鸡胚绒毛膜尿囊膜血管试验法用于评价化妆品眼刺激性的可行性研究

目的 研究鸡胚绒毛膜尿囊膜血管试验法（chorioallantoic membrane vascular assay,CAMVA）评价化妆品眼刺激性的可行性,并用改良后的方法对14种市售化妆品进行眼刺激性的评价。方法 通过控制样品的浓度、与鸡胚绒毛膜尿囊膜的接触时间,以及对评价体系的改良,尝试建立一套标准的CAMVA法评价化妆品眼刺激性的方法。结果 护肤类产品无刺激性,用后冲洗类、染发类产品的浓度、与鸡胚绒毛膜尿囊膜的接触时间均与刺激性大小成正比。在3%的浓度下,用后冲洗类产品的最佳接触时间为20 min,体内外试验结果一致性为90%（9/10）;染发类产品为5 min,体内外试验结果一致性为100%（2/2）。结合改良后的评价体系可做到刺激性分级,体内外试验结果一致性为用后冲洗类产品80%（8/10）,染发类产品50%（1/2）。结论 用CAMVA法可以对化妆品的眼刺激性进行评价,但实验条件和判定标准还需进一步优化。     

鸡胚绒毛尿囊膜血管试验与家兔眼刺激试验方法的比较

由于接触化学品和商用化合物的机会越来越多 ,人们逐渐意识到检测这些物质对人体毒性、刺激性或眼腐蚀性的重要性。而家兔眼刺激试验 (ｄｒａｉｚｅ试验 ) [1] ,早已被许多国际组织机构指定为检测化学物质对眼刺激程度的常规方法之一。但近年来该方法因其动物用量大 ,损伤兔子眼睛 ,遭到动物保护组织的指责。因此 ,许多国家已着手使用体外的试验系统来替代活体动物的试验方法。欧共体已要求各成员国修订现行有关化妆品试验法规[2 ] ,自 2 0 0 0年 7月 1日起禁止使用动物进行化妆品的检验 ,这些内容将作为进入ＷＴＯ所签定的双边协议的一个条…     

鸡胚尿囊膜绒毛膜试验替代兔眼刺激试验的研究

随着科学技术的发展以及迫于各种动物保护组织施加的社会压力等方面原因,国际社会尤其欧、美、日等发达工业国家对于化妆品安全性评价已趋向于向“3Rs原则[1]”转化,既减少(Reduction)、优化(Refinement)和替代(Replacement)。因此,为了适应我国加入WTO的形势,尽快开展与国际发     

鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型的应用

本文综述了鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型在药物促血管生成和抑制血管生成作用研究中的应用，对药物载体的选择及药物置入时间的选择等进行了介绍。     

鸡胚绒毛尿囊膜在血管生成活性研究中的应用

本文综述了鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型在药物促血管生成和抑制血管生成研究中的应用,对药物载体的选择及药物置入时间的选择等进行了介绍.     

莪术油对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管抑制作用研究

目的:探讨莪术油对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管形成的抑制作用.方法:制备鸡胚绒毛尿囊膜模型(CAM).水蒸馏法提取莪术油,稀释成不同浓度.平行设置NS对照(阴性)和沙利度胺片对照(阳性),每组分别8枚鸡胚.接种各药物后,37℃培养箱中继续孵育,每12小时观察一次,孵化5天.通过肉眼及体视显微镜观察,数码相机拍照留存,图像处理后进行血管面积值/面积比值测定,并作统计学处理.结果:莪术油鸡胚尿囊膜血管面积值/面积比值较生理盐水对照组显著增高,且有一定的量效关系趋势.结论:莪术油可剂量依赖性地抑制新生血管的作用,且效果明显.     

硫酸软骨素对鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成抑制作用

目的观察硫酸软骨素的血管生成效应。方法将 15g/L硫酸软骨素溶液 4 μl加到孵化 4d的鸡胚绒毛尿囊膜血管网上 ,2 4h后观察对血管生长的影响。同时设有同浓度的氢化可的松组和肝素组及三蒸水组作为对照组。结果硫酸软骨素使鸡胚绒毛尿囊膜血管发生大面积褪色 ,血管密度减低 ;氢化可的松组血管结构模糊 ,分枝发生断裂 ,颜色变浅 ,血管密度减少 ;肝素组血管生长旺盛 ,血管密度增加 ;正常对照组血管网清晰 ,呈叶脉状 ,放射状生长。结论硫酸软骨素有显著的抗血管生成活性。     

5种他汀类药物对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的影响

目的:观察5种他汀类药物对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生的影响,探讨他汀类药物是否具有独立于血脂调节作用以外的促进血管新生作用。方法:制备CAM模型,将不同浓度他汀类药物、重组牛碱性成纤维细胞生长因子和生理盐水分别通过载体加到CAM上,观察CAM特异性血管生长情况及血管数目变化。结果:不同浓度辛伐他汀(0.02,0.1,0.5,2.5,12.5μmol.L-1)中,当辛伐他汀浓度为0.1μmol.L-1时,CAM血管生成数量明显高于生理盐水对照组(P<0.05),与阳性对照组比较无统计学意义(P>0.05);而不同他汀类药物,即瑞舒伐他汀组(0.025μmol.L-1)、阿托伐他汀组(0.05μmol.L-1)、普伐他汀组(0.2μmol.L-1)、氟伐他汀组(0.4μmol.L-1),CAM血管生成数均明显高于生理盐水组(P<0.05),与阳性对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:常用5种他汀类药物均有促进CAM血管新生作用;不同浓度辛伐他汀对CAM的作用不同。提示他汀类药物促进血管新生的作用可能与药物剂量有关。     

珠母贝糖胺聚糖对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的探讨珠母贝糖胺聚糖的抗肿瘤作用机制。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型观察珠母贝糖胺聚糖单用及与5-氟尿嘧啶(5-FU)合用对CAM血管生成的影响。结果珠母贝糖胺聚糖CPG、PGⅠ、PGⅡ在实验所选剂量(0·5、5、50、500mg·L-1)下,无明显的直接抑制CAM血管生成作用;但CPG、PGⅠ、PGⅡ在实验所选剂量(5、50mg·L-1)下与5-FU(2·5mg·L-1)合用时,均能增敏5-FU的抑制CAM血管生成作用(P<0·01),并呈一定的剂量效应关系,其中PGⅡ增敏效果较好。结论珠母贝糖胺聚糖通过抑制肿瘤血管生成而对5-FU的抗肿瘤作用起增敏效果。     

丹酚酸B对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生作用的影响

目的探讨丹酚酸B对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的影响。方法将7日龄鸡胚制备鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)模型,随机分为6个组,分别为PBS(phosphatebuffer solution)对照组,丹酚酸B 4个剂量组(150、50、16.67、5.56 mg.L-1)及VEGF(vascular endo-thelial growth factor)组,培养3 d后时采集数据进行评价。结果丹酚酸B 150、50 mg.L-1组血管新生面积明显高于PBS(phosphate buffer solution)对照组(P<0.01,P<0.05)。结论丹酚酸B可明显促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生。     

三维重组眼角膜上皮模型法与兔眼刺激法对洗发水眼刺激性的比较与评价

目的 本文同时采用三维人重组角膜模型BioOcular?和现行的兔眼刺激Daize法,对市面常见的不同配方洗发水的眼刺激性进行评价与比较。方法 参考体外眼刺激实验(OECD指导原则492),采用人重组眼角膜上皮模型和兔眼刺激法对8种不同品牌洗发水的眼刺激性进行评价研究。结果 研究表明,与传统兔眼实验比较,采用皮肤模型的眼刺激法对8种洗发水有无刺激性的区分结果与兔眼刺激法基本一致。其中两种方法相关系数r达到0.955,具有很好的相关性。结论 与兔眼刺激法相比,人重组眼角膜上皮模型刺激实验所需的周期短、试验步骤相对简便、检测结果相对更加客观,人源重组组织与人眼刺激更为接近,是一种值得推荐的眼刺激替代检测方法。     

牛角膜混浊和渗透性试验方法与家兔法评价染发类化妆品眼刺激性的比较研究

目的 探讨在染发类化妆品备案审查中,用牛角膜混浊和渗透性试验(BCOP)代替家兔法(Draize 试验)进行眼刺激性评价的可能性。方法 分别用BCOP与Draize 试验对14种市售染发剂进行眼刺激性评价,并对评价结果进行比较。结果 对14种染发剂眼刺激性检测的结果表明,Draize 试验所得的刺激反应等级为微刺激性―轻刺激性,按现行评审标准,通过率为100%(14/14);BCOP所得的刺激反应等级为轻微刺激性―严重刺激性,与Draize法分类一致性达到78.6%(11/14),以体外刺激评分值(IVIS)≤25为限值,通过率为78.6%(11/14);以IVIS≤55为限值,通过率为85.7%(12/14)。结论 用BCOP代替Draize 试验对染发类化妆品进行眼刺激性评价可行。     

盐酸左氧氟沙星缓释滴眼液的毒性及刺激性反应

目的:进行盐酸左氧氟沙星缓释滴眼液的安全性评价。方法:采用琼脂扩散法,以褪色指数和溶解指数为指标得到的细胞反应级数评价该滴眼液的体外细胞毒性;20只小鼠一次性静脉注射盐酸左氧氟沙星缓释滴眼液(15mg·kg-1)进行急性毒性实验,观察14d内小鼠死亡数和体质量变化;12只兔敷贴滴眼液(1.5mg·d-1,连续用药7d)进行皮肤刺激性实验,观察末次用药24h后1、24、48、72h的红斑和水肿评分。结果:盐酸左氧氟沙星缓释滴眼液体外细胞毒性反应为1级;14d内小鼠无死亡且体质量变化没有明显差异;兔皮肤红斑和水肿评分均小于0.05,评价均为无刺激性。结论:盐酸左氧氟沙星缓释滴眼液具有良好的生物安全性。     

BCOP法评价染发类化妆品眼刺激性的研究

目的 尝试采用牛角膜混浊和渗透性试验 (bovine corneal opacity and permeability,BCOP)对染发类化妆品进行眼刺激性的评价。方法 通过对染发剂与牛角膜的接触时间、染发剂各组成成分、染发剂配制后存放时间等检测条件的摸索,尝试建立一套标准的BCOP法评价染发类化妆品眼刺激性的方法,并用该法对市售样品进行评价性检测。结果 染发剂与牛角膜接触时间与刺激性大小成正比;染发剂各组成成分的刺激性不同,其中作为氧化剂的组分(通常为B剂或2剂)均为无刺激性,染发剂中的A剂或1剂的刺激性各品种存在较大的差异;染发剂配制后存放一定时间,刺激性会下降。以配制后即刻给样,接触牛眼时间为10 min,对市场销售的13种染发类化妆品进行评价性检测,结果体外刺激得分为3.5~78.2,分类为轻微刺激性的有10种,中度刺激性的有1种,严重刺激性的有2种。结论 用BCOP法可以对染发类化妆品的眼刺激性进行评价。     

蜂胶提取物对口腔黏膜刺激和皮肤致敏作用的实验研究

目的初步评价蜂胶提取物的安全性,为其在临床应用提供依据。方法遵循各种评价标准,以家兔为模型进行一次给药和多次给药口腔黏膜刺激实验,以豚鼠为模型观察蜂胶的皮肤致敏作用。结果蜂胶提取物单次和多次给药刺激性研究结果表明,蜂胶对家兔正常黏膜无刺激性,不引起豚鼠出现过敏反应。结论蜂胶提取物外用治疗时安全可靠。     

Survey of ocular irritation predictive capacity using Chorioallantoic Membrane Vascular Assay (CAMVA) and Bovine Corneal Opacity and Permeability (BCOP) test historical data for 319 personal care products over fourteen years

The Chorioallantoic Membrane Vascular Assay (CAMVA) and Bovine Corneal Opacity and Permeability (BCOP) test are widely used to predict ocular irritation potential for consumer-use products. These in vitro assays do not require live animals, produce reliable predictive data for defined applicability domains compared to the Draize rabbit eye test, and are rapid and inexpensive. Data from 304 CAMVA and/or BCOP studies (319 formulations) were surveyed to determine the feasibility of predicting ocular irritation potential for various formulations. Hair shampoos, skin cleansers, and ethanol-based hair styling sprays were repeatedly predicted to be ocular irritants (accuracy rate = 0.90-1.00), with skin cleanser and hair shampoo irritation largely dependent on surfactant species and concentration. Conversely, skin lotions/moisturizers and hair styling gels/lotions were repeatedly predicted to be non-irritants (accuracy rate = 0.92 and 0.82, respectively). For hair shampoos, ethanol-based hair stylers, skin cleansers, and skin lotions/moisturizers, future ocular irritation testing (i.e., CAMVA/BCOP) can be nearly eliminated if new formulations are systematically compared to those previously tested using a defined decision tree. For other tested product categories, new formulations should continue to be evaluated in CAMVA/BCOP for ocular irritation potential because either the historical data exhibit significant variability (hair conditioners and mousses) or the historical sample size is too small to permit definitive conclusions (deodorants, make-up removers, massage oils, facial masks, body sprays, and other hair styling products). All decision tree conclusions should be made within a conservative weight-of-evidence context, considering the reported limitations of the BCOP test for alcohols, ketones, and solids.     

BioOcularTM角膜上皮模型ET50法在化妆品体外眼刺激评价中的应用

目的 采用国内生产的BioOcular?三维人源重组角膜上皮模型,对市面常见的几种洗发水和面霜的眼刺激性进行比较,通过该方法评价不同配方的化妆品在眼刺激性上的强弱。方法 采用三维人源重组角膜上皮模型BioOcular?模型 ET50法对不同品牌洗发水和面霜的眼刺激性进行比较研究,区分不同配方产品的眼刺激性强弱等级。结果 在同样实验条件下,洗发水和面霜表现出对三维人源重组角膜不同的刺激程度,不同配方品牌的洗发水的刺激程度也有很大差别。该方法可对化妆品的眼刺激性强弱程度进行很好的区分。结论 采用三维人源重组角膜上皮模型的ET50法是一种评价不同配方化妆品以及原料的眼刺激性的差异的快速替代检测方案。     

HPLC法测定萘敏维滴眼液中苯扎溴铵含量

目的:建立萘敏维滴眼液中苯扎溴铵含量的测定方法。方法:采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,以0.005mol·L-1的醋酸铵溶液-乙腈(35:65)为流动相,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,检测波长为214nm,采用外标法进行计算。结果:在49.5~495.0μg·mL-1的浓度范围内线性良好,r=0.9999,苯扎溴铵的回收率为100.99%,RSD2%。结论:本法测定萘敏维滴眼液中防腐剂苯扎溴铵具有简便、灵敏、重现性好的优点,可用于测定萘敏维滴眼液中苯扎溴铵的含量。     

Investigation of ingredient interactions in cosmetic formulations using isolated bovine corneas

The purpose of this paper is to report on use of a modified bovine cornea opacity and permeability assay (BCOP) to test the effects of several cosmetic formulations on eye-derived tissue in vitro. The results from these studies suggest that a BCOP protocol using prolonged exposure and repeated treatments may be useful for screening the eye effects of cosmetic formulations. Further work will be required, however, before the model is ready for formal validation. This series of experiments also provides an example of where the toxicity of one ingredient was significantly changed by its interaction with other ingredients in a mixture. As it was not possible to predict the highly reactive nature of the formulation in vitro based on an evaluation of ingredient toxicity data alone, this case illustrates the importance of obtaining adequate safety testing data on innovative mixtures of cosmetic ingredients before human exposure is allowed.