脑缺血/再灌注中柴胡皂苷d联合黄芩苷介导PARP-1对Th1/Th2平衡的影响

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后给予柴胡皂苷d联合黄芩苷能否通过调控二磷酸腺苷核糖多聚酶-1(PARP-1)影响Th1/Th2细胞平衡进而发挥脑保护作用。方法将420只大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组、PJ34组、柴胡皂苷d组、黄芩苷组、柴胡皂苷d+黄芩苷组,每组60只。除正常组、假手术组外,其他组均采用改良Longa线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。术后2 h,PJ34组、柴胡皂苷d组、黄芩苷组、柴胡皂苷d+黄芩苷组分别给予相应药物腹腔注射,正常组、假手术组、模型组给予等量生理盐水腹腔注射,均1次/d。于干预后24 h检测各组缺血脑组织体积,于干预后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h分别检测各组缺血脑组织中PARP-1聚合体蛋白表达量及INF-γ、IL-4含量,计算INF-γ/IL-4比值。结果各药物干预组的缺血脑组织体积均明显小于模型组(P均0.05),柴胡皂苷d+黄芩苷组缺血脑组织体积明显小于柴胡皂苷d组和黄芩苷组(P均0.05);干预后各时间点模型组PARP-1蛋白表达量及INF-γ/IL-4比值均明显高于假手术组及正常组(P均0.05),各药物干预组PARP-1蛋白表达量及INF-γ/IL-4比值均明显低于模型组(P均0.05),且各时间点柴胡皂苷d+黄芩苷组PARP-1蛋白表达量及INF-γ/IL-4比值均明显低于柴胡皂苷d组和黄芩苷组(P均0.05),但柴胡皂苷d+黄芩苷组与PJ34组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论柴胡皂苷d联合黄芩苷可能通过抑制PARP-1表达,维持Th1/Th2细胞平衡,从而实现对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

通脉舒络胶囊对缺血性中风大鼠Th17细胞介导炎症反应的影响

目的:观察通脉舒络胶囊对大脑中动脉栓塞大鼠外周免疫中Th17细胞亚群功能的影响。方法:将120只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、通脉舒络低剂量组、通脉舒络中剂量组、通脉舒络高剂量组。除假手术组外,其余四组大鼠采用大脑中动脉栓塞制备脑缺血模型。各组大鼠分别于脑缺血再灌注后1、3、7、14 d进行神经功能缺损评分,HE染色观察各组大鼠缺血脑组织病理形态变化,ELISA法测定脑、脾脏中Th17细胞特异性转录因子RORγt及其分泌的IL-17含量。结果:给药治疗后,与假手术组相比,通脉舒络各剂量组大鼠神经功能缺损评分均降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。给药治疗后,通脉舒络各剂量组大鼠海马组织炎症细胞损伤现象有所缓解,细胞排列较整齐,间质水肿程度减轻,且大鼠脑和脾脏内RORγt、IL-17含量低于模型组,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:通脉舒络胶囊可抑制脑缺血后局部脑组织及外周脾脏的免疫炎症反应,抑制炎症细胞因子产生,改善缺血性中风引起的Th17细胞亚群功能失衡,发挥神经保护作用。     

枸芪复肾丸对IgA肾病模型大鼠Th1/Th2影响的研究

目的探讨枸芪复肾丸对IgA肾病的疗效及对IgAN模型大鼠Th1/Th2的影响。方法 Wistar大鼠72只,随机分为空白组、枸芪复肾丸高、中、低剂量组、洛汀新组、模型组。采用BSA口服和LPS尾静脉注射法建立IgAN大鼠模型。8周后观察大鼠各时相UTP、尿红细胞;检测血清IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10。结果治疗组大鼠UTP及尿RBC均下降,枸芪复肾丸中剂量组优于洛汀新组(P0.05);给药后治疗组大鼠IL-2、INF-γ升高,IL-4、IL-10下降,Th1/Th2失衡状态明显纠正(P0.05)。结论枸芪复肾丸能有效减轻IgA肾病大鼠蛋白尿、血尿;IgA肾病模型大鼠经给药后IL-2、INF-γ升高,IL-4、IL-10下降,纠正Th1/Th2失衡。     

针灸对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2免疫平衡的影响

目的:探讨针灸对溃疡性结肠炎(UC)大鼠Th 1/Th 2免疫平衡的影响。方法:SD大鼠随机分为模型组、隔药灸组、电针组,每组10只,并另选10只正常大鼠作为对照组。采用免疫学方法并加局部刺激建立大鼠UC模型。隔药灸组、电针组选取"天枢"(双)和"气海"进行隔药灸或电针治疗,连续治疗14d。采用定量PCR法检测结肠组织中干扰素(INF)-γ、白介素(IL)-12、IL-4和IL-10mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附法检测结肠组织中INF-γ、IL-12、IL-4和IL-10的含量;采用流式细胞术分析结肠组织细胞中CD4~+INF-γ~+/CD 4~+IL-4~+的比值。结果:与对照组比较,模型组大鼠结肠组织中INF-γ、IL-12mRNA和含量显著升高(P0.05),IL-4、IL-10mRNA和含量显著下降(P0.05);隔药灸组和电针组大鼠结肠组织INF-γ、IL-12mRNA和含量显著低于模型组(P0.05),IL-4、IL-10mRNA和含量显著高于模型组(P0.05)。模型组结肠组织中CD 4~+INF-γ~+/CD 4~+IL-4~+的比值显著高于对照组(P0.05);与模型组比较,隔药灸组和电针组CD4~+INF-γ~+/CD 4~+IL-4~+比值显著下降(P0.05)。隔药灸组和电针组的各项指标比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:隔药灸和电针均能显著改善UC模型大鼠炎性反应,通过下调结肠组织中INF-γ和IL-12水平,上调IL-4和IL-10水平从而保持Th 1/Th 2细胞间平衡,进而改善免疫功能。     

黄连素对阿尔兹海默症大鼠Th17、Treg亚群比例及脑组织炎性细胞因子的影响

目的探究黄连素对阿尔兹海默症大鼠外周血辅助性T细胞(T helper cell,Th) 17、调节性T细胞(regulatory T-cell,Treg)亚群比例,以及脑组织炎性细胞因子水平的影响。方法大鼠分为假手术组、模型组、黄连素组,除假手术组外,其余各组采用腹腔注射D-半乳糖联合Aβ25-35海马注射的方法建立阿尔兹海默症大鼠模型,药物干预4周后,留取标本,流式细胞技术检测两组大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例,实时荧光定量PCR检测两组大鼠海马组织炎性细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-17、IL-22、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-βmRNA转录水平。结果 (1)与假手术组相比,模型组Th17、Treg细胞比例升高(P0.05),与模型组相比,黄连素组大鼠外周Th17细胞比例降低(P0.05);(2)与假手术组相比,模型组大鼠海马组织促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-17、IL-22、TNF-α转录水平均显著升高(P0.01),抑炎性细胞因子TGF-β转录水平显著降低(P0.01);与模型组相比,IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α转录水平均降低(P0.05),TGF-β转录水平升高(P0.05)。结论黄连素能降低阿尔兹海默症大鼠外周血Th17亚群比例,减轻脑组织内炎性反应。     

马甲子对实验性结肠炎的干预及Th1/Th2漂移相关作用机理研究

目的:评价马甲子对大鼠实验性结肠炎的干预作用及基于Th细胞的可能作用机制。方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)灌肠复制大鼠结肠炎模型;马甲子片0. 27 g/kg、0. 54 g/kg及1. 08 g/kg灌胃给予7天,对结肠组织进行病理学观察,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中γ-干扰素(IFN-γ)、白介素12(IL-12)、白介素10(IL-10)、白介素4(IL-4)浓度和结肠组织中髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)活性,流式细胞术测定外周血单个核细胞中Th1、Th2细胞比例。结果:马甲子片1. 08 g/kg灌胃给予能显著降低结肠炎模型大鼠血清中IFN-γ、IL-12含量,提高IL-4、IL-10含量,降低结肠组织中MPO活性;巴甲子片0. 54、1. 08 g/kg能显著改善模型动物结肠病理变化;巴甲子片各剂量均能提高Th2在外周血单个核细胞中的比例。结论:马甲子片可减轻实验性结肠炎病理反应,提示其对炎性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)有潜在治疗作用,其机制可能与提高Th2水平有关。     

益气复元汤对TNBS诱导的溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响

目的:观察自拟"益气复元汤"对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响。方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-TNBS)/乙醇法复制UC大鼠模型,给予柳氮磺吡啶溶液及11.92、17.16、23.84g/kg剂量益气复元汤水煎液干预14天,观察各组大鼠一般情况、记录疾病活动指数(DAI),进行大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI)及结肠组织学损伤评分(HI);检测外周血淋巴细胞亚群及细胞因子TNF-α、IL-4和INF-γ的含量。结果:与正常组比较,模型组DAI、CMDI、HI和INF-γ、TNF-α含量以及CD4+、CD4+/CD8+淋巴细胞百分比显著升高,IL-4含量和CD8+、CD4+CD25+/CD4+淋巴细胞百分比显著降低;柳氮磺吡啶及益气复元汤各剂量组,可显著降低模型大鼠DAI、CMDI、HI和INF-γ、TNF-α、CD4+的含量以及CD4+/CD8+淋巴细胞百分比,增加IL-4、CD8+的表达以及CD4+CD25+/CD4+淋巴细胞百分比。结论:益气复元汤可抑制TNBS/乙醇诱导的溃疡性结肠炎大鼠模型的炎症,可能通过减少血清INF-γ表达、上调IL-4表达,从而调节Th1/Th2细胞平衡,调节肠道免疫,抑制肠道炎症,促进溃疡愈合。     

安宫牛黄丸对中、印两国脑梗死痰热阻窍证患者Th1/Th2的影响

目的观察安宫牛黄丸对脑梗死患者Th1/Th2的影响,揭示脑梗死“痰热阻窍”机制。方法在中、印两国各收集30例脑梗死痰热阻窍证患者,按安宫牛黄丸的使用情况分为4组,各15例,分别为中国治疗组、印尼治疗组、中国对照组、印尼对照组。对照组采用常规治疗,治疗组为在常规治疗的基础上配合使用安宫牛黄丸,持续使用30天。在观察患者治疗不良反应的同时,检测INF-γ、IL-4水平。结果4组治疗后INF-γ及INF-γ/IL-4均降低,IL-4均升高,差异有统计学意义（P<0.05）。与同国对照组治疗后比较,两个治疗组INF-γ及INF-γ/IL-4均降低,IL-4均升高,差异有统计学意义（P<0.05）。与中国组同组治疗前比较,两个印尼组INF-γ及INF-γ/IL-4均较高,IL-4均较低,差异有统计学意义（P<0.05）,而治疗后则趋于一致。结论安宫牛黄丸对脑梗死患者Th1/Th2具有调节作用,脑梗死患者痰热阻窍证与Th1/Th2可能存在一定关系。     

抵当汤调控深静脉血栓形成大鼠Th1/Th2信号漂移的实验研究

目的:探讨深静脉血栓形成(DVT)大鼠辅助性T细胞(Th)Th1/Th2信号漂移的变化规律及抵当汤的干预机制。方法:选取雄性Wistar大鼠120只,分为假手术组、模型组、抵当汤小剂量组和抵当汤大剂量组,每组30只,每组又根据术后第1、3、7日处死时间的不同随机平均分笼饲养。Reyers法制备DVT大鼠模型,造模成功后假手术组和模型组大鼠每日给予生理盐水灌胃,抵当汤大、小剂量组每日分别给予1.8、0.9g/100g体重抵当汤药液灌胃。于术后第1、3、7日灌胃2h后,取相应10只大鼠,腹腔麻醉,开腹,腹主动脉取血,检测Th1、Th2细胞因子的变化。结果:血栓形成后同一时相,模型组较假手术组的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)显著升高(P0.01)。随着干预天数的增加,模型组IL-10/TNF-α比值在第3天变小,第7天增大,而IFN-γ/IL-4比值在第3天增大,第7天回落。抵当汤治疗后TNF-α、IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4比值较模型组显著降低(P0.01),IL-4、IL-10水平及IL-10/TNF-α比值较模型组显著升高(P0.05,P0.01),且抵当汤大剂量组作用强于抵当汤小剂量组。结论:Th1/Th2信号漂移与DVT的发生密切相关,抵当汤呈剂量依赖性地升高Th2细胞因子的分泌,抑制Th1细胞因子表达,进而调节Th1/Th2信号平衡,达到治疗DVT的目的。     

复方止嗽散对咳嗽变异性哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子平衡的影响

目的研究复方止嗽散(百部、紫菀、桔梗等)对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠Th1/Th2细胞因子平衡影响,探讨复方的平喘作用机制。方法建立SD大鼠CVA模型,灌胃止嗽散提取物,采用ELISA方法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素IL-4及干扰素INF-γ含有量,并测定BALF中的炎性细胞变化,比较组间差异。结果止嗽散中、高剂量组大鼠BALF中,炎性细胞计数均较模型组明显降低,而INF-γ/IL-4比值升高,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论复方止嗽散对CVA大鼠的Th1/Th2细胞因子失衡具有调节作用,并能减少炎症细胞,推测与其平喘作用相关。     

消斑饮加减治疗面部激素依赖性皮炎的疗效及对Th1/Th2细胞水平的影响

目的:探讨消斑饮加减治疗面部激素依赖性皮炎(HDD)的疗效及对辅助性T细胞免疫炎症和皮肤屏障功能的影响。方法:将119例HDD患者采用分层区组,随机按数字表法分为对照组59例和观察组60例。对照组口服氯雷他定片,10 mg/次,1次/d;和硫酸羟氯喹片,0.2 g/次,2次/d。观察组在对照组治疗的基础上加服消斑饮加减,1剂/d。两组疗程均为连续治疗8周。记录治疗前后主观症状和客观皮损症状评分;进行治疗前后皮肤屏障功能检测;检测治疗前后干扰素-γ(IFN-γ),白细胞介素-2(IL-2),IL-4,IL-6,IL-10,IL-1,IL-13和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;进行治疗前后皮肤病生活质量指数(DLQI)评价。结果:观察组临床疗效总有效率为93.33%,高于对照组的79.66%(χ2=4.778,P0.05);观察组患者症状积分低于对照组(P0.01);观察组患者的角质层含水量和皮脂含量均高于对照组,经皮水分丢失少于对照组(P0.01);观察组血清IFN-γ,IL-2水平均高于对照组,IL-4,IL-6,IL-10水平均低于对照组(P0.01);观察组血清IL-1,IL-13和TNF-α水平均低于对照组(P0.01);观察组患者的DLQI量表各维度评分及总分均低于对照组(P0.01)。结论:消斑饮加减在西医治疗的基础上,可明显缓解HDD症状,提高临床疗效和生活质量,并具有调节Th1/Th2细胞因子,减轻炎症损伤,促进皮肤屏障功能修复的作用。     

左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17/Treg亚群的影响

目的观察左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失模型小鼠脾脏辅助性T细胞亚群17（Th17）/调节性T细胞亚群（Treg）亚群平衡的影响,并探讨其作用机制。方法 50只BALB/c小鼠按随机数字表法随机分为假手术组、卵巢切除模型组、左归丸加减（简称中药）小、中、大剂量组,共5组,每组10只。中药组分别给予中药小、中、大剂量（7.25、14.50、29.00 g/kg）,1天1次,1次约0.5 m L,连续用药12周;同时假手术组及模型组给予等量的生理盐水。采用酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法检测各组血清雌二醇（E2）水平,双能X线骨密度仪检测股骨骨密度（bone mineral density,BMD）,流式细胞仪胞内外双染色法检测脾脏单个核细胞Th17/Treg亚群比例,RT-PCR法检测脾脏单个核细胞IL-17A、TGF-βmRNA表达。结果与假手术组比较,模型组E2、BMD均降低（P〈0.05）,Th17亚群比例、Th17/Treg比值均升高（P〈0.05）,Treg亚群比例明显降低（P〈0.05）,IL-17A mRNA表达明显升高（P〈0.05）,TGF-βmRNA表达明显降低（P〈0.05）;与模型组比较,中药中、大剂量组BMD值明显升高（P〈0.05）,Th17亚群比例、Th17/Treg比值降低（P〈0.05）、Treg亚群比例升高（P〈0.05）,IL-17A mRNA表达降低（P〈0.05）及TGF-βmRNA表达升高（P〈0.05）。相关性分析显示BMD与血清E2水平、Treg亚群比例呈明显正相关（P〈0.05）,与Th17亚群比例呈明显负相关（P〈0.05）;血清E2水平与Treg亚群比例呈明显正相关（P〈0.05）,与Th17亚群比例呈明显负相关（P〈0.05）。结论 Th17/Treg亚群平衡状态与雌激素缺乏骨丢失存在相关性,左归丸加减能降低雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17亚群比例,升高雌激素缺乏骨丢失小鼠Treg亚群比例。左归丸加减可能通过调节雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17/Treg亚群平衡达到治疗作用,且该方无明显雌激素样作用。     

积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞表达的影响

目的:观察积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)表达的影响.方法:将SPF级DBA/1雄性小鼠按体质量随机分为6组:正常组,CIA组,甲氨蝶呤组(MTX组,0.5 mg·kg-1),积雪草苷低、中、高剂量(5,15,45 mg· kg-1)组.除正常组...     

基于Th17/Treg细胞平衡探讨抗纤益心方对自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制

目的:探讨抗纤益心方干预自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制,及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系。方法:将60只SPF级BALB/c健康8周龄雄性小鼠按1∶5的比例随机分为正常组和造模组,在第0,7,28天于造模组小鼠腹股沟、腋下、背部多处皮下注射猪心肌肌球蛋白乳化液0.2 m L(含猪心肌肌球蛋白0.1 mg)以制备心肌免疫损伤小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组,抗纤益心方组(KYP),缬沙坦组(Valsartan),抗纤益心方组给予抗纤益心方20.4 g·kg^-1·d^-1灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦12 mg·kg^-1·d^-1灌胃,正常组和模型组给予同计算量的生理盐水灌胃,连续灌胃4周后取材,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色检测心肌组织中病理损伤情况,酶联免疫吸附法检测小鼠血清中B型钠尿肽(BNP),抗心肌抗体,白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10(IL-10)的表达,流式细胞术检测脾脏Th17,Treg细胞的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠脾脏转录因子维A酸相关孤独受体γt(RORγt),叉头框蛋白P3(Fox P3)m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠心肌病理损伤增加,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17升高,IL-10降低(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平升高,Treg细胞的表达水平降低(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax/Bcl-2值升高,脾脏RORγt m RNA表达升高,Fox P3 m RNA表达降低,RORγt/Fox P3升高(P<0.05);与模型组比较,抗纤益心方组及缬沙坦组心肌病理损伤减轻,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17降低,IL-10升高(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平降低,Treg细胞的表达水平升高(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax/Bcl-2降低,脾脏RORγt m RNA表达降低,Fox P3 m RNA表达升高,RORγt/Fox P3值降低(P<0.05)。结论:抗纤益心方可能通过调节Th17/Treg细胞平衡改善心肌免疫损伤。     

Selective Th1 upregulation by ethyl acetate fraction of Labisia pumila

Aim of the study

Labisia pumila has rejuvenating properties that help women to regain the strength and vigour after giving birth (Burkill, 1935) leading us to speculate that Labisia pumila might also modulate the immune matrix as it is one of the important aspect of healthy state of the living body.

Materials and methods

Studies were carried out for the evaluation of pro-inflammatory cytokines in murine neutrophils followed by expression of T cell-surface markers and corresponding intracellular expression of cytokines related to T helper1 (Th1) and T helper 2 (Th2) activity.

Results

The ethyl acetate fraction (A001/3b) obtained from ethanolic extract of leaves of Labisia pumila at graded doses (in vitro) showed increased expression of TNF-α, IL-6 and IL-12. IL-12 is a strong inducer of Th1 response in activated CD4+ T cells and accordingly T cell studies were carried out (in vivo). These specific studies showed A001/3b to cause marked stimulation of CD4+ T helper cells and related cytokine expression like IL-2 and IFN-gamma (a potent Th1 inducer), thereby, having a predominant Th1 upregulation pathway. This was further validated by suppression of IL-4 and IL-10 expression which are the Th2 pathway cytokines.

Conclusion

This study showed ethyl acetate fraction (A001/3b) of Labisia pumila to have Th1 upregulating activity and suggests its possible usefulness as a therapeutic agent in immune compromised patients.     

基于Notch1-Jagged1通路探讨鹿鹅鼻炎方对变应性鼻炎小鼠Th17/Treg的影响

目的 探讨鹿鹅鼻炎方对变应性鼻炎（AR）小鼠Notch1-Jagged1通路及辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）免疫失衡的影响。方法 将30只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组,每组6只。以卵清蛋白（OVA）为致敏原诱导建立AR模型小鼠,鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组每天分别给与鹿鹅鼻炎方0.5、1、2 g/kg 灌胃。通过行为学观察评估各组小鼠鼻部症状（打喷嚏、流鼻涕）改变;进行鼻灌洗液（NLF）细胞计数;观察各组小鼠鼻黏膜组织形态学变化并计算嗜酸性粒细胞、杯状细胞和肥大细胞数;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组小鼠血清中OVA特异性IgE（OVA-sIgE）、OVA特异性IgG（OVA-sIgG）水平以及NLF中白细胞介素（IL）-10、IL-17水平;Western Blot检测各组小鼠鼻黏膜中Notch1、Jagged1、视黄酸相关孤儿受体γt（RORγt）及叉头状螺旋转录因子3（Foxp3）蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠可观察到鼻黏膜上皮细胞显著增生和化生,纤毛脱落不完整,黏膜下层血管扩张明显,出现以嗜酸性细胞为主的炎性细胞浸润;经鹿鹅鼻炎方干预后,黏膜上皮损伤好转。与空白组比较,模型组小鼠末次滴鼻激发后10 min内喷嚏和抓鼻次数、鼻黏膜上皮厚度、嗜酸性粒细胞数、杯状细胞数、肥大细胞数、血清OVA-sIgE及OVA-sIgG水平、NLF IL-17水平、鼻黏膜RORγt、Notch1、Jagged1蛋白表达增加（P<0.05）,NLF IL-10水平、鼻黏膜Foxp3蛋白表达降低（P<0.05）。与模型组比较,鹿鹅鼻炎方低、中、高剂量组小鼠末次滴鼻激发后10 min内喷嚏和抓鼻次数、鼻黏膜上皮厚度、嗜酸性粒细胞数、血清OVA-sIgE及OVA-sIgG水平、NLF、IL-17水平、鼻黏膜RORγt、Notch1、Jagged1表达降低,鼻黏膜Foxp3表达水平升高（P<0.05）;鹿鹅鼻炎方中、高剂量组鼻黏膜杯状细胞数、鼻黏膜RORγt蛋白表达降低,NLF IL-10水平升高（P<0.05）;鹿鹅鼻炎方高剂量组鼻黏膜肥大细胞数降低（P<0.05）。结论 鹿鹅鼻炎方干预AR小鼠的机制可能是通过抑制Notch1-Jagged1表达,恢复Th17/Treg免疫平衡实现的。     

雷公藤甲素对体外培养的变应性接触性皮炎小鼠Th细胞Fas表达的影响

目的 为了探讨雷公藤甲素对体外培养的变应性接触性皮炎(ACD)小鼠Th细胞Fas表达的影响.方法 以二硝基氯苯(DNCB)制作小鼠ACD模型,分离ACD小鼠淋巴细胞,不同浓度雷公藤甲素体外作用48 h后,利用流式细胞仪检测Th细胞Fas表达率.结果 雷公藤甲素3个浓度组体外培养的ACD小鼠淋巴细胞Fas表达均高于对照组(P＜0.01),高浓度组与中浓度和低浓度比较Fas表达水平显著升高(P＜0.01),中浓度与低浓度比较表达水平差异具有显著性(P＜0.05).结论 雷公藤甲素可以促进体外培养的ACD小鼠淋巴细胞Fas的表达,可能是治疗ACD的机理之一.     

中医药干预溃疡性结肠炎Th17/Treg平衡的研究进展

溃疡性结肠炎(UC)是一种常见的慢性非特异性的肠道炎症,其病程长且难以治愈,发病率逐年上升。辅助性T细胞17(Th17)是免疫促进细胞之一,而调节性T细胞(Treg)是一种免疫抑制细胞,Th17和Treg细胞共同维持着机体免疫微环境的平衡。在UC进展期间,引起炎症的Th17群体通常增加,而抑制Th17活性的Treg减少。其中,Th17介导免疫应答反应,Treg介导免疫抑制,两者协调平衡在溃疡性结肠炎的炎症和免疫过程中起关键作用。UC的西医治疗虽具有一定的效果,然而,副作用的频率和严重程度,不方便的剂量调节,以及部分价格过高限制了他们的临床应用。中药作为我国的传统医药,具有多靶点、多环节、多途径的治疗特点,在抗溃疡性结肠炎方面具有独特优势和广阔前景。近年来,中医药领域以Th17/Treg平衡为切入点,开展了大量中医药干预UC中Th17/Treg平衡的临床和实验研究,并取得了一定的成果,临床和实验证据明确表明干预Th17/Treg是中医药治疗溃疡性结肠炎的重要作用机制。本文主要对前人关于中药单体、组分或有效成分、中药复方对UC中Th17/Treg平衡的干预作用研究进行了总结与分析,有利于人们更为准确、全面地认识中医药干预UC中Th17/Treg平衡的作用机制,为临床合理设计抗溃疡性结肠炎治疗方案提供参考。     

养阴方对HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠Th17、Treg细胞失衡的作用研究

目的考察在热休克蛋白(HSP)65攻击下养阴方对载脂蛋白E敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)的病变及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)的影响及可能机制。方法将ApoE~(-/-)小鼠分别饲喂普通和高脂饲料,并分别sc无菌PBS或HSP65,以辛伐他汀为阳性药,研究养阴方对AS模型小鼠血脂、斑块、Th17细胞与Treg细胞比例(Th17/Treg)及相关炎症指标的影响。给药方式皆为ig给药,并以等体积生理盐水做对照。采用酯酶法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)水平;油红O染色法测定主动脉斑块面积;流式细胞术测定抗凝血中IL-17A~+CD4~+Th17及Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg细胞数量;ELISA法测定血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、IL-2、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10水平;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定脾脏中Stat3、Stat5a、Foxp3和主动脉中Stat3、Stat5a mRNA表达;Western blotting法测定脾脏中磷酸化STAT3(pSTAT3)、磷酸化STAT5(pSTAT5)、FOXP3和主动脉中pSTAT3蛋白表达。结果养阴方使小鼠血清TC、TG、LDL水平显著降低(P0.01),HDL显著升高(P0.05);主动脉斑块面积明显减小(P0.01);外周血IL-17A~+CD4~+Th17细胞显著减少(P0.05),Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg显著增加(P0.05),Th17/Treg值大幅下降(P0.01);血清IL-6水平显著下降(P0.05),IL-2(P0.01)、TGF-β(P0.05)、IL-10(P0.05)水平显著升高;脾脏pSTAT3蛋白水平下降(P0.01),pSTAT5(P0.01)和FOXP3(P0.05)蛋白水平上升;主动脉Stat3 mRNA(P0.01)和pSTAT3蛋白(P0.05)水平下降。结论养阴方能够改善HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠的高脂血症及AS,同时调节外周血中Th17/Treg的平衡和炎症因子的分泌从而改善炎症。养阴方对Th17、Treg的效应可能与减弱的IL-6/pSTAT3和增强的IL-2/pSTAT5信号有关。     

清营活血汤对原发性胆汁性肝硬化肝胆湿热型的疗效以及对外周血Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨清营活血汤治疗原发性胆汁性肝硬化(PBC)肝胆湿热证的临床效果以及对血清Th17/Treg水平的影响。方法:选择PBC肝胆湿热证病例共98例,参照数字表法随机分为对照组和治疗组各49例;对照组口服复方甘草酸苷片,2片/次,3次/d,连服2周后,口服熊去氧胆酸胶囊,13~15 mg·kg~(-1)·d~(-1),3次/d,餐后口服;治疗组在对照组用药基础上给予清营活血汤治疗,1剂/d,常规水煎煮2次,分早晚内服;所有患者均给予24周治疗。比较两组中医临床症状积分;分析两组患者治疗24周后的临床疗效;比较两组患者外周血中辅助性T细胞17(Th17)细胞和调节性T细胞(Treg)水平;检测两组血清白细胞介素(IL)-17,IL-6和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果:治疗组治疗后中医临床症状积分均明显低于对照组(P0.01);治疗组治疗后总反应率为93.88%,对照组为77.55%,治疗组明显高于照组(P0.05);治疗组治疗后患者外周血中Th17细胞明显低于对照组,而Treg细胞明显高于对照组(P0.01);治疗后治疗组患者血清IL-17和IL-6水平明显低于对照组,而TGF-β显著高于对照组,比较差异均有统计学意义(P0.01)。结论:在西医治疗基础上,清营活血汤治疗PBC肝胆湿热证可显著改善患者临床症状,提高临床疗效,调节外周血Th17/Treg平衡及其细胞因子水平可能是其发挥疗效的机制之一。