基于AMPK/eNOS信号通路探讨黄芪甲苷改善糖尿病肾病大鼠肾损伤的作用及机制研究

【目的】探讨黄芪甲苷对糖尿病肾病大鼠的治疗作用及机制。【方法】将27只大鼠随机分为正常组、模型组、黄芪甲苷组,每组9只。模型组、黄芪甲苷组大鼠给予高脂饲料喂养联合链脲佐菌素（STZ）40 mg/kg腹腔注射构建2型糖尿病肾病模型。造模成功后,黄芪甲苷组给予黄芪甲苷40 mg/kg灌胃治疗,正常组、模型组给予等体积生理盐水,每日1次,持续12周。12周后,测定大鼠空腹血糖（FBG）、尿白蛋白/尿肌酐比值（UACR）、血尿素氮（BUN）、血清肌酐（SCr）水平;苏木素-伊红（HE）染色法观察肾脏病理结构变化;过碘酸雪夫（PAS）染色、马松（Masson）染色法观察肾脏纤维化程度;定量聚合酶链反应（qPCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测肾脏组织中腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）、内皮型一氧化氮合酶（e NOS）mRNA及蛋白表达水平。【结果】与模型组比较,黄芪甲苷组大鼠FBG、UACR显著降低（P<0.05）,BUN、SCr含量未见明显改变;与模型组比较,黄芪甲苷组大鼠肾小球体积减小,基底膜增厚、系膜基质增生、肾小囊腔狭窄程度、胶原纤维沉积明显减轻;进一步的实验结果显...     

糖尿病对大鼠阴茎组织中eNOS和nNOS的影响及胰岛素的治疗作用

目的:研究糖尿病(DM)对大鼠阴茎组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白表达的影响及胰岛素的治疗作用。方法:随机选取雄性SD大鼠70只,其中60只以链脲佐菌素(STZ)诱导建立DM模型后,行阿朴吗啡阴茎勃起实验,筛选DM性ED模型。以未加处理因素的10只大鼠作为正常对照组,发生ED者随机分为DM性ED组、胰岛素组,发生DM但未发生ED者作为DM组,未成DM者作为STZ组。各组干预6周后,采用免疫组织化学SP法检测各组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达。结果:DM组、DM性ED组大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平显著低于正常对照组(P<0.01);胰岛素组显著高于DM组和DM性ED组(P<0.01),其中,eNOS蛋白表达水平接近于正常对照组(P>0.05),nNOS蛋白表达水平低于正常对照组(P<0.01);STZ组与正常对照组之间eNOS、nNOS蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)DM可以显著降低大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达水平,提示其可能是DM性ED发病的重要机制之一;(2)胰岛素干预可以减缓DM性ED大鼠阴茎组织中eNOS、nNOS蛋白表达的下降。     

川陈皮素对糖尿病大鼠海马Nrf-2表达及认知功能的影响

目的 探讨川陈皮素(NOB)对糖尿病认知功能的改善作用及可能机制.方法 实验大鼠均为雄性,分为正常组:12周龄Wistar大鼠8只,清洁级,正常饲料喂养;糖尿病组:12周龄GK大鼠8只,SPF级,正常饲料喂养;NOB组:12周龄GK大鼠6只,SPF级,正常饲料喂养,同时每天给予NOB 10 mg/kg灌胃8周.喂养到22周龄时,Morris水迷宫行为学实验评估大鼠认知功能、免疫组织化学和Western blot检测海马中核因手E2相关因子2(Nrf-2)的表达水平.结果 与正常纽相比,糖尿病组潜逃潜伏期延长(P＜0.05),NOB组潜逃潜伏期较糖尿病组缩短(P＜0.05).平台撤走后,与正常组相比,糖尿病组在目标象限停留时间较短(P＜0.05),NOB组较糖尿病组延长(P＜0.05).与正常组相比,糖尿病组Nrf-2的表达增加(P＜0.05);与糖尿病组相比,NOB纽Nrf-2的表达水平上升(P＜0.05).结论 NOB可以升高海马Nef-2表达水平,改善糖尿病大鼠认知功能障碍,提示可能与增强Nrf-2活性及激活抗氧化应激通路有关.     

卡托普利对SHR大鼠eNOS、iNOS表达的影响

目的 探讨自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR)在高血压发展进程中,卡托普利对SHR内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达的改善作用。方法 以WKY(Wistar-Kyoto)大鼠为空白对照,SHR为模型进行分组实验,7～24周龄SHR灌服卡托普利(3.375 g/(kg·d)),后停药观察至32周龄。测量血压、左室质量指数(left ventricular mass index, LVMI)、主动脉舒张功能、血清亚硝酸根离子(NO₂^-)含量、iNOS、eNOS mRNA以及蛋白含量变化。结果 (1)不同周龄的SHR左室质量指数、血清NO₂^-浓度均高于WKY,主动脉的舒张度均显著低于WKY。(2)mRNA表达含量变化：与WKY相比,不同周龄的SHR的心肌和动脉eNOS和iNOS mRN...     

AMPK在内皮细胞中对血管形成的影响

在真核细胞中,腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是细胞及全身能量稳态的一个重要调节器,受体内AMP/ATP比率调节,通常被称为代谢敏感性激酶。新近的研究发现,AMPK的激活参与了许多细胞(如骨骼肌细胞、内皮细胞)的分化、迁移和管腔形成。该文就AMPK在血管生成这一生物效应中的显像和作用机制予以综述。     

eNOS基因多态性与糖尿病肾病之间关系的临床研究进展

一氧化氮具有广泛的生理作用,其合成失调可介导糖尿病肾病.一氧化氮是由一氧化氮合酶氧化L-精氨酸合成的.近年来,内皮型一氧化氮合酶基因第4内含子的1个27bp的插入/缺失(a/b)多态性、第7外显子的894G→T点突变、(-786)T)C多态性与糖尿病肾病的关系已成为临床上新的研究热点,且各方面的结论不一.本文主要对这一研究热点的临床进展情况进行综述.     

MTHFR和eNOS基因多态性与糖尿病肾病的相关研究

目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因G894T位点与糖尿病肾病的关系。方法:运用PCR-RFLP检测2型糖尿病合并糖尿病肾病者60例(DN+组)、2型糖尿病不伴糖尿病肾病者60例(DN-组)、60例健康对照组(NC组)的MTHFR、eNOS基因型,比较各组间等位基因频率和基因型频率。结果:(1)MTHFR基因C677T位点DN+组TT基因型频率及T等位基因频率明显高于DN-组及NC组(P<0.05);(2)eNOS基因G894T位点DN+组T等位基因频率明显高于DN-组及NC组(P<0.05);(3)MTHFR基因C677T位点的TT基因型与eNOS基因G894T位点的TG基因型在2型糖尿病肾病方面具有协同作用(P<0.05)。结论:MTHFR基因C677T位点和eNOS基因G894T位点变异增加了糖尿病患者发生肾病的危险性,可能是糖尿病肾病的遗传易感基因。     

ACE和eNOS 2个基因多态性并存与糖尿病肾病的相关性

［摘要］ 目的　探讨广东2型糖尿病（T2DM）患者eNOS G894T多态性及ACE基因I/D多态性共存与糖尿病肾病（DKD）的关系．方法　选取T2DM患者231例和健康对照者（NC组）101例,用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP ）方法检测其eNOS G894T多态性及ACE基因I/ D多态性,其中2型糖尿病中正常白蛋白尿即DKD0组145例,微量白蛋白尿即DKD1组39例,大量白蛋白尿即DKD2组47例．比较分析各组间单个基因及两基因多态性共存的基因型频率、等位基因频率以及相关临床资料．结果　（1）NKD0、DKD1、DKD2 ３组间临床资料比较,除了收缩压有统计学差异外（χ2＝4.393,P＝0.036）,其他临床资料无统计学差异;（2）eNOS基因基因型及等位基因在各组间均无统计学差异（χ2＝5.054,P＝0.282;χ2＝5.425,P＝0.066）;（3）ACE DD基因型在DKD2和DKD0组间比较有统计学差异（χ2＝12.608,P＝0.002）,DKD（DKD1+DKD2）和DKD0比较有统计学差异（ χ2＝10.671,P＝0.005）;D等位基因在DKD0/DKD（DKD1+DKD2）组间比较有统计学意义（χ2＝7.284,P＝0.007）;（4）eNOS T等位基因与ACE D等位基因共存时,各组间无统计学差异（χ2＝1.884,P＝0.296）．结论　在中国广东地区汉族人中,eNOS T和ACE D多态性共存可能不是DKD的遗传危险因素．     

川陈皮素对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞凋亡的影响*

目的从肝细胞凋亡途径研究川陈皮素对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)大鼠的保护作用。方法 适应性喂养2周后,72只SD大鼠随机分成6组,分别为正常对照组、模型组、阳性药物水飞蓟素片治疗组（14 mg/kg）,以及川陈皮素低（100 mg/kg）、中（200 mg/kg）、高剂量（400 mg/kg）组,高脂高糖饮食8周构建NAFLD模型,治疗6周后,HE染色观察肝脏病理变化,计算肝指数,取血清检测ALT、AST、TC、TG、LDL-C、HDL-C、IL-1a、IL-1b和IL-6的含量,Western blot和qRT-PCR法测定肝组织TNF-α、TNFR-1、Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3、Bcl-2和Bax的蛋白及mRNA表达水平。结果 正常组大鼠精神活跃,模型组在造模成功后精神萎靡,水飞蓟素片治疗组以及川陈皮素低、中、高剂量组相较于模型组有一定好转。与正常组相比,模型组大鼠肝湿重、肝指数、ALT、AST、TG、TC、LDL-C、IL-1a、IL-1b、IL-6明显升高（P<0.05）,HDL-C明显降低（P<0.05）;相较于模型组,水飞蓟素片治疗组及川陈皮素低、中、高剂量组肝湿重、肝指数、ALT、AST、TG、TC、LDL-C、IL-1a、IL-1b、IL-6明显降低（P<0.05）,HDL-C明显升高（P<0.05）;此外川陈皮素高剂量组肝指数、ALT、AST、IL-1a、IL-1b、IL-6明显低于水飞蓟素片治疗组（P<0.05）;川陈皮素中剂量和高剂量组TG、TC、LDL-C明显低于水飞蓟素片治疗组（P<0.05）,中剂量和高剂量组HDL-C明显高于水飞蓟素片治疗组（P<0.05）,体重各组间没有明显差异。与正常组相比,模型组TNF-α、TNFR-1、FasL、Fas、Bax、Caspase-8、Caspase-3蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白和mRNA表达明显降低（P<0.05）;与模型组相比,水飞蓟素片治疗组、川陈皮素低、中、高剂量组TNF-α、TNFR-1、FasL、Fas、Caspase-8、Caspase-3蛋白和mRNA表达明显降低（P<0.05）,水飞蓟素片治疗组、川陈皮素低、中、高剂量组Bcl-2表达明显升高（P<0.05）。结论 川陈皮素对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏具有明显的保护作用,其作用途径可能与川陈皮素调节凋亡相关蛋白表达,降低炎症反应有关。     

eNOS基因多态性与糖尿病肾病易感性相关关系

目的探讨eNOS基因多态性与糖尿病肾病易感性的相关关系。方法选择病程大于10年的88例南方汉族2型糖尿病（T2DM）患者为研究对象。将尿微量白蛋白排泄率（UAER）〉20μg／mL归入糖尿病肾病（DN）组,将UAER≤20μg／mL归入对照组,比较两组患者的年龄、性别构成、血压、血脂、血糖、C肽、糖化血红蛋白等传统危险因素的差异,并进行eNOS基因多态性分析。结果①两组患者在性别构成、年龄、糖尿病病程、吸烟及高血压比例、收缩压、舒张压、体重指数、空腹血糖、餐后2h血糖、空腹C肽、餐后2hC肽、糖化血红蛋白、胆固醇和甘油三酯等方面比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。②DN组GT基因型及T等位基因显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论eNOS基因GT基因型及T等位基因是DN是易感因素。     

红景天苷对糖尿病大鼠心肌炎症因子和Hippo信号通路相关蛋白的影响

目的 探讨红景天苷(SAL)对糖尿病(DM)大鼠心肌炎症因子和Hippo信号通路相关蛋白的影响。方法 将4周龄雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组,正常组(对照组)、DM链脲佐菌素组(STZ组)、SAL治疗组(SAL组),每组5只。DM大鼠模型使用STZ诱导方案。SAL作为DM模型大鼠的治疗措施。HE染色和Masson染色观察心肌病理学改变,Tunel染色观察CM凋亡率。ELISA分别检测心脏组织匀浆和外周血中TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平。免疫印迹法分析Hippo信号通路相关蛋白表达水平。RT-PCR法定量检测Yap mRNA含量。结果 与对照组相比,STZ组大鼠CM排列明显紊乱,纤维化增加,CM凋亡增加; TNF-α、IL-1β和IL-6表达显著升高(P＜0.05);Mst1/2、Lats1/2和Yap表达上调,p-Mst1/2、p-Lats1/2和p-Yap表达下调,Yap/p-Yap比值增高(P＜0.05),Yap mRNA表达水平显著增高(P＜0.05)。SAL干预后CM纤维化和凋亡率降低,TNF-α和IL-6表达水平下调,Yap/p-Yap比值降低,Yap mRNA表达水平降低(P＜0.05)。结论 本研究的结果表明,SAL能改善DM大鼠CM功能,其机制与抑制炎症反应,减少细胞凋亡,以及调节Yap/p-Yap有关。SAL对心脏的长期保护作用值得进一步研究。     

雷公藤红素对IgA肾病大鼠肾脏组织中Notch信号通路表达的影响研究

目的 探讨雷公藤红素对IgA肾病大鼠肾脏组织中Notch信号通路表达的影响.方法 建立IgA肾病大鼠模型,观察雷公藤红素治疗后大鼠血尿、蛋白尿情况,采用免疫组织化学和实时荧光定量PCR检测Notch1、Jagged1及其下游靶基因Hes1、Hey1的表达.结果 与对照组比较,IgA肾病模型组血尿及24 h尿蛋白定量明显增高(P＜0.05);第16、20周末与模型组比较,贝那普利组及雷公藤红素干预组血尿、24 h尿蛋白定量明显下降(P＜0.05),且贝那普利组及高剂量组较低剂量组下降明显(P＜0.05).各组大鼠尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、谷丙氨基酸转移酶(ALT)、谷草氨基酸转移酶(AST)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).对照组大鼠肾小球、肾小管细胞质中Notch1、Jagged1仅有少量表达,在模型组大鼠肾脏组织的肾小球及肾小管细胞质中表达明显增加,贝那普利组、低剂量组、高剂量组Notch1、Jagged1的表达较模型组减弱,但仍高于对照组.而Hes1、Hey1在对照组大鼠肾小球、肾小管细胞质中基本无表达,在模型组大鼠肾脏组织的肾小球细胞核表达增加,贝那普利组、低剂量组、高剂量组Hes1、Hey1的表达较模型组减弱,但仍高于对照组.结论 雷公藤红素可以通过抑制IgA肾病大鼠肾组织中Notch信号通路的表达,减少血尿、蛋白尿的生成,从而对大鼠IgA肾病起到治疗作用.     

栀子苷对溃疡性结肠炎大鼠的抗炎作用及AMPK/MLCK信号通路的影响

目的 探讨栀子苷对溃疡性结肠炎大鼠的抗炎作用及腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路的影响。方法 90只SD只大鼠随机分成对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(300mg?kg^-1)、栀子苷低、高剂量组(40、80mg?kg^-1),每组18只;模型组、柳氮磺胺吡啶组、栀子苷低剂量组、栀子苷高剂量组用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导溃疡性结肠炎模型,建模成功后,柳氮磺胺吡啶组、栀子苷低、高剂量组给予相应药物灌胃,持续4周,对照组及模型组给予等体积的生理盐水。试验结束后,测定各组大鼠结肠黏膜损伤指数、疾病活动指数(DAI)评分、大体形态损伤评分,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(WB)法测定大鼠肠黏膜AMPK、MLCK mRNA和蛋白水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 与对照组比较,模型组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,柳氮磺胺吡啶组、栀子苷低剂量组、栀子苷高剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);且栀子苷高剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平低于栀子苷低剂量组(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平高于栀子苷低剂量组(P<0.05);与柳氮磺胺吡啶组比较,栀子苷低剂量组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织MLCK mRNA和蛋白表达水平、IL-2、IL-6、TNF-α水平升高(P<0.05),AMPK mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);栀子苷高剂量组和柳氮磺胺吡啶组结肠黏膜损伤指数、DAI评分、大体形态损伤评分、结肠组织AMPK、MLCK mRNA和蛋白表达、IL-2、IL-6、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 栀子苷能抑制溃疡性结肠炎大鼠肠道损伤及炎症反应;其机制与栀子苷可能增强了AMPK mRNA和蛋白表达,抑制了MLCK mRNA和蛋白表达,进而抑制了AMPK/MLCK信号通路有关。     

慢病毒介导沉默SOCS3基因对糖尿病大鼠相关胰岛素通路蛋白表达的影响

目的构建糖尿病大鼠模型,探讨慢病毒介导沉默细胞因子信号转导抑制因子3(suppressors of cytokine signaling 3,SOCS3)基因对大鼠相关胰岛素通路蛋白表达的影响。方法选取SD大鼠40只,构建2型糖尿病大鼠模型成功后,随机分为空白对照组、空白载体组和观察组,各10只。空白对照组不进行其他处理,空白载体组通过大鼠尾部静脉注射空慢病毒载体,观察组通过大鼠尾部静脉注射SOCS3 RNAi慢病毒载体。注射载体4周后,测定3组大鼠血糖、血脂、胰岛素水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测SOCS3、IRS1、IRS2、STAT5b、JAK2和STAT3 mRNA表达,Western blotting法检测SOCS3、IRS1、pIRS1、IRS2、pIRS2、STAT5b、pSTAT5b、JAK2、pJAK2、STAT3、pSTAT3蛋白表达。结果注射载体4周后,观察组大鼠空腹血糖、胰岛素、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平均明显低于空白对照组和空白载体组(P＜0.01),高密度脂蛋白胆固醇水平均明显高于空白对照组和空白载体组(P＜0.01);观察组SOCS3 mRNA和STAT5b mRNA表达均低于空白对照组和空白载体组(P＜0.01),IRS1 mRNA、IRS2 mRNA和JAK2 mRNA表达均高于空白对照组和空白载体组(P＜0.05～P＜0.01),3组STAT3 mRNA差异无统计学意义(P>0.05);观察组SOCS3、STAT5b、pSTAT5b表达均明显低于空白对照组和空白载体组(P＜0.01),IRS1、pIRS1、IRS2、pIRS2、JAK2、pJAK2、pSTAT3蛋白表达均明显高于空白对照组和空白载体组(P＜0.01),3组STAT3蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05)。结论沉默SOCS3基因可降低糖尿病大鼠血糖水平,SOCS3基因可能通过相关信号通路介导胰岛素抵抗。     

糖尿病肾病患者血清miRNA377的表达及其对SM AD信号通路调控作用

目的：探索糖尿病肾病（DN）患者血清miRNA377（miR377）的表达特点及其可能的下游调控通道。方法用实时荧光定量PCR方法检测经肾活检确诊的DN组、糖尿病无肾病损害（DM ）组和健康人群（对照组）血清中miR377的相对表达量,用TargetScan等生物信息学的方法预测miR377调节的靶基因,并在体外细胞模型中上调miR377的表达,检测下游机制蛋白。结果 DN组（1．32±0．13）和DM 组（0．92±0．11）患者血清中miR‐377均高于对照组（0．33±0．06）,差异有统计学意义（P＜0．01）;生物信息学分析显示为糖尿病肾病中miR377的靶基因为SMAD ;Western blot结果显示,转染miR377 mimics组HMC细胞中SMAD2和SMAD3蛋白的表达量均高于miR377 NC组和对照组（P＜0．05）,而SMAD7在各组中表达量无明显差异（P＞0．05）。结论糖尿病肾病患者血清的miR377存在异常高表达,可能预示肾脏病变的程度。     

积雪草酸对糖尿病大鼠肾脏c-Jun氨基末端激酶信号通路的影响

目的:探讨积雪草酸(AA)对糖尿病(DM)大鼠肾脏c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路及足细胞的影响。方法:链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,将糖尿病大鼠随机分为糖尿病组(DM组)和AA干预组(AA组),并以正常组(NC组)作对照。干预8周后测各组血尿素氮(BUN)、肌酐(SCR)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血糖、肾皮质超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;透射电镜观察足细胞超微结构;Western blot法测肾脏p-JNK、JNK蛋白的表达;免疫组化法测足细胞nephrin蛋白的表达。结果:与NC组比较,DM组血BUN、SCR、UAER、血糖均显著增加(均P<0.01);肾皮质MDA含量显著增加(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05);透射电镜示:DM组足突增宽,肾小球基底膜增厚,系膜基质增多。肾脏p-JNK、JNK表达均显著增加(均P<0.01);nephrin的表达显著降低(P<0.01)。与DM组比较,AA组血BUN、SCR、UAER、MDA含量均显著降低(均P<0.05),SOD活性显著增加(P<0.05);足细胞超微结构明显改善;肾脏p-JNK、JNK表达均显著降低(均P...     

帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠肾保护作用机制研究

【摘要】〓目的〓探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DN）大鼠的肾保护作用机制。方法〓采用链尿佐菌素(STZ)腹腔注射的方法构建DN大鼠动物模型,将造模成功的大鼠随机分为帕立骨化醇组（P组）、DN组（D组）,并设置健康对照组（N组）。P组大鼠每周灌胃帕立骨化醇3次,每次04μg/kg;D组与N组给予等量丙二醇灌胃。给药12周后检测各组24 h尿蛋白定量及血生化指标,通过ELISA法检测肾组织中肾素浓度变化,尿中前列腺素E2（PGE2）水平,免疫组化法检测肾组织中环氧化酶 2（COX 2）和nephrin蛋白的表达。结果〓与N组相比,D组和P组24 h尿蛋白定量、血清肌酐、肾素、尿PGE2水平及COX 2表达较高,P组又显著低于D组,差异均有统计学意义（P<005）。与N组相比,D组和P组nephrin蛋白表达较低,P组又显著高于D组,差异均有统计学意义（P<005）。结论〓帕立骨化醇可显著减少DN大鼠早期蛋白尿,此作用可能通过抑制COX 2、PGE2,减少肾素分泌,上调足细胞nephrin蛋白的表达实现。     

帕立骨化醇对糖尿病肾病大鼠肾保护机制的研究

目的探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DN）大鼠的肾保护作用及其可能机制。方法采用腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）构建DN大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为帕立骨化醇组（P组）、DN组（D组）,并设置健康对照组（N组）。P组大鼠每周腹腔注射帕立骨化醇3次,剂量为0.4μg/kg,给药12周后检测24h尿蛋白定量及血生化指标,以实时PCR检测肾组织肾素及环氧化酶-2（COX-2）mRNA表达,免疫组化检测肾组织COX-2蛋白的表达,并以ELISA法检测尿前列腺素E2（PGE2）水平。结果与N组相比,D组与P组24h尿蛋白定量、血肌酐（SCr）、空腹血糖及甲状旁腺激素（PTH）均显著升高（均P＜0.05）,肾组织肾素和COX-2 mRNA及蛋白表达,以及尿PGE2水平均显著升高（均P＜0.05）,且D组显著高于P组（P＜0.05）。肾素水平与尿PGE2水平及COX-2 mRNA表达均呈正相关（r=0.798、0.722,均P＜0.01）。结论帕立骨化醇可显著减少DN大鼠早期蛋白尿,其机制可能与通过抑制肾组织COX-2表达,下调尿PGE2水平,从而抑制肾组织肾素表达有关。     

厄贝沙坦对糖尿病大鼠心肌损伤中MAPKs信号通路及相关因子的影响

目的观察厄贝沙坦在糖尿病大鼠心肌损伤中发挥的作用,并探讨其对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPKs)信号通路及其相关因子表达影响。方法雄性SD大鼠50只,随机分为糖尿病4周(DM4W)组、糖尿病8周(DM8W)组、糖尿病8周+厄贝沙坦(DM8W+Ir)组、对照(Con)组、高糖高胆固醇饮食(HC)组,各10只。复制2型糖尿病大鼠模型成功后,DM8W+Ir组给予厄贝沙坦溶液灌胃干预;饲喂第4周时,处死DM4W组大鼠并留取心脏组织标本;饲喂8周后,处死剩余组大鼠。比较各组大鼠空腹血糖、体质量、心体比和左心室质量指数;取大鼠离体心肌行Masson染色观察心肌细胞纤维化改变;ELISA法检测心肌细胞内炎症细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-1表达水平;Western blotting法检测心肌组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)、P38丝裂原激活蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-related kinases,P-ERK1/2)蛋白表达水平。结果HC组大鼠空腹血糖、体质量、心体比、左心室质量指数与Con组差异均无统计学意义(P>0.05),IL-1β、IL-6、IL-1表达水平和MKP-1、P38MAPK、P-ERK1/2蛋白表达与Con组差异亦均无统计学意义(P>0.05)。与Con组、HC组相比,各糖尿病组大鼠Masson染色心肌细胞明显纤维化改变;体质量减轻,心肌细胞内炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-1表达水平升高,心肌组织MKP-1蛋白表达降低,P38MAPK、P-ERK1/2蛋白表达升高(P < 0.05~P < 0.01);与DM4W、DM8W组比较,DM8W+Ir组大鼠IL-1β、IL-6、IL-1表达水平降低,MKP-1蛋白表达升高,P38MAPK、P-ERK1/2表达蛋白降低(P < 0.05~P < 0.01)。结论厄贝沙坦通过调控MAPKs信号通路发挥改善糖尿病心肌损伤的作用。     

赖诺普利对糖尿病模型大鼠肾脏的保护作用

目的探讨血管紧张素转换酶抑制剂赖诺普利对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用。方法24只健康雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组（NC组，n=8）、糖尿病未治疗组（DM组，n=8）、糖尿病苯那普利治疗组（DL组，n=8）。应用链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病模型，造模成功后，用赖诺普利（10mg·kg^-1·d^-1）对DL组进行治疗性灌胃，其余2组均用等量自来水灌胃。10周治疗后，观察了其对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。结果对照组糖尿病大鼠肾小球滤过率（GFR）、肾血流量（RPF）、滤过分数（FF）及尿白蛋白（Upro）均较正常对照组明显升高，赖诺普利治疗后糖尿病大鼠GFR、RPF、FF及UA均较糖尿病对照组明显降低，血糖、糖化血红蛋白较糖尿病对照组无显著性差异。结论早期应用赖诺普利能改善糖尿病大鼠肾脏的血流动力学异常，减少尿蛋白排泄，防止或延缓糖尿病肾脏的病理学进展。