染料溶剂红207的体外致突变风险评价

目的 使用基于鼠伤寒沙门氏菌的Ames波动试验和小鼠淋巴瘤细胞（L5178Y）的体外Pig-a基因突变试验评价新型染料溶剂红207的碱基突变风险。方法 不同质量浓度的溶剂红207（0.625~10.000 μg/mL）分别与TA98和TA100混合于96孔培养板,在37℃条件下作用72 h后判断其对突变菌落数的影响。在优化后的体外L5178Y细胞Pig-a基因突变实验中,溶剂红207（2.5~20.0 μg/mL）分别与L5178Y细胞在有或无S9代谢活化条件下作用24 h或4 h,于给药后第8天评价其是否可诱导哺乳动物细胞Pig-a基因的突变频率增加。结果 无和有S9代谢活化条件下,溶剂红207可导致TA98和TA100回复性突变孔数显著增加（P<0.05、0.01、0.001）,且存在浓度效应相关性,代谢活化后增加更为明显。在非S9代谢活化条件下,溶剂红207各浓度组Pig-a基因突变率与阴性对照组比较无显著性差异;在S9代谢活化条件下,溶剂红207质量浓度范围为2.5~20 μg/mL时,可导致Pig-a基因突变率显著增加（P<0.01、0.001）,且存在浓度效应关系。结论 首次使用体外高通量试验方法评价溶剂红207的致突变风险,发现其存在体外致突变性且经I相代谢活化后致突变性进一步增强。     

茜素型蒽醌化合物体外Pig-a基因突变性试验研究

目的 对具有相同母核结构的7种茜素型蒽醌化合物开展体外Pig-a基因突变试验，分析不同茜素型蒽醌化合物取代基结构与其致突变性的关联。方法 小鼠淋巴瘤细胞L5178Y（tk^+/--3.7.2.C）分别与系列浓度的茜草素、异茜草素、甲基异茜草素、羟基茜草素、甲基异茜草素-1-甲醚、茜草素-1-甲醚和光泽汀作用4 h（有S9）或24 h（无S9），给药24 h后应用细胞计数仪进行计数，计算细胞相对倍增速率（RPD）评价受试物细胞毒性；细胞培养8 d后经APC-anti-CD45和PE-antiCD90.2抗体孵育后，使用流式细胞仪检测细胞突变（CD45⁺CD90.2^-）率。结果 所有受试物在有或无代谢活化条件下所设浓度组RPD均大于50%，未见明显细胞毒性作用，可排除试验中假阳性结果。在无S9代谢活化条件下，光泽汀（16 μg· mL^-1）组、羟基茜草素（10 μg· mL^-1）组、甲基异茜草素-1-甲醚（31.25 μg·mL^-1）组Pig-a基因突变率与溶媒对照组比较显著升高（P<0.05、0.01、0.001）；在有S9代谢活化条件下，光泽汀（4、8 μg· mL^-1）、羟基茜草素（10 μg· mL^-1）、茜草素-1-甲醚（3.75、15.00 μg· mL^-1）、甲基异茜草素（12.5、25.0、50.0、100.0 μ g · mL^-1）、甲基异茜草素-1-甲醚（15、30、60 μ g · mL^-1）、异茜草素（2.50、5.00 μg·mL^-1）组Pig-a基因突变率与溶媒对照组比较显著升高（P<0.05、0.01、0.001）。结论 羟基取代基所在位点是茜素型蒽醌化合物致突变性强弱的决定性因素，其体内致突变性有待进一步确证。     

基于体外Pig-a基因突变试验的大黄素型蒽醌致突变风险评价

目的 对相同母核结构的8种大黄素型蒽醌类化合物开展体外Pig-a基因突变试验，分析不同大黄素型蒽醌结构与致突变性的关联。方法 L1578Y细胞分别与系列浓度的大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚、大黄酸、羟基大黄素、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷作用4 h（有S9）或24 h（无S9），给药24 h后应用细胞计数板进行计数，计算细胞相对倍增速率（RPD）评价受试物细胞毒性；细胞表达8 d后经APC-anti-CD45和PE-anti-CD90.2标定后，使用流式细胞仪检测突变细胞（CD45^＋CD90^－）发生率。结果 所有受试物在有或无S9代谢活化条件下所设浓度组RPD均大于50%，未见明显细胞毒性作用，可排除试验中假阳性结果。在非S9代谢活化条件下芦荟大黄素25 μg·mL^-1组Pig-a基因突变率与溶媒对照组比较显著升高（P<0.001）； S9代谢活化条件下，与溶剂对照组比较，大黄素50 μg·mL^-1组，羟基大黄素6.25、12.5、25 μg·mL^-1组，大黄酚25、50、100 μg·mL^-1组和大黄酸12.5、25、50 μg·mL^-1组Pig-a基因突变率显著升高（P<0.05、0.01、0.001）。结论 羟基取代基的多寡及所在位点是蒽醌类化合物致突变性强弱的决定性因素，其体内致突变性及致癌性作用仍需进行大量体内研究证实。     

衍生化法分离（2R，4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯酒石酸盐手性异构体

目的 建立衍生化法分离（2R,4R）-4-甲基-2-哌啶甲酸乙酯酒石酸盐（MPFET）3种手性异构体。方法 以2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（GITC）为柱前衍生化试剂,对MPFET手性异构体进行分离,并对衍生化条件进行优化。采用Venusil AQ C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱作为固定相进行分离、监测和定量。以0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调pH至3.6）-乙腈（60∶40）为流动相,体积流量1.5 mL/min进行等度洗脱,采用紫外检测器,检测波长266 nm;柱温30℃;进样量20 μL。结果 MPFET与2S,4S-异构体分离度为1.76。2S,4R-异构体的线性范围为1.500～8.999 μg/mL,2R,4S-异构体的线性范围为0.255 2～1.531 0 μg/mL,2S,4S-异构体的线性范围为0.250 1～75.000 0 μg/mL,MPFET的线性范围为0.250 1～600.100 0 μg/mL,回收率均在90%～108%内,RSD均不大于3.0%。结论 柱前衍生化法分离MPFET中3种手性异构体,专属性强、准确度高、灵敏度高、重复性好,可用于MPFET手性异构体的分离和质量控制。     

BRAF V600E基因突变与甲状腺乳头状癌远处转移及预后的关系

目的 研究BRAF V600E基因突变能否成为乳头状甲状腺癌（PTC）预后相关分子标志物，从而更有利于PTC的个体化治疗。方法 收集远处转移的高分化乳头状甲状腺癌患者的肿瘤组织标本共30例，运用扩增受阻突变系统（ARMS）法进行BRAF基因检测。结果 BRAF基因突变率为36.67%（11/30），均为V600E突变；BRAF V600E基因突变与患者性别、有无淋巴结转移、远处转移情况、肿瘤病理类型及大小均无明显相关性（P>0.05），而与患者年龄（≥45岁）显著相关（P=0.025）；BRAF突变型患者的无进展生存时间（PFS）更长（P=0.05）。结论 BRAF突变型远处转移高分化乳头状甲状腺癌患者可能预后更好。     

血脂异常患者ApoE和SLCO1B1基因多态性与阿托伐他汀调脂治疗后血脂和肝功能的相关性

目的 研究血脂异常患者载脂蛋白（ApoE）、有机阴离子转运蛋白家族成员1B1（SLCO1B1）基因多态性与阿托伐他汀调脂治疗后血脂、肝功能的相关性。方法 选取2020年1月—2023年9月就诊于沧州市人民医院的128例高脂血症患者,阿托伐他汀治疗至少4周,检测ApoE、SLCO1B1基因和血脂、肝功能指标,分析其因型与调脂疗效、肝功能指标关系。结果 阿托伐他汀治疗后,ApoE基因表型E2组三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平均较治疗前改善,E3组总胆固醇（TC）、HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平均较治疗前改善,E4组HDL-C水平均较治疗前改善,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,ApoE基因表型各组丙氨酸转氨酶（ALT）差异无统计学意义,仅E3组谷氨酰转移酶（GGT）差异有统计学意义（P＜0.05）。阿托伐他汀治疗后,SLCO1B1基因表型I型的TC、TG、HDL-C、LDL-C均较治疗前改善,Ⅱ型HDL-C较治疗前改善,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后,SLCO1B1基因表型各组ALT、GGT差异无统计学意义。结论 临床使用阿托伐他汀时,可检测ApoE、SLCO1B1基因多态性评估降脂疗效,实现阿托伐他汀个体化用药。     

HPLC法测定安立生坦中R异构体

目的 建立HPLC法测定安立生坦中R异构体的方法。方法 采用HPLC法, 用硅胶键合蛋白质型手性色谱柱ULTRON ES-OVM(150 mm×4.6 mm, 5 μm);以0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至4.0)-乙腈(80:20)为流动相;检测波长220 nm;柱温30 ℃;体积流量为1.0 mL/min;进样体积20 μL。结果 安立生坦R异构体在0.501～4.008 μg/mL与峰面积线性关系良好(r=0.999 3), 平均回收率为98.62%, RSD值为2.82%(n=12)。结论 本法操作简便快速, 结果准确可靠, 可用于安立生坦中R异构体的控制。     

NUDT15c.415C>T和TPMT*3C基因多态性检测方法的比较与临床应用

目的 建立准确、快速、经济的方法,检测NUDT15 c.415C>T和TPMT*3C基因多态性,探讨临床应用价值。方法 收集2017年5月-2018年5月期间福建汉族患者服用硫唑嘌呤2周以上的血清样本,提取DNA或白细胞后分别采用PCR-RFLP法、PCR-Sanger测序法和荧光定量PCR法对NUDT15 c.415C>T和TPMT*3C进行基因多态性分型,比较这3种方法的准确性、简便性及经济性。根据白细胞值分组,结合临床资料,探讨基因多态性等因素与硫唑嘌呤致白细胞减少的相关性。结果 共纳入129例患者,其中硫唑嘌呤致白细胞减少15例（11.6%）。3种方法的基因多态性检测结果一致,TPMT*3C未发现突变纯合子。携带NUDT15c.415C>T突变等位基因者服用硫唑嘌呤致白细胞减少的风险高于携带野生等位基因者（OR=6.2,95%CI：2.5~15.4,P=0.000 054）,而携带TPMT*3C突变等位基因者与野生等位基因者出现白细胞减少比例并无显著性差异（P=0.393）。NUDT15c.415C>T基因多态性预测白细胞减少敏感度为53.3%,特异度为85.1%,ROC曲线AUC为0.69。结论 3种方法都可用于临床检测NUDT15 c.415C>T和TPMT*3C基因多态性。PCR-RFLP法不需要专用试剂盒,也不需要昂贵的仪器设备,成本较低,过程简单,易于操作,特别适合条件有限的单位开展工作。福建汉族患者在服用硫唑嘌呤前进行NUDT15c.415C>T基因多态性检测比TPMT*3C更具临床价值。     

纳武利尤单抗治疗肺癌的疗效及与IFN-γ基因突变的相关性研究

目的 探讨纳武利尤单抗治疗肺癌的疗效及对患者预后的影响,并探讨疗效与IFN-γ基因突变的相关性。方法 选取邢台医学高等专科学校第二附属医院2020年1月—2021年6月收治的肺癌患者共150例作为研究对象,根据治疗方案不同,将150例患者分为对照组和试验组,每组各75例;纳入同期邢台医学高等专科学校第二附属医院行健康体检的人群100例,设为健康对照组。对照组采用多西他赛进行化疗,试验组应用纳武利尤单抗进行治疗。比较治疗6周后两组疗效,观察用药治疗期间不良反应发生情况,随访记录患者生存情况,分析肺癌患者与健康对照人群IFN-γ基因+874A/T单核苷酸多态性,并分析IFN-γ+874A/T基因多态性与纳武利尤单抗疗效的关系。结果 试验组治疗总有效率为28.0%,高于对照组的14.6%,两组比较差异显著（P＜0.05）;试验组不良反应中脱发、贫血、肌肉酸痛、中性粒细胞减少情况均显著少于对照组（P＜0.05）;试验组疲倦、胃肠道反应发生情况与对照组比较差异无统计学意义（P＜0.05）;随访15个月后,试验组患者中位生存时间为2.500个月（95%CI：2.120～10.425）;对照组患者中位生存时间为4.264个月（95%CI：2.021～11.230）。Log-rank检验显示,两组患者生存情况无显著差异（χ²＝3.84,P=0.912）;肺癌患者IFN-γ+874TT基因型频率和T等位基因频率分别为25.33%、48.6%,显著高于健康对照人群的6.0%、22.0%（P＜0.05）;试验组75例患者中15例有效（20.0%）,有效患者中TT基因型与T等位基因占比与无效患者基因型比较,差异显著（P＜0.05）。结论 纳武利尤单抗能够提升肺癌治疗效果,并且具有较高的安全性;IFN-γ+874A/T基因多态性与纳武利尤单抗治疗肺癌疗效可能有关。     

中国南海山海绵Mycale sp.的化学成分研究

目的 对采自中国南海山海绵Mycale sp.的化学成分进行研究。方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、高效液相色谱等多种色谱学分离手段,对山海绵Mycale sp.的乙酸乙酯萃取层进行分离纯化;应用现代波谱技术,结合理化性质与文献报道对化合物进行结构鉴定;用Cell Counting Kit-8（CCK-8）法对化合物进行体外人乳腺癌细胞株MCF-7及人肺癌细胞株PC9细胞生长抑制活性进行测试。结果 共分离得到10个化合物,分别鉴定为：环（脯-异亮）二肽[cyclo-（Pro-Ile）]（1）,环（脯-亮）二肽[cyclo-（Pro-Leu）]（2）,环（异亮-亮）二肽[cyclo-（Ile-Leu）]（3）,环（苯丙-脯）二肽[cyclo-（Phe-Pro）]（4）,环（苯丙-缬）二肽[cyclo-（Phe-Val）]（5）,环（苯丙-亮）二肽[cyclo-（Phe-Leu）]（6）,环（苯丙-异亮）二肽[cyclo-（Phe-Ile）]（7）,2''-deoxythymidine（8）,胸腺嘧啶（thymine）（9）,5-hydroxy-3,4-dimethy-5-pentyl-2（5H）-furanone（10）。经体外活性筛选发现,这些化合物对MCF-7及PC9未显示明显的生长抑制活性。结论 化合物 1、2、4、5、6、7和10 均为首次从该属海绵中分离得到,本研究首次对化合物 1 ~ 10 的抗肿瘤活性进行了评价。     

大黄、枳实、厚朴不同炮制品对小承气汤中药效组分的影响

目的研究大黄、枳实、厚朴饮片变化对小承气汤药效组分的影响,以期为临床的合理应用和饮片的质量标准提供参考。方法采用HPLC法分别测定各类成分。大黄游离蒽醌类(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–0.1%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长254 nm。大黄结合蒽醌类(番泻苷B、番泻苷A):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;柱温30℃;进样量10μL;检测波长340 nm。枳实黄酮苷类(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–水;梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;柱温40℃;进样量10μL;检测波长283 nm。厚朴木脂素类成分(和厚朴酚、厚朴酚):Syncronis C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.7 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长294 nm。结果小承气汤配伍剂量(大黄12 g–炒枳实9 g–姜厚朴6 g)不变,大黄、枳实、厚朴饮片改变时,小承气汤药效组分总量变化规律为:大黄–枳实–姜厚朴酒大黄–炒枳实–姜厚朴熟大黄–炒枳实–姜厚朴大黄炭–炒枳实–姜厚朴≈小承气汤大黄–炒枳实–厚朴,变化率分别为酒大黄组(6.561%)、熟大黄组(4.222%)、大黄炭组(0.118%)、枳实组(30.186%)、厚朴组(-11.218%)。除大黄炭组外,其余组的药效组分总量皆明显变化,其中枳实组变化最明显。结论同一味药材的不同炮制品在小承气汤处方中药效组分不同,对其他药味的影响亦不同,在小承气汤处方配伍中不可随意替代。     

Comparison of Curcuma sp. in Yakushima with C. aeruginosa and C. zedoaria in Java by trn K gene sequence, RAPD pattern and essential oil component

As the result of a comparison of Curcuma sp. (Gajutsu in Japanese) in Yakushima Island, Japan, with Curcuma aeruginosa and C. zedoaria in Java, Indonesia, by trnK gene sequence, random amplified polymorphic DNA (RAPD) pattern and essential oil component, it is indicated that Curcuma sp. in Yakushima is more closely related to C. aeruginosa than to C. zedoaria.     

GSTP1、GSTM1基因多态性与顺铂导致骨髓抑制的相关性研究

目的考察顺铂致骨髓抑制与谷胱甘肽硫转移酶P1(GSTP1)和谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)基因多态性的关系。方法用病例对照研究的方法考察以顺铂为主要化疗方案的100例癌症初治肿瘤化疗患者基因多态性与骨髓移植的相关性,白细胞计数和血小板的数量为指标判断是否发生了骨髓抑制以及骨髓抑制程度。提取DNA扩增测序法判断GSTP1、GSTM1基因型。结果 GSTP1的3种基因型AA、AG、GG型均存在,并且在62例发生骨髓抑制的病例中,GSTP1 AG/GA型的患者的分布明显高于GSTP1 AA型患者。GSTM1包含缺失(-)和非缺失(+)2种基因型,100例病例中GSTM1(+)少于GSTM1(-)。Logistic分析结果表明GSTP1 AG/GG型是顺铂致骨髓抑制的独立危险因素,GSTM基因缺失虽不是顺铂致骨髓抑制的独立危险因素,但能促进GSTP1 AG/GG型的作用,导致顺铂致骨髓抑制进一步加重。结论顺铂导致的骨髓抑制程度与GSTP1基因多态性相关。     

柴胡属饮片中藏柴胡掺伪检测方法研究

目的 以Nepasaikosaponin K为指标,建立柴胡属饮片中藏柴胡掺伪检测方法。方法 采用高效液相色谱-串联质谱技术（HPLC-MS/MS）,电喷雾负离子多反应监测模式,以m/z 943.6→635.5、m/z 943.6→797.4、m/z 943.6→781.5为特征离子对,对北柴胡、南柴胡、锥叶柴胡、竹叶柴胡和藏柴胡等5种常见柴胡属饮片中Nepasaikosaponin K含量进行检测。进一步考察Nepasaikosaponin K定量离子对峰面积与藏柴胡掺伪比例之间线性关系,建立柴胡属饮片中藏柴胡掺伪比例计算公式,并以Nepasaikosaponin K为指标,开展藏柴胡掺伪限度研究。结果 Nepasaikosaponin K在藏柴胡中含量约为其他种柴胡的25~140倍。藏柴胡掺伪比例为0% ~ 100%范围内的混合样品中,定量离子对m/z 943.6→635.5峰面积与掺伪比例之间的线性关系良好。不同柴胡属掺伪模拟样品的计算掺伪量与实际掺伪量偏差在0.6%~1.4%之间。3批市售疑似掺伪北柴胡饮片中藏柴胡掺伪比例分别为14%、16%和27%。结论 该分析方法专属性强,灵敏度高,测定结果准确,为柴胡饮片中藏柴胡的掺伪情况筛查与评价提供依据,同时为其他中药饮片的掺伪情况分析提供新的思路与方法。     

A novel compound N,N-(Z)-N-(E)-tri-p-coumaroylspermidine isolated from Carthamus tinctorius L. and acting by serotonin transporter inhibition

Safflower, the dry flower of Carthamus tinctorius L., has long been applied for empirically treating cerebral ischemia and depression in traditional Chinese medicine. Pathogenesis of major depression involves monoaminergic transmission. The present study assessed whether safflower or its isolate would be effective in functionally regulating monoamine transporter using in vitro screening cell lines. We discovered that safflower insoluble fraction significantly inhibited serotonin uptake in Chinese hamster ovary cells stably expressing serotonin transporter (i.e. S6 cells). This fraction went through an activity-guided isolation and an active ingredient was obtained, which was subsequently elucidated as a novel coumaroylspermidine analog N¹,N⁵-(Z)-N¹⁰-(E)-tri-p-coumaroylspermidine using NMR techniques. Pharmacologically, this compound potently and selectively inhibited serotonin uptake in S6 cells or in synaptosomes, with IC₅₀ of 0.74 ± 0.15 µM for S6 cells or 1.07 ± 0.23 µM for synaptosomes and with a reversible competitive property for the 5HT-uptake inhibition. The potency of it for 5HT uptake was weaker than that of fluoxetine whereas efficacy generally similar for both. Animals treated with this testing compound showed a significant decrease in synaptosomal 5HT uptake capacity. Thus, N¹,N⁵-(Z)-N¹⁰-(E)-tri-p-coumaroylspermidine is a novel serotonin transporter inhibitor, which could improve neuropsychological disorders through regulating serotoninergic transmission.     

滇南金线兰的植物形态和显微鉴定

目的 对滇南金线兰进行生药鉴定,明确其原植物形态和显微特征。方法 采用生药学鉴定方法,观察滇南金线兰的原植物形态、组织构造及粉末显微特征。结果 叶片呈卵形或卵状披针形,具金红色叶脉,花不倒置,唇瓣黄色,呈Y字形,前部明显扩大并2裂,裂片狭长圆形或狭倒披针形,中部收狭成长10 mm左右、其边缘具狭翅。显微结构中,根、茎横切面中皮层明显,具草酸钙针晶、黏液细胞等;叶横切面上表皮细胞乳突状,下表皮气孔类型多样,以不定式气孔为主。粉末中可见草酸钙针晶和导管。结论 滇南金线兰的生药鉴定为其资源开发利用提供了参考依据。     

甘草配伍大戟的体外肝毒性研究

目的 研究甘草和大戟配伍的体外肝毒性。方法 采用显微观察法和MTT法检测不同浓度的甘草单煎液、大戟单煎液、甘草-大戟合煎液和甘草-大戟单煎混合液对人肝癌细胞HepG2增殖的影响,并比较大戟单煎液、甘草-大戟合煎液和甘草-大戟单煎混合液相当浓度下细胞毒性的大小。结果 大戟单用及大戟与甘草配伍均有细胞毒性,且呈剂量相关性;与大戟单煎液相比,甘草-大戟单煎混合液细胞毒性无明显差异,甘草-大戟合煎液细胞毒性减小。结论 甘草和大戟配伍导致大戟的体外肝毒性减小。     

中药鹿茸草的研究进展

鹿茸草始见于《植物名实图考》,是玄参科植物绵毛鹿茸草(Monochasma savatier Franch.)或沙氏鹿茸草(Monochasma sheareri Franch.ex Maxim.)的全草,具有清热解毒、祛风止痛、凉血止血等多种功效.本文利用CNKI、PubMed和SciFinder以鹿茸草(Monoc...