大鼠急性胰腺炎 Caspase－3及 Survivin 在胰腺组织中表达的实验研究

目的：检测 Caspase－3及 Survivin 在急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达并探讨其与胰腺组织损伤的关系。方法60只 SPF 级雄性 Wistar 大鼠随机分为假手术组、胰腺炎6 h 组、胰腺炎12 h 组及胰腺炎24 h 组。采用胰腺被膜下注射牛磺胆酸钠（Na－Tc）建立急性胰腺炎模型。分别检测4组大鼠血清淀粉酶（AMY）、胰腺病理损伤、胰腺组织中 Caspase－3及 Survivin 的表达程度。结果假手术组、胰腺炎6 h、12 h、24 h 组组间两两比较血清淀粉酶及胰腺组织病理评分胰腺组织 Caspase－3及 Survivin 平均光密度表达差异均有统计学意义（ P ＜0．05）。 Caspase－3、Survivin、血清淀粉酶及胰腺病理评分均有相关性（ P ＜0．05）。结论急性胰腺炎过程中伴随着 Caspase－3及 Survivin 的表达紊乱,并且与胰腺损伤密切相关。     

川芎嗪治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的探讨川芎嗪对大鼠重症急性胰腺炎的治疗作用及其机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组、重症急性胰腺炎组(胰腺炎组)和川芎嗪治疗组(治疗组),每组10只。以L-精氨酸注射法制作大鼠重症急性胰腺炎模型,治疗组大鼠在制模成功后给予川芎嗪治疗,在实验后24 h采集标本,比较不同组大鼠胰腺组织HE染色结果,血清淀粉酶、白介素-6(IL-6)、TNF-α水平及胰腺湿/干比率。结果胰腺炎组和治疗组大鼠血清淀粉酶、IL-6和TNF-α水平均显著高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组大鼠血清淀粉酶[(883.75±143.25)U/L vs.(1 031.94±146.59)U/L]、IL-6[(148.65±18.94)pg/L vs.(185.79±17.49)pg/L]和TNF-α[(109.31±123.65)pg/mL vs.(155.79±17.49)pg/mL]均低于胰腺炎组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组大鼠胰腺湿/干比率(9.8±0.7)低于胰腺炎组(12.5±0.8),差异有统计学意义。结论川芎嗪可通过降低重症急性胰腺炎大鼠的血清淀粉酶、IL-6和TNF-α水平发挥治疗作用。     

塞来昔布对大鼠重症急性胰腺炎肝脏保护作用的研究

目的 观察环氧化酶(COX)2及其抑制剂在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肝损伤中的作用,为临床SAP肝损伤的治疗提供理论与实验依据.方法 健康清洁级雄性Wistar大鼠45只,完全随机分为假手术组、急性胰腺炎组和治疗组,各15只.检测各组动物血中淀粉酶(AMS)、ALT、AST、乳酸脱氢酶(LDH)的变化,免疫组织化学ABC法检测肝脏中COX2的表达,并观察肝脏和胰腺的病理变化.结果 ①急性胰腺炎组AMS (5676 ± 2311) U/L、ALT(276±13) U/L、AST(555±32)U/L和LDH(21.5±3.2) μmol/(S·L)均高于假手术组[分别为(1705±793) U/L、(70±15) U/L、(159±14) U/L和(2.8 ±0.2) μmol/(S·L)]及治疗组[分别为(3109±1411) U/L、(228±22) U/L、(492 ±24) U/L和(16.4 ±2.6)μmol/(S·L)],分别与假手术组和治疗组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).②肝脏及胰腺病理改变:注射牛磺胆酸钠6h后肝组织有明显的炎性细胞浸润,肝细胞界限不清,肝细胞呈颗粒状,胰腺腺泡包膜破裂,细胞灶性及片状坏死,周围满布浸润的中性粒细胞.而治疗组的肝脏及胰腺的损伤程度有所减轻.③假手术组、急性胰腺炎组和治疗组灰度值分别为208 ±40、88±14和145±17,假手术组高于急性胰腺炎组和治疗组(均P＜0.05),治疗组高于急性胰腺炎组(P＜0.05).结论 通过使用牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射法建立大鼠SAP模型是一种简单可靠的方法,SAP时大鼠的肝脏功能受损,肝脏组织在病理形态学上也有明显变化；COX2参与了大鼠SAP所致肝损伤的过程,且COX2的表达可能是造成机体损伤的一种有害机制,抑制肝组织内COX2的表达有助于SAP及其所致肝损伤的治疗.     

依达拉奉对重症急性胰腺炎大鼠胰腺环氧化酶2表达的影响

目的 探讨依达拉奉对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织环氧化酶2(COX-2)表达的影响.方法 将60只Wistar大鼠随机均分为假手术组(S组)、SAP组和依达拉奉治疗组(E组).在造模成功后,E组立即尾静脉注射依达拉奉注射液,6h和12 h后重复给药,每次8 mg/kg,S组注射同等生理盐水,SAP组不予处理.24 h后比较各组大鼠腹水量、血清淀粉酶(AMY)、组织病理学以及胰腺组织COX-2蛋白的变化.结果 SAP组胰腺组织COX-2蛋白表达、腹水量、AMY水平、病理损害程度均明显高于S组(P＜0.01).E组胰腺组织COX-2蛋白表达、腹水量、AMY水平低于SAP组(P＜0.05).胰腺组织COX-2蛋白表达与腹水量、AMY水平、胰腺病理损伤呈正相关(P＜0.05或P＜0.01).结论 SAP时,胰腺组织COX-2蛋白表达增强,依达拉奉可以抑制COX-2的表达,从而减少胰腺的损伤.     

急性胰腺炎大鼠外周血淋巴细胞亚群的变化

目的检测急性胰腺炎（ AP）大鼠外周血淋巴细胞亚群,探讨AP病程进展过程中免疫状态改变的原因。方法60只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为空白组、假手术组、AP组（ AP 6 h组、12 h组及AP 24 h组）。采用胰腺被膜下注射牛磺胆酸钠（ Na-Tc）建立急性胰腺炎模型。空白组及假手术组在第6小时处死,胰腺炎组在造模后第6、12、24小时3个时点分批处死。每只大鼠处死前腹主动脉抽血5 ml,取胰腺组织行HE染色并做病理评分。测定每只大鼠淋巴细胞计数及血清淀粉酶,用流式细胞仪测定淋巴细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD19＋及CD56＋。结果假手术组与空白组比较淋巴细胞无明显降低（ P ＞0构．05）,随着病程的延长CD3＋淋巴细胞逐渐下降,CD8＋淋巴细胞轻度增高,CD4＋/CD8＋明显下降,CD3＋/CD19＋明显上升（ P ＜0．05）。结论在AP病程中免疫系统的紊乱是逐渐加重的。     

急性胰腺炎大鼠血清NGAL变化及意义

目的:研究在急性胰腺炎大鼠血清中中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)表达的变化.方法:建立大鼠急性胰腺炎模型,造模后将大鼠随机分为对照组、轻症急性胰腺炎组、重症急性胰腺炎组.于模型建立成功后6h、12h、24h及36h手术的大鼠利用HE染色观察大鼠胰腺组织的病理变化,以及用ELISA方法检测大鼠血清中淀粉酶与NGAL表达的变化.结果:胰腺组织的病理学评分显示各时间点对照组评分明显低于轻症急性胰腺炎组(P＜0.05);且轻症急性胰腺炎组评分明显低于重症胰腺炎组(P＜0.05).术后各时间点重症急性胰腺炎组和轻症急性胰腺炎组大鼠血清淀粉酶明显高于对照组(P＜0.05),术后各时间点大鼠重症急性胰腺炎组血清中NGAL水平高于轻症急性胰腺炎组(P＜0.05);并且轻症急性胰腺炎组高于对照组(P＜0.05).在轻症急性胰腺炎组和重症急性胰腺炎组6h后大鼠血清中NGAL表达与对照组相比明显升高(P＜0.05),在24h,重症急性胰腺炎组大鼠血清中NGAL表达大幅度升高,在36h,轻症急性胰腺炎组与重症急性胰腺炎组大鼠血清中的NGAL水平均下降,但仍高于对照组(P＜0.05).结论:急性胰腺炎模型大鼠血清中NGAL的表达明显升高,并且重症急性胰腺炎大鼠血清中NGAL的表达量高于轻症急性胰腺炎,NGAL于重症急性胰腺炎早期升高明显,急性胰腺炎可促进大鼠NGAL表达增加.     

醋酸奥曲肽联合甲磺酸加贝酯治疗急性胰腺炎患者的临床疗效分析

目的 探讨醋酸奥曲肽联合甲磺酸加贝酯治疗急性胰腺炎的效果.方法 选择本院2014年1月至12月收治的急性胰腺炎患者50例为对照组,在常规对症治疗的基础上给予醋酸奥曲肽静脉滴注;另选择本院2015年1月至12月收治的急性胰腺炎患者50例为观察组,在对照组治疗基础上给予甲磺酸加贝酯静脉滴注,观察两组治疗效果.结果 观察组和对照组的总有效率分别为90.0％和70.0％,观察组明显高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);两组治疗前CRP、IL-6水平比较差异无统计学意义(P＞0.05);治疗2d后,两组CRP、IL-6水平均明显下降,观察组CRP为(4.3±0.5)mg/L、IL-6为(29.7±3.9)μg/L,对照组CRP为(19.2±3.8) mg/L、IL-6为(55.8±6.8)μg/L,观察组改善效果更加明显(P＜0.05);观察组腹痛、腹胀缓解时间分别为(3.9±0.5)d、(2.1±0.3)d,对照组分别为(8.6±1.5)d、(6.6±1.2)d,观察组明显短于对照组(P＜0.05);观察组血淀粉酶水平为(3.8±0.3)U,对照组为(6.9±1.1)U,观察组较对照组明显下降,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 醋酸奥曲肽联合甲磺酸加贝酯治疗急性胰腺炎可提高治疗效果,改善血清炎症因子和血淀粉酶水平,在较短的时间内缓解患者腹痛、腹胀症状,效果显著.     

丹参注射液预防大鼠急性胰腺炎及其机制研究

目的观察丹参注射液预防大鼠急性胰腺炎及其对血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-6)、胰腺组织核因子(NF-κB)及氧自由基的影响。方法将60只SD大鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、乌司他丁组(20 000U/kg)以及丹参注射液低、中、高剂量(0.4、0.8、1.6 m L/kg)组。用5%牛磺胆酸钠(1.0 m L/kg)胰管内注入诱导大鼠急性胰腺炎模型,造模前30 min分别尾iv给予丹参注射液。各组大鼠均于造模6 h后行腹主动脉采血,处死大鼠取胰腺组织标本,检测SD大鼠急性胰腺炎模型血清淀粉酶(AMY)、血浆内毒素(ET)、胰腺病理评分和病死率。并用ELISA法检测血清IL-6、TNF-α浓度的变化,运用免疫组化法检测NF-κB表达水平,同时切取各时间点大鼠胰腺组织,检测丙二醛(MDA)、组织髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)的水平。结果模型组大鼠的血清AMY、血浆ET、病理评分、死亡率、IL-6、TNF-α水平及胰腺组织中NF-κB活性、MDA水平和MPO活性均较假手术组升高(P0.01),而SOD活性则明显降低(P0.05);乌司他丁组和丹参注射液组上述各项指标均较模型组明显改善(P0.05、0.01)。结论丹参注射液可显著降低实验性急性胰腺炎大鼠的IL-6、TNF-α及NF-κB,清除氧自由基,减轻脂质过氧化反应,从而减轻急性胰腺炎病理损害程度,降低急性胰腺炎大鼠的死亡率。     

CT灌注成像技术用于断肢再植骨骼肌再灌注损伤实验性研究

目的 评价在断肢再植骨骼肌再灌注损伤的评估中应用CT灌注成像技术的效果。方法 2017年7—8月,选择60只SD大鼠,采用随机数字表法分为假手术组和再植组(其中分为夹闭1 h、2 h、4 h和8 h等4个亚组),通过钳夹大鼠左侧股动静脉,建立大鼠左后肢的断肢模型,夹闭左侧股动静脉1 h、2 h、4 h、8 h后恢复血供。应用多排螺旋CT灌注扫描比较各组的血流量(BF)、相对血流量(rBF)、血容量(BV)和相对血容量(rBV)等灌注指标、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)水平,探究rBF与LDH和CK水平的相关性,并应ROC曲线评价rBF、LDH和CK预测再灌注后肢体坏死的效能差异。结果 与假手术组BF (4.08±1.09) mL·(100 g)-1·min-1,rBF 1.03±0.07,BV (4.85±1.21)mL·(100 g)-1,rBV 1.03±0.07,造影剂通过总时间(TT)(38.06±10.11) s,造影剂达峰时间(TTP)(27.54±6.37) s相比,再植组术侧1 h,2 h,4 h,8 h的BF(3.55±1.06),(3.12±0.91),(2.76±0.82),(2.39±0.71) mL·(100 g)-1·min-1、rBF(0.92±0.12),(0.86±0.10),(0.81±0.11),(0.75±0.12)、BV(4.31±1.11),(3.80±0.96),3.31±0.87),(2.89±0.81) mL·(100 g)-1和rBV(0.91±0.11),(0.85±0.11),(0.80±0.10),(0.75±0.09)明显降低(P＜0.05),TT(43.21±10.31),(49.03±11.26),(55.23±12.13),(59.41±12.35) s和TTP(31.21±7.31),(35.36±8.26),(39.78±9.13),(44.16±9.35) s明显延长(P＜0.05)。与假手术组(160±50) U/L,(120±40) U/L相比,不同时间的再植组的LDH(300±120) U/L,(350±150) U/L,(380±160) U/L,(420±180) U/L和CK(320±140) U/L,(360±150) U/L,(420±160) U/L,(480±170) U/L水平明显升高(P＜0.05);其中,夹闭时间越长,LDH和CK的水平越高(P＜0.05)。线性相关性分析显示,术侧相对血流量rBF与LDH(r＝-0.710,P＜0.001)和CK(r＝-0.738,P＜0.001)水平呈明显的负相关。受试者工作特征曲线(ROC曲线)显示,应用rBF预测肢体坏死的诊断效能(AUC＝0.974)明显高于LDH(AUC＝0.724)和CK(AUC＝0.754)。结论 在断肢再植骨骼肌再灌注损伤的评估中应用CT灌注成像技术具有较高的应用价值。     

白细胞介素1β转化酶抑制剂对胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的诱导

目的 探讨白细胞介索(IL)1β转化酶(ICE)抑制剂诱导急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的作用.方法 120只SD大鼠随机分为假手术对照组(S)、胰腺炎组(P)和ICE抑制剂干预组(Ⅰ),每组40只.各组造模后在2、6、12和24 h 4个时间点分别检测10只大鼠.Ⅰ组于制模前48 h开始腹腔注射ICE抑制剂0.25 mg/100 mg体质量,间隔12 h注射一次.P组仪同时注射等量生理盐水.应用ELISA方法、细胞凋亡原位标记(TUNEL)染色等检测血清中淀粉酶、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β和胰腺细胞凋亡.结果 HE染色见胰腺组织中典型的细胞核固缩及凋亡小体形成.Ⅰ组各个时间点病理学评分和血淀粉酶、TNF-α、IL-1βp浓度均明显低于P组,胰腺细胞凋亡指数显著高于P组(P<0.01).结论 ICE抑制剂能减轻急性胰腺炎严重程度,其机制可能与其对炎症介质的抑制和诱导胰腺腺泡细胞的凋亡有关.