白首乌C21甾体苷诱导肝癌细胞凋亡的作用及其机制

研究白首乌C₂₁甾体苷对肝癌实体瘤细胞的凋亡作用及其机制。建立肝癌实体型(Heps)小鼠移植性肿瘤模型，随机分为模型组和C₂₁甾体苷各用药组，连续灌胃，10 d后脱颈椎处死小鼠，进行抑瘤率计算，对肿瘤组织进行电镜下观察，采用免疫荧光(AO/EB)测定肿瘤细胞凋亡，免疫组化染色检测bcl-2基因的表达。C₂₁甾体苷(10，20和40 mg·kg^-1)对小鼠移植性肝癌Heps有抑制作用，3个剂量组的抑瘤率分别为34.79%，47.08%和50.23%。C₂₁甾体苷(10，20和40 mg·kg^-1)可增加肿瘤细胞的凋亡，电镜下可见凋亡的形态学改变，并出现凋亡小体；免疫组化结果显示，bcl-2基因的表达与模型组比较明显降低(p<0.01)，但不同于凋亡结果的是高剂量组的阳性面积表达比中剂量略高。降低高表达的bcl-2基因从而促进肝癌细胞的凋亡，可能是C₂₁甾体苷抗肝癌的机制之一。     

华北白前中的C21甾体类化合物

从华北白前(Cynanchum hancockianum)干燥根的乙醇提取物中分离鉴定了6个C₂₁甾体化合物,其中白前甙元C(glaucogenin C,Ⅰ),白薇甙A(cynatratoside A,Ⅱ),白前甙元A(glaucogenin A,Ⅲ),脱水何拉得甙元(anhydrohirundigenin,Ⅳ)为已知化合物;华北白前甙元B(hancogenin B,Ⅴ),华北白前甙A(hancoside A,Ⅵ)为新化合物。提出了变型C₂₁甾体甙元质谱的裂解规律。药理实验发现化合物Ⅱ具有一定的抗肿瘤活性,化合物Ⅵ具有一定的抗内毒素作用。     

通光散藤茎的C21甾体成分

为了研究通光散藤茎中的C₂₁甾体类成分，采用不同的色谱方法对通光散藤茎乙醇提取物进行分离纯化，并用波谱学的方法鉴定化合物的结构。从氯仿部位共分离得到8个C₂₁甾体类化合物，其结构分别被鉴定为11α-O-tigloyl-17β-tenacigenin B (1)、 17β-tenacigenin B (2)、 tenacigenoside A (3)、 11α-O-2-methylbutyryl-12β-O-acetyl tenacigenin B (4)、 tenacissoside H (5)、 marsdenoside A (6)、 tenacissoside G (7)和tenacissoside I (8)。其中化合物1为新化合物。     

通光藤中两个新C21甾体苷类成分通光藤中两个新C21甾体苷类成分

目的研究中药通光藤的化学成分。方法用现代色谱技术分离化合物,用化学方法及现代光谱技术(IR,UV,MS,¹HNMR,¹³CNMR和各种2D-NMR技术)对所得化合物的结构进行鉴定。结果从云南昆明产通光藤茎中分离得到2个化合物,分别鉴定为通光藤苷J(tenacissosides J,I)和通光藤苷K(tenacissosides K,II)。结论化合物I和II均为新化合物。     

迷迭香酸诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用机制研究

摘 要 目的：研究迷迭香酸诱导HepG₂细胞凋亡的作用机制。方法: MTT法检测不同浓度的迷迭香酸作用于HepG₂细胞48 h后,对细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测不同浓度迷迭香酸分别作用于HepG₂细胞24 h及48 h后的细胞凋亡;Western Blotting法检测迷迭香酸作用HepG₂细胞48 h对P53和c-Myc蛋白表达的影响。结果: 12.50,25.00,50.00,100.00 μg·ml^-1浓度的迷迭香酸作用48 h后对HepG₂的生长有抑制作用,半抑制浓度（IC₅₀）为43.48 μg·ml^-1。对比不同浓度迷迭香酸作用HepG₂细胞24 h及48 h,当作用48 h时对HepG₂细胞的早期凋亡产生作用。不同浓度迷迭香酸作用于 HepG₂48 h后,c-Myc的表达随迷迭香酸浓度的增加而降低,P53的表达随迷迭香酸浓度的增加而增高。结论:迷迭香酸对HepG₂细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性,可通过对抑癌基因P53的激活及对原癌基因c-Myc蛋白的切割,促进 HepG₂细胞发生凋亡。     

黑鳗藤属植物C_(21)甾体苷类化学成分及其免疫作用研究进展

C21甾体苷是一类重要的活性成分,具有抗肿瘤、调节免疫等多方面药理作用,近年来已成为研究热点。黑鳗藤属植物富含各种C21甾体苷类成分,目前已从该属植物中分离得到大量C21甾体化合物。现综述国内外对黑鳗藤属植物C21甾体类成分及其免疫作用的研究进展。     

乌骨藤总苷对肺腺癌NCI-H1299细胞糖酵解、凋亡和自噬作用的影响

目的 探讨乌骨藤总苷通过Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物（KRAS）对肺腺癌细胞糖酵解、凋亡和自噬的影响。方法 体外培养NCI-H1299细胞,分为对照组、乌骨藤总苷低剂量组、乌骨藤总苷高剂量组、乌骨藤总苷+Vector组和乌骨藤总苷+KRAS组。对照组用正常培养基作用于细胞,乌骨藤低剂量组用终浓度为5 mg/ml的乌骨藤总苷作用于细胞,乌骨藤高剂量组用终浓度为20 mg/ml的乌骨藤总苷作用于细胞,乌骨藤总苷+Vector组先在细胞内转染入阴性对照载体,再用20 mg/ml的乌骨藤总苷作用于细胞,乌骨藤总苷+KRAS组转染入KRAS过表达载体后,用20 mg/ml的乌骨藤总苷作用于细胞。用qRT-PCR法检测各组细胞中KRAS mRNA的表达情况,用Western blot法检测各组细胞中KRAS蛋白的表达情况,用MTT法检测细胞增殖抑制率,用试剂盒检测各组细胞葡萄糖消耗量和乳酸含量,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用Western blot法检测各组细胞中凋亡和自噬相关蛋白的表达水平。结果 乌骨藤总苷低剂量组和乌骨藤总苷高剂量组KRAS表达水平、葡萄糖消耗量、乳酸含量、Bcl-2...     

乌骨藤总苷对SGC-7901、S_(180)、P_(388)肿瘤细胞的抑制作用研究

目的研究乌骨藤总苷对人胃癌细胞SGC-7901、肉瘤S180、淋巴白血病细胞P388的抑制作用。方法采用MTT比色法观察乌骨藤总苷对人胃癌细胞SGC-7901体外生长的影响;采用瘤体移植法将BALB/c裸鼠接种人胃癌细胞SGC-7901,通过计算肿瘤抑制率评价乌骨藤总苷对人胃癌细胞SGC-7901体内肿瘤生长抑制作用;采用腋窝皮下接种将昆明小鼠接种肉瘤S180,通过计算抑瘤率评价乌骨藤总苷对肉瘤S180体内肿瘤生长抑制作用;DBA/2小鼠腹腔接种淋巴白血病细胞P388,通过计算生命延长率评价乌骨藤总苷对淋巴白血病细胞P388体内生长抑制作用。结果乌骨藤总苷对人胃癌细胞SGC-7901有显著的体外抑制作用,并能显著抑制小鼠人胃癌细胞SGC-7901、小鼠移植S180、小鼠移植P388肿瘤生长。结论乌骨藤总苷具有一定抗癌活性,有望开发成抗癌的中药有效部位新药。     

岩藻黄素抗H2O2诱导WI-38细胞早衰的作用研究D*

目的：探讨岩藻黄素是否具有抑制H₂O₂引起的WI-38细胞早衰的活性。方法：WI-38细胞在添加岩藻黄素的培养基中培养一定时间后经H₂O₂处理诱导发生早衰,用MTT法检测细胞活力,SA-β-半乳糖苷酶染色法检测细胞内衰老相关的β-半乳糖苷酶活性。 结果：300 μM H₂O₂处理WI-38细胞20 min可成功建立早衰细胞模型。与空白对照组相比,H₂O₂处理组细胞活力明显降低,SA-β-半乳糖苷酶阳性细胞数明显增多。5 μM和10 μM岩藻黄素组细胞活力明显高于H₂O₂处理组,SA-β-半乳糖苷酶阳性细胞数较H₂O₂组明显减少。 结论：岩藻黄素能够抑制由H₂O₂处理引起的细胞早衰,具有一定的抗衰老作用。     

八角属植物中的C6-C3类化合物及其药理活性研究进展

八角属植物中富含C₆-C₃类化合物,结构类型多样,有苯丙素类、木质素类和独特新颖的植物醌类,并具有较好的抗炎、神经营养、抗癌和抗氧化等活性,药用开发前景广阔。本文根据国内外文献报道,对该属植物C₆-C₃类化合物及其药理活性研究进展进行综述,为进一步研究开发该属植物提供参考。     

杨梅醇与5-对氟苄氧基杨梅醇的制备及其对人肝癌HepG2细胞活性的影响

目的 体外观察杨梅醇与5-对氟苄氧基杨梅醇（myricanol 5-fluorobenzyloxy ether,5FEM）对人肝癌细胞HepG₂活性的影响。方法 制备杨梅醇与5FEM,杨梅醇（25,12.5,6.25 μg·mL^-1）、5FEM（25,12.5,6.25 μg·mL^-1）作用于HepG₂细胞,实时细胞分析系统记录96 h细胞指数,观察杨梅醇与5FEM对HepG₂细胞增殖和迁移的影响。结果 杨梅醇与5FEM对HepG₂细胞的增殖和迁移均有较好的抑制作用,且呈现较好的量效关系,相等剂量下,5FEM的作用优于杨梅醇。结论 杨梅醇与5FEM能有效抑制HepG₂细胞的增殖和迁移。     

高效液相色谱-光化学衍生法测定湖南产莲子中黄曲霉毒素G1、G2、B1、B2

目的对不同来源的湖南产莲子中黄曲霉毒素G_1、G_2、B_2、B_1进行高效液相色谱-光化学衍生法测定。方法采用高效液相色谱–光化学衍生法,采用岛津GL Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇–乙腈–水(35∶13∶52),柱温35℃;光化学衍生器(254 nm)激发波长λ_(ex)=360 nm,发射波长λ_(ex)=450 nm。结果黄曲霉毒素G_1、G_2、B_2、B_1分别在6.7～33.3、11.4～56.8、10.3～51.5、4.1～20.3 pg线性关系良好;平均回收率分别为98.07%、97.72%、96.11%、99.52%,RSD值分别为1.69%、1.40%、2.72%、1.34%(n=6)。9批莲子样品中,有6批未检出黄曲霉毒素,来自于农贸市场农户自存的2批次检出黄曲霉毒素B_1,实验室塑料袋包装储存1年的1批检出黄曲霉毒素B_1、B_2,但质量分数均低于法定标准限量。结论不同来源湖南产莲子中黄曲霉毒素质量分数均低于《中国药典》2020年版规定限量。该法测定结果准确、重复性良好,可为完善莲子安全性控制和质量标准提升提供实验依据。     

UFLC法测定复方丹参片中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及Rb1

目的 探索建立超快速液相色谱（UFLC）法测定复方丹参片中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁及Rb₁。方法 采用SHIMADZU Shim-pack XR-ODS Ⅲ（2.0 mm×75 mm, 1.6 μm）色谱柱;以乙腈-水作为流动相进行梯度洗脱;体积流量为0.4 mL/min;检测波长为203 nm;进样体积为3 μL。结果 三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁及Rb₁分别在0.025 7～0.257 0、0.101 2～1.012 0、0.104 4～1.044 0 μg与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为96.7%、98.1%、98.8%。结论 本方法在15min内可以将三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁及Rb₁有效分离,节省了大量人力和流动相的消耗,为中药的质量控制技术提供参考方法。     

The effects of fluoride on cell migration, cell proliferation, and cell metabolism in GH4C1 pituitary tumour cells

The consumption of drinking water rich in fluoride has toxic effects on the central nervous system. In cell biology research, fluoride is currently used as a phosphatase inhibitor. The aim of the present study was to evaluate the effect of fluoride on different physiological processes in GH₄C₁ pituitary tumour cells. We used a range of different fluoride concentrations, from levels below normal human serum concentrations (0.23 and 1.2 μmol/L) to those observed in chronically exposed persons (10.7 μmol/L) and above (107 and 1072 μmol/L). Treatment of 10.7 μmol/L fluoride resulted in a discrete induction of DNA synthesis, without a change in cell number. Cell migration, a behaviour stimulated by growth factors, was increased in cells treated with 2.4 μmol/L. At this fluoride concentration, changes in phosphorylation status of both cytoskeletal and cytosolic protein fractions, as well as in actin cytoskeletal arrangements were observed. The GH₄C₁ fluoride treated cells had significantly less cellular protein than control cells, suggesting an effect of fluoride on hormone secretion and protein synthesis in this endocrine cell. The bioreduction of MTT was significantly increased with a wide range of fluoride concentrations. With the highest fluoride concentration, 1072 μmol/L, all of the analysed parameters were significantly reduced, suggesting that this dose is highly toxic in GH₄C₁ cells. Our results show that biologically relevant concentrations of fluoride are capable of increasing cell migration in tumour cells, suggesting that exposure to fluoride could stimulate tumour invasion.     

HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B1、B2和B6含量

摘 要 目的:建立HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B₁、维生素B₂和维生素B₆含量的方法。方法: 采用Insteril ODS-3色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：0.01 mol·L^-1庚烷磺酸钠（含0.25%三乙胺,用冰醋酸调节pH至3.8)-甲醇（75∶25）,柱温30℃,检测波长为280 nm,流速：1.0 ml·min^-1。结果: 维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆分别在3.98～99.40 μg·ml^-1（r=0.999 7）、4.08～101.91μg·ml^-1（r=0.999 9）、2.08～52.00 μg·ml^-1（r=0.999 9）范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.18%、99.53%、99.27%,RSD分别为0.60%、0.67%、0.71%(n=9)。结论:本法简便、快速、准确,可用于复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B₁、维生素B₂和维生素B₆的含量测定     

乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传代后的基因序列研究

目的：研究乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK₂₁细胞上传代后的病毒基因序列,以深入控制乙型脑炎减毒活疫苗的安全性。方法：将乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK₂₁细胞上连续传代,选取第二代病毒（P2）、第五代病毒（P5）、第十五代病毒（P15）提取RNA,反转录为cDNA后,进行各代病毒全基因序列分析,分析与乙型脑炎病毒毒力密切相关的关键位点基因是否发生改变。结论：乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK₂₁细胞上传5代后,病毒E蛋白上关键基因第279位（E279）氨基酸由甲硫氨酸（M）突变为赖氨酸（K）。     

HPLC法测定四维钙片中维生素C、B1、B2的含量

目的：建立高效液相色谱法测定四维钙片中维生素C、维生素B1和维生素B2含量的方法.方法：采用SHISEIDOC18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以0.05％磷酸溶液（含0.005 mol·L-1己烷磺酸钠）-乙腈（88：12）为流动相,流速：1.0ml· min-1,检测波长：244 nm,柱温：30℃,进样量：20μm.结果：维生素C、维生素B1和维生素B2的线性范围分别为7.52～90.24 μg· ml-1（r=1.000 0）,1.32 ～15.82 μg·ml-1（r=1.000 0）和1.27～15.24μg·ml-1 （r=1.000 0）;平均回收率分别为101.63％、99.77％和100.25％,RSD分别为1.51％、1.48％和1.84％（n=9）.结论：本法操作简便,结果准确、可靠,可用于四维钙片中维生素C、B1、B2的含量测定.