管花肉苁蓉的苯乙醇苷类成分

采用各种色谱技术主要为ＨＰＬＣ从国产管花肉苁蓉Ｃｉｓｔａｎｃｈｅ ｔｕｂｕｌｏｓａ （Ｓｃｈｅｎｋ）Ｗｉｇｈｔ中分离得到７个苯乙醇苷类化合物,根据理化性质和波谱 数据鉴定它们的结构为２′－乙酰基类叶升麻苷（Ⅰ）、类叶升麻苷（Ⅱ）、ｃｒｅ－ｎａｔｏｓｉｄｅ（Ⅲ）、丁香苷Ａ３／′－α－Ｌ－吡喃鼠李糖苷（Ⅳ）、异类叶升麻苷（Ⅴ）、去咖啡酰基类叶升麻苷（Ⅵ）和红景天苷（Ⅶ）。化合物Ⅲ为首次从本属植物中分离得到,其它化合物为首次从本植物中分离得到。     

鲜管花肉苁蓉加工工艺

目的：建立鲜管花肉苁蓉直接加工饮片的工艺。方法：采用4因素3水平的正交试验对鲜管花肉苁蓉饮片加工过程的主要影响因素,包括切片厚度、加热温度和杀酶时间进行了优化,得到最佳的工艺参数为：鲜管花肉苁蓉切成4 mm厚片,70 ℃杀酶6 min。另外,将优化后的工艺与鲜管花肉苁蓉切片直接晒干、鲜管花肉苁蓉按传统方法晒干的工艺进行了比较。结果：按照优化后工艺得到的饮片,其松果菊苷的含量是鲜品切片直接晒干方法的7.3倍,是传统晒干方法的12.8倍；毛蕊花糖苷的含量是鲜品切片直接晒干方法的6.5倍,是传统晒干方法的14.9倍。结论：利用本方法加工管花肉苁蓉,可以大大提高饮片中有效成分的质量,节约原料,从而有效地保护野生肉苁蓉资源,提高药物的疗效,将产生很好的经济效益和生态效益。     

管花肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量测定

目的:采用高效液相色谱法,测定管花肉苁蓉野生种和栽培种以及人工种植不同寄主、不同大小药材的有效成分松果菊苷和毛蕊花糖苷含量。方法:AgilentEclipseXDB-C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相甲醇-乙腈-1%醋酸(15:10:75),流速0.6mL·min^-1,柱温30℃,检测波长334nm。结果:松果菊苷在0.904-9.04μg呈良好线性关系,回归方程为Y=2.000×10⁶X-114800(r=0.9999),毛蕊花糖苷在1.27-12.7μg呈良好线性关系,回归方程为Y=3.000×10⁶X-243200(r=0.9999),加样回收率松果菊苷平均为98.9%(n=5,RSD1.9%);毛蕊花糖苷平均为97.0%(n=5,RSD0.97%)。结论:本法用于管花肉苁蓉的测定简便、快速、灵敏、重复性好,所测样品中有效成分松果菊苷比毛蕊花糖苷的含量均高,野生种的2种有效成分含量均比栽培种的高,将样品以个体长度分成大、中、小3种不同样品,所测结果表示其含量按大、中、小依次增加,不同寄主间的含量差异很大,为评价管花肉苁蓉的药材质量提供一定的依据。     

管花肉苁蓉不同部位中苯乙醇总苷含量的测定

目的:考察苯乙醇总苷在管花肉苁蓉不同部位的分布情况。方法:采用UV法测定管花肉苁蓉不同部位中苯乙醇总苷的含量。结果:苯乙醇总苷在管花肉苁蓉不同部位分布为根部>中部>顶部,同一株管花肉苁蓉中顶部和根部的最大差异达到8.7倍。结论:管花肉苁蓉不同部位苯乙醇总苷含量的差异很大,且大部分的有效成分分布在根部,这些数据将为更加合理科学地使用开发管花肉苁蓉提供依据。     

基于膜分离技术富集纯化肉苁蓉苯乙醇苷的研究

目的探讨膜分离技术提取分离肉苁蓉有效成分的应用价值。方法肉苁蓉80%乙醇提取,以水溶解,经不同截留分子量超滤膜超滤,再经纳滤膜处理,用高效液相色谱法检测毛蕊花糖苷和松果菊苷的含量。结果不同截留分子量超滤膜处理,产品的出膏率和目标成分的含量存在明显差异。结论该方法可显著降低生产成本,清洁安全,方法可行。     

管花肉苁蓉中苯乙醇苷的提取和大孔树脂纯化工艺研究

目的优选管花肉苁蓉Cistanche tubulosa中苯乙醇苷的提取纯化工艺。方法以松果菊苷和麦角甾苷质量分数为考察指标,采用L9(34)正交试验设计,对提取工艺进行优化;考察7种大孔树脂对2种苯乙醇苷的吸附和解吸附性能,确定最佳纯化工艺条件。结果最佳提取纯化工艺为管花肉苁蓉药材加12倍量50%乙醇,70℃温浸2次,温浸时间1 h,滤过,合并滤液,回收溶剂,加水调整为含生药0.2 g/mL的上样溶液,上样量为0.8倍柱体积(BV),大孔树脂柱的径高比为1∶9,先用3 BV的水除杂,再用4 BV的30%乙醇洗脱,洗脱液减压浓缩至干,即得肉苁蓉苯乙醇苷纯化物,该纯化物中2种苯乙醇苷质量分数>75%。结论优选得到的提取纯化工艺稳定可行,适合工业化生产。     

管花肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的提取工艺优选

目的:筛选管花肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的最佳提取工艺条件。方法:采用多指标综合评分正交设计法筛选。结果:管花肉苁蓉中苯乙醇苷类成分的最佳提取工艺为:采用加热回流法,加20倍量的40%乙醇,提取1次,每次2 h,提取液减压浓缩至无乙醇味,浓缩液于60℃干燥,得管花肉苁蓉中苯乙醇苷类粗品。结论:本试验为管花肉苁蓉中苯乙醇苷的提取提供了参考数据,为管花肉苁蓉的进一步开发研究提供依据。     

肉苁蓉苯乙醇总苷微乳的制备及质量评价北大核心CSCD

目的制备肉苁蓉苯乙醇总苷微乳制剂,并对其质量进行评价。方法采用滴定法制备微乳,高效液相色谱法测定制剂中松果菊苷、毛蕊花糖苷的含量。结果所制备的微乳外观澄清透明,电镜下乳滴呈圆形或椭圆形,平均粒径16.6 nm,p H值为5.1~6.9,黏度为5.42 mm2·s^(-1),8000×g离心30 min未见分层;微乳中松果菊苷、毛蕊花糖苷平均含量分别为7.337,3.596 mg·m L^(-1),RSD分别为1.29%、1.60%。结论肉苁蓉苯乙醇苷微乳制备工艺简单,性质稳定;所建立的高效液相测定方法具有简单、专属、稳定、可重复性的特点,可用于肉苁蓉苯乙醇苷中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量测定。     

肉苁蓉愈伤组织培养及所含有效成分量的研究

目的为扩大和提高肉苁蓉Cistanchedeserticola资源的利用效率。方法以肉苁蓉肉质茎的不同组织部位作为外植体,采用正交实验方法,筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养。应用HPLC方法对愈伤组织培养物中松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)的量进行测定。结果肉苁蓉肉质茎的维管组织部分是诱导愈伤组织的最适外植体,鳞片叶次之,髓组织部分诱导效果较差。在暗培养、25~27℃条件下以B5为基本培养基附加6-BA(0.5~2mg/L)与IAA(0.5~1.5mg/L)诱导愈伤组织效果最佳;在半光照(光培养10h/d,暗培养14h/d)条件下,愈伤组织生长正常,最佳继代时间为25~30d。愈伤组织培养物中松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)达4.37%。结论筛选出了适宜的肉苁蓉愈伤组织培养方法,且培养物中主要药用有效成分松果菊苷和洋丁香苷(毛蕊花糖苷)的量达到并超过了《中国药典》要求(0.3%)的标准。     

HPLC同时测定肉苁蓉药材中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量

 目的 建立RP-HPIE同时测定肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量。方法 采用HP-1100色谱系统和YMC-PackODS-A柱(5μm,25mm×4.6 mm);以CH₃CN-MeOH-1％Hac(10:15:75)为流动相,流速0.7 mL·min^-1,检测波长为334nm,柱温:30℃。结果 松果菊苷进样量在0.12～1.47μg内、毛蕊花糖苷在0.18～2.16μg内与峰面积呈良好线性关系,相关系数均为0.9999;平均回收率分别为98.87％和97.01％。结论　本方法简便,精密度、重现性良好,结果准确可靠。可用于肉苁蓉药材、饮片及其制剂的含量测定。     

列当中苯乙醇苷类成分的含量测定

列当为列当科中重要的药用植物。该研究建立了列当中主要活性成分毛蕊花糖苷和crenatoside,以及总苯乙醇苷类化合物含量测定的方法,并测定15个列当样品中上述成分的含量,对其资源利用价值进行评价。研究采用高效液相色谱法测定列当中毛蕊花糖苷和crenatoside的含量,紫外分光光度法测定总苯乙醇苷的含量。结果显示列当中含量最高的成分是毛蕊花糖苷,其次为crenatoside;15个样品中毛蕊花糖苷、crenatoside和总苯乙醇苷的含量差异较大,毛蕊花糖苷的含量在1.15%~15.60%,crenatoside在0.83%~4.47%,总苯乙醇苷在6.78%~27.43%。采集时间对药材主要成分含量影响较大,盛花期采集的列当,苯乙醇苷类成分含量较高。结果表明2种含量测定方法操作简便、准确、重复性良好,可用于评价列当药材的质量以及资源利用价值。     

肉苁蓉属植物的化学成分研究进展

肉苁蓉为补益中药研究的热点之一，近20年来受到国内外的普遍关注。结合相关文献，对肉苁蓉属的化学成分作了全面系统的介绍，其中对苯乙醇苷类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷类作了详细综述，为肉苁蓉的应用奠定坚实的物质基础。     

石胆草的苯乙醇苷类成分研究

目的：研究石胆草Corallodiscus flabellata的化学成分。方法：大孔吸附树脂、凝胶、硅胶柱色谱分离，理化性质和光谱数据鉴定结构。结果：分离并鉴定了6个苯乙醇苷类化合物，1’－O－β-D-（3,4-二羟 基苯乙基）－4‘-O-咖啡酰基－葡萄糖苷（calceolarioside A,I)、1’－O－β－D－（3，4－二羟基苯乙基）－6’－O－咖啡酰基－葡萄糖苷（calceolarioside B,Ⅱ）、1’－O－β－D－（3，4－二羟基苯乙基）－6’－O－咖啡酰基－β－D－芹菜糖（1→3’）－葡萄糖苷（nuomioside A, Ⅲ）、1’－O-β-D－（3，4－二羟基苯乙基）－4’－O－咖啡酰基－β－D－芹菜糖（1→3’)－葡萄糖苷（isonuomioside A, Ⅳ）、1’－O－β－D－（3，4－二羟基苯乙基）－4’－O－咖啡酰基－β－D－葡萄糖（1→6‘）－葡萄糖苷（lugrandoside,V)、1’－O-β-D-（3,4二羟基苯乙基）－3’－O－咖啡酰基－β－D－葡萄糖（1→6’）－葡萄糖苷（isolugrandoside, Ⅵ）。结论：6个苯乙醇苷类化合物均为首次从该植物中分离得到。     

大孔树脂分离纯化广东紫珠中苯乙醇苷的工艺研究

目的 研究大孔树脂分离纯化广东紫珠中苯乙醇苷类成分的工艺。方法 以连翘酯苷B和金石蚕苷的量之和为考察指标,采用HPLC法考察10种大孔树脂对苯乙醇苷的吸附分离性能,并考察分离纯化苯乙醇苷类成分的最佳工艺条件。结果 以X-5型大孔树脂为吸附剂,优选的纯化工艺为树脂的最佳吸附量为32.79 mg/g,先以4 BV的水洗脱,除去大部分水溶性杂质,再以7 BV 30%乙醇溶液洗脱,体积流量为2 BV/h,所得提取物中苯乙醇苷的量达52.8%（n＝3）。结论 该优选的工艺简便可行,可作为分离纯化广东紫珠中苯乙醇苷类成分的有效方法。     

管花肉苁蓉花中查耳酮合酶的基因克隆、功能鉴定与表达分析

目的 研究管花肉苁蓉Cistanche tubulosa花中查耳酮合酶（chalcone synthase）Ct CHS蛋白的功能和Ct CHS基因在白、红、紫3种颜色花中的表达模式。方法 利用RT-PCR克隆Ct CHS基因并进行生物信息学分析。将p ET-28a-CtCHS质粒转入大肠杆菌通过IPTG诱导蛋白表达。将Ct CHS重组蛋白与底物4-香豆酰辅酶A、丙二酰辅酶A孵育并利用HPLC和MS检测产物。将p CAMBIA1300-35S-GFP-CtCHS质粒转入拟南芥原生质体观察CtCHS蛋白亚细胞定位。利用q RT-PCR检测Ct CHS基因在3种颜色管花肉苁蓉花中的表达模式。结果 克隆出1条Ct CHS基因,开放阅读框（open reading frame,ORF）长度为1173 bp,编码390个氨基酸,蛋白相对分子质量为42 800,具有查耳酮合酶保守的催化残基Cys164、His303、Asn336。利用大肠杆菌外源表达Ct CHS蛋白并纯化获得重组蛋白。Ct CHS蛋白能够催化4-香豆酰辅酶A与丙二酰辅酶A生成柚皮素查耳酮。Ct CHS蛋白主要定位于细胞质。Ct C...     

鹿茸草中3种苯乙醇苷的分离制备工艺研究

目的 利用大孔吸附树脂以及动态轴向分离技术,建立鹿茸草Monochasma savatieri中3种苯乙醇苷类化合物麦角甾苷(acteoside)、异麦角甾苷(isoacteoside)、torenoside B的最佳分离制备工艺。方法 通过静态吸附与解吸附实验和动态分离实验,研究8种常用大孔树脂AB-8、D101、HPD100、LSA-10、LX-11、LX-17、LX-38、XDA-6对该类化合物的分离特性,选出最佳大孔树脂类型;采用所选最佳大孔树脂对3种苯乙醇苷类化合物的纯化工艺参数进行优化。经放大实验得到总苯乙醇苷,再经动态轴向分离得到3种苯乙醇苷类化合物单体。结果 优化出的最理想大孔树脂为LX-17;优选的最佳上样质量浓度为原药材1.8 g/m L;最佳吸附时间为150 min;洗脱条件为乙醇-水系统,体积流量为2.5 m L/min,梯度浓度依次为纯水(4 BV)、15%乙醇(4 BV)、60%乙醇(5 BV)以及90%乙醇(2 BV);随后放大10倍进行中试,得到总苯乙醇苷部位,得率为5.25%,其中麦角甾苷15.24%、异麦角甾苷32.14%、torenoside B 29.33%;5 g总苯乙醇苷部位经动态轴向压缩制备柱纯化出3种苯乙醇苷单体成分,分别为麦角甾苷0.127 g,得率2.54%,质量分数为92%;异麦角甾苷0.894 g,得率17.88%,质量分数为95%;torenoside B 0.962 g,得率19.24%,质量分数为98%。结论 LX-17型大孔树脂可作为纯化苯乙醇苷的较佳分离材料,经过优化的分离工艺稳定可靠,有望在工业化生产中推广应用。     

肉苁蓉提取工艺及干燥方式研究

目的选择肉苁蓉最佳提取工艺参数,研究不同干燥方式对5种苯乙醇苷类成分的影响。方法采用单因素筛选结合Box-Behnken响应面法优化提取工艺。最优条件提取后,利用HPLC法检测不同干燥方式肉苁蓉的松果菊苷、肉苁蓉苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、2′-乙酰基毛蕊花糖苷成分含量并采用单因素方差分析、聚类分析、主成分分析、密切值法分析5种苯乙醇苷类成分含量,选择最佳干燥方式。结果最佳提取工艺:甲醇体积分数55.14%,液料比46.39,提取时间38.50 min。聚类分析、主成分分析、密切值法分析表明,采用冷冻干燥法所得到的肉苁蓉品质最好,80℃烘干次之,40℃烘干最低。结论使用该工艺提取肉苁蓉,其5种苯乙醇苷类成分提取完全、充分。虽然冷冻干燥法炮制肉苁蓉所保留有效成分最高,但从生产角度考虑,采用80℃烘干法炮制能达到成本和功效的平衡。     

肉苁蓉属植物分子鉴定研究进展

肉苁蓉是我国常用珍稀药材之一,具有较高的药用价值和生态价值。随着分子生物学技术的快速发展,多种基于DNA水平的分子鉴定技术逐步完善与成熟,肉苁蓉相关的研究也取得了一定的成果。对近10年来有关肉苁蓉属植物DNA分子鉴定技术的研究进展进行综述,对其存在的问题进行探讨,对应用前景进行展望,以期为肉苁蓉真伪优劣的精准鉴别及其资源保护、合理利用、新品种的培育提供参考。