弹性髓内钉并病灶刮除混合植骨治疗儿童肱骨骨囊肿

目的 探讨弹性髓内钉并病灶刮除混合植骨治疗儿童肱骨骨囊肿的疗效,及病灶活跃性对疗效的影响.方法 回顾性分析2008年5月至2017年4月我院收治的儿童肱骨骨囊肿42例,治疗采用弹性髓内钉并病灶刮除混合植骨或单一病灶刮除混合植骨.按Neer标准评价病灶活跃期情况及治疗效果,采用x2检验比较两组疗效.结果 平均随访37.6个月.弹性髓内钉并植骨组22例,其中完全愈合14例,部分愈合7例,复发1例;单一植骨组20例,其中完全愈合9例,部分愈合4例,无反应4例,复发3例.两组的治愈率分别为95.5％(21/22)和65.0％(13/20),(P=0.034).22个活动期病灶中仅有5个完全愈合,而20个静止期病灶中有18个完全愈合(P＜0.01).结论 弹性髓内钉并病灶刮除混合植骨治疗儿童肱骨骨囊肿有较高治愈率;活动期病灶较静止期病灶完全愈合率低;对活动期病灶可选择弹性髓内钉并病灶刮除混合植骨治疗.     

完全后腹腔镜下肾输尿管根治术与开放手术的比较

目的：比较完全后腹腔镜下肾输尿管根治术与开放手术治疗上尿路移行细胞癌的临床疗效。方法：44例上尿路移行细胞癌患者行肾输尿管根治术,其中15例为腹腔镜手术组,采取完全后腹腔镜下手术,29例为开放手术组,采取开放肾输尿管根治性手术。比较2组患者的手术时间、术中出血量、术后止痛药应用时间和剂量、胃肠道功能恢复时间、下床活动时间、术后住院时间和并发症,并随访6~42月,比较2组膀胱肿瘤发生及远处转移、存活时间等。结果：2组手术均获成功。腹腔镜手术组与开放手术组比较,出血量明显减少（116.1±29.4） ml vs. （278.6±84.3） ml,P=0.000;止痛药（杜冷丁注射液）应用时间短（0.7±0.5） d vs. （2.3±0.9） d,P=0.000;剂量少（33.3±24.4） mg vs. （155.2±62.8） mg,P=0.000;下床活动早（2.1±0.5） d vs. （4.2±1.0） d,P=0.000;术后住院时间短（8.7±1.6） d vs. （13.1±3.2） d,P=0.000。腹腔镜手术组手术时间较短（212.1±19.5） min vs. （251.7±24.2） min,P=0.000,肠道功能恢复较快（1.9±0.8） d vs. （2.9±0.8） d,P=0.00１,但与开放手术组比较差异无统计学意义（P >0.05）。随访6~42月,2组病人均存活,术后并发症、肿瘤复发及转移差异无统计学意义（P >0.05）。结论：完全后腹腔镜下肾输尿管根治术具有微创并与开放手术相同的肿瘤学效果,将成为上尿路移行细胞癌的理想手术方法。     

精索静脉显微结扎术与传统手术方式治疗原发性精索静脉曲张的疗效比较

目的：比较3种手术方式治疗原发性精索静脉曲张的治疗效果。方法：将97例原发性精索静脉曲张患者根据手术方式随机分为3组：经腹股沟精索静脉高位结扎组（开放手术组）38例;腹腔镜下精索静脉高位结扎组（腹腔镜组）33例;显微镜下精索静脉结扎组（显微镜组）26例,术后随访12月,对比分析3组患者的手术治疗近期效果及并发症。结果：开放手术组、腹腔镜组、显微镜组3组手术均顺利完成。3组间手术时间比较（56.02±4.84 vs. 35.60±4.54 vs. 91.65±4.56,F=1 058.74,P=0.000）,显微镜组最长;3组间动脉识别率比较（52.63% vs. 54.55%,P=0.872;54.55% vs. 100%,P=0.000;52.63% vs. 100%,P=0.000）,显微镜组最高;3组间精液质量改善率比较（34.21% vs. 33.33%,P=0.938;33.33% vs. 65.38%,P=0.014;34.21% vs. 65.38%,P=0.014）,显微镜组最高;术后切口疼痛评分比较（7.45±0.65 vs. 4.82±0.58 vs. 1.04±0.34,F=1 018.35,P=0.000）,显微镜组最低;睾丸鞘膜积液发生率比较（26.32% vs. 21.21%,P=0.615;21.21% vs. 0,P=0.014;26.32% vs. 0,P=0.013）,显微镜组最低;精索静脉曲张复发率比较（28.95% vs. 21.21%,P=0.455;21.21% vs. 0,P=0.014;28.95% vs. 0,P=0.007）,显微镜组最低;住院时间比较（7.26±0.79 vs. 5.45±0.75 vs. 3.65±0.63,F=186.10,P=0.000）,显微镜组最短。结论：除手术时间较长外,显微镜下精索静脉结扎术具有动脉识别率高,疗效好,并发症少,住院时间短等优势,值得临床应用。     

经皮穿刺椎体成形术治疗骨质疏松性椎体骨折骨不愈合

目的：探讨经皮穿刺椎体成形术治疗骨质疏松性椎体骨折不愈合的临床疗效。方法：54例患者实施该项手术。术前及术后1天、1个月、3个月及12个月分别进行疼痛视觉模拟评分（visual analog scale,VAS）及MacNab评分。术后第1天进行X线及CT检查。所有评分数据收集后使用SAS软件进行重复测量方差分析。结果：48例患者（共54例,6例失访）获得12个月随访。术后第1天（3.120±1.076）,第1个月（2.620±0.874）、第3个月（2.320±0.726）、第12个月（1.920±0.686）VAS评分（F=142.481,P=0.000）和术后第1天（2.940±0.598）,第1个月（3.060±0.697）、第3个月（3.210±0.683）、第12个月（3.440±0.501）MacNab评分（F=144.207,P=0.000）较术前（VAS=8.490±0.689,MacNab=1.270±0.449）明显改善。结论：经皮穿刺椎体成形术治疗骨质疏松性椎体骨折不愈合具有良好的疗效。     

Beclin-1、P62、LC3B在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达变化

目的：探讨自噬相关蛋白Beclin-1、P62及微管相关蛋白轻链3B（microtubule-associated protein light chain 3B,LC3B）在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达及意义。方法：生长至对数生长期的肺炎链球菌标准株D39用无菌PBS调节浓度为1.5×109 CFU/mL,采用鼻滴的方法对50只SPF级雌性Balb/c鼠（6~8 周,16~20 g）进行处理,分别在感染后0、6、12、24、48 h收集Balb/c小鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）及肺组织,瑞氏-吉姆萨染色进行BALF细胞计数,HE染色观察肺组织病理学改变,Western blot 检测自噬相关蛋白Beclin-1、P62、LC3B在肺组织中的表达水平,免疫荧光观察LC3B在肺组织中的表达情况。结果：HE染色显示,小鼠鼻饲肺炎链球菌后12 h及24 h后肺组织内出现大量炎症细胞浸润。BALF中总细胞数量及中性粒细胞数量于感染后6 h开始增高[（1.280±0.506） vs. （6.272±1.312）,P=0.000;（0.000±0.000） vs. （3.456±1.308）,P=0.000],在12 h时达到高峰[（1.280±0.506） vs. （19.456±0.997）,P=0.000;（0.000±0.000） vs. （15.040±1.012）,P=0.000],48 h后基本恢复正常水平[（1.280±0.506） vs. （3.520±0.933）,P=0.005;（0.000±0.000） vs. （0.128±0.175）,P=0.835]。Western blot结果显示：自噬相关蛋白Beclin-1于感染后6 h开始增加[（0.626±0.078） vs. （0.921±0.093）,P=0.002],48 h时达到最高水平[（0.626±0.078） vs. （1.884±0.158）,P=0.000];自噬相关蛋白P62于感染后6 h开始减少[（2.915±0.094） vs. （2.275±0.269）,P=0.000],48 h时降低至最低水平[（2.915±0.094） vs. （1.178±0.142）,P=0.000];自噬相关蛋白LC3B于感染后12 h开始升高[（0.747±0.197） vs. （1.429±0.318）,P=0.006],24 h时达到高峰[（0.747±0.197） vs. （2.002±0.451）,P=0.000],48 h后降低[（0.747±0.197） vs. （1.563±0.501）,P=0.002]。免疫荧光显示：小鼠感染后12 h与24 h,肺组织中LC3B蛋白表达水平增加。结论：肺炎链球菌感染小鼠肺部后激活自噬的发生,且自噬在免疫调节过程中发挥着重要作用。     

咀嚼口香糖加速腰椎后路融合术后患者胃肠道功能恢复的临床观察

目的：探究咀嚼口香糖能否加速腰椎后路融合术后患者胃肠道功能的恢复。方法：回顾性分析重庆医科大学附属第一医院骨科脊柱病区2016年1月至2016年9月收治的腰椎间盘突出症且行腰椎后路融合手术治疗的患者的临床资料,共65例,按术后是否咀嚼口香糖分为观察组和对照组。观察组患者（30例）于术毕麻醉清醒后6 h开始咀嚼益达无糖木糖醇口香糖,每4小时1次,每次2粒,每次至少咀嚼15 min,至肛门首次排气后改为每8小时1次,直至术后第5天;对照组患者（35例）术后不咀嚼口香糖,仅接受常规护理。2组患者术后均禁食,肛门排气后开始进食流质饮食,并逐步过渡到正常饮食。比较2组患者术后首次闻及肠鸣音时间,肛门首次排气时间、首次排便时间、住院时间、住院费用以及并发症等指标。结果：咀嚼口香糖能明显缩短患者术后首次闻及肠鸣音时间[（12.35±2.87） h vs. （17.10±2.59） h,t=-7.007,P=0.000]、肛门首次排气时间[（17.34±2.86） h vs. （24.12±3.18） h,t=-8.974,P=0.000]及首次排便时间[（51.89±5.16） h vs. （74.81±4.76） h,t=-18.612,P=0.000],但2组患者的住院时间[（11.67±2.12） d vs. （12.03±2.33） d,t=-0.650,P=0.518]、住院费用[（66 554.13±16 325.18）元vs. （65 707.26±11 765.25）元,t=-0.493,P=0.809]及并发症发生率（10/30 vs. 12/35, ?字2=0.007,P=0.936）无统计学差异。结论：咀嚼口香糖可以加速腰椎后路融合术后患者胃肠道功能的恢复。上述结论尚需大样本、多中心的前瞻性研究来验证。     

加速康复外科在肾上腺和肾脏肿瘤手术中的应用

目的：评估加速康复外科（enhanced recovery after surgery,ERAS）在肾上腺和肾脏肿瘤手术中应用的效果。方法：将2017年3月至2018年2月我院收治的拟行手术治疗的肾上腺肿瘤、肾脏肿瘤按随机数字表法随机分为ERAS组和常规组,按照预设的纳入排除标准,最终ERAS组纳入89例,其中肾上腺肿瘤38例、肾癌15例、肾囊肿36例。常规处理组纳入100例,其中肾上腺肿瘤49例、肾癌16例、肾囊肿35例。ERAS组按照预设的加速康复外科措施进行围手术期处理,比较2组围手术期相关指标。结果：与传统组相比,ERAS组的术后首次饮水时间[（3.1±1.7） h vs. （7.8±3.5） h,t′=-11.419,P＝0.00０]、术后首次进食时间[（7.6±3.7） h vs. （13.0±6.9） h,t′=-6.611,P＝0.00０]和术后首次下床时间[（9.1±4.9） h vs. （26.9±16.3） h,t′=-10.449,P＝0.00０]明显提前;术后留置尿管时间[（10.1±4.5） h vs. （23.2±15.4） h,t=-8.165,P＝0.00０]、术后肛门排气时间[（10.0±7.6） h vs. （15.0±9.0） h,t′=-4.157,P＝0.00０]和术后住院天数[（2.7±1.8） d vs. （3.6±2.1） d,t′=－３.128,P=0.002]明显缩短;术后2 h VAS疼痛评分[（3.3±0.8） vs. （4.3±0.8）,t=-8.925,P＝0.00０]和术后首次下床时VAS评分[（2.5±0.6） vs. （3.4±0.7）,t=-8.662,P＝0.00０]降低;手术时间[（55.8±32.5） min vs. （58.5±31.8） min,t′=-0.557,P=0.578]、术中出血量[（48.2±39.2） mL vs. （48.3±34.6） mL,t′=－0.008,P=0.994]、术后并发症（3/89 vs. 6/100, ?字2=0.712,P=0.398）、引流管留置时间[（24.4±16.2） h vs. （27.0±15.3） h,t′=－1.１４３,P=0.255]两组对比差异无统计学意义。结论：ERAS理念运用于肾上腺和肾脏肿瘤手术的围手术期是安全有效的,能够明显加速患者术后康复,提高患者舒适感,缩短住院时间。     

胸腔镜辅助下右胸小切口心脏二尖瓣手术同期房颤消融术的临床研究

目的：探讨胸腔镜辅助下右胸小切口心脏二尖瓣手术同期房颤消融术的临床效果、安全性和可行性。方法：前瞻性对照分析重庆市人民医院心血管外科2016年3月1日至2017年5月10日收治的瓣膜手术加房颤消融的手术患者。根据手术切口类型分为2组,A组（微创组）：胸腔镜辅助下右胸小切口行心脏二尖瓣手术同期房颤消融（13例）,B组（传统手术组）：正中胸骨切口心脏瓣膜手术同期房颤消融术（28例）。对照2组术后即刻和术后10 d房颤的转复率、术中房颤消融时间、术后出血引流量、术后切口长度、术后左房直径。结果：微创组有着与传统组相同的房颤转复率,术后即刻（76.9% vs. 78.5%,P=1.000）、术后10 d（84.6% vs. 78.5%,P=0.975）,且术中房颤消融时间也无明显差异[（41.9±4.0） min vs. （39.7±5.4） min,P=0.198]。术后左房直径2组间无明显差异[（47.6±6.3） mm vs. （49.5±6.6） mm,P=0.384]。术后出血引流量,微创组明显少于传统组[（342.9±44.3） mL vs.（47.1±132.5） mL,P=0.020]。术后切口长度,微创组明显优于传统组（5.1±0.6） cm vs. （20.7±2.6） cm,P=0.000）。结论：胸腔镜辅助下右胸小切口二尖瓣替换同期房颤消融术在手术创伤和手术出血方面由于传统手术方式,是一种临床上安全、可行的一种手术方式。     

姜黄素改善N2a/APP695swe细胞线粒体功能和抑制细胞凋亡的作用

目的：观察姜黄素（curcumin）对N2a/APP695swe细胞线粒体形态和功能及细胞凋亡的影响;探讨其可能的神经保护机制。方法：实验细胞分为4个组：N2a/APP695组（WT）、N2a/APP695swe组（APP）、溶剂对照组（DMSO,5 μmol/L）、姜黄素组（Curcumin,5 μmol/L）。流式细胞术分别检测细胞凋亡、活性氧水平和膜电位水平、免疫细胞化学检测细胞色素C的表达、电镜观察细胞线粒体形态的改变,Western blot检测Caspase3、Caspase9蛋白表达,分光光度检测Caspase3、Caspase9酶活性。结果：流式细胞术结果显示,Curcumin组细胞的凋亡率、活性氧水平较APP组明显降低[（0.05±0.01） vs. （0.18±0.01）,P=0.000;（49.67±4.16） vs. （197.67±8.08）,P=0.000];而Curcumin组线粒体膜电位较APP组升高[（1.00±0.03） vs. （0.64±0.03）,P=0.000]。电镜结果发现姜黄素可以减轻线粒体的肿胀,改善其形态。同时免疫细胞化学结果显示姜黄素减少了细胞色素C的释放。Western blot检测发现,与APP组相比,Curcumin组Caspase3、Caspase9蛋白的表达均降低[（0.62±0.12） vs. （1.39±0.10）,P=0.000;（0.64±0.20） vs. （1.78±0.03）,P=0.000];并且Curcumin组较APP组的Caspase3与Caspase9的活性明显降低[（0.66±0.04） vs. （2.12±0.06）, P=0.000;（0.58±0.04） vs. （0.93±0.03）, P=0.000]。结论：姜黄素能抑制N2a/APP695swe细胞的凋亡,其机制可能与改善线粒体功能有关。     

过表达NICD通过下调基因JunB的表达抑制BMP9

目的：研究Notch信号通路在骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic protein 9,BMP9）诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化过程中的作用及其机制。方法：将细胞分为5组：空白组（Blank,n=3）,BMP9处理组（BMP9,n=3）,空白质粒对照组（BMP9+Control,n=3）,过表达Notch1胞内段质粒（Notch1 intracellular domain,NICD）处理组（BMP9+NICD,n=3）,DAPT处理组（BMP+DAPT,n=3）。通过碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色和钙盐染色分别验证过表达NICD对成骨分化早晚期情况的影响。进一步采用定量逆转录PCR（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-RCR）和Western blot检测基因NICD、Hey1及成骨相关基因Smad-1/5/8、p-Smad-1/5/8、OPN、Runx2、OCN、JunB的表达。结果：早期ALP活性及染色结果显示,NICD组较Control组能显著抑制C3H10T1/2细胞成骨分化过程中ALP的形成[5 d：（33 167.66±2 018.45） vs. （146 451.00±14 889.67）,P=0.000;7 d：（58 981.33±4 724.70） vs. （89 588.66±5 928.32）,P=0.000],γ-分泌酶抑制剂（N-[N-（3,5-difluorophen-acetyl）-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester,DAPT）完全抑制Notch通路时得到相同的结果[5 d：（44 812.66±4 174.94） vs. （146 451.00±14 889.67）,P=0.000;7 d：（64 622.93±4 724.70） vs. （89 588.66±5 928.32）,P=0.000]。茜素红S染色结果显示,NCID抑制钙盐结节的形成,而DAPT阻断Notch通路明显促进钙盐结节形成。qRT-PCR结果表明,NCID组中NICD及靶基因Hey1的表达较Control组明显增加[（3.90±0.02） vs. （0.35±0.01）,P=0.000;（19.79±0.01） vs. （11.80±0.02）,P=0.000],Western blot得到相同结果[（1.32±0.01） vs. （0.19±0.01）,P=0.000],且NICD明显抑制成骨分化相关基因JunB、Runx2、OCN、OPN等的表达[（0.10±0.01） vs. （0.53±0.01）,P=0.000;（0.18±0.01） vs. （0.30±0.02）,P=0.000;（0.36±0.01） vs. （0.62±0.02）,P=0.000;（0.07±0.01） vs. （0.48±0.01）,P=0.000],而转录因子Smad-1/5/8、p-Smad-1/5/8的表达不受影响[（0.74±0.02） vs. （0.73±0.03）,P=0.000;（0.63±0.01） vs. （0.58±0.04）,P=0.000],DAPT阻断Notch通路后上述相关基因的表达明显增加。结论：本实验结果首次证明,NICD激活Notch通路对BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化的抑制作用可能是通过抑制JunB基因发挥作用,而非调控BMP9/Smad（bonemorphogenetic protein 9/drosophila mothers against decapentaplegic）信号通路。     

IPSS-V/S在TUVP术后下尿路症状评估的临床价值

目的：探讨国际前列腺症状评分的排尿期/储尿期评分比值（international prostatic symptom score-voiding/storage sub－score ratio,IPSS-V/S）在经尿道前列腺汽化电切术（transurethral electrovaporization prostatectomy,TUVP）术后下尿路症状（lower urinary tract symptoms,LUTS）再评估的临床价值。方法：回顾性分析了2015年1月至2016年12月期间234例接受TUVP的良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）患者的国际前列腺症状评分（international prostatic symptom score,IPSS）等临床资料。按照IPSS-V/S比值将患者分为A组（IPSS-V/S≤1,80例）和B组（IPSS-V/S>1,154例）。术后6个月再次评估IPSS,储尿期症状评分（international prostatic symptom score-storage,IPSS-S）,排尿期症状评分（international prostatic symptom score-voiding,IPSS-V）和生活质量评分（quality of life,QOL）。结果：234例患者术后6个月IPSS和QOL较术前明显降低,差异有统计学意义（t=33.0,P=0.000;t=34.3,P=0.000）。术后6个月B组患者IPSS改善程度明显优于A组[（12.36±3.67）分 vs. （8.20±3.21）分]（t=8.96,P=0.000）。其中A组术后6个月IPSS-S明显高于B组[（9.61±2.88）分 vs. （5.55±2.63）分]（t=10.8,P=0.000）;而2组患者术后6个月时IPSS-V对比无统计学差异（t=1.56,P=0.120）。虽然A组术后6个月的QOL明显改善[（3.59±0.91）分 vs.（5.19±0.55）分]（t=14.8,P=0.000）,但是基本满意及以上者仅占13.75%,明显低于B组的70.78%。A组术后6个月IPSS-S各症状评分均有一定改善,改善程度从高到低依次为尿急评分、尿频评分和夜尿评分,其中夜尿评分改善率最低,仅为36.3%（29/80）,是A组患者IPSS及QOL改善较小的重要原因。结论：相比IPSS,IPSS-V/S更能准确反映TUVP术后疗效,LUTS排尿期症状改善明显优于储尿期症状。对于以夜尿症为主的BPH/LUTS患者,TUVP对患者QOL改善有限,需要引起临床医师重视。     

腹腔镜与开腹子宫肌瘤剔除术的对比研究

[摘要] 目的 探讨腹腔镜子宫肌瘤剔除术的临床应用价值。方法 170例子宫肌瘤患者随机分为两组：腹腔镜组82例,开腹组88例。腹腔镜组采用腹腔镜下子宫肌瘤剔除术,与开腹组比较手术时间、术中出血量、术后肠功能恢复时间、术后病率、术后镇痛率、住院时间、术后复发与妊娠情况等。结果 腹腔镜组82例无中转开腹,有2例中转经阴式缝合完成。腹腔镜手术时间（86.4±20.1）min较开腹组（79.3±23.2）min延长（t=-3.432,p=0.000）;腹腔镜组术中出血量（94.6±30.5）ml与开腹组（99.8+28.7）比差异无显著性（t=1.847,p=0.069）;腹腔镜组术后肠功能恢复时间（18.4±6.5）h短于开腹组（26.6±6.8）h（t=-5.757,p=0.000）;腹腔镜组术后病率12例,显著少于开腹组30例（x2=8.638,p=0.000）;腹腔镜组术后住院时间（5.5±2.0）d短于开腹组（8±2.0）d（t=-10.564,P=0.000）;腹腔镜组术后镇痛率33例显著少于开腹组75例（x2=37.071,p=0.000）。术后随访全部病例,时间7~36个月,平均21个月,两组术后妊娠率、复发率的差异均无统计学意义。结论 腹腔镜子宫肌瘤剔除术具有开腹术式相同的效果,但更具有创伤小,出血不多,术后恢复快及住院时间短,并发症少等优点。 [关键词] 子宫肌瘤剔除术 腹腔镜 开腹     

尿道表面麻醉处理输尿管中下段结石的可行性分析

目的：探讨尿道表面麻醉在输尿管中下段结石中的疗效性、安全性及并发症发生情况。方法：回顾性分析我科2016年9月至2017年9月输尿管中下段结石患者共307例,按照随机分配原则分为局麻组及硬膜外麻醉组。其中尿道表面麻醉患者168例,硬膜外麻醉组139例。观察其术中疼痛评分、一次性结石清除率、并发症、住院时间、患者满意度及住院费用。结果：在一次性结石清除率（97.02% vs. 96.40%, χ2=0.093,P=0.760）、并发症发生率（3.57% vs. 3.60%, χ2=0.088,P=0.767）、患者满意度（7.4±3.4 vs. 7.6±2.9,t=1.490,P=0.137）等方面2组患者无显著差异;疼痛评分方面硬膜外麻醉组优于尿道表面麻醉组（3.8±2.6 vs. 1.9±0.7,t=8.366,P=0.000）,而在住院时间（3.6±1.9 vs. 4.2±3.1,t=2.081,P=0.038）及住院费用（0.9±0.4 vs. 1.3±0.5,t=7.787,P=0.000）方面尿道表面麻醉组明显优于硬膜外麻醉组。结论：尿道表面浸润麻醉处理输尿管中下段结石是一种安全、可行、经济的方式,值得临床推广。     

远端胃癌腹腔镜D2根治术与传统开腹术近期疗效观察

目的：对比分析远端胃癌腹腔镜D2根治术与传统开腹术的临床近期疗效,探讨腹腔镜D2根治术的应用价值。方法：选取本院2008年12月至2012年3月胃癌患者60例,行腹腔镜手术患者30例为观察组;行传统开腹手术患者30例为对照组。观察比较两组患者切口长度、手术时间、术中出血量、首次肛门排气时间、清扫淋巴结数、术后住院时间、术后并发症等临床疗效指标。结果：腹腔镜组/开腹组：切口长度（5.98±1.56） cm/（13.02±2.15） cm（t=14.52,P=0.000）;手术时间：（189.02±13.78）min/（150.58±15.31） min（t=10.22,P=0.000）;术中出血量：（100.89±23.03） ml/（156.36±30.37） ml（t=7.97,P=0.000）;首次肛门排气时间：（3.67±1.56） d/（5.04±2.08） d（t=2.89,P=0.005）;淋巴结清扫数：（18.87±5.03）枚/（17.03±3.67）枚（t=1.62,P=0.011）;术后住院时间:（10.58±3.17） d/（13.59±4.36） d（t=3.06,P=0.003）。组间差异均具有统计学意义。结论：腹腔镜辅助远端胃癌D2根治术较传统的开腹手术治疗在临床近期疗效方面具有较大的优势。     

中性粒细胞/淋巴细胞比值对冠状动脉临界病变严重程度及斑块稳定性的预测价值

目的：探究外周静脉血中性粒细胞/淋巴细胞比值（neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR）与冠状动脉临界病变严重程度及斑块稳定性的关系。方法：将51例冠状动脉临界病变患者按NLR绝对值分为高NLR组（NLR＞2.73）23例和低NLR组（NLR≤2.73）28例,采集两组患者有关临床资料和实验室指标。通过冠状动脉造影（coronary angiography,CAG）及血管内超声（intravascular ultrasound,IVUS）比较2组病变严重程度和斑块组成。结果：（1）高NLR组非ST段抬高型急性冠状动脉综合征（non-ST-segment elevation acute coronary syndrome,NSTE-ACS）发生率明显高于低NLR组（70% vs. 39%,P=0.031）;（2）高NLR组的最小管腔直径小于低NLR组{（1.28±0.04） mm vs. （1.44±0.03） mm,P=0.002},而其狭窄百分比高于低NLR组{（61.69± 1.37）% vs. （55.03±0.91）%,P=0.000};（3）高NLR组斑块负荷及病变长度均明显高于低NLR组{（74.51±1.16）% vs （69.90± 1.22）%,P=0.010;（22.33±1.24） mm vs. （19.34 ± 0.55） mm,P=0.023};且高NLR组薄帽纤维斑块（thin-cap fibroatheroma,TC－FA）发生率及斑块坏死核心（Necrotic core,NC）比例明显高于低NLR组{57% vs. 25%,P=0.022;（24.70±0.70）% vs. （21.11± 0.74）%,P=0.001};（4）NLR与冠状动脉直径狭窄率（r=0.48,P=0.000）、斑块负荷（r=0.38,P=0.000）、病变长度（r=0.52,P=0.000）及斑块NC比例（r=0.28,P=0.047）呈正相关。结论：NLR与冠状动脉临界病变严重程度呈正相关,NLR可能可作为预测临界病变斑块稳定性的指标,对于冠状动脉临界病变治疗方案的选择有一定参考价值。     

Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响

目的：研究脂肪细胞因子Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响。方法：培养INS-1细胞,分为正常组：用普通培养基培养24h;棕榈酸（palmiticacid,PA）组：以0.5mmol/LPA培养24h;PA+Vaspin组：先加入320ng/mLVaspin预培养2h,再以0.5mmol/LPA+320ng/mLVaspin共培养24h;PA+Vaspin+雷帕霉素（rapamycin）组：先以50nmol/LRapamycin预培养2h,再以0.5mmol/LPA+320ng/mLVaspin共培养24h;PA+Vaspin+3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）组：先以1mmol/L3-MA预培养2h,再以0.5mmol/LPA+320ng/mLVaspin共培养24h。葡萄糖（3.3mmol/L和16.7mmol/L）刺激胰岛素分泌实验检测各组胰岛素分泌水平,Westernblot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammaliantargetofrapamycin,mTOR）、p-mTOR、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及P62蛋白水平,mRFP-GFP-LC3检测自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果：与正常组相比,PA组INS-1细胞上清液中胰岛素分泌水平在3.3mmol/L葡萄糖和16.7mmol/L葡萄糖刺激下均降低[（1.02±0.08）ng/mLvs.（0.54±0.06）ng/mL,P=0.000;（1.15±0.13）ng/mLvs.（0.71±0.05）ng/mL,P=0.000）],PA+Vaspin组较PA组升高[（0.76±0.03）ng/mLvs.（0.54±0.06）ng/mL,P=0.001;（0.91±0.04）ng/mLvs.（0.71±0.05）ng/mL,P=0.011）];与正常组相比,PA组INS-1细胞p-mTOR与mTOR蛋白比值低（2.04±0.14vs.1.19±0.09,P=0.000）,PA+Vaspin组p-mTOR与mTOR蛋白比值较PA组高（1.51±0.05vs.1.19±0.09,P=0.005）;同时,PA组自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与正常组相比明显增加（0.81±0.07vs.0.65±0.04,P=0.005;2.35±0.25vs.1.16±0.11,P=0.000）,P62蛋白水平降低（1.04±0.19vs.0.60±0.08,P=0.000）;PA+Vaspin组Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平较PA组低（0.58±0.04vs.0.81±0.07,P=0.001;1.95±0.08vs.2.35±0.25,P=0.007）,P62蛋白增加（0.82±0.03vs.0.60±0.08,P=0.032）;PA组自噬溶酶体数量较正常组多（8.33±1.53vs.0.33±0.58,P=0.000）,Vaspin干预后降低（3.67±1.53vs.8.33±1.53,P=0.001）;同时,PA干预INS-1细胞24h后细胞凋亡明显增加（7.91±0.50vs.22.15±2.05,P=0.000）,PA+Vaspin组较PA组细胞凋亡减少（13.23±1.97vs.22.15±2.05,P=0.000）。结论：Vaspin能够改善棕榈酸诱导的INS-1细胞过度自噬和细胞凋亡,改善胰岛β细胞分泌功能。     

二甲双胍通过干预上皮-间质转化逆转尼古丁诱导的肺癌吉非替尼耐药

目的：探讨尼古丁（nicotine,NIC）诱导EGFR敏感突变PC-9肺癌细胞株吉非替尼耐药及二甲双胍对其作用。方法：PC-9分成4组：空白组、尼古丁组、二甲双胍组、尼古丁和二甲双胍组,利用定量反转录聚合酶连锁反应（quantificational real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测E-cadherin和Vimentin信使核糖核酸（messenger ribonucleic acid,mRNA）的表达,Western blot检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达,细胞计数试剂盒（cell counting Kit-8,CCK-8）检测不同分组细胞对吉非替尼药物敏感情况。Transwell小室实验检测细胞侵袭迁移。结果：尼古丁诱导PC-9细胞上皮间质转化呈时间浓度依赖,在10 μmol/L尼古丁处理72 h后,发生E-cadherin下调和Vimentin上调最明显,故选该条件做以下实验。CCK-8提示,相比空白组,尼古丁组PC-9细胞对吉非替尼敏感性减弱,在吉非替尼浓度为0.05 μmol/L最明显（P=0.000）。Matrigel侵袭实验提示尼古丁组穿膜细胞数较空白组明显增多[（15.70±1.53）个/高倍视野 vs. （32.70±2.08）个/高倍视野,F=75.406,P=0.000,P=0.000];迁移实验的结果与之相似。与空白组相比,尼古丁组E-cadherin mRNA 表达水平明显降低[（0.932±0.100） vs. （0.459±0.024）,F=25.924,P=0.000,P=0.000）],Vimentin mRNA表达水平明显升高[（1.200±0.200） vs. （1.973±0.129）,F=20.998,P=0.000,P=0.000]。蛋白水平变化与之相同。尼古丁＋二甲双胍组可以增加尼古丁作用PC-9对吉非替尼的敏感性,在吉非替尼浓度为0.05、0.10、0.50、1.00、5.00 μmol/L时有统计学意义。尼古丁＋二甲双胍组可以减弱尼古丁组的穿膜数[（17.00±2.00）个/高倍视野vs. （32.70±2.08）个/高倍视野,F=75.406,P=0.000,P=0.000],迁移实验呈现相同的结果。相比于尼古丁组,尼古丁＋二甲双胍组上调E-cadherin mRNA[（0.459±0.024） vs. （0.838±0.058）,F=25.924,P=0.000,P=0.000）],下调Vimentin mRNA[（1.973±0.129） vs. （1.467±0.115）,F=20.998,P=0.000,P=0.003）]。结论：尼古丁通过上皮间质转化诱导PC-9细胞吉非替尼耐药,二甲双胍可以逆转上述现象。     

Kindlin-2 RNA干扰经Wnt信号通路抑制血管平滑肌细胞增殖

目的：观察Kindlin-2 RNA干扰（RNA interference,RNAi）对大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC）增殖的影响并探讨相关的作用机制。方法：构建并制备Kindlin-2 siRNA慢病毒载体并感染大鼠VSMC,CCK-8和BrdU技术检测重组Wnt3a蛋白诱导的VSMC增殖情况,实时定量PCR测定VSMC中Kindlin-2、c-Myc和cyclin D1 mRNA的表达水平,免疫共沉淀了解Kindlin-2和β-catenin的关系,Western blot检测VSMC中Kindlin-2、β-catenin、磷酸化β-catenin（Ser675）、GSK-3β和磷酸化GSK-3β（Ser9）蛋白的表达。结果：Kindlin-2 siRNA慢病毒载体能有效感染大鼠VSMC。CCK-8和BrdU结果表明Kindlin-2 RNAi能够显著抑制Wnt3a诱导的VSMC增殖（1.12±0.14 vs. 2.25±0.15,P=0.000;0.162±0.017 vs. 0.288±0.019,P=0.000）。与阴性对照组相比,Kindlin-2 RNAi组和Kindlin-2 RNAi+Wnt3a组中Kindlin-2、c-Myc和cyclin D1 mRNA表达水平均明显下降（0.964±0.014 vs. 0.530±0.029,P=0.000;0.980±0.025 vs. 0.572±0.022,P=0.000;0.979±0.009 vs. 0.590±0.035,P=0.002和0.964±0.014 vs. 0.569±0.027,P=0.000;0.980±0.025 vs. 0.741±0.026,P=0.001;0.979±0.009 vs. 0.769±0.017,P=0.023）。免疫共沉淀证实VSMC中Kindlin-2可以与β-catenin结合,而且Kindlin-2 RNAi+Wnt3a组中Kindlin-2、磷酸化β-catenin（Ser675）和磷酸化GSK-3β（Ser9）蛋白的表达水平较阴性对照+Wnt3a组明显降低（0.468±0.029 vs. 0.725±0.033,P=0.001;1.058±0.109 vs. 1.478±0.045,P=0.001;0.624±0.048 vs. 0.809±0.067,P=0.020）。但各组中总β-catenin和总GSK-3β蛋白水平没有明显变化（F=0.638,P=0.647;F=0.781,P=0.563）。结论：Kindlin-2 RNAi可以通过Wnt信号通路发挥作用并抑制VSMC增殖。     

p38 MAPK在钛颗粒诱导的破骨细胞形成中的作用

目的：探讨p38 丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK）在钛颗粒诱导的破骨细胞形成中的作用。方法：提取小鼠骨髓细胞,接种于24孔板后分为3组：①空白对照组;②核因子κB受体活化因子配体（receptor ac－tivator for nuclear factor-κB ligand,RANKL）组：每孔加入50 ng/ml RANKL;③钛颗粒+RANKL组：每孔加入0.01%钛颗粒悬液（0.1 mg/ml）及RANKL 50 ng/ml,抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP）染色鉴定和计数破骨细胞。Western blot检测p38、磷酸化p38的表达水平,通过腺病毒介导的p38 siRNA沉默p38的表达后,观察破骨细胞数目及相关蛋白RANK的变化情况。结果：各组破骨细胞计数结果分别为：空白对照组2.0±0.8,RANKL组62.8±5.6,钛颗粒+RANKL组93.0±8.8（F=235.193,P=0.000）。RANKL组高于空白对照组（P=0.000）,钛颗粒+RANKL组明显高于RANKL组（P=0.000）。Western blot结果显示钛颗粒能明显提高p38的磷酸化水平（p-p38/p38相对值： 空白对照组0.29±0.05,RANKL组0.64±0.05,钛颗粒+RANKL组 0.87±0.05,F=106.491,P=0.000,钛颗粒+RANKL组高于空白对照组和RANKL组P1=0.000,P2=0.001）。转染腺病毒介导的p38 siRNA后,Ad-sip38干扰组RANK蛋白的表达水平低于对照组和Ad-RFP组,破骨细胞数目也明显低于对照组和Ad-RFP组（破骨细胞计数：对照组99.8±13.5,Ad-RFP组95.8±7.1,Ad-sip38组3.8±2.5,F=148.654,P=0.000,对照组与Ad-RFP组无明显差异P=0.541,Ad-sip38处理组与对照组和空白病毒组比较均P=0.000）。结论：p38 MAPK在钛颗粒诱导的破骨细胞形成中起重要的作用。     

载BDNF基因阳离子超声微泡联合超声靶向微泡破裂技术治疗大鼠急性不完全脊髓损伤的实验研究

目的：探讨超声靶向破裂技术介导载脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）基因阳离子微泡（brain-derived neurotrophic factor-loaded cationic nanobubbles,BDNF/CNBs）治疗大鼠急性不完全脊髓损伤的可行性及效果。方法：96只成年雄性SD大鼠构建急性不完全脊髓损伤模型（Allen法）后随机分为4组：生理盐水（normal saline,NS）组;载BDNF基因阳离子微泡（BDNF/CNBs）组;BDNF基因+超声（brain-derived neurotrophic factor + ultrasound,BDNF+US）组;载BDNF基因阳离子微泡+超声（BDNF/CNBs + US）组,每组24只。经大鼠尾静脉注射药物后再按上述分组进行处理,在不同时间点采用HE染色观察脊髓损伤后的病理变化;Nissl染色观察神经元存活及再生情况;TUNEL染色法检测神经元凋亡情况;采用RT-PCR和Western blot检测BDNF基因和蛋白的表达情况;通过倒置荧光显微镜观察偶联绿色荧光蛋白的表达情况;最终采用BBB法（Basso,Beattie,and Bresnahan test,BBB）评估大鼠神经功能恢复情况。结果：本实验所制备的BDNF/CNBs阳离子超声微泡的平均粒径为（339.8±210.3） nm,Zeta电位为（24.30±6.24） mV。BDNF/CNBs + US治疗组能有效减轻脊髓组织损伤,明显增加BDNF基因及BDNF蛋白的表达（0.61±0.10 vs. 0.70±0.13 vs. 0.83±0.15 vs. 1.55±0.19,P=0.000;31.65±1.30 vs. 45.62±1.50 vs. 49.55±1.20 vs. 75.83±2.10,P=0.000）;与对照组相比,BDNF/CNBs + US治疗组尼氏小体数量明显增多（51.00±4.95 vs. 90.80±6.87 vs. 99.60±7.50 vs. 159.40±8.56,P=0.000）,神经元凋亡数明显减少（60.19±1.84 vs. 54.97±2.40 vs. 36.70±2.23 vs. 17.08±1.42,P=0.000）;且最终促进脊髓损伤后神经功能的恢复,即表现为明显增高的BBB评分（10.10±0.33 vs. 10.60±0.43 vs. 11.70±0.36 vs. 17.20±0.45,P=0.000）。结论：载BDNF阳离子超声微泡联合超声靶向微泡破裂治疗能有效地将BDNF基因转染入损伤脊髓组织,并能促进脊髓损伤的功能恢复。以BDNF/CNBs为基础的超声辐照联合基因治疗在治疗脊髓损伤及其他中枢神经系统疾病方面有广阔的应用前景,为脊髓损伤的治疗提供了一种新型、安全的方法。