基于“质量标志物-生物活性”关联分析评价丹参的等级

目的基于"成分反映活性,活性指向功效"的中药质量控制研究思路,建立用于丹参饮片等级评价的Logistic回归模型。方法采用超高效液相色谱法(UPLC)测定丹参质量标志物(quality marker,Q-marker)含量,以凝血酶时间(thrombin time,TT)、羟自由基抑制率、DPPH自由基清除率作为生物活性评价指标,运用Logistic回归分析法将质控指标和生物活性指标进行关联分析,最后建立Logistic回归模型。结果 Logistic模型结果显示,31批丹参饮片被分成了优、良、中、差4个等级,样本等级预测概率(P)值均大于90%,说明本研究所建立的模型其准确性和预测能力均较好。结论基于含量测定及生物活性结果建立的Logistic回归模型可用来评价丹参饮片质量高低,为丹参整体质量控制提供参考依据。     

基于“生物活性-质量标志物”关联的赤芍饮片等级评价方法研究

目的基于"成分反映活性,活性指向功效"的中药质量控制研究思路,建立用于赤芍饮片等级评价的Logistic回归模型。方法采用超高效液相色谱(UPLC)法测定质量标志物芍药苷的含量,以赤芍抗凝血生物效价,羟自由基抑制率和DPPH抑制率作为生物活性评价指标,运用Logistic回归分析法将各批次芍药苷含量和生物活性指标进行关联分析,最终建立用于赤芍4个等级(优、良、中、差)评价研究的"主成分分析-Logistic回归"模型。结果等级评价结果显示,各批次赤芍的等级概率达到了95%以上。16个批次的赤芍饮片分布在优级、良级和中级各有5个批次,差级有1个批次。结论初步建立了不同批次赤芍饮片等级评价的新方法,并用于赤芍饮片质量的评价。     

基于成分-抗氧化活性相关的鸡血藤饮片等级评价研究

目的基于"成分反映活性,活性指向功效"的中药质量控制研究思路,建立鸡血藤饮片等级评价模型。方法采用超高效液相色谱(UPLC)技术建立鸡血藤饮片的儿茶素、表儿茶素含量测定方法,以ABTS·+清除率、羟自由基清除率和DPPH·清除率作为体外抗氧化活性评价指标,运用Logistic的二分类算法,将儿茶素、表儿茶素含量指标和抗氧化活性指标进行关联分析,最终建立用于鸡血藤4个等级(优、良、中、差)评价研究的"主成分分析-二分类Logistic回归"模型。结果不同产地鸡血藤饮片的儿茶素和表儿茶素质量分数分别介于0.40~1.26mg/g、0.57~2.02mg/g;抗氧化指标ABTS·+、羟自由基和DPPH·清除率分别介于12.96%~51.76%、30.65%~66.65%、37.65%~60.33%。二分类Logistic回归分析结果显示,17个批次的鸡血藤及其2个伪品(大血藤和牛马藤)饮片分布在优级、中级、差级各有5个批次,良级有4个批次,拟合概率P值均大于94%。结论基于Logistic回归分析建立的的鸡血藤等级评价模型,可用于不同产地来源鸡血藤的等级划分。     

基于二分类Logistic回归分析的桂枝等级预测研究

目的结合质量控制成分和生物活性对桂枝药材质量等级的影响,建立一种基于"成分-功效"研究思路的二分类模型,为桂枝的质量分级提供依据。方法采用超高效液相色谱法(UPLC),建立质控成分的含量测定方法,以DPPH和羟自由基清除实验来反映桂枝药材体外抗氧化活性,采用Logistic算法,将质控指标和抗氧化指标进行关联分析,最后建立用于桂枝分级的二元Logistic回归模型。结果建立了20批桂枝样品的UPLC指纹图谱,并对其抗氧化活性进行测定。采用主成分分析筛选出了4个质量控制成分香豆素、桂皮醇、肉桂酸、桂皮醛,并对其进行方法学验证。根据回归方程,初步将20批桂枝药材分为优、良、中、差4级。结论基于二元Logistic回归模型来描述桂枝饮片等级与影响因素之间的映射关系是可行的,可以更好地表达投料饮片等级分类标准,为中药桂枝的质量评价标准制定提供了新的思路。     

红花中黄酮类化合物的分离与体外抗氧化研究

采用体外抗氧化活性(包括DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法和FRAP法)为导向,筛选红花抗氧化活性部位,随后对活性部位进行成分分离与抗氧化效应评价。从红花活性部位水部位中分离得到5个成分,分别鉴定为6-羟基山柰酚-3,6,7-三-O-β-D-葡萄糖苷(1)、6-羟基山柰酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-D-葡萄糖苷(2)、6-羟基山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(3)、羟基红花黄色素A(4)和脱水红花黄色素B(5)。通过对红花不同极性部位和单体成分进行抗氧化效应比较,发现水部位的抗氧化活性较显著,从中分离得到6-羟基山柰酚糖苷类和醌式查尔酮碳苷类主要活性物质。     

基于二分类Logistic回归分析的桃仁等级预测研究

目的基于"成分反映活性,活性指向功效"的中药质量控制研究思路,建立用于桃仁饮片等级评价的Logistic模型。方法采用二元Logistic算法将桃仁饮片苦杏仁苷含量、体外凝血酶时间(TT)、ABTS清除率、DPPH清除率和羟自由基清除能力等指标进行关联分析,建立用于桃仁饮片的等级预测模型,并进行验证。结果 Logistic预测模型概率公式将18个批次桃仁饮片最终分为以内蒙桃仁为代表的优级、以甘肃桃仁为代表的良级、以步长桃仁为代表的中级和以陕西桃仁为代表的差级4个等级,各批次所对应的预测归属等级明确,拟合概率P值均大于98%。结论基于Logistic算法并结合"质控成分-体外效价"所建立的分级标准可用于桃仁饮片的等级分类,且结果准确可靠。     

原儿茶醛与羟基红花黄色素A单用与合用在高脂血症大鼠体内的药动学-药效学相关性研究

探讨原儿茶醛以及羟基红花黄色素A单用与合用在高脂血症大鼠体内的药动学及药效学相关性研究。该实验建立高脂血症大鼠模型,尾静脉注射液原儿茶醛(20 mg·kg~(-1))及羟基红花黄色素A(12 mg·kg~(-1)),采用HPLC-DAD测定不同时间内原儿茶醛和羟基红花黄色素A的血药浓度,并绘制药-时曲线;同时测定各时间点血浆中血小板活化因子(PAF),血浆a颗粒膜蛋白(GMP-140)含量,绘制时间-效应曲线;采用DAS 3.2.6软件处理并进行相关性分析,比较分析单用及合用后原儿茶醛与羟基红花黄色素A在模型大鼠体内的药动学差异以及药效学指标的变化,评价原儿茶醛、羟基红花黄色素A在高脂血症大鼠体内的影响作用。结果原儿茶醛、羟基红花黄色素A在高脂血症大鼠体内单用及合用后,均符合三房室模型,模型组血浆中PAF及GMP-140明显升高,给予药物后在一定时间内降低PAF及GMP-140在体内的含量。原儿茶醛与羟基红花黄色素A抗药效指标的作用可能与其在体内的水平高低有关,并且其血药浓度与血浆中PAF及GMP-140的含量呈正相关。在高脂血症大鼠体内原儿茶醛和羟基红花黄色素A具有一定的互为影响作用,并且合用后药效学指标更好,同时也反映了原儿茶醛、羟基红花黄色素A合用在临床用药的合理性。     

红花显微特征常数与化学成分相关性

目的:研究红花花粉粒显微特征常数的测定方法并测定红花中指标性成分羟基红花黄色素A的含量,分析两者的相关性,建立评价红花质量的新方法。方法:采用容量分析法对红花粉末中花粉粒的显微特征常数值进行测定,采用高效液相法对红花中羟基红花黄色素A的含量进行测定,将两组数据用统计方法进行相关性分析。结果:红花中花粉粒的显微特征常数与羟基红花黄色素A具有显著的相关性(正相关)。即红花花粉粒的显微特征常数的数值愈大,羟基红花黄色素A的含量愈大。结论:利用显微定量法测定红花显微特征常数值来评价其质量是科学、可行的。该研究初步建立了一种基于花粉粒显微特征常数测定的中药材质量评价新方法及技术,可为红花的质量控制提供新的技术手段,为其质标准制定提供参考依据。     

羟基红花黄色素A对小胶质细胞炎性激活的抑制作用

红花为菊科植物红花(Carthamus tinctorius L.)的干燥花,是传统的活血化瘀类代表药[1].其主要的活血化瘀成分为水溶性的黄色素;红花黄色素主要成分有羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)、红花明苷A、红花明苷B及其他含量较低的成分[2],其中羟基红花黄色素A含量最高且具有较强的药理活性[3]:如抑制血栓形成、抗炎、抗氧化等作用.据文献报道,羟基红花黄色素A能抑制血栓形成,对缺血性脑损伤有治疗作用[4],但作用机制尚不明确.本试验利用LPS激活中枢神经免疫细胞小胶质细胞,考察羟基红花黄色素A的抗炎作用及其机制.     

心脑脉舒口服液质量控制与降血脂作用相关研究

目的：探索心脑脉舒口服液中羟基红花黄色素A含量与高脂血症大鼠降血脂作用的相关性。方法:采用高效液相色谱法建立羟基红花黄色素A含量测定方法,测定高脂血症大鼠血清三酰甘油（Triglyceride,TG）、胆固醇(Cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(Highdensitylipoprotein,HDL-C)、低密度脂蛋白(Low Densith Lipoprotein,LDL-C)的含量。结果：羟基红花黄色素A含量测定方法准确性、重复性良好,羟基红花黄色素A的含量与高脂血症大鼠降血脂作用存在一定相关性。结论：羟基红花黄色素A可作为心脑脉舒口服液质量控制指标。     

HPLC测定蒙药德都红花七味丸中羟基红花黄色素A的含量

目的:建立蒙药德都红花七味丸中羟基红花黄色素A的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法;应用Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm,5 μm)色谱柱;以甲醇-乙腈-0.7％磷酸溶液(26∶2∶72)为流动相;流速为1.0mL·min-1;检测波长403 nm;柱温30℃.结果:羟基红花黄色素A在0.068～0.408 μg,与峰面积具有良好的线性关系.羟基红花黄色素A的平均回收率97.66％,RSD 1.7％ (n =6).结论:3批样品中羟基红花黄色素A的平均质量分数为1.50％,可作为蒙药德都红花七味丸的质量控制标准.该方法精密度高,分离度好,可用于蒙药德都红花七味丸中羟基红花黄色素A的含量测定.     

花球大小对红花花和种子品质的影响

目的:考察花球大小对红花花和种子品质的影响,为该药材的规范化种植提供参考。方法:采用抽样调查法建立河南红花花球大小的等级规格,运用HPLC测定不同等级花球红花中羟基红花黄色素A含量,利用GC测定不同等级花球的种子中亚油酸含量。结果:Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ等红花花球中羟基红花黄色素A质量分数分别为2.90,2.85,2.97,2.87 mg·g-1,无显著性影响。同一植株Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ等花球分别为19.32%,37.16%,21.16%,16.36%。不同花球的大小对种子千粒重、壳仁比、出油率及亚油酸含量均有显著性影响,较大花球的种子往往具有较大的千粒重和壳仁比,但却具有较低的出油率。结论:生产上可通过提高大花球或果球的比例来获得较好品相的花和种子,花球大小对花中羟基红花黄色素A含量无显著影响。     

新疆不同产地红花中羟基红花黄色素A的含量测定

目的:建立HPLC法检测新疆地区不同产地的红花中羟基红花黄色素A含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱hypersilgold C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm);进样量为10μL;流动相为乙腈-甲醇-0.7%磷酸溶液(2∶26∶72);流速1.0mL/min;检测波长403nm。结果:羟基红花黄色素A的线性范围0.613～6.13μg,样品质量与峰面积的线性关系良好(r=0.9998);加样回收率为100.76%±1.41%,RSD为1.56%(n=6),12批不同产地红花中羟基红花黄色素A含量为1.85%～2.70%。结论:12个不同产地红花样品中羟基红花黄色素A含量均符合2015版《中国药典》,其中新疆昌吉地区的红花药材中羟基红花黄色素A含量较高。红花作为临床常用中药材,检测不同产地该药材中羟基红花黄色素A含量,可为从新疆地区筛选优质的红花药材产地与实施红花GAP奠定基础。     

羟基红花黄色素A对脑缺血-再灌注大鼠脑组织细胞间黏附分子1表达的影响

目的:研究羟基红花黄色素A(Hydroxy Saffloryellow A,HYSA)对大鼠脑缺血-再灌注后E选择素(E-selectin)、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达及中性粒细胞浸润的影响。方法:采用Zea-Longa线栓法建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。分别用紫外分光光度、酶免法测定羟基红花黄色素A对大鼠缺血-再灌注后脑组织E选择素,ICAM-1表达以及髓过氧化酶(MPO)活性的影响。结果:羟基红花黄色素A可降低缺血-再灌注后脑损伤E选择素和ICAM-1的表达以及MPO的活性。结论:羟基红花黄色素A可减轻缺血-再灌注后炎症反应,对缺血-再灌注性脑损伤具有保护作用。     

基于UPLC同时测定3种成分法评价新疆主产区红花的品质

目的:建立红花药材中6-羟基山柰酚-3,6,7-三-O-葡萄糖苷、羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B 3种化学成分的UPLC含量测定方法,并评价新疆不同主产区红花的品质。方法:采用BEH C_(18)色谱柱(100 mm×4.6 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.5%甲酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速为0.1 mL/min;检测波长为275 nm;柱温为30℃。结果:6-羟基山柰酚-3,6,7-三-O-葡萄糖苷、羟基红花黄色素A、脱水红花黄色素B 3个成分的线性范围分别为3.375～108μg/mL、9.76～312.4μg/mL和2.54～81.5μg/mL,平均加样回收率分别为100.34%、98.96%和96.47%,应用此法测定新疆不同主产区红花药材成分含量,米东区八家户村和新疆昌吉奇台县基地的红花药材中指标成分含量较高。结论:建立的UPLC方法操作简便、快速、结果准确,适合红花药材的品质评价及质量控制。     

羟基红花黄色素A对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨羟基红花黄色素A对心肌缺血再灌注损伤(I/R)的影响。方法:采用大鼠冠状动脉左前降支结扎40min,再灌注160min建立实验性心肌I/R损伤模型,于结扎冠状动脉10min后股静脉分别给于4、8、16mg/kg羟基红花黄色素A,测定心肌梗死面积、血清中乳酸脱氢酶(LDH)、血清肌钙蛋白(c Tn T)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性的变化,血浆中血浆血栓素(TXB2)、6-酮-前列腺1a(6-keto-PGF1a)含量,心肌组织中IL-6、IL-1β、TNF-α水平和MPO活性。结果:羟基红花黄色素A 4、8、16mg/kg各剂量均可不同程度降低大鼠急性心肌梗死面积,减少心肌酶的漏出,升高6-keto-PGF1a含量,并可显著降低TXB2含量;羟基红花黄色素A 4、8、16mg/kg各剂量组可不同程度降低心肌组织炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平和MPO活性,其中对TNF-α水平和MPO活性的影响尤为显著。结论:羟基红花黄色素A对心肌I/R损伤具有较好的保护作用,可能与其抑制血小板聚集、抑制炎症反应有关。     

红花药材黄色素A含量的RP-HPLC测定及其资源的质量评价

目的：为红花药材质量评价体系的建立、红花优良品种的筛选提供依据。方法：选择有代表性的红花品种22个，在不同生态地区和不同年份进行栽培试验，并采用RP-HPLC测定各品种中主要活性成分黄色素A含量，建立药材质量评价标准，比较品种间差异，考察其遗传稳定性。结果：红花不同品种黄色素A的含量在0.70%～1.85%，品种间存在非常显著差异（P<0.01），其中，鱼台红花、合肥红花、芮城红花含量居前3位。结论：红花药材中的主要活性成分黄色素A为质量评价的重要指标，鱼台红花、合肥红花、芮城红花为红花优良种质资源。     

基于模式识别和遗传神经网络算法的醋香附近红外光谱等级评价和含量预测模型研究

目的基于近红外光谱(near infrared spectrum,NIRS)技术建立一种能快速准确识别醋香附饮片等级并预测其挥发油中α-香附酮、香附烯酮含量的质量评价模型,为其他中药材或中药饮片的质量评价提供参考。方法采集醋香附的NIRS信息,并建立39批醋香附挥发油气相色谱-质谱联用(GC-MS)指纹图谱,对挥发油中的α-香附酮、香附烯酮进行定量,采用相似度分析、多元统计分析、主成分分析(principal component analysis,PCA)、聚类分析、偏最小二乘-判别分析(partial leastsquares-discriminantanalysis,PLS-DA)、Logistic回归分析等方法处理数据,划分等级;利用遗传神经网络算法(GA-BPNN)将等级划分结果、α-香附酮含量、香附烯酮含量分别与NIRS信息进行拟合,建立等级预测模型和含量预测模型。结果根据主成分聚类分析法可以将醋香附划分为3个等级,其中一等品6批,二等品8批,三等品25批,PLS-DA分析结果与主成分聚类分析结果一致。采用多元Logistic回归分析建立了饮片等级分类经验公式P_(一等)=exp(G_1)/[1+exp(G_1)]、P_(二等)=exp(G_2)/[1+exp(G_2)]、P_(三等)=1-P_(二等),等级预测结果和主成分聚类分析结果一致。利用GA-BPNN建立的醋香附饮片等级预测模型预测准确率达89.74%,模型准确性较好;α-香附酮、香附烯酮回归模型预测集决定系数分别为0.9923、0.9697,能很好地预测醋香附挥发油中α-香附酮、香附烯酮含量。结论采用GA-BPNN所建立的基于近红外技术的醋香附饮片等级评价模型能快速准确地预测醋香附饮片等级,为醋香附及其他中药材或中药饮片质量标准的制定和等级评价模型的研究提供了参考。     

基于近红外光谱的丹红注射液提取过程质量在线检测方法研究

目的:应用近红外透射光谱法,建立丹红注射液提取过程中关键指标的快速定量分析方法.方法:在线采集丹参和红花2种药材混合提取过程的近红外光谱图,以高效液相色谱(HPLC)和差重法为参照,采用偏最小二乘回归(PLSR)法分别建立迷迭香酸、丹酚酸B、紫草酸、羟基红花黄色素A和固含量的定量校正模型.结果:校正模型的交叉验证相关系数(RCV)和交叉验证均方根偏差(RMSECV)分别为:迷迭香酸0.9093,0.012 1 g·L-1;丹酚酸B 0.915 2,0.251 g·L-1;紫草酸0.901 9,0.017 7 g·L-1;羟基红花黄色素A 0.747 7,0.038 1 g·L-1;固含量0.931 4,0.359.结论:利用近红外光谱技术可以实现丹红注射液原料药材提取过程中迷迭香酸、丹酚酸B、紫革酸和固含量的快速检测,羟基红花黄色素A的定量校正模型有待进一步完善.     

基于“药效论质”评价柴胡质量及其等级预测插件开发

目的基于"成分反映活性,活性指向功效"的中药质量控制研究思路,建立用于柴胡Bupleurumchinense等级评价的二分类Logistic模型,并开发出一种柴胡等级评价计算器。方法采用二分类Logistic算法将柴胡的柴胡皂苷a、d含量、环氧化酶2 (cyclooxygenase-2,COX-2)生物效价、ABTS+清除率、DPPH清除率和羟自由基清除能力等指标进行关联分析,建立用于柴胡的等级预测模型,并进行验证。采用多元回归分析方法、二分类Logistic回归模型结合柴胡成分-药效相关数据,建立等级评价方程。采用JavaScript和CSS3技术,将等级评价方程嵌入HTML进行计算器插件的开发。结果 Logistic预测模型概率公式初步将15个产地来源柴胡最终分为优、良、中、差4级,各批次所对应的预测归属等级明确,拟合概率P值均大于90%。开发了一种无需将数据传给服务器端,通过动态地输入测定的数据,可直接输出柴胡等级评价结果的计算器。结论首次将柴胡功效-成分相结合,建立评价柴胡质量等级的方法,可为柴胡质量评价提供重要依据;并开发出一种基于"药效-成分"相关联的柴胡质量等级快速评价的...