组各10只,灌胃治疗.对比各组大鼠股骨、胫骨骨密度,骨代谢指标;观察骨组织形态学变化;检测大...     

骨疏康对卵巢切除大鼠骨质量及基因表达的影响

为进一步探讨骨疏康防治骨质疏松的作用机理。方法将２７只３月龄Ｗｉｓｔａｒ雌性大鼠随机分为三组：假手术组、卵巢切除术、骨疏康组。给药后１２周同时处死。取大鼠血、尿检测骨代谢生化指标,取得骨或腰椎测量骨密度,骨形态计量学参数、骨生物力学参数,取股骨和胫骨,测定骨粘连蛋白ｍＲＮＡ表达。     

Time course of bone biomechanical parameters in ovariectomized mice

Four-week-old female ddY mice were ovariectomized or sham-operated, and biochemical and biomechanical measurements were performed to examine time-dependent changes in quality and quantity of bone after the operations. The body weight and the femoral length increased time dependently and no difference was observed between the ovariectomized and the sham-operated mice. On the other hand, increase in the uterine weight was completely suppressed in the ovariectomized mice, although the uterine weight of the sham-operated mice increased in a time-dependent manner. The femoral weight of both the shamoperated and the ovariectomized mice tended to increase time dependently within 4 weeks after the operations. However, the increase in the ovariectomized mice was mild and stopped at 5 weeks after the operation. Calcium and hydroxyproline content, failure load, and stiffness of femur were highly correlated with femoral weight in both ovariectomized and shamoperated mice. The yield energy of femur correlated with the femoral weight in the sham-operated mice but not in the ovariectomized mice. The increase in the yield energy of the ovariectomized mice was completely suppressed after the operation in spite of time-dependent gain in femoral weight. Therefore, the yield energy of femur is the best index for morbidity of osteoporosis of all these parameters described in this study.     

抗疏健骨颗粒对去卵巢骨质疏松大鼠血清骨代谢及骨组织自噬水平的影响

目的研究抗疏健骨颗粒对去卵巢骨质疏松(osteoporosis,OP)大鼠骨稳态及自噬相关因子的影响,探讨抗疏健骨颗粒干预OP的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、抗疏健骨颗粒低、中、高剂量组。除假手术组外,其余4组建立去卵巢大鼠OP模型。正常喂养12周检测模型建成后,给予抗疏健骨颗粒干预12周,采用ELLSA法测定血清ALP、BGP和TRACP水平和股骨GPR48、ATF4含量;蛋白印迹法(Western blotting)检测股骨中AMPK、LC3、Beclin1和P62蛋白表达。结果抗疏健骨颗粒可显著降低OP大鼠血清ALP、BGP和TRACP水平,升高股骨GPR48、ATF4含量,上调AMPK磷酸化水平及LC3、Beclin1蛋白表达,降低P62水平,差异有统计学意义(P0.05)。抗疏健骨颗粒各剂量组中,中剂量组效果显著,与其他两组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论抗疏健骨颗粒可调节血清、骨组织中骨代谢指标,减轻去卵巢大鼠OP的发生,其机制可能与通过骨组织中AMPK调节自噬通路有关,通过恢复自噬水平,促进骨生成,进而维持骨平衡。     

刺五加苷E对去卵巢小鼠骨量及神经肽的影响

目的 研究刺五加苷E(Eleutheroside E,EE)对去卵巢(OVX)小鼠骨量以及神经肽的影响。方法 选取24只7周龄C57BL6/J雌性小鼠,平均分为假手术组(Sham组)、OVX组、EE低剂量组(EE-L组)和EE高剂量组(EE-H组),EE-L组和EE-H组在OVX基础上分别予EE 20 mg/(kg·d)和40 mg/(kg·d)灌胃,Sham组和OVX组以等体积1%羟甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃。12周后收集小鼠左侧股骨和血清标本。左侧股骨行Micro-CT扫描;ELISA法检测血清中骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨形成指标Ⅰ型原胶原氨基端肽(P1NP)、炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)以及神经肽降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、神经肽Y (NPY)的含量。结果 与Sham组相比,OVX组小鼠骨密度(bone mineral density, BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、P1NP、IL-10、CGRP、SP、VIP...     

促胰液素对去卵巢骨质疏松大鼠血清骨转换指标和骨密度的影响

目的 观察促胰液素(secretin,SCT)对去卵巢骨质疏松大鼠骨转换指标和骨密度的影响。方法 采用双侧卵巢去除法制备绝经后骨质疏松大鼠模型,将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、雌激素治疗组和促胰液素治疗组,每组各15只。干预3个月后,测定腰椎骨密度(bone mineral density,BMD),采取ELISA法测定血清I型胶原N前端肽(procollagen I N-Terminal propeptide,PINP)和I型胶原C末端肽(collagen type I C-terminal cross-linked telopeptide,CTX),另使用STRING10.0蛋白相互作用网络分析工具分析骨质疏松相关差异蛋白。结果 与假手术组比较,模型对照组、雌激素治疗组、促胰液素治疗组的PINP含量升高（P＜0.05）,模型对照组的CTX含量升高（P＜0.05）,模型对照组的BMD下降（P＜0.05）,雌激素治疗组和促胰液素治疗组的CTX、BMD含量无显著差异（P＞0.05）;与模型对照组比较,雌激素治疗组、促胰液素治疗组PINP、CTX含量有所下降,而BMD含量升高（P＜0.05）;雌激素组与促胰液素组之间PINP、CTX、BMD含量无显著差异（P＞0.05）。结论 促胰液素能改善去卵巢骨质疏松大鼠的PINP和CTX含量,增加骨密度,抑制骨质丢失,具有较好的抗骨质疏松效果。     

健骨颗粒含药血清调控miR-141对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的观察健骨颗粒含药血清对去卵巢模型小鼠BMSCs成骨分化的影响,并研究其调控miR-141影响BMSCs分化的可能机制。方法流式细胞计数法鉴定BMSCs;含药血清和空白血清分别干预体外培养的BMSCs;显微镜下观察细胞形态结构,碱性磷酸酶染色、定量检测,茜素红染色;RT-PCR检测miR-141及DLx5、Msx2、Runx2的基因表达情况;Western blot检测DLx5、Msx2及Runx2的蛋白表达情况。结果流式细胞计数法鉴定提取细胞符合实验要求;镜下观察发现两组细胞有差异,含药血清组细胞群落间结晶更为密集;ALP染色及定量、茜素红染色结果含药血清组均优于空白血清组;RT-PCR检测Dlx5、Msx2、Runx2及miR-141的基因表达结果:含药血清组miR-141和Msx2基因表达较空白血清组显著降低(P<0.01),而Dlx5、Runx2的基因表达显著升高(P<0.01);Western blot检测DLx5、Msx2、Runx2的蛋白表达结果:含药血清组较空白血清组相比,Msx2的蛋白表达略微下降(P<0.05),而Dlx5、Runx2的蛋白表达相对升高(P<0.01)。结论健骨颗粒可以调低miR-141的表达,进而调高Dlx5的表达,削弱Dlx5的同源异形基因Msx2对Runx2抑制作用,通过miR-141调控Dlx5/Msx2/Runx2信号通路促进BMSCs成骨分化达到预防和治疗绝经后骨质疏松的目的。     

肠道菌群介导贞术调脂胶囊抑制去势小鼠骨丢失的机制研究

目的 基于肠道菌群的变化,探讨贞术调脂胶囊（FTZ）抑制去卵巢（OVX）小鼠骨丢失的作用机制。方法选取18只11周C57BL6/J雌性小鼠,平均分为假手术组（SHAM组）、OVX组和FTZ组。FTZ组在OVX基础上给予FTZ[1.55 g/(kg·d）]灌胃,SHAM组和OVX组以等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃,12周后收集小鼠左侧股骨、血清和粪便标本。左侧股骨行Micro-CT扫描;采用ELISA法检测血清中TNF-α、IL-10、IL-6、LPS和TRACP5b的含量;末次灌胃结束24 h后收集小鼠粪便,提取并检测粪菌总DNA,利用16S rRNA高通量肠菌基因测序技术,对标本中的细菌16S rRNA 基因V3-V4可变区进行定性分析和OUT分析。结果 与SHAM组相比,OVX组BV/TV、Tb.N、BMD和IL-10均显著性降低(P＜0. 05),Tb.Sp、TNF-α、IL-6、LPS和TRACP5b显著性增高（P＜0. 05）;与OVX组相比,FTZ组Tb.N和IL-10显著性增高（P＜0. 05）,Tb.Sp、TNF-α、IL-6和TRACP5b显著性降低（P＜0. 05）。在门水平,OVX组Firmicutes/Bacteroidota（F/B）率较SHAM组有增高趋势（P=0.310）,但无显著性差异,而与OVX组相比,FTZ组F/B率显著性降低（P=0.002）。在属水平,与SHAM组相比,Faecalibaculum和Coriobacteriaceae_UCG-002丰度在OVX组中显著减少（P=0.030,P=0.005）,Lachnoclostridium丰度在OVX组中显著增加（P=0.037）,而与OVX组相比,FTZ组Faecalibaculum和Coriobacteriaceae_UCG-002丰度显著增加（P =0.045,P=0.005）,Lachnoclostridium丰度显著减少（P=0.013）。结论 FTZ能够延缓去势小鼠骨量丢失,其机制可能是通过调节肠道菌群中Faecalibaculum、Coriobacteriaceae_UCG-002和Lachnoclostridium丰度实现的,且同时抑制炎性反应。     

重骨颗粒对强直性脊柱炎患者疾病活动及骨代谢的影响

目的 观察重骨颗粒对强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)患者疾病活动及骨代谢的影响。方法 将84例AS患者随机分成对照组和观察组,每组42例。对照组予以基础治疗,口服柳氮磺吡啶片联合塞来昔布胶囊,观察组在对照组的基础上加重骨颗粒口服,疗程均为12周。观察治疗前后巴氏AS疾病活动度指数(BASDAI)、AS疾病活动度评分(ASDAS)、巴氏AS功能指数(BASFI)和中医症状评分的变化,检测治疗前后C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、抑炎因子[白介素10(IL-10)]、促炎因子[白介素1β(IL-1β)、白介素17(IL-17)]、骨代谢指标[骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、血清β胶原降解产物(β-CTX)、I型前胶原氨基末端肽(PINP)]水平。结果 两组均无脱落病例,治疗后观察组ASAS20达标率83.33%,显著优于对照组的64.29%(χ²=3.941,P<0.05);ASAS50达标率为71.43%,显著...     

补肾健骨中药复方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织Leptin启动子甲基化的影响

目的观察去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织Leptin启动子甲基化,探索补肾健骨中药复方防治绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的分子机制。方法切除雌性Wistar大鼠双侧卵巢建立PMOP模型,实验大鼠分为4组:正常组、模型组、补肾健骨中药复方组、仙灵骨葆阳性对照组。给药14周后,X射线骨密度测定仪检测骨密度、显微镜观察股骨头石蜡切片HE染色显微形态结构、质谱法检测Leptin启动子甲基化。结果 (1)第1～6腰椎骨密度,模型组与正常组相比显著降低(P0.01);补肾健骨中药复方组、仙灵骨葆阳性对照组与模型组相比显著升高(P0.05)。(2)模型组与正常组相比,股骨头骨皮质骨板变薄,骨松质骨小梁明显变细,有些部位破坏、断裂,骨髓腔明显扩大;补肾健骨中药复方组、仙灵骨葆阳性对照组与模型组相比,股骨头显微形态结构病理改变明显改善。(3)骨组织Leptin启动子-493 bp～-19 bp甲基化水平,模型组与正常组相比Cp G19、Cp G22.23显著升高(P0.05);补肾健骨中药复方组(P0.01)、仙灵骨葆阳性对照组(P0.05)与模型组相比,Cp G19甲基化水平显著降低。结论补肾健骨中药复方通过降低骨组织Leptin启动子甲基化的分子机制,有效防治PMOP。