过表达Beclin 1对食管癌Eca109细胞生物学行为的影响

目的：探讨自噬基因Beclin 1对食管癌细胞Eca109生物学行为的影响。方法：运用Beclin 1过表达质粒pIRES2-Zs－Green1-h Beclin 1转染食管癌 Eca109细胞株,RT-PCR和Western blot检测Beclin 1的mRNA和蛋白的表达;电子显微镜观察转染后自噬体的形成情况;MTT法检测转染前后各组细胞生长曲线的变化;血管形成实验检测其对Eca109细胞株血管形成能力的影响;Transwell小室实验检测其对Eca109细胞株迁移和侵袭能力影响;流式细胞技术检测目的基因组和对照组细胞周期的变化。结果：pIRES2-ZsGreen-hBeclin1质粒成功转染食管癌Eca109细胞株。目的基因组Eca109细胞较空载体组和未转染组生长明显抑制（P=0.000,P=0.000）;目的基因组Eca109细胞迁移、侵袭及血管形成能力明显低于对照组（P值均<0.05）;Beclin 1稳定表达后,S期细胞明显减少,细胞增殖受到抑制。结论：Beclin 1基因可以作为食管癌生长及转移的一种抑制基因。     

KAI1蛋白在食管癌组织中的表达

目的探讨KAI1蛋白的表达与食管癌发生及浸润转移的关系。方法采用免疫组织化学方法,检测160例食管癌组织及相应病例150例正常粘膜中KAI1蛋白的表达。结果KAI1蛋白在癌组织中的表达明显低于其正常粘膜(P<0.05),在有淋巴结转移病例中的表达明显低于无淋巴结转移病例(P<0.05)。KAI1蛋白的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度无关(P>0.05)。结论KAI1蛋白低表达与食管癌的癌变和淋巴结转移有关,KAI1的功能下调使得细胞具有恶性侵袭性。     

XRCC1和ERCC1蛋白在食管癌组织及癌旁组织中的表达及临床意义

目的 探讨XRCC1、ERCC1蛋白在食管癌组织及癌旁组织中的表达与食管癌临床病理特征的相关性.方法 采用免疫组织化学SP法对153例食管癌组织及76例癌旁组织中XRCC1、ERCC1蛋白的表达进行检测,结合临床病理特征进行分析.结果 XRCC1蛋白阳性表达率为54.2%(83/153),ERCC1蛋白阳性表达率为34.6%(53/153).XRCC1在癌组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为55.3%(42/76)、13.1%(10/76),二者差异有统计学意义(P＜0.05).ERCC1在癌组织、癌旁组织中的阳性表达率差异无统计学意义(P＞0.05).XRCC1蛋白的表达与民族、年龄、临床分期、病理类型、浸润程度、远处转移以及淋巴转移无相关性.ERCC1蛋白的表达与民族、年龄、临床分期、病理类型、浸润程度、远处转移无相关性.结论 XRCC1蛋白的表达可能与食管癌的发生有关.     

微血管密度与食管癌生物学行为的相关性

恶性实体肿瘤的生长必须依赖新生血管持续不断地为其提供营养和排泄代谢产物。血管内皮生长因子 (VEGF)有很强的促血管生成作用 ,对血管生成的关键环节即血管内皮细胞持续增殖具有直接作用。而野生型 P5 3抑制 VEGF的表达 ,突变型 P5 3则可以增加 VEGF的表达 [1 ,2 ] 。本实验选择 4 0例手术切除的食管癌标本 ,对其微血管密度及 P5 3蛋白进行免疫组织化学染色 ,初步研究了食管癌血管形成与P5 3蛋白表达的关系及病理学意义。1　资料和方法1.1　研究对象　选择 1993、1994年两年间手术切除的原发性食管鳞癌病例共 4 0例 ,平均年龄 5 6 …     

SIRT1蛋白在食管癌组织中表达及顺铂化疗对其表达的影响

目的探讨食管癌组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白表达与肿瘤发生发展的关系及顺铂化疗对其影响。方法选取在我院手术后获取的80例食管癌组织标本、40例符合要求的癌旁组织标本,采用免疫组化技术检测两组标本中的SIRT1蛋白表达差异,分析不同病理学特征食管癌组织中的SIRT1蛋白阳性表达率差异;选取EC109食管癌细胞分别培养于不同浓度(0、6、12μmol/L)顺铂中,采用Western-blot技术检测三组细胞中SIRT1蛋白的表达差异。结果食管癌组织中的SIRT1蛋白阳性表达率66.25%显著高于癌旁组织的18.75%,差异有统计学意义(P<0.05);不同TNM分期、是否发生淋巴结转移、不同肿瘤浸润深度的食管癌组织中的SIRT1蛋白阳性表达率组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);经单因素方差分析,随着顺铂浓度的增高,食管癌细胞中的SIRT1蛋白相对表达强度逐渐降低,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SIRT1蛋白在食管癌组织中表达显著增高,与肿瘤的发生发展有关,给予顺铂化疗能降低食管癌细胞SIRT1蛋白的表达。     

XRCC1基因在食管癌组织、癌旁组织中的蛋白表达与临床因素的相关性研究

目的:探讨DNA修复基因XRCC1在人食管癌组织、癌旁组织中的蛋白表达及其临床意义。方法:应用免疫印迹技术对66例食管癌患者的癌、癌旁组织中XRCC1的蛋白表达水平进行检测和比较。结果:66例食管癌患者XRCC1在癌组织的蛋白表达高于癌旁组织(P<0.05);淋巴结转移阳性患者组XRCC1在癌组织与癌旁组织的表达差异程度高于淋巴结转移阴性患者组(P<0.05);不同临床分期、病理类型、鳞癌中不同分化程度、族别病例组之间XRCC1在食管癌和癌旁表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:XRCC1的蛋白表达在癌组织和癌旁组织表达差异程度与食管癌发生及淋巴结转移有关联。     

Tiam -1蛋白表达与鼻咽癌生物学行为的关系

目的 探讨Tiam-1蛋白与鼻咽癌生物学行为的关系.方法 用免疫组化方法检测60例不同临床分期人鼻咽癌组织、20例鼻咽粘膜慢性炎症组织以及6例裸鼠人鼻咽癌转移细胞株模型标本中Tiam-1蛋白的表达.结果 Tiam-1蛋白在鼻咽癌组织中的阳性表达率63.33%高于慢性炎症组36.67%(X2=-20.429,P=-0.001);Tiam-1蛋白在鼻咽癌组的平均表达得分(2.9167±1.3057)高于鼻咽粘膜慢性炎组(0.7000±0.9234)(t=7.0162,P=0.0000).Tiam-1蛋白表达在临床T分期之间没有统计学差异(F=2.36,P=0.0811),在有无淋巴结和器官转移的肿瘤组织中均有统计学意义(P=0.0001).在具有转移特性的人源性鼻咽癌细胞株裸鼠模型肿瘤组织中Tiam-1蛋白均呈高表达.结论 Tiam-1与鼻咽癌浸润转移密切相关,提示Tiam-1蛋白可能是鼻咽癌的重要促侵袭转移因子.     

HIF-1在食管癌中的表达及临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1（hypoxia inducible factor-1,HIF-1）与食管癌发生、发展及预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测82份食管癌组织与相应癌旁组织（距离病灶5cm）中HIF-1的表达情况,随后分析其与食管鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。结果癌组织、癌旁组织中HIF-1过表达率分别为51.2%（42／82）,9.8%（8／82）,差异有统计学意义（P〈0.05）;HIF-1过表达在不同分化程度及是否伴有淋巴结转移上差异有统计学意义（P〈0.05）,HIF-1阳性组与阴性组2年生存率分别为64.3（27/42）,82.5（33/40）。结论 HIF-1过表达促进食管癌发生、发展并且与食管癌的预后密切相关。     

GLUT1 mRNA在食管癌中的表达及临床意义

目的 :研究GLUT1mRNA在食管癌组织及正常食管黏膜的表达水平。方法 :对 16例食管癌病人手术标本的肿瘤组织及正常食管黏膜进行总RNA的提取 ,并进行GLUT1mRNA的RT -PCR扩增。结果 :16例肿瘤组织标本中 ,14例有GLUT1mRNA阳性表达 ;相应的 16例正常组织标本中 ,10例有GLUT1mRNA阳性表达。结论 :GLUT1mRNA在食管癌组织中的表达水平较正常食管黏膜显著升高 ,对于食管癌的早期诊断有一定的帮助。     

nm23-H1蛋白在食管癌组织中的表达及意义

目的：探讨肿瘤转移抑制基因（nm-23H1）蛋白在不同食管癌组织中表达及与临床的意义。方法：选取收治的60例食管癌患者,取患者手术标本包括食管癌组织、食管癌旁1cm粘膜（癌旁）、食管正常粘膜（切缘）及食管癌区域淋巴结,采用流式细胞仪检测不同组织标本中nm23-H1蛋白表达水平。结果：癌组织与癌旁组织、组织切缘之间nm23-H1蛋白表达比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;nm23-H1蛋白在癌组织与淋巴结表达比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;在有、无淋巴结转移两组对应组织间,癌与癌、癌旁与癌旁、淋巴结与淋巴结比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;nm23-H1蛋白在切缘与切缘间表达比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。nm23-H1蛋白表达与食管癌组织病理分期有关,呈逐级降低趋势（P〈0．05）。结论：nm23-H1蛋白检测可作为食管癌判断肿瘤淋巴结转移的重要指标,有助于对食管癌患者术后转移的判断。     

RNF2在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨环指蛋白2（RNF2）在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响。方法 采用免疫组织化学法检测RNF2在结直肠癌组织和癌旁正常组织中的表达，并利用过表达的慢病毒转染HCT116细胞构建过表达RNF2的HCT116细胞系，通过CCK-8法、划痕实验、Transwell实验检测过表达RNF2对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响。结果 结直肠癌组织中RNF2阳性表达率高于癌旁正常组织（P <0.05）；不同年龄、组织学类型、分化程度、Dukes分期、淋巴结转移的结直肠癌患者的RNF2表达阳性率比较，差异有统计学意义（P <0.05）；HCT116组、HCT116-control组、HCT116-RNF2组HCT116细胞增殖、迁移能力及侵袭能力比较，差异有统计学意义（P <0.05）；HCT116-RNF2组细胞增殖速度、迁移能力及侵袭能力均高于HCT116-control组和HCT116组（P <0.05）。结论 RNF2在结直肠癌中呈高表达，且过表达RNF2可促进结直肠癌细胞迁移、增殖、侵袭能力，可为结直肠癌治疗提供新的治疗靶点。     

SND1在食管鳞癌细胞中的表达及对食管癌细胞恶行生物学行为的影响

目的 研究葡萄球菌核酸酶结构域蛋白1（SND1）基因在人食管鳞状细胞癌(ESCC)中表达水平的表达及对食管癌细胞恶行生物学行为的影响。方法 qRT-PCR及Western blot检测SND1在ESCC细胞株中翻译和转录水平的改变。运用sh-SND1病毒载体构建出SND1稳定干扰的ESCC细胞株模型,利用克隆形成,Transwell小室及流式细胞术等细胞生物学手段研究SND1基因对ESCC细胞增殖和转移、凋亡的影响,运用动物实验研究SND1基因在体内对ESCC细胞的影响。结果 qRT-PCR和Western blot的实验结果表明SND1在ESCC细胞中的转录和翻译水平高于人正常食管上皮细胞（HEEC）;经过培养、染色、拍照和通过统计学分析细胞表型实验数据,结果显示干扰SND 基因表达可显著抑制ESCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力;干扰SND1的表达抑制体内食管癌细胞的增殖能力;化疗药物敏感实验结果显示SND1干扰组食管癌细胞对CPT的敏感性增加,细胞凋亡率明显升高。结论 SND1在食管癌细胞中表达上调及促进食管癌细胞恶性生物学行为     

SAMHD1蛋白在食管癌中的表达特点及其临床意义

目的 探讨食管鳞癌组织中SAMHD1蛋白的表达水平及其临床意义.方法 用免疫组化方法检测204例食管鳞癌组织SAMHD1蛋白表达情况,分析其与食管鳞癌患者性别、年龄、临床病理特征以及患者生存预后之间的关系.结果 SAMHD1主要在食管鳞癌细胞的细胞质或细胞核中表达.SAMHD1的表达在患者的年龄、性别、肿瘤分期(T、N...     

SMURF1蛋白在人胃癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究SMAD泛素化调节因子1（SMURF1）蛋白在人胃癌组织中的表达及临床意义。方珐：采用免疫组化SP法检测68例胃癌及对应癌旁组织中SMURF1蛋白表达情况,分析SMURFl蛋白表达与胃癌不同临床病理特征的相关性。结果：SMURFl蛋白在胃癌组织中的阳性率为76．5％（52／68）,而在对应癌旁组织中的阳性率仅为26．5％（18／68）,差异具有统计学意义（χ2=34．029,P=0．000）。胃癌组织中SMURFl蛋白表达与浸润深度（χ2=5．461,P=0．019）、淋巴结转移（χ2=9．141,P=0．002）和肿瘤分期（χ2=8．380,P=0．004）显著相关,而与性别、年龄和肿瘤大小无明显相关。结论：胃癌组织中SMURFl蛋白异常高表达,其高表达与胃癌侵袭转移密切相关,提示SMURFl在胃癌发生、发展中可能发挥重要作用。     

食管鳞癌组织中β1整合素的表达及其与生物学行为的关系

目的检测β1整合素在食管鳞癌中的表达,探讨其与食管鳞癌临床生物学行为的关系,为食管鳞癌的基因治疗和预后判断提供理论依据。方法采用S-P免疫组织化学染色法检测10例正常食管粘膜和60例食管鳞癌组织中β1整合素的表达。结果β1整合素在食管鳞癌中的阳性表达率(61.67%)较正常粘膜(90.00%)低,但无显著性差异(P>0.05);在浸润至全层组β1整合素的阳性表达率(20.83%)显著低于浸润至肌层组(50.00%)(P<0.05);在淋巴结移组其阳性表达率(43.48%)显著低于无淋巴结转移组(72.97%)(P<0.05)。结论β1整合素的低表达可能是食管鳞癌浸润和淋巴结转移的原因之一。     

RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及其对癌细胞生物学行为的影响

目的 探究RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及对癌细胞生物学功能的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测不同结直肠癌细胞系DiFi、SNU175、HT-29、HCT-15细胞中RasGRF1mRNA;体外培养人结肠癌细胞,随机分为si-RasGRF1-NC组（阴性对照）、si-RasGRF1组（沉默RasGRF1表达）、NG组（空白对照）。采用qRT-PCR检测各组RasGRF1 mRNA,CCK-8法检测细胞存活情况,AnnexinV/PITC双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞PI3K/Akt通路蛋白。结果 DiFi细胞中RasGRF1 mRNA相对表达量最高（P <0.05）,选择DiFi细胞进行后续实验。si-RasGRF1组光密度值低于NG组、si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组细胞凋亡率高于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <0.05）。si-RasGRF1组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量低于NG组和si-RasGRF1-NC组（P <...     

食管癌组织中明胶酶的表达

目的：探讨明胶酶在食管癌中的表达及其意义。方法：以明胶酶谱（gel zymography）法对35例食管癌（其中27例鳞癌、8例腺癌）及8例正常食管粘膜组织中明胶酶表达水平进行检测。结果：明胶酶（MMP－2、pro－MMP－1和MMP－9）在癌组织和正常粘膜中表达差异有显著性（P＜0.05）；有淋巴结转移组（3－4期）显著高于无淋巴结转移组（0－2期）（P＜0.05）。结论：明胶酶与食管的发生发展，特别与肿瘤的侵袭转移关系密切，并且有望成为判断食管癌临床预后的新指标；明胶酶谱法是检测IV型胶原酶的有效方法。     

食管癌中高表达的钙结合蛋白1基因的序列分析及意义

目的:筛选食管癌中差异表达的基因,为进一步了解食管癌发生的分子机制奠定基础.方法: 利用荧光差异显示技术(DD-PCR)获得差异片段,对这些片段进行克隆和序列分析.通过在GenBank中同源性检索,查找差异片段相对应的同源基因.利用定量PCR检测验证该基因表达的差异性,并对该基因的结构进行预测和分析.结果:通过DD-PCR得到差异片段中的一个片段对应于人类钙结合蛋白1基因(Cabin1).荧光定量PCR技术检测结果表明钙结合蛋白1基因在食管癌组织中的表达量高于其对应的癌旁组织,在食管癌细胞株TE1中的表达量高于其他被测试的5种肿瘤细胞株.生物软件分析表明:该基因的读码框长6 663bp,编码2 220个氨基酸,至少有4种剪切方式.结论:Cabin1在食管癌组织及食管癌细胞中异常表达,可能在食管癌发生过程中起着重要的作用.