冬虫夏草水提液和醇提液HPLC指纹图谱分析

目的:建立冬虫夏草水提液和醇提液的高效液相指纹图谱。方法:采用高效液相色谱对20批冬虫夏草和2批发酵冬虫夏草菌粉的水提液和醇提液进行分析;并对所获得的色谱数据进行相似度计算和聚类分析。结果:建立了冬虫夏草水提液和醇提液指纹图谱,水提液指纹图谱确定了7个共有峰,醇提液指纹图谱确定了8个共有峰;冬虫夏草水提液和醇提液指纹图谱相似度评价结果均显示20批冬虫夏草样本的相似度系数大于0.9,2批发酵冬虫夏草菌粉的相似度系数小于0.9;冬虫夏草水提液和醇提液共有峰聚类分析结果均显示,20批冬虫夏草与2批发酵冬虫夏草菌粉分别聚为不同类。结论:本文所建立的方法稳定可靠,可以对冬虫夏草质量进行综合评价,为其提高产品质量控制提供了依据。     

不同产地蜂胶药材的HPLC指纹图谱

目的:通过建立蜂胶药材HPLC指纹图谱,评价不同产地蜂胶药材质量的差异,为蜂胶原料适宜产地的选择提供实验依据。方法:采用HPLC测定4个不同主产区14批不同产地蜂胶药材的指纹图谱,并采用国家药典委员会颁布的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004 A)和聚类分析对指纹图谱进行相似度比较。结果:建立蜂胶药材指纹图谱共有模式,标定12个指纹图谱共有峰,14批蜂胶药材中9批蜂胶药材的相似度>0.90,说明不同主产区及同一主产区不同产地蜂胶指纹图谱既有共性又存在一定差异。结论:建立的方法精密度、重复性和稳定性较好,可用于蜂胶药材的的质量控制及产地鉴别。     

不同产地金银花指纹图谱研究

目的:采用指纹图谱技术对不同产地金银花药材进行分析比较,为金银花药材质量的综合评价奠定基础。方法:采用Agilent TC-C18色谱柱,流动相为0.5%冰醋酸水溶液(A)—乙腈(B)梯度洗脱,波长为327nm,对14种不同产地金银花药材进行测定,建立金银花的高效液相色谱指纹图谱;采用程度相似度计算法,结合聚类分析对金银花药材进行比较,评价其质量和品质。结果:对14种金银花药材进行测定,建立金银花药材指纹图谱,并确定14种不同产地金银花药材的18个共有峰,且14种金银花药材的指纹图谱相似度在0.9以上。结论:不同产地金银花药材的指纹图谱存在明显差异,又存在一定程度的相关性,为金银花的质量考察、品种鉴定及划分提供参考依据。     

黄白甘草洗剂的HPLC指纹图谱研究

目的： 建立黄白甘草洗剂的HPLC指纹图谱的检测方法。方法： 采用Kromasil C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长237 nm,对10批黄白甘草洗剂进行HPLC指纹图谱检测,采用"中药色谱指纹图谱评价系统2004年A版"进行评价。结果： 黄白甘草洗剂采用该方法分离效果好,确定了20个共有峰,10批洗剂的相似度均>0.9。结论： 该方法重复性、稳定性好,建立的指纹图谱可为黄白甘草洗剂的质量评价提供依据。     

玉屏风散醇提部位HPLC指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法建立玉屏风散醇提部位的指纹图谱.方法:用Sepax138X GP-C18 ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈-0.15%磷酸水为流动相梯度洗脱,检测波长220 am,流速1 mL/min,柱温30℃,分析时间100 min.结果:方法学考察表明,所用色谱方法符合定性研究要求;标示出玉屏风散醇提部位38个共有峰,并对各共有峰进行初步归属判断.结论:建立了玉屏风散醇提部位HPLC指纹图谱分析法,为玉屏风散及其制剂的质量控制提供了科学依据,同时可为该方的物质基础研究提供重要的分析手段.     

不同产地禹州漏芦HPLC指纹图谱研究

目的:建立不同产地禹州漏芦药材的高效液相指纹图谱.方法:采用HPLC,测定了14批不同产地的禹州漏芦样品.Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1％醋酸水溶液,梯度洗脱;柱温25℃,检测波长280nm,流速0.9 mL·min-1,记录色谱图75 min.结果:建立了禹州漏芦药材指纹图谱,确定了10个共有峰.结论:该法重复性好、可靠、简便,为禹州漏芦药材的质量控制提供依据.     

不同产地没药指纹图谱的研究

目的:建立没药药材的HPLC特征图谱。方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速:0.8 m L·min-1;检测波长:300 nm;柱温:35℃;进样量:10μL。对不同产地的没药进行特征指纹图谱考察,并采用"中药色谱特征图谱相似度评价系统"(2012版)对其进行相似度分析。结果:建立了没药高效液相色谱指纹图谱研究方法,并确定了指纹图谱中9个共有峰,14批没药药材中7批药材相似度大于0.90。结论:该方法简单、快速、重复性好,为没药的基源鉴定和质量评价提供了充分的依据。     

大黄及其醇提液HPLC特征图谱相关性研究

目的:建立大黄HPLC特征图谱分析方法,研究大黄与其醇提液HPLC特征图谱的相关性,评价大黄醇提工艺。方法:采用Zorbax SB-Aq C18色谱柱;流动相为乙腈-0.1%的磷酸溶液(梯度洗脱);检测波长430,280 nm,柱温为40℃,流速1.0 mL.min-1。结果:大黄及其醇提液在430 nm波长条件下均标示出14个蒽醌类共有峰,其中鉴别了5个游离蒽醌类成分,10批大黄及其醇提液中有8批样品相似度分别>0.96及0.95,2批样品差异较大,相似度<0.90;在280 nm波长条件下标示出10个共有峰,其中鉴别了2个特征成分,10批大黄及其醇提液中有8批样品相似度>0.94及0.92,2批相似度低于0.90。同批次大黄及其醇提液在430,280 nm波长处的相似度分别为0.992～0.999,0.987～0.999,表明大黄的常规醇提工艺能保留大黄饮片的主要特征成分。结论:方法准确可靠,重复性好,为大黄饮片及其醇提液的质量控制提供方法依据,并为大黄复方制剂的工艺与质量控制提供了参考。     

不同产地洋甘菊HPLC指纹图谱分析

目的：为洋甘菊的质量评价和种植地点的选择提供参考。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）及聚类分析法,测定分析12个不同产地的洋甘菊样品,使用中药材指纹相似度评价软件进行相似度计算及指纹图谱的建立。结果：12批不同产地、批次的洋甘菊药材,根据其相似度的结果可知,洋甘菊药材因产地不同、药材采收季节不同等多种因素,导致药材之间的化学成分及其含量有一定差异。结论：使用本方法可以简便、快捷地确定洋甘菊的适宜产地,旨在从种植源头上确保药材品质,亦为洋甘菊质量评价标准的完善提供参考。     

不同产地栀子药材HPLC指纹图谱研究

采用高效液相色谱(HPLC)方法建立了江西道地药材栀子的HPLC指纹图谱,并将不同产地的栀子药材进行了指纹图谱相似度计算,为科学评价和有效控制栀子质量提供了新方法.色谱条件C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,检测波长为258nm,体积流量为0.8mL/min,柱温30℃;线性梯度洗脱.该方法能简便、快速地鉴别和区分不同来源的栀子药材,为全面控制栀子药材的质量提供了依据.     

甘草microRNA及其靶基因的生物信息学预测

目的利用生物信息学手段预测甘草Glycyrrhiza uralensis的micro RNA(mi RNA),并实验验证其存在,确定相应的靶基因,为理解甘草mi RNA的生物学功能奠定基础。方法下载公共核酸数据库中的甘草高通量测序序列和表达序列、标签序列,使用Trinity和Assembler等软件拼接以获得转录本数据。基于mi RNA前体序列在植物物种间的保守性,将mi RBase数据库中的已知植物mi RNA前体与甘草转录组序列进行Blast比对,按照mi RNA前体应具备的标准进行筛选。通过stem-loop q RT-PCR实验验证mi RNA。使用ps RNATarget软件进行mi RNA的靶基因预测,并对靶基因进行功能分析。结果序列拼接获得88 263条甘草转录组数据。使用这些数据预测到分属于17个家族的49个mi RNA序列,以及相应的30个茎环结构前体,随机选取其中12个,经实验验证,确实存在。这些mi RNA靶向的172个基因主要参与基因转录调控、信号转导、发育调控和防御反应等生物学过程。结论新预测的甘草mi RNA及其靶基因为进一步研究mi RNA在甘草中的生物学功能奠定了基础。     

甘草新型自组装纳米粒的形成及抗炎作用评价

目的 对传统中药煎煮自组装现象进行改良,应用微沉淀法制备甘草新型自组装纳米粒（glycyrrhiza novel self-assembled nanoparticles,GN-SAN）,将其与传统水煎煮形成的甘草SAN（glycyrrhiza decoction self-assembled nanoparticles,GD-SAN）进行系统比较,进一步探究GN-SAN对2,4-二硝基氯苯（2,4-dinitrochlorobenzene,DNCB）诱导的小鼠特应性皮炎的治疗作用。方法 采用煎煮结合微沉淀法制备GN-SAN,以粒径、PDI和ζ电位为评价指标,通过单因素试验联合Box-Behnken设计-响应面法对煎煮时间、磁力搅拌转速、磁力搅拌时间、磁力搅拌温度、旋转蒸发温度以及生药质量浓度进行优化,筛选最优处方工艺。将优化后的GN-SAN与GD-SAN进行比较,扫描电子显微镜（scanning electron microscope,SEM）和透射电子显微镜（transmission electron microscope,TEM）观察形态;高效液相色谱仪（HPLC）、紫外分光光度计（UV）以及bicinchoninic acid（BCA）试剂盒检测各SAN中小分子活性成分（芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、异甘草苷、甘草酸、甘草查耳酮A）、多糖以及蛋白的含量。采用DNCB对小鼠背部皮肤刺激,建立特应性皮炎模型。将小鼠分为空白组,模型组,阳性药组,GN-SAN凝胶低、中、高剂量组,观察各小鼠背部皮肤皮损变化,对皮损组织病理变化、炎症因子表达、脏器指数等指标进行检测。结果 GN-SAN的最佳处方工艺：甘草经8倍量水煎煮1 h,得GD-SAN。再经6倍70%乙醇煎煮1 h后得醇提液,合并2次提取液,600 r/min磁力搅拌20 min,60℃旋转蒸发除醇并浓缩至0.2 g/mL,即得GN-SAN。形成的SAN性质稳定,为形态均一的圆球形纳米粒,粒径为（189.5±0.3）nm,多分散指数为0.138±0.130,ζ电位为（−31.4±0.8）mV。其粒径大小、均匀性、稳定性及有效成分转移率相对于传统SAN均提高,且GN-SAN对皮炎有良好的治疗效果。结论 采用煎煮法结合微沉淀法制备GN-SAN,其工艺简单、主要成分含量高,稳定性好;制成的GN-SAN性能优良、抗炎作用显著,为甘草纳米制剂进一步开发应用奠定基础。     

大血藤的HPLC指纹图谱

目的:建立大血藤的HPLC指纹图谱方法,为其质量控制提供参考.方法:采用HPLC Ultimate XB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-甲醇(1∶1)为A相,0.1％磷酸水为B相,流速0.6 mL·min-1,柱温25℃,梯度洗脱,在280 nm波长下测定大血藤、鸡血藤及五香血藤的指纹图谱,应用系统聚类分析对不同市场购买的大血藤药材进行分类.结果:建立了大血藤药材HPLC指纹图谱的分析方法,标定了22个共有峰,指认了3个峰,分别为红景天苷、原儿茶酸和大黄酸.大血藤、五香血藤和鸡血藤药材的指纹图谱相似度差异明显.11批不同市场购买的大血藤药材分为3类.结论:方法简便、准确、重复性好,可用于大血藤的鉴别研究和质量控制.     

不同产地菘蓝ISSR分析与鉴定

目的应用ISSR-PCR标记技术探讨不同产地菘蓝的遗传多样性,为其种质鉴定及育种提供参考。方法对采自全国不同地区的菘蓝及其变异类型的23份样本进行ISSR-PCR分析,采用NTSYS-pc软件计算Jaccard遗传相似系数,按非加权配对算术平均法(UPGMA)建立所研究类群的系统聚类图。结果 10条引物共扩增出109个条带,其中多态性条带为88条,占总扩增条带数的80.7%,菘蓝种质具有较丰富的遗传多样性。从聚类分析图可以看出,所研究样本聚为3支,第1支包括绝大多数样本,第2支为一被毛变异类型,第3支相距最远,从相似度0.62处即被分开,表明为一独立类群。结论 ISSR标记可以为菘蓝的种质资源鉴定、遗传关系分析及栽培育种提供分子生物学依据。     

甘草属7种植物叶绿体基因组密码子使用偏好性分析

目的 探究甘草属7种植物叶绿体基因组密码子使用模式及影响因素。方法 从NCBI获取国内已有的7种甘草属植物叶绿体全基因组,筛选得到49条共有蛋白编码序列,使用codon W1.44、EMBOSS、SPSS26.0等分析密码子偏好性相关参数。结果 7种甘草属物种叶绿体基因组密码子不同位置的GC含量均小于50%,共得到了29个高频密码子,其中有28个密码子第3位碱基为A/U,筛选得到的17个最优密码子第3位碱基均为A/U。7种甘草属植物叶绿体蛋白编码基因的ENC值均大于35,密码子偏好性较弱。PR2-plot分析、ENC-plot分析和中性绘图分析结果显示突变压力和自然选择均为这7种甘草属物种叶绿体基因组密码子偏好性形成的重要影响因素,但自然选择对密码子偏好性形成的贡献更大。基于叶绿体编码序列构建的系统发育树与基于RSCU的聚类分析结果具有一定的相似性,叶绿体基因组密码子偏好性与物种的系统发育关系存在一定的联系。结论 7种甘草属植物叶绿体基因组密码子第3位倾向于使用A/U碱基,自然选择是密码子偏好性形成的主要影响因素。     

甘草地上部分化学成分研究

目的研究甘草Glycyrrhiza uralensis地上部分的化学成分。方法通过硅胶、凝胶等柱色谱及高效液相色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和核磁数据对化合物进行结构鉴定。结果从甘草地上部分乙醇提取物中分离得到12个化合物,分别鉴定为(2S)-3′-(2-hydroxy-3-methylbut-3-enyl)-4′,5,7-trihydroxy-dihydroflavanone(1)、乔松素(2)、sigmoidin B(3)、licoflavanone(4)、6-异戊烯基柚皮素(5)、短叶松素(6)、高良姜素(7)、染料木素(8)、红车轴草素(9)、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷(10)、芦丁(11)、α,α′-dihydro-3,5,3′-trihydroxy-4′-methoxy-5′-isopentenyl-stilbene(12)。结论化合物1为新化合物,命名为羟甘草黄烷酮;化合物3、6、7和9是首次从甘草属植物中分离得到。     

叶下珠指纹图谱及模式识别研究

目的建立叶下珠HPLC指纹图谱评价体系。方法采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.2%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长270 nm,体积流量1.0 m L/min。测定9个不同产地叶下珠指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算相似度,并用对照品和液质联用技术指认色谱峰。结果建立了叶下珠指纹图谱共有模式,标定了11个共有峰,指认了其中8个主要色谱峰,用聚类分析和主成分分析对指纹图谱进行模式识别。结论将指纹图谱和模式识别结合起来对叶下珠进行质量控制是一种有效的评价方法,为叶下珠的全面质量控制提供了基础。     

甘草色泽与有效成分含量的相关性研究

为探讨甘草色泽与其质量评价的相关性,该研究以精密色差仪和视觉分析仪测定甘草根皮和断面颜色,以HPLC测定甘草药材中6种黄酮类和2种皂苷类成分的含量,采用偏最小二乘回归法对两类数据进行相关分析。结果发现,野生和栽培甘草根皮颜色不存在显著差异,断面颜色存在显著或极显著差异(P0.05,P0.01);野生甘草的甘草苷、异甘草苷、异甘草素含量与甘草酸铵、甘草次酸含量显著或极显著高于栽培甘草;相关性结果表明,甘草根皮和断面的颜色均与有效成分含量具有显著或极显著相关性。该研究为传统以甘草色泽评价其质量提供了科学依据,为完善中药材质量评价体系提供新的参考。     

细辛非挥发性提取物抗炎镇痛作用研究

目的:考察细辛不同煎煮时间的水煎液及不同浓度乙醇提取物是否具有抗炎及镇痛作用,并初步探讨细辛的抗炎镇痛作用机制.方法:采用ICR小鼠,以小鼠耳肿胀法对北细辛(根和根茎)水煎液(提取挥发油后水煎液和临床常用水煎液)和乙醇提取物(95%乙醇提取物和50%乙醇提取物)进行抗炎作用的评价;以热板法对北细辛水煎液进行镇痛作用的评价;并以去肾上腺试验和纳洛酮阻断试验,探讨细辛水煎液的抗炎镇痛机制.结果:二甲苯小鼠耳肿胀试验中,北细辛2种水煎液明显减轻炎症肿胀度,高剂量时抑制率分别为43.20%,和63.69%,而对二甲苯所致去肾上腺小鼠耳肿胀无抑制作用;北细辛95%乙醇提取物和50%乙醇提取物均能抑制小鼠耳肿胀,高剂量时抑制率分别为61.86%和52.56%.在热板试验中,北细辛2种水煎液高、低剂量均使痛反应潜伏期明显延长,镇痛作用在2.0 h达高峰;2.0 h各组痛阈提高率分别为51.27%,62.78%,60.08%和68.00%;经纳洛酮预处理后潜伏期明显缩短,北细辛水煎液未显示镇痛作用.结论:北细辛水煎液有明显的抗炎和镇痛作用.临床常用水煎液的抗炎镇痛作用强于提取挥发油后的水煎液.北细辛乙醇提取物具有显著的抗炎作用,95%乙醇提取物抗炎作用与50%乙醇提取物相当.北细辛水煎液抗炎作用有肾上腺的参与,镇痛作用与阿片受体有关.     

不同产地博落回果化学成分指纹图谱研究

目的构建博落回Macleaya cordata果化学成分指纹图谱,建立博落回果品质评价方法。方法根据湖南省长沙市地方标准2009年版测定博落回中原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱含量;采用高效液相色谱法构建基于不同产地的博落回果化学成分指纹图谱;利用主成分分析和聚类分析方法,分析博落回果中共有指纹峰、产地和药材品质的关联性。结果构建不同产地博落回果化学成分指纹图谱,确定11个共有指纹峰;主成分分析和聚类分析将8个产地的博落回果分为2大类,其中共有峰5、7、8、9和11对指纹图谱差异贡献较大,6号峰是指纹图谱参照峰的最佳选择。结论本实验建立的博落回果化学成分指纹图谱具有良好的精密度、重复性和稳定性,能够对不同产地博落回果进行品质评价。