单味中药诱导肝癌细胞分化的研究概况

原发性肝癌（肝癌）自20世纪90年代以来已上升为恶性肿瘤的第二位。自1971年Friend等发现二甲亚砜（DMS0）可诱导小鼠红白细胞分化和稍后Sachs发现在某些诱导分化物质作用下，鼠白血病细胞系的分化受阻有时是可逆的，并最早提出分化治疗（differentiation therapy）的概念。此后，诱导分化作为一种潜在的肿瘤治疗方法引起了广泛的重视。笔者总结了近年来国内外单味中药诱导肝癌细胞分化的研究概况，现综述如下。     

马兜铃酸致癌作用的分子毒理学关键点

马兜铃酸（AAs）几乎满足致癌物的所有标准与条件并导致人体癌症,被确定为一级致癌剂。本文将围绕着化学致癌物评价标准与致癌作用机制过程进行探讨与比较,以马兜铃酸为代表性典型范例,针对有关理念与概念综述现有的研究进展解读以下关键问题：①确定致癌物必须清晰其作用机理吗？致癌机理对致癌物评判的影响是什么？②马兜铃酸为何被判定为一级致癌物？③碱基对替换突变特征是什么？④AAs经口暴露却为何更易致泌尿系统癌症？⑤肾脏与肝脏间代谢与转运差异及其对AAs致毒的影响是什么？综上,作者认为,通过马兜铃酸现代毒理学评价的主要关键点进行解读,可深入理解并遵循国际研究规范,力抓中药及其成分的分子毒理学评价与分类,对于比较易受忽视的基因毒评价领域,需以科学严谨的方式系统收集、整理相关有效评价与证据,这将为我国在相关类似事件研究与评价中提供借鉴与规范。     

“马兜铃酸致癌事件”带来的警示与思考

正近日,"马兜铃酸"成了热搜词。2017年10月18日,国际著名期刊《科学》旗下的《转化医学》子刊发表题为"马兜铃酸及其衍生物与台湾和整个亚洲的肝癌广泛相关"的封面文章。文章称,研究人员通过对全世界共计1400多个肝癌样本的测序分析,得出了亚洲肝癌的发生与马兜铃酸暴露存在相关性的结论。在国内含马兜铃     

β-榄香烯抗肝癌的促凋亡机制研究

目的：研究中药莪术提取物β-榄香烯对人肝癌HepG2 细胞增殖抑制及诱导凋亡,以及小鼠肝癌H22 荷瘤小鼠凋亡相关蛋白表达的作用。方法:体外培养人肝癌HepG2 细胞,MTT 法检测β-榄香烯对细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡。通过建立H22 小鼠肝癌荷瘤模型,观察β-榄香烯对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及凋亡相关蛋白的表达。结果：β-榄香烯对HepG2 细胞具有抑制增殖的作用,呈剂量和时间的依赖性;Annexin V-FITC/PI 法检测到早期凋亡细胞。不同实验组对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用程度不同,各药物浓度组Caspase-3 蛋白均上调（P<0.05）,P65 蛋白均下调。结论：β-榄香烯可有效抑制人肝癌HepG2 细胞的增殖,其抑制癌细胞增殖的途径是通过诱导细胞发生凋亡,并且与上调凋亡相关蛋白Caspase-3、下调NF-κB P65 相关。     

银杏外种皮多糖抑制小鼠肝癌及诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的：研究银杏外种多糖（Ginkgo biloba enocarp polysaccharides,GBEP)对小鼠肝癌的抑制作用及作用机制。方法：建立小鼠肝癌（Heps)实体瘤及腹水癌模型,观察抑瘤率和小鼠的生命延长率,并用流式细胞术（FCM）检测小鼠肝癌实体瘤的细胞周期及癌细胞凋亡率。结果：GBFP在50,100和200mg.kg^-1剂量下,对小鼠肝癌的抑瘤率皆大于30％,能延长荷腹水型肝癌小鼠的生存期,随GBFP剂量增大,G0－G1期和S期细胞（％）不断减少,而G2－M期细胞及凋亡细胞（％）则不断增加。结论：GBEP可抑制小鼠肝癌（Heps),其作用机制可能与阻止G2－M期细胞转换而影响癌细胞在细胞周期中的进程和干扰S期细胞DNA合成以及诱导小鼠肝癌细胞凋亡有关。     

双苓扶正抗癌胶囊对小鼠肝癌的影响

目的：研究双苓扶正抗癌胶囊对小鼠肝癌的抑制作用及作用机制。方法：建立小鼠肝癌（Heps）实体瘤及腹水癌模型，观察抑瘤率和生长延长率，并用流式细胞术（FCM）检测小鼠肝癌实体瘤的细胞周期及癌细胞凋亡率。结果：双苓扶正抗癌胶囊在15g和30g/kg剂量下，对小鼠肝癌实体瘤有显著抑制作用，也能延长荷腹水型肝癌小鼠的生存期；还可引起小鼠肝癌瘤细胞S期及G2-M期细胞减少，G0-G1期细胞及凋亡细胞增加。结论：双苓扶正抗癌胶囊对小鼠移植性肝癌具有抑制作用，其作用机制可能与抑制细胞周期中S期DNA合成、干扰细胞的分裂增殖速度及诱导癌细胞凋亡有关。     

扶正抑瘤颗粒含药血清对小鼠肝癌细胞H22凋亡及细胞内Ca2+浓度的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)含药血清诱导小鼠肝癌细胞H22凋亡的作用及其对细胞内钙离子浓度的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法:FYK含药血清孵育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,电子显微镜观察FYK含药血清诱导H22细胞凋亡的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜测细胞内钙离子浓度的变化。结果:FYK含药血清能诱导小鼠肝癌H22细胞发生凋亡,同时使细胞内游离钙离子浓度升高,并与剂量和时间存在依赖性关系,细胞内钙离子浓度与相同时间点凋亡率呈正相关。结论:FYK含药血清可通过改变细胞内钙离子浓度诱导细胞发生凋亡,这可能是其抗肿瘤作用的机制之一。     

西洋参协同蜂胶增强荷瘤小鼠免疫功能的实验研究

目的：观察西洋参增强蜂胶提高肝癌移植瘤（HepA）小鼠免疫功能的作用。方法：实验设阴性对照组（蒸馏水）、蜂胶对照组（2．0g／kg体重）、蜂胶西洋参低、中、高三个剂量组（分别为0．5、1．0、2．0g/kg体重）,相当于人体临床用量的7．5、15和30倍。结果：与阴性对照组比较,蜂胶西洋参中、高二个剂量组可明显提高荷瘤小鼠血清溶血素水平、小鼠NK细胞活性和ConA诱导的脾淋巴细胞转化,差异均有显著性（P〈0．05）;而蜂胶对照组仅ConA诱导的脾淋巴细胞转化有明显的提高作用（P〈0．05）。结果还表明,蜂胶及蜂胶西洋参各组对HepA肿瘤的抑制率在10％～14％,但与阴性对照组比较无明显差异（P〉0．05）。结论：西洋参可增强蜂胶提高肝癌移植瘤（HepA）小鼠的免疫功能。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞H22凋亡的影响

目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响.方法:扶正抑瘤颗粒含药血清温育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,利用光镜、电镜、流式细胞仪、原位末端标记(TUNEL)等方法观察其诱导小鼠肝癌H22细胞的凋亡作用.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可明显诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡,随着培养时间的延长和用药剂量的增加,细胞凋亡率随之增加,与空白对照组比较P＜0.01或0.05.结论:扶正抑瘤颗粒药物血清可诱导肝癌H22细胞凋亡.     

脾虚内环境对诱导型肝癌小鼠胃组织中oatp2a1、oatp2b1、oatp4a1、oatp1b2表达的影响

目的:通过研究脾虚内环境下肝癌小鼠胃组织中有机阴离子转运家族(oatp2a1、oatp2b1、oatp4a1、oatp1b2)mRNA和蛋白的表达情况,探讨脾虚因素对肝癌的影响及其机制。方法:45只小鼠随机分成正常对照组、肝癌组和脾虚肝癌组,建立脾虚药物诱导肝癌小鼠模型,采用RT-qPCR和Western Blot的方法检测小鼠胃组织中oatp2a1、oatp4a1、oatp2b1、oatp1b2和肝癌组织中AFP的表达。结果:各组造模后小鼠胃组织Oatp家族的表达发生了变化,与肝癌组小鼠比较,脾虚肝癌组小鼠胃组织中的Oatp家族mRNA和蛋白表达明显降低(P0.05)。脾虚肝癌组小鼠癌组织的AFP表达较肝癌组小鼠癌组织明显升高(P0.05)。结论:脾虚因素能促进小鼠肝癌的发生和发展,其机制可能与脾虚内环境下胃组织中Oatp家族的异常表达有关,进一步提示脾虚湿浊转运障碍影响了肝癌的发生发展。     

清胰化积方在晚期胰腺癌治疗中可抑制MMP-2表达

目的:研究清胰化积方干预后MMPs的表达变化对胰腺癌肝转移的影响。方法:通过脾脏注射法建立裸鼠人胰腺癌SW1990HM肝转移模型,观察清胰化积方干预后对胰腺癌肝转移灶增殖的影响,通过检测MMPs mRNA表达的变化观察其与肝转移灶之间的关系,并通过免疫组化和western blot进一步验证。结果:①与NS组相比,QYHJ各组均可抑制肝转移灶的增殖生长(P<0.05);②与NS组比较,QYHJ干预后,大、中、小剂量组的肝转移灶肿瘤组织中MMP-1、MMP-7、MMP-9的mRNA表达无明显差异(VS NS,P>0.05);MMP-2的mRNA表达下调(VS NS,P<0.05)。结论:清胰化积方可能通过诱导MMP-2的表达下调抑制胰腺癌肝转移的发展。     

马兜铃酸诱导TM3小鼠睾丸间质细胞凋亡机制

目的:探讨马兜铃酸(AAs)对TM3细胞凋亡的作用及分子机制。方法:用2.5、10、25、100、400、1000 μmol/L浓度的马兜铃酸分别对TM3细胞作用24、48、72 h后,CCK-8法测定细胞活力; 25、100、400 μmol/L的马兜铃酸对TM3细胞作用48 h后,TUNEL检测细胞凋亡率,实时荧光定量法检测Caspase通路相关基因Caspase-3、Caspase-9和Bax mRNA相对表达情况,并通过Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9和Bax蛋白表达水平变化。结果:不同浓度的马兜铃酸对小鼠睾丸间质细胞的活力有一定的抑制作用; 用25、100、400 μmol/L浓度的马兜铃酸处理TM3细胞48 h后,通过TUNEL染色发现,不同浓度的马兜铃酸能够促进细胞的凋亡,Caspase-3、Caspase-9、Bax mRNA和蛋白表达水平升高。结论:马兜铃酸通过Caspase途径促进TM3细胞的凋亡来影响生殖细胞的发育。     

Acute, subacute toxicity and mutagenic effects of anacardic acids from cashew (Anacardium occidentale Linn.) in mice

Aim of the study

Anacardium occidentale Linn. (cashew) is a Brazilian plant that is usually consumed in natura and is used in folk medicine. Anacardic acids (AAs) in the cashew nut shell liquid are biologically active as gastroprotectors, inhibitors of the activity of various deleterious enzymes, antitumor agents and antioxidants. Yet, there are no reports of toxicity testing to guarantee their use in vivo models.

Materials and methods

We evaluated AAs biosafety by measuring the acute, subacute and mutagenic effects of AAs administration in BALB/c mice. In acute tests, BALB/c mice received a single oral dose of 2000 mg/kg, whereas animals in subacute tests received 300, 600 and 1000 mg/kg for 30 days. Hematological, biochemical and histological analyses were performed in all animals. Mutagenicity was measured with the acute micronucleus test 24 h after oral administration of 250 mg/kg AAs.

Results

Our results showed that the AAs acute minimum lethal dose in BALB/c mice is higher than 2000 mg/kg since this concentration did not produce any symptoms. In subacute tests, females which received the highest doses (600 or 1000 mg/kg) were more susceptible, which was seen by slightly decreased hematocrit and hemoglobin levels coupled with a moderate increase in urea. Anacardic acids did not produce any mutagenic effects.

Conclusions

The data indicate that doses less than 300 mg/kg did not produce biochemical and hematological alterations in BALB/c mice. Additional studies must be conducted to investigate the pharmacological potential of this natural substance in order to ensure their safe use in vivo.     

华蟾素抗肿瘤作用的临床研究

华蟾素注射液（Cinobutacini injection，CINO）是我国临床中应用较广的抗肿瘤中药制剂，尤其对原发性肝癌、肺癌、食管癌和胃癌具有较好的疗效。近年来，中药华蟾素注射液治疗肝癌、肺癌、胰腺癌的Ⅰ期临床研究已获得阶段成果，初步的实验结果显示，其抗肿瘤活性有效组分可能为其非极性部分。2005年该研究获得美国NCI U19课题立项资助，进行华蟾素注射液治疗胰腺癌的Ⅱ期临床研究。本文综述了华蟾素注射液及其活性成分在抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化、促进肿瘤细胞凋亡、提高机体免疫力等方面的研究进展。     

中药诱导肝癌细胞自噬特点分析及意义

中药及其成分在抗肝癌领域发挥着重要作用,从细胞自噬角度阐明其作用机制,有助于中医药在抗肝癌领域研究的发展。该文通过文献分析归纳,发现中药及其有效成分有促进自噬诱导肿瘤细胞凋亡和周期抑制的报道,也有抑制自噬阻滞肿瘤细胞周期的报道,但缺乏系统整理。该文根据中药诱导肝癌细胞自噬发挥作用的不同,从诱导杀伤性自噬、抑制保护性自噬、诱导肝癌保护性自噬、诱导效应不明自噬4方面进行归纳分析中药及其成分。发现引起杀伤性自噬的中药及成分,可通过诱导自噬的发生、阻滞细胞周期、诱导细胞衰老或促进细胞凋亡;抑制保护性自噬的中药及成分,通过抑制保护性自噬进而抑制肝癌细胞增殖;诱导保护性自噬的中药及成分具有显著抗肝癌作用,应考虑联合应用自噬抑制剂,增强药物对肝癌细胞的杀伤力,成为该类药物治疗肝癌的新途径;诱导效应不明自噬中药及成分,需明确其自噬的类型,根据自噬类型联合应用自噬激动剂或阻断剂以增强其抗肝癌效应,为临床肝癌的治疗提供新治疗途径。从细胞自噬方面不仅可揭示中药抗肝癌的分子机制,也可成为中药联合用药抗肝癌研究的新途径。     

从马兜铃酸含量影响因素探讨含马兜铃酸中药的风险控制

马兜铃酸广泛地存在于马兜铃科马兜铃属Aristolochia和细辛属Asarum等植物中,由于具有很强的肾脏毒性和对泌尿系统的致癌性而引起了广泛关注。我国于2003—2004年禁止关木通、广防己和青木香的使用,其他的含马兜铃酸中药均按照处方药管理使用。该文检索了近十年发表的有关马兜铃酸含量分析的文献,提示细辛属Asarum药材尤其是其根和根茎中的马兜铃酸含量较低,含细辛的中成药多数未检出马兜铃酸Ⅰ,个别中成药品种可检出微量马兜铃酸Ⅰ。而马兜铃属Aristolochia药材如马兜铃、朱砂莲、寻骨风等药材中的马兜铃酸含量相对较高,含这些药材的中成药马兜铃酸含量研究文献较少。影响中药材及中成药中马兜铃酸含量的因素较多,包括药材的使用部位、药材的产地、炮制方法、提取工艺等。建议重视含马兜铃酸中药尤其是马兜铃属Aristolochia中药的毒性,对相关的饮片和中成药的使用要慎重。加强含马兜铃酸中药的基础研究,选择合适的产地、炮制方法及提取工艺,同时加强相关中药材、饮片及中成药中马兜铃酸含量的监测,以降低用药风险,保证临床用药安全。     

Combined effects of ginseng and radiotherapy on experimental liver cancer

Panax ginseng, one of the most widely used plant medicines, was combined with radiotherapy, and studied against intrahepatic sarcoma-180 tumour cells in mice. Oral administration of ginseng extract, radiation treatment and the combination of both increased the life span of tumour-bearing mice to 20.4%, 16.9% and 82.1%, respectively. The same treatments were found to be cytotoxic to sarcoma-180-induced liver tumour cells. The synthetic rates of DNA, RNA and protein of the tumour cells were all inhibited measurably by the combined treatment. Histopathological studies showed that radiation treatment destroyed both cancer and liver cells and the cells shrank and became necrotic. The ginseng treatment seemed to help the recovery of liver cells and no infiltration of cancer cells was noted.     

The chemistry and biological activity of herbs used in Flor-Essence herbal tonic and Essiac

The herbal mixtures, Essiac and Flor-Essence, are sold as nutritional supplements and used by patients to treat chronic conditions, particularly cancer. Evidence of anticancer activity for the herbal teas is limited to anecdotal reports recorded for some 40 years in Canada. Individual case reports suggest that the tea improves quality of life, alleviates pain, and in some cases, impacts cancer progression among cancer patients. Experimental studies with individual herbs have shown evidence of biological activity including antioxidant, antioestrogenic, immunostimulant, antitumour, and antiocholeretic actions. However, research that demonstrates these positive effects in the experimental setting has not been translated to the clinical arena. Currently, no clinical studies of Essiac or Flor-essence are published, but a clinical study is being planned at the British Columbia Cancer Agency by the University of Texas-Center for Alternative Medicine (UT-CAM) and Tzu-Chi Institute for Complementary and Alternative Medicine.     

三氧化二砷对肝癌治疗及剂型研究新进展

通过查阅近几年国内外有关三氧化砷(As2O3)研究资料，对As2O3治疗肝癌的体内体外实验研究、临床试验及新剂型研究进行了综述。临床试验表明静脉注射给药治疗原发性肝癌，在规定的药物剂量范围内毒副作用较小，且疗效确切，可以用于肝癌预防和治疗，显示出可喜的前景；As2O3抗肝癌机制研究已逐步深入，还开展了联合用药研究等；但是新剂型研究很少。因而应加强高效、低毒、定向的新型给药系统的研究，使As2O3成为更理想的治疗肝癌药物。