miR⁃1254靶向PAX5调控肝癌的迁移、侵袭与血管形成

目的：探讨miR?1254对肝癌细胞生物学行为的影响及其潜在机制。方法：①RT?qPCR检测miR?1254在肝癌和癌旁组织或细胞系中的表达。②构建过表达和敲低miR?1254的肝癌细胞系,Transwell实验与HUVEC体外成管实验研究miR?1254对肝癌细胞迁移、侵袭与血管形成的影响。③Target Scan预测miR?1254的靶基因,RT?qPCR与Western blot测定靶基因的表达,双重萤光素酶报告基因证实miR?1254的靶基因。结果：①miR?1254在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达上调（P < 0.01）;②miR?1254促进肝癌细胞的迁移、侵袭与血管形成;③配对盒基因5（paired box gene 5,PAX5）在肝癌组织和细胞系中的表达下调,PAX5是miR?1254的直接靶标,miR?1254负向调控肝癌中PAX5的表达;④过表达PAX5能够逆转过表达miR?1254对肝癌细胞进展的的促进作用。结论：miR?1254通过靶向PAX5促进肝癌细胞的迁移、侵袭与血管形成,因而它是肝癌的一个潜在的治疗靶标。     

miR⁃202及其靶基因Glypican⁃3在肝癌中的表达及其临床意义

目的：探究肝癌标志物磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（glypican?3,GPC3）与miR?202相互调控的分子机制。方法：取126例临床肝癌组织标本及血清样本,免疫组化检测GPC3表达,qRT?PCR检测循环miR?202的水平;培养肝癌HepG2细胞,转染miR?202 mimics,qRT?PCR检测miR?202表达,Western blot检测GPC3表达;CCK8实验检测miR?202 mimics对HepG2细胞增殖活性的影响;Luciferase报告基因实验检测miR?202对GPC3的调控。结果：临床126例肝癌GPC3总阳性率为77.78%,其表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、临床分期无关,但与细胞组织学分化类型以及微血管侵犯高度相关。肝癌患者循环miR?202呈低水平状态,且与癌组织GPC3表达水平呈负相关关系。上调HepG2细胞中miR?202表达,GPC3表达随之下调,且癌细胞增殖受抑制。Luciferase实验证实miR?202可直接负调控GPC3的表达。结论：GPC3受miR?202的直接调控,GPC3高表达与肝癌恶性生物学表征密切相关。靶向GPC3的治疗策略如能辅助提高miR?202的功能,将可能产生协同抗肝癌的效果。     

miR⁃1301对肝细胞肝癌增殖的影响及机制研究

目的：明确miR?1301在肝细胞肝癌组织以及细胞系中的表达情况,并探讨miR?1301对肝癌细胞增殖的影响及可能机制。方法：实时定量PCR检测肝癌、癌旁组织及肝癌细胞系中miR?1301的表达水平,并在肝癌细胞中转染miR?1301模拟物或抑制物,用CCK?8法和平板克隆法检测其对肝癌细胞增殖活性的影响;通过蛋白质印迹（Western blot）检测磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、蛋白激酶B（p?AKT、AKT）蛋白的表达情况。结果：miR?1301在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达水平明显低于对应的癌旁组织和正常肝细胞。实时定量PCR证实转染了miR?1301模拟物或抑制物后,miR?1301的表达量明显升高或降低（P＜0.01）。 与对照组相比,降低miR?1301的表达能明显促进肝癌细胞Hep3B的增殖活性,差异有统计学意义（P＜0.05）;而过表达miR?1301则显著抑制Huh7细胞的生长,差异有统计学意义（P＜0.05）。 此外,miR?1301可显著抑制PI3K/AKT信号通路的活性。结论：miR?1301在肝细胞肝癌中低表达,并抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与miR?1301抑制PI3K/AKT通路的活性有关。     

miR⁃552⁃3p通过抑制DACH1促进肝细胞性肝癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的：探讨miR?552?3p在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达及其促进细胞增殖和迁移、侵袭的机制。方法：qRT?PCR检测HCC细胞系及人正常肝细胞系中miR?552?3p的表达情况;下载TCGA数据库中HCC样本的微阵列数据,分析miR?552?3p在HCC癌组织及癌旁组织中是否存在表达差异;miR?552?3p mimics以及miR?552?3p inhibitor转染HCC细胞,荧光素酶报告基因验证miR?552?3p与DACH1是否存在靶向关系,CCK?8及Transwell实验检测miR?552?3p及其与DACH1相互作用对于HCC细胞增殖、迁移、侵袭的影响。结果：TCGA数据库中HCC样本的分析结果表明,miR?552?3p在HCC中高表达,同时qRT?PCR显示miR?552?3p在HCC细胞系中的表达水平显著高于人肝细胞系L02;miR?552?3p的高表达促进HCC细胞的增殖、迁移和侵袭,而抑制miR?552?3p表达后则相反;荧光素酶报告实验证实miR?552?3p靶向作用于DACH1的3′?UTR,上调miR?552?3p可抑制DACH1的表达,而下调miR?552?3p则增加DACH1表达;DACH1的过表达可抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭,但同时过表达miR?552?3p后DACH1对于HCC细胞相关功能的抑制即可解除;miR?552?3p正向调控Wnt/β?catenin信号通路的激活。结论：miR?552?3p靶向作用于DACH1促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭,并参与调控Wnt/β?catenin信号。可能为HCC的诊疗策略提供潜在靶点。     

MicroRNA⁃141靶向致癌基因Bmi⁃1抑制胰腺癌细胞的增殖

目的：探讨miR?141调控胰腺癌细胞增殖的机制。方法：采用qRT?PCR检测正常胰腺细胞和4种胰腺癌细胞株中miR?141的表达。从Gene Expression Omnibus数据库（GEO）下载包含36例胰腺癌样本和16例正常样本的GSE71533 miR?141表达文件,分析miR?141在胰腺癌及癌旁的表达差异。Western blot 检测Bmi?1在正常胰腺细胞和4种胰腺癌细胞株中的表达。荧光素酶报告基因检测miR?141和Bm?1之间的靶向关系。通过CCK8、平板克隆形成检测Bmi?1和miR?141对胰腺癌细胞增殖能力的影响。结果：qRT?PCR显示与正常胰腺细胞相比,miR?141在胰腺癌细胞中表达下调;GSE71533数据集分析结果也显示miR?141在胰腺癌组织中下调;Western blot分析结果表明Bmi?1在胰腺癌细胞中高表达,双荧光素酶实验表明miR?141锚定在Bmi?1的3′非编码区,下调Bmi?1可以抑制胰腺癌细胞的增殖;上调miR?141可以降低Bmi?1的蛋白质表达水平,从而抑制胰腺癌细胞中细胞增殖。结论：miR?141通过靶向Bmi?1在胰腺癌中起抑制作用,在胰腺癌诊疗中具有潜在功能。     

术后结合替莫唑胺对神经胶质瘤患者血清miR⁃181b及miR⁃497的影响

目的：分析神经胶质瘤患者术后结合替莫唑胺对血清miR?181b及miR?497表达的影响。方法：将收治的76例神经胶质瘤术后患者随机分为A、B两组。其中A组（38例）采用司莫司汀方法治疗,B组（38例）采用司莫司汀联合替莫唑胺的方法治疗。观察比较两组患者的临床疗效,术后 1、2、3年生存率,Karnofsky 评分。同时收集患者治疗前、治疗后的血清样本,以检测miR?181b及miR?497表达的变化。结果：B组患者的客观有效率明显高于A组,差异有统计学意义（P < 0.05）;B组中位生存期以及术后1、2、3年生存率明显高于A组（P < 0.05）;B组术后的Karnofsky 评分显著高于A组（P < 0.05）。术后血清miR?181b浓度明显提高［术后（162.34 ± 51.79）fmol/L vs. 术前（91.37 ± 40.41）fmol/L,P <0.05］;术后血清miR?497明显提高［术后（166.23 ± 53.68）fmol/L vs. 术前（88.36 ± 36.72）fmol/L,P < 0.05］。结论：术后结合替莫唑胺能够提高神经胶质瘤患者血清miR?181b及miR?497的表达,延长患者生存期。     

miR⁃1247对骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

目的：检测microRNA?1247（miR?1247）在骨肉瘤细胞系中的表达及对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响和机制。方法：采用实时荧光定量PCR（qRT?PCR）测定miR?1247在人正常成骨细胞系（U2OS、Saos?2、143B）及人骨肉瘤细胞系（hFOB1.19）中的表达,将Saos?2细胞系分成两组,即miR?1247过表达组（miR?1247组）和阴性对照组（EV组）,采用LipofectamineTM 2000分别转染miR?1247 mimics和阴性对照序列scramble,采用MTT法和流式细胞术测定增殖和凋亡,Western blot检测SOX9和FAM129B的表达。结果：miR?1247在骨肉瘤细胞系中的相对表达量低于人正常成骨细胞系,差异有统计学意义（P < 0.05）。转染后0、1、3 d,EV组与miR?1247组细胞增殖水平差异无统计学意义（P > 0.05）;转染后5、7 d,miR?1247组细胞增殖水平低于EV组,差异有统计学意义（P < 0.05）。miR?1247组细胞凋亡率高于EV组,差异有统计学意义（P < 0.01）。 miR?1247组SOX9和FAM129B蛋白表达量低于EV组,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论：miR?1247在骨肉瘤细胞系中低表达,miR?1247上调表达可抑制细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与SOX9和FAM129B蛋白下调表达有关。     

miR⁃448通过下调SPACRL1促进口腔鳞癌增殖及迁移能力的研究

目的：探讨微小RNA?448（miR?448）对口腔鳞癌细胞增殖调控作用,筛选并验证相关靶基因。方法：RT?qPCR检测miR?448在人口腔鳞癌临床标本中表达;miR?448抑制物转染口腔鳞癌细胞系Cal?27细胞,MTT实验研究miR?448抑制物对细胞增殖能力的影响;细胞划痕实验检测miR?448抑制物对细胞迁移能力的影响。3种基因预测软件筛选出miR?448的可能下游靶基因,实验验证miR?448对靶基因的调控作用。结果：RT?qPCR分析发现miR?448在15对OSCC组织内表达显著升高。与对照组相比,转染miR?448抑制物后,Cal?27细胞增殖及迁移能力明显下降;Western blot、RT?qPCR结果显示SPARCL1基因的表达量升高;荧光素酶报告基因实验确定miR?448与SPARCL1基因在3′ UTR区存在位点结合。结论：miR?448在人口腔鳞癌临床标本中呈高表达。miR?448与SPARCL1?3′ UTR的结合,下调 SPARCL1的表达,在口腔鳞癌细胞中发挥癌基因的作用,促进肿瘤细胞的增殖与迁移。     

miR⁃588在乳腺癌中的表达及对乳腺癌细胞增殖和侵袭的作用

目的：探讨miR?588在乳腺癌中的表达及对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法：用化学合成的miR?588成熟模拟物（miR?588 mimic）过表达miR?588,并验证miR?588过表达率;采用MTT、克隆形成实验检测miR?588对乳腺癌细胞MCF7和MDA?MB?231增殖的影响;采用划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测miR?588对MDA?MB?231细胞迁移和侵袭的影响。结果：miR?588在乳腺癌组织及细胞中的相对表达均低于癌旁正常组织及乳腺正常上皮细胞;过表达miR?588能明显抑制MCF7和MDA?MB?231细胞的增殖;上调miR?588可显著抑制MDA?MB?231细胞的迁移和侵袭能力。结论：miR?588在乳腺癌中低表达,过表达miR?588可抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭。     

血清miR⁃23a、miR⁃27a联合CEA在结直肠癌诊断中的临床价值

目的：探讨结直肠癌（colorectal cancer,CRC）患者血清miR?23a和miR?27a的表达水平联合癌胚抗原（carcinoembryo?nic antigen,CEA）在CRC诊断中的临床价值。方法：通过GEO数据库分析GSE25609中miR?23a和miR?27a在CRC患者及健康体检者中的表达水平。收集2014年1月—2018年12月在南京医科大学附属南京医院进行治疗的100例CRC患者为CRC组,以及同期在南京市第一医院健康体检者100例为对照组。分析所有纳入研究者的临床资料,通过qRT?PCR检测CRC患者及健康体检者血清miR?23a及miR?27a等的相对表达水平,分析血清miR?23a及miR?27a与CRC患者各临床病理特征之间的关系,绘制ROC曲线分析miR?23a、miR?27a联合CEA对结直肠癌的诊断价值。结果：GSE25609中miR?23a和miR?27a在CRC患者血清中显著升高（P < 0.01）。通过临床样本进一步证实CRC患者血清miR?23a和miR?27a的相对表达水平明显高于健康体检者（P < 0.001）。CRC患者血清miR?23a和miR?27a的相对表达水平均与CRC患者的T分期、淋巴结转移及远处转移密切相关。血清miR?23a、miR?27a联合CEA诊断CRC的AUC为0.921（95% CI：0.879~0.962）（P < 0.001）,灵敏度为86%,特异度为94%。结论：miR?23a与miR?27a在CRC患者血清中高表达,并且与CRC患者的T分期、淋巴结转移及远处转移密切相关,血清miR?23a、miR?27a联合CEA检测可显著提高对CRC的诊断效率。     

miR⁃590⁃3p对甲状腺乳头状癌的抑制作用研究

目的：探究miR?590?3p在甲状腺乳头状癌进展中的作用。方法：利用RT?PCR检测甲状腺乳头状癌患者标本及其细胞系中miR?590?3p的表达。利用CCK?8、EdU、划痕、Transwell实验以及细胞流式技术检测miR?590?3p对细胞相关功能的影响。Western blot检测上皮细胞?间充质转化（epithelial?mesenchymal transition,EMT）途径相关蛋白表达量的变化。结果：在甲状腺乳头状癌组织及细胞系中miR?590?3p的表达量明显低于癌旁组织和正常甲状腺滤泡上皮细胞。与对照组相比,干扰miR?590?3p明显提升TPC?1细胞的增殖活性（P < 0.01）,过表达miR?590?3p则降低K?1细胞的增殖活性（P < 0.01）。干扰miR?590?3p可增加TPC?1细胞的迁移与侵袭能力,抑制细胞凋亡（P < 0.01）,过表达miR?590?3p则降低K?1细胞的迁移与侵袭能力,促进细胞凋亡（P < 0.01）。同时可以抑制EMT相关蛋白的表达。结论：miR?590?3p在甲状腺乳头状癌的发生发展中发挥抑癌基因的作用,可能为甲状腺乳头状癌的治疗提供帮助。     

脓毒症心肌病患者循环miR⁃155诊断价值的研究

目的：探讨脓毒症心肌病（sepsis?induced cardiomyopathy,SIC）早期血浆miR?155水平的变化,与血浆B型利钠肽（B?type natriuretic peptide,BNP）、肌钙蛋白T（cardiac troponin T,cTnT）的相关性,评估miR?155是否可作为早期诊断SIC的新型生物标记物。方法：收集31例江阴市人民医院心血管内科救治SIC患者入院即刻血浆样本及24例健康对照者血浆样本。逆转录实时定量PCR（qRT?PCR）检测样本miR?155的表达水平,并与cTnT和BNP进行相关性分析。qRT?PCR检测SIC患者血浆miR?155表达水平,绘制ROC曲线评估诊断价值。结果：循环miR?155在SIC患者血浆中含量较对照组增高（P=0.004）。相关性分析表明血浆miR?155含量与BNP、cTnI呈正相关;ROC曲线分析发现miR?155对SIC的诊断效能AUC为0.905。结论：SIC早期血浆中miR?155的变化水平与血浆BNP、cTnT的相关性好,有望成为SIC的早期诊断生物标记物。     

过表达miR⁃155对斑马鱼胚胎发育的影响

目的：探讨过表达miR?155对斑马鱼胚胎发育的影响和机制。方法：利用qRT?PCR检测miR?155在斑马鱼胚胎发育各阶段的表达;通过显微注射的方法将miR?155 mimic转入斑马鱼胚胎,实现基因的过表达;利用qRT?PCR和Western blot方法检测过表达miR?155后发育相关标志性基因的表达变化;利用ETS1的mRNA对过表达miR?155的胚胎进行补救实验。结果：miR?155在胚胎发育时期均有表达,在器官形成期表达量明显增高;过表达miR?155导致斑马鱼胚胎发育迟缓、褪膜延迟、腹部及心包积液、尾部变短变粗,肝脏、小肠、心脏及肌肉发育相关标志性基因表达下调;ETS1能缓解过表达miR?155所致发育畸形。结论：过表达miR?155可能通过负向调控ETS1而影响斑马鱼胚胎肝脏、小肠、心脏及肌肉的发育。     

miR⁃29c过表达对P19细胞增殖、凋亡和分化的影响

目的：探讨microRNA?29c（miR?29c）过表达对P19细胞增殖、凋亡和分化的影响及机制。方法：体外传代培养P19细胞,利用细胞转染技术构建miR?29c过表达细胞（mimic组）。CCK?8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞周期;Hoechst染色结合流式细胞技术检测细胞凋亡情况,定量PCR和蛋白质免疫印迹（Western blot）检测凋亡相关因子Bax/Bcl?2表达情况;二甲亚砜（DMSO）诱导P19细胞分化,定量PCR检测心肌特异性标志基因肌球蛋白重链（α?myosin heavy chain,αMHC）,转录因子GATA4和心肌增强因子2c（myocyte enhancer factor 2c,Mef2c）表达情况,明确miR?29c过表达对P19细胞分化的影响;生物信息学分析结合荧光素酶报告实验和Western blot明确miR?29c的靶基因。结果：与对照组相比,miR?29c过表达组细胞增殖速率较慢,细胞周期S期比例降低;miR?29c过表达组细胞凋亡率增高,Bax表达水平增高,而Bcl?2表达无明显差异;P19细胞分化第6天和第8天miR?29c过表达组αMHC、GATA4和Mef2c的表达水平显著高于对照组;Akt3被证实为miR?29c的靶基因。结论：miR?29c过表达可能是通过调控Akt3来抑制P19细胞增殖、促进P19细胞的凋亡和分化。     

急性呼吸窘迫综合征新生儿血浆miR⁃6833⁃3p的表达水平及诊断效能

目的：筛选并验证分析与新生儿急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）相关的微小核糖核酸（miRNA）,初步研究患儿血浆中miR?6833?3p的表达水平及其诊断效能。方法：选取南京医科大学附属儿童医院25例ARDS患儿（ARDS组）为研究对象,同期选取32例普通新生儿为对照组。采用微流体芯片技术筛选与新生儿ARDS相关的miRNA,对于组间差异表达超过5倍的miRNA进一步进行实时荧光定量聚合酶链式反应（RT?PCR）验证芯片重复性及进行靶基因预测,对两组血浆miR?6833?3p的表达水平进行检测并与急性生理评分做相关性分析,通过绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线分析 miR?6833?3p在患者中的诊断效能并计算诊断敏感度及特异度。结果：通过基因芯片筛选出24个与新生儿ARDS相关的高表达差异基因。表达差异超过5倍的miRNA有8个,4个上调的分别是miR?31?5p、miR?4754、miR?6833?3p和miR?192?3p,4个表达下调的基因分别是miR?362?3p、miR?11a、miR?7a?2?3p和miR?1382。通过验证发现miR?6833?3p在ARDS组血浆中显著上调（P＜0.01）,且与APACHE Ⅱ评分中的急性生理评分呈正相关（r=0.731,P < 0.001）。通过靶基因预测分析发现miR?6833?3p与PI3?K/Akt、MAPK信号通路可能密切相关。相关ROC曲线结果也显示,miR?6833?3p预测新生儿ARDS的ROC曲线下面积为 0.848,其诊断最佳阈值为 1.03,约登指数最大值为 0.59,此时 miR?6833?3p的诊断灵敏度为 84.55%,特异度为75.36% 。结论：miR?6833?3p在新生儿ARDS血浆中的表达水平显著升高,可作为新生儿ARDS的特异性标志物。     

miR⁃21在早产儿呼吸窘迫综合征患儿血清中表达水平的研究

目的：探讨早产儿呼吸窘迫综合征（respiratory distress syndrome,RDS）患儿外周血血清中miR?21的表达水平及其临床意义。方法：选取2015年6—12月入住南京医科大学第一附属医院新生儿监护病房的RDS患儿30例;对照组为非RDS早产儿共21例,使用逆转录PCR法检测外周血血清中miR?21的表达水平,并分析各组病例的临床特点。结果：RDS患儿血清中miR?21表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P < 0.05）。中重度RDS组miR?21表达水平有明显增加趋势,但目前尚未发现差异有统计学意义。RDS患儿中使用肺表面活性物质（pulmonary surfactant,PS）组miR?21表达水平明显增加（P < 0.05）。结论：血清miR?21表达水平与RDS密切相关,提示miR?21在RDS发病机制中起一定作用。     

microRNA⁃449a通过调控MDM4抑制神经母细胞瘤生长

目的：研究microRNA?449a（miR?449a）对神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法：在BE（2）?C细胞中过表达miR?449a后通过实时荧光定量PCR（quantitative real?time PCR,qPCR）分析基因表达水平的变化,MTT分析细胞活力,克隆形成试验观察肿瘤细胞增殖能力,同时,采用microRNA靶标预测和功能注释数据库miRDB预测miR?449a潜在靶向基因,对靶基因MDM4进行过表达和干扰表达后,Western blot分析相关蛋白表达水平,流式细胞术分析细胞凋亡。结果：miR?449a过表达抑制细胞增殖及克隆形成。经过软件预测和实验验证,证实MDM4为miR?449a的1个靶基因。另外干扰MDM4表达后亦可以抑制细胞增殖和克隆形成。过表达MDM4可以抵消由转染miR?449a模拟物所引起的细胞凋亡和p53蛋白量的增加。miR?449a可以促进BE（2）?C细胞凋亡,但是在稳定干扰p53表达的细胞株没有观察到这种效应。结论：miR?449a通过靶向调控MDM4基因进而稳定p53蛋白从而促进肿瘤细胞凋亡,提示miR?449a可能作为神经母细胞瘤潜在治疗靶标之一。     

miR⁃124在卒中后脑缺血损伤与修复中的作用及机制研究进展

脑卒中是成人因病致死和致残的主要原因之一,缺血性卒中为其主要类型。虽然随着溶栓、机械取栓技术的成熟,卒中的病死率逐年下降,但是大部分幸存者可能会有慢性功能障碍,而临床尚缺乏促进卒中后功能修复的药物。缺血性脑卒中后,miR?124在外周血液和脑组织中表达均发生改变,通过靶向调节基因和调控病理过程广泛参与缺血性卒中后的氧化应激、神经炎症、细胞凋亡、神经分化等。文章就miR?124在卒中后脑缺血损伤与修复中的作用及机制研究进展做一综述。     

miR⁃16/15a-/-小鼠NK细胞功能及其对结肠癌移植瘤敏感度分析

目的：观察miR?16是否通过调节NKG2D表达而影响自然杀伤（natural killer,NK）细胞的生物学功能及其抗肿瘤活性。方法：miR?16/15a-/-小鼠和对照小鼠经皮下注射MC38细胞制备结肠癌移植瘤模型,观察两组小鼠皮下实体瘤生长情况;比较普通小鼠生理或荷瘤状态下NK1.1+NKG2D+细胞和NK1.1+NKG2D?细胞内miR?16的表达;分析生理及荷瘤状态下miR?16/15a-/-小鼠NK细胞NKG2D表达、γ干扰素（interferon?γ,IFN?γ）分泌及细胞毒性作用。结果：与同品系小鼠比较,miR?16/15a-/-小鼠中MC38结肠癌移植瘤的生长受到显著抑制,生理状态小鼠NK1.1+NKG2D+细胞miR?16的表达明显低于NK1.1+NKG2D?细胞,而在荷瘤小鼠来源的两组细胞中无明显差异;与野生型小鼠相比,生理及荷瘤状态下的miR?16/15a-/-小鼠NK1.1+NKG2D+细胞的比例及NK细胞活性无明显变化。结论：miR?16/15a敲除抑制MC38结肠癌移植瘤生长,而miR?16/15a敲除小鼠体内NK细胞的比例及功能及荷瘤状态下NK细胞活性并无明显变化,提示miR?16/15a缺失并非通过NK细胞抑制MC38结肠癌移植瘤生长。     

miR⁃182在口腔鳞癌血清外泌体中的表达及其临床意义

目的：探讨血清外泌体中miR?182的表达水平及其在口腔鳞状细胞癌浸润中的临床意义。方法：通过TCGA数据库与文献相关研究相结合,筛选出在头颈鳞癌组织及头颈鳞癌细胞株外泌体中均高表达的miRNA;分别运用ExoQuick试剂盒和超速离心法提取血清及HEK293细胞培养上清液中的外泌体,结合透射电子显微镜、纳米粒子追踪分析仪、Western blot实验鉴定外泌体;通过实时定量PCR方法检验筛选出的miRNA在两种口腔癌细胞系HN6、CAL27及口腔癌患者血清外泌体中的表达水平;通过共孵育的方法将miR?182 antagomir加载到HEK293细胞外泌体中,CCK?8实验检测该外泌体处理的CAL27细胞增殖能力的变化。结果：miR?182在头颈鳞癌组织、口腔鳞癌细胞株及头颈鳞癌细胞株外泌体中均显著高表达;口腔癌患者血清外泌体miR?182表达水平与对照组相比升高,但差异无统计学意义（P＞0.05）,肿瘤浸润深度＞5 mm的患者血清外泌体内 miR?182含量相对于正常对照组明显升高（P＜0.05）;加载miR?182 antagomir的外泌体处理CAL27细胞后,CAL27细胞的增殖能力显著下降（P＜0.05）。结论：miR?182在口腔癌中高表达,血清外泌体miR?182的表达水平与口腔鳞状细胞癌的肿瘤浸润深度有关,加载miR?182 antagomir的外泌体可以显著抑制CAL27细胞的增殖。