丹溪痛风方对胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号通路关键蛋白的影响

目的探讨丹溪痛风方(DGP)对胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号通路关键蛋白的影响。方法胰腺癌BxPC-3细胞随机分成模型组,5-氟尿嘧啶(5-FU)组(50μg/ml),DGP高、中、低剂量组(40,20,10μg/ml)。采用台盼蓝染色、MTT法、细胞划痕法分别检测胰腺癌BxPC-3细胞生长曲线、增殖抑制率、运动能力;采用免疫组织化学、RT-PCR法检测胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号通路关键蛋白Shh、Smo、Ptch1、Gli1水平。结果与模型组比较,5-FU组,DGP高、中剂量组胰腺癌BxPC-3细胞OD值明显降低(P0.05);运动能力明显降低(P0.05);Hedgehog信号通路关键蛋白Shh、Smo、Ptch1、Gli1水平明显降低(P0.05);Hedgehog信号通路关键蛋白Shh、Smo、Ptch1、Gli1 mRNA水平明显降低(P0.05)。结论 DGP对胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号通路关键蛋白Shh、Smo、Ptch1、Gli1具有抑制作用,可见DGP在胰腺癌治疗中扮演重要角色。     

益气活血方对胃癌前病变大鼠胃黏膜Sonic Hedgehog信号通路的影响

目的:研究益气活血方对1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)诱导的新生大鼠胃癌前病变胃黏膜组织Sonic Hedgehog(Shh)信号通路的影响。方法:48只雄性乳鼠随机分为正常组8只,造模组40只。造模组灌服800mg/L的MNNG 0.1mL/只,正常组灌服等量0.9%氯化钠溶液,共10d。23周后将造模组随机均分为模型组,中药高、中、低剂量组,环耙明组。正常组、模型组灌服0.9%氯化钠溶液10mL/kg,中药高、中、低剂量组分别灌服38.4、19.2、9.6g/kg的益气活血方流浸膏,环耙明组腹腔注射0.2mg/kg环靶明,均每日1次,12周后HE染色观察胃黏膜组织病理学变化,免疫组化检测胃黏膜PCNA的表达,qRT-PCR法检测胃黏膜组织Shh、Ptch1、Smo、Gli1、SuFu、CyclinD1、CyclinE1、C-Myc mRNA的表达,Western Blot检测胃黏膜组织Shh、Ptch1、Smo、Gli1、SuFu、CyclinD1、CyclinE1、C-Myc、p-c-Myc蛋白表达。结果:与模型组比较,益气活血方高、中、低剂量组和环耙明组大鼠胃黏膜炎症及异型增生程度均显著减轻,PCNA表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),Ptch1及SUFU mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01),Shh、Smo、Gli-1、CyclinD1及p-c-Myc蛋白的相对表达量显著降低而Ptch1及SUFU蛋白的表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:益气活血方可能通过下调Shh信号通路的表达起到对胃癌前病变的防治作用。     

基于Hedgehog信号通路的熊果酸诱导结直肠癌SW480细胞凋亡的机制研究

目的研究熊果酸通过经典Hedgehog信号通路影响人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法通过显微镜观察熊果酸对SW480细胞形态的影响;采用MTT比色法检测熊果酸对细胞活力的影响;细胞划痕实验检测熊果酸对细胞迁移的影响;Hoechest/PI染色法观察熊果酸对细胞凋亡的影响;荧光探针法检测熊果酸对细胞线粒体膜电位的影响;Caspase活性检测试剂盒检测熊果酸对细胞凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-9的影响;蛋白免疫印迹法检测Hedgehog信号通路相关蛋白SHh、Gli1、Ptch1、Smo、c-Myc、Su Fu及细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平。结果 SW480细胞经熊果酸给药后形态发生改变;细胞迁移能力显著下降;线粒体膜电位降低;细胞核出现致密浓染;Caspase-3、Caspase-9活性升高;SW480细胞发生凋亡;Hedgehog信号通路相关蛋白Su Fu的表达水平升高,SHh、Gli1、Ptch1、Smo、c-Myc的表达水平下降;细胞凋亡相关蛋白Bax的表达水平升高,Bcl-2的表达水平下降。结论熊果酸对SW480细胞的生长、增殖具有抑制作用,通过抑制Hedgehog信号通路的激活促进SW480细胞凋亡。     

半夏泻心汤调控Shh信号通路对BMSCs外泌体诱导的人胃癌细胞BGC-823增殖的影响

目的观察半夏泻心汤对骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体诱导的人胃癌细胞BGC-823增殖的影响,探讨其相关作用机制。方法利用Transwell小室将BMSCs外泌体与BGC-823细胞进行非接触共培养,实验分为空白组、模型组、阳性对照组和半夏泻心汤高、中、低剂量组,荧光染料Dil标记BMSCs外泌体,激光共聚焦显微镜观察BGC-823细胞对BMSCs外泌体的摄取,计算平均光密度(MOD);实时无标记细胞分析技术检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;RT-q PCR检测Shh、Ptch1、Smo、Gli1及C-myc m RNA的表达。结果与空白组比较,模型组细胞内可见大量红色荧光标记,MOD值显著增加(P0.05);模型组20~50 h细胞指数(CI)显著增加(P0.05),G_1、G2期细胞比例降低,S期细胞比例升高(P0.05),Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达显著升高(P0.05);与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组红色荧光标记减弱,其中半夏泻心汤高、中剂量组MOD值明显减少(P0.05),半夏泻心汤各剂量组20~50hCI显著减少(P0.05),G_1、G2期细胞比例升高,S期细胞比例降低(P0.05),Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达显著降低(P0.05)。结论半夏泻心汤可抑制BMSCs外泌体诱导的BGC-823细胞增殖,其机制可能与下调Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达,抑制Shh信号通路有关。     

左归丸对去卵巢致骨质疏松症大鼠Hedgehog/Smo/GLI1表达的影响

目的通过去卵巢复制骨质疏松症(OP)模型大鼠,观察去势大鼠骨中Hedgehog信号通路中的Smo、GLI1以及血清TRACP的蛋白表达变化,探讨左归丸治疗骨质疏松症的作用机制,为左归丸的临床应用提供科学依据。方法实验采用去卵巢的方法建立绝经骨质疏松症模型。SPF级雌性大鼠随机分为正常组、模型组、福善美组及左归丸组,术后2d开始给药干预,6次/周,持续12周后取材。检测各组大鼠股骨中骨密度(BMD),酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞中的7次跨膜蛋白(Smoothened, Smo)、Gli家族锌指蛋白-1(Gli family zinc finger-1,Gli-1)以及大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)的含量。结果经双能X线骨密度仪检测发现,与模型组比较,正常组、福善美组、左归丸组大鼠骨密度有明显提高(P0. 01);经ELISA检测发现,与模型组相比,正常组、福善美组、左归丸组Smo、GLI1均有所升高,TRACP均有所下降。结论①Hedgehog信号通路的Smo、Gli1的变化可能引起骨质疏松症;②左归丸可以改善大鼠体内Smo、Gli1、TRACP蛋白的表达;③左归丸能够有效治疗骨质疏松,这种作用可能通过Hedgehog信号通路来实现。     

吴茱萸碱通过调控Hedgehog信号通路诱导结直肠癌HCT-116细胞凋亡的研究

目的:基于Hedgehog信号通路研究吴茱萸碱抑制人结直肠癌HCT-116细胞增殖和诱导凋亡的作用及机制。方法:采用MTT法检测吴茱萸碱对HCT-116细胞和人正常结肠上皮NCM-460细胞增殖的影响;显微镜观察吴茱萸碱对HCT-116细胞形态的影响;结晶紫染色考察吴茱萸碱对HCT-116细胞克隆形成能力的影响;细胞划痕试验检测吴茱萸碱对细胞水平迁移的影响;Hoechest33324/PI染色观察吴茱萸碱对HCT-116细胞凋亡的影响;试剂盒检测吴茱萸碱对HCT-116细胞凋亡相关因子Caspase-9和Caspase-3活性的影响;蛋白免疫印迹试验(Western blotting)检测吴茱萸碱对细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、细胞周期相关蛋白Cyclin D1以及Hedgehog信号通路相关蛋白SHH、Gli1、SMO、c-Myc表达的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测吴茱萸碱对细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Cyclin D1以及Hedgehog信号通路相关因子Shh、Gli1、Smo、c-Myc mRNA表达的影响。结果:吴茱萸碱抑制HCT-116细胞的增殖且在高剂量和长时间给药情况下对人正常结肠上皮NCM-460细胞产生一定的抑制效应。此外,HCT-116细胞经吴茱萸碱5、10、20μmol/L干预后形态发生改变,细胞水平迁移能力和克隆形成能力显著下降,染色质固缩,细胞核呈致密浓染,Caspase-9和Caspase-3活性升高(P<0.01);吴茱萸碱10、20μmol/L作用HCT-116细胞48 h后,Bax mRNA和蛋白表达随吴茱萸碱浓度增高而上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01);吴茱萸10、20μmol/L碱诱导了周期调节因子Cyclin D1 mRNA和蛋白的下调(P<0.01);Hedgehog信号通路中的关键因子Shh、Gli1、Smo、c-Myc mRNA和蛋白表达也在吴茱萸碱干预后显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论:吴茱萸碱抑制HCT-116细胞的生长、增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能涉及抑制Hedgehog信号通路的激活。     

莪术含药血清抑制HSCs中Shh和Gli1表达的机制研究

研究莪术含药血清抑制活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)中Hedgehog(Hh)信号通路关键因子Shh(sonic hedgehog),Gli1(glioma-associated oncogene homolog-1)表达的机制。清洁级SD大鼠均分2组,分别给予莪术水煎剂、生理盐水灌胃取血制备含药血清。体外培养大鼠HSCs,分为7组:空白组、模型组、Hh通路抑制剂组、莪术组、Hh通路抑制剂+莪术组、Hh通路激动剂组、Hh通路激动剂+莪术组。除空白组外,其余各组均给予100μg·L-1瘦素诱导后,各组再予以相应药物干预24 h,经MTT法检测HSCs增殖情况,RT-PCR法检测Shh,Gli1的mRNA表达,Western blot法检测Shh,Gli1蛋白表达及免疫荧光法检测Gli1蛋白表达。经瘦素活化的大鼠HSCs中Shh,Gli1的mRNA和蛋白表达均显著上调(与空白组比较P0.01)。Hh通路抑制剂、莪术含药血清分别干预后,Shh,Gli1的mRNA和蛋白表达显著下调(与模型组比较P0.01);莪术含药血清与Hh通路抑制剂协同干预后,Shh,Gli1 mRNA和蛋白表达显著下调(与模型组比较P0.01);Hh通路激动剂干预后,Shh,Gli1 mRNA和蛋白表达显著上调(与模型组比较P0.01)。用莪术含药血清干预Hh通路激动剂组后,Shh,Gli1mRNA和蛋白表达显著下调(与Hh通路激动剂组比较P0.01)。莪术含药血清可通过抑制瘦素诱导活化的HSCs中Shh,Gli1的表达,参与Hh信号通路抑制HSCs的活化,发挥抗肝纤维化的作用。     

补骨脂素介导Hedgehog信号通路促进骨髓MSC成骨分化作用研究

目的:观察补骨脂素不同剂量含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞Shh、Ptch1、Gli1 mRNA及蛋白表达的影响,探讨补肾中药防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:采用SPF级SD雌性大鼠灌服高、中、低剂量补骨脂素配制对应用药组的含药血清5 d,取血清后,用各含药血清(补骨脂素高剂量组、补骨脂素中剂量组、补骨脂素低剂量组)对大鼠骨髓间充质干细胞进行干预6、9、12 d,以大鼠血清组为正常对照组,小牛血清组为空白对照组,成骨转化诱导液组作为阳性对照组。ELISA法检测第6、9、12天大鼠骨髓间充质干细胞ALP蛋白含量; ELISA法及qRT-PCR法检测第9天大鼠骨髓间充质干细胞Shh、Ptch1、Gli1 mRNA及蛋白表达。结果:各用药组均能提高大鼠间充质干细胞ALP蛋白表达,第9天达到峰值。补骨脂素能够上调Shh、Gli1,下调Ptch1 mRNA及蛋白表达,其中补骨脂素中剂量组最显著。结论:补骨脂素含药血清能够促进大鼠骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞,其作用机制可能与Hedgehog信号通路的活性有关。     

薏苡仁油对人结肠癌细胞增殖及凋亡的影响和机制

目的:观察薏苡仁油对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响,探讨薏苡仁油对人结肠癌HT-29细胞Hedgehog(Hh)信号通路的影响。方法:分别使用不同浓度薏苡仁油处理人结肠癌细胞株HT-29,另取空白培养基做对照组。采用噻唑蓝还原法[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]检测各组细胞增殖情况,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用实时定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,q-PCR)检测Ptch、Smo、Shh和Gli-1 mRNA表达,采用蛋白印迹检测CyclinD1、p21、Caspase-3、Bcl-2、Ptch、Smo、Shh和Gli-1蛋白的表达。结果:MTT法观察到薏苡仁油可抑制人结肠癌HT-29细胞增殖,各浓度水平组HT-29细胞增殖抑制率差异均有统计学意义(P0.05),抑制率随着薏苡仁油浓度的增加而升高。流式细胞术观察到薏苡仁油可诱导HT-29细胞凋亡,各浓度水平组HT-29细胞凋亡率差异均有统计学意义(P0.05),凋亡率随着薏苡仁油浓度的增加而升高。与空白对照组比较,薏苡仁油各组Ptch、Smo、Shh和Gli-1 mRNA的表达降低,且随着薏苡仁油浓度增加,各组表达变化逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。与空白对照组比较,薏苡仁油各组CyclinD1、Bcl-2、Ptch、Smo、Shh和Gli-1蛋白的表达降低,且随着薏苡仁油浓度增加,各组表达变化逐渐降低,差异有统计学意义(P0.05)。与空白对照组比较,薏苡仁油各组p21和Caspase-3蛋白的表达升高,且随着薏苡仁油浓度增加,各组表达变化逐渐升高,且差异有统计学意义(P0.05)。结论:薏苡仁油能抑制人结肠癌HT-29细胞增殖、促进其凋亡,其机制可能和薏苡仁油抑制Hh信号通路相关。     

Hedgehog 信号通路与慢性肝损伤后肝再生的调控

目的 初步探讨小肝细胞样祖细胞增殖过程中Hedgehog 信号通路的表达及其变化.方法 按Gordon's方案,Fisher344 大鼠腹腔注射倒千里光碱后,择期行部分肝切除术诱导小肝细胞样祖细胞的增殖,反转录聚合酶链反应、实时荧光定量PCR 及免疫组化等方法检测原代再生细胞均浆中Hedgehog 信号通路相关成分在不同时间点的表达,并以同期正常大鼠原代肝细胞作对照.结果 小肝细胞样祖细胞增殖过程中Hedgehog 信号通路多种成分表达,其中IHH、PTCH、Smo、Gli1、Gli2、Gli3 mRNA 持续表达并呈动态变化,SHH 表达阴性.信号分子IHH,以及反映通路活动状态的3 个标志(PTCH,Gli1,Gli3)在同一时间点与对照组之间差异有统计学意义,在实验组内不同时间点之间差异也有统计学意义(均P ＜0.001),时间与处理组之间有交互效应.免疫组化证实PTCH、Gli1 在蛋白水平的表达.结论 Hedgehog 信号通路在小肝细胞样祖细胞增殖过程中持续激活,可能是调控慢性肝损伤后肝再生的一条新的重要的信号通路.     

PESV干预K562细胞PI3K/Akt 信号通路凋亡调控的研究

[目的]探讨PESV对K562细胞PI3K/Akt信号蛋白及凋亡调控因子Bcl-2和Bad表达的影响。[方法]将体外培养K562细胞,经PESV处理不同时间后,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测PI3K及p-Akt蛋白水平变化,实时荧光定量RT-PCR检测Bcl-2、Bad mRNA水平变化。[结果]与对照组相比,PESV处理后K562细胞凋亡率显著增加,PI3K及p-Akt表达降低,抗凋亡相关基因Bcl-2 mRNA表达降低,促凋亡基因Bad mRNA表达增加。[结论]PESV可能通过降低PI3K、Akt信号蛋白表达,调节Bcl-2和Bad表达,抑制K562细胞增殖,促进其凋亡。     

蝎毒多肽提取物促进自噬抑制S180肉瘤作用机制的研究

目的 探讨蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)抑制S₁₈₀肉瘤的机制.方法 小鼠30只,建立S₁₈₀肉瘤皮下荷瘤模型,随机分为对照组、PESV组和雷帕霉素(rapamycin,RAPA)组,每组10只,给药组ig给药,连续给药14 d.绘制肿瘤体积生长曲线并且计算抑瘤率;HE染色观察各组肿瘤组织病理变化;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Beclin1、MAP1LC3A、CD133的蛋白表达差异;Western blotting检测各组肿瘤组织中Beclin1、MAP1LC3A、CD133的蛋白表达.结果 PESV组和RAPA组移植瘤的生长受到明显抑制,PESV组与RAPA组的抑瘤率分别为17.9%和25.0%(P< 0.05).与对照组相比,PESV组和RAPA组Beclin1、MAP1LC3A蛋白表达明显上调(P< 0.05).且CD133的蛋白表达明显下调(P< 0.01).结论 PESV可抑制S₁₈₀肉瘤细胞生长,其机制可能与促进自噬相关因子Beclin1、MAP1LC3A的表达及抑制肿瘤干细胞标志物CD133的表达有关.     

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??OBJECTIVE To investigate the effect of inhibitting sonic hedgehog(Shh) signaling pathway with cyclopamine pretreatment on proliferation of rat cortical neural stem cells (NSCs) after oxygen-glucose deprivation/reoxygenation (OGD/R) injury in vitro. METHODS The suspended culture was used for the isolation and purification of NSCs in neonatal Sprague-Dawley (SD) rats. The third passage NSCs for adherent culture were deprived oxygen and glucose for 150 min and recovered oxygen and glucose for 24 h. There were three groups, including normal, model and cyclopamine pretreatment groups. NSCs were identified with immunofluorescence. CCK-8 assay was used to examine cell viability. The proliferation of NSCs was measured with BrdU assay and flow cytometry cell cycle. Western blot was used to detect the protein expressions of Ptc-1,Smo and Gli-1. RESULTS There were high expression of nestin protein in suspended and adherent cultured cells. The cell vitalities in model and cyclopamine groups were decreased significantly compared with the normal group. Especially, there was less cell vitality in cyclopamine group(P<0.05). There was significantly increased for NSCs proliferation and upregulated for Ptc-1,Smo and Gli-1 proteins in the model group. On the contrary, compared with the model group, NSCs proliferation and the expressions of Ptc-1,Smo and Gli-1 proteins in cyclopamine group were significantly decreased(P<0.05). CONCLUSION Cyclopamine pretreatment can inhibit NSCs proliferation after OGD/R injury. The result suggests that Shh signaling may participate in the regulation of NSCs proliferation after injury.     

吴茱萸碱逆转K562/Adr细胞多药耐药的实验研究

目的 探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对白血病K562细胞及其耐药株K562/Adr的增殖、细胞周期及多药耐药性(MDR)的影响。方法用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测EVO和/或柔红霉素(DNR)对细胞增殖的影响,并计算耐药指数(RI)和逆转倍数(RF);流式细胞仪检测EVO和/或DNR对K562及K562/Adr细胞周期的影响;流式细胞仪检测K562及K562/Adr细胞内DNR的荧光强度;定量PCR检测K562及K562/Adr细胞中MDR1基因的表达;Western blotting检测K562及K562/Adr细胞中MDR1、BCRP蛋白的表达。结果EVO、DNR作用于K562和K562/Adr细胞后,细胞增殖受到抑制,且呈剂量和时间依赖性;与K562细胞相比,K562/Adr细胞对DNR的RI为30.54,K562/Adr细胞对EVO的RI为19.09。当EVO(0.125 gmol/L)与不同浓度DNR联合作用后,能使DNR对K562/Adr细胞的IC_(50)明显下降,DNR+EVO对K562/Adr细胞的RF为12.07;EVO、DNR单独或联合作用于K562及K562/Adr细胞后,能够使K562/Adr细胞BCRP、MDR1蛋白及mRNA表达水平均明显下降。结论EVO能有效逆转白血病K562/Adr细胞对DNR的耐药现象,而这种作用可能与EVO通过减少细胞膜上多药耐药蛋白MDR1的表达有关。     

TKP,a serine protease extracted from Trichosanthes kirilowii,inhibits the migration and invasion of colorectal adenocarcinoma cells by targeting Wnt/β‐catenin and Hedgehog/Gli1 signalings

Trichosanthes kirilowii, which is a type of Liana from cucurbitaceous family, possesses many bioactive constituents and therefore has multifarious pharmacological functions. TKP, which is a serine protease extracted from the fruit of Trichosanthes kirilowii, has been reported to possess potential anticancer activity. However, the effects of TKP on cancer cell migration and invasion are still unknown. Here, we reported that TKP could inhibit the migration and invasion abilities of colorectal cancer cells. In addition, the mRNA, protein expression levels, and activities of migration and invasion‐related proteins MMP2 and MMP9 were decreased in TKP‐treated cells. Mechanistically, TKP treatment repressed Wnt/β‐catenin and Hedgehog/Gli1 signaling cascades. However, the addition of lithium chloride or the transfection of plasmid pcDNA3.1‐V5‐HisA‐Gli1 reversed the impacts of TKP on MMP2, MMP9, cell migration, and invasion. These results indicated that TKP suppressed the migration and invasion of colorectal cancer cells through blocking Wnt/β‐catenin and Hedgehog/Gli1 pathways‐mediated MMP2 and MMP9.     

蝎毒多肽对卵巢癌抑制作用机制研究

目的研究蝎毒多肽抑制卵巢癌裸鼠肿瘤生长的作用机制,为恶性肿瘤临床治疗提供理论依据。方法制备人SKOV3裸鼠异种移植瘤模型,蝎毒多肽高、低剂量(20、10 mg/kg)ig给药2周,绘制肿瘤体积增长曲线,并计算抑瘤率;HE染色法观察各组肿瘤组织病理变化;免疫组化法检测肿瘤组织中PTEN、PI3K、p-Akt的表达水平;ELISA法检测各组裸鼠血清中PTEN、PI3K、p-Akt水平。结果蝎毒多肽高、低剂量组的抑瘤率分别为50.8%和31.5%。与对照组相比,蝎毒多肽高、低剂量组裸鼠肿瘤组织中PI3K和p-Akt的表达明显下调(P0.05、0.01),PTEN的表达明显上调(P0.05、0.01);血清中各因子的变化与免疫组化结果一致。结论蝎毒多肽可抑制卵巢癌肿瘤的生长,其机制可能与抑制肿瘤微环境中PI3K、p-Akt的表达,上调PTEN的表达有关。     

老鼠簕生物碱A对肝纤维化大鼠PI3K/Akt/m TOR/p70S6K信号通路的影响

目的观察老鼠簕生物碱A(HBOA)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路的影响,探讨HBOA抗肝纤维化的作用机制。方法大鼠随机分成对照组、模型组及HBOA高、中、低剂量(100、50、25 mg/kg)组和秋水仙碱(0.4 mg/kg)组。除对照组外,其余各组ig给予50%CCl4橄榄油溶液,每周2次,连续12周,诱导肝纤维化大鼠模型。于造模第9周起,给药组分别ig相应的受试药物,每天1次,给药4周。实验结束后,计算各组大鼠体质量变化、肝脏指数;检测各组大鼠肝匀浆中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性;蛋白免疫印迹法(Western blotting)法检测肝组织P-PI3K、p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K蛋白的表达。结果与模型组比较,各给药组大鼠体质量增加量显著升高,均能降低肝脏指数及肝组织中ALT、AST活性;此外,HBOA高、中剂量组均能显著抑制p-PI3K、p-Akt、p-m TOR、p-p70S6K蛋白的表达。结论 HBOA对肝纤维化大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与抑制PI3K/Akt/m TOR/p70S6K信号通路有关。     

蝎毒多肽干预急性白血病髓外浸润传变的机制

目的:观察蝎毒多肽(PESV)对人白血病NOD/SCID小鼠髓外浸润模型体内uPA、uPAR、MMP2、MMP9表达的影响,探讨PESV干预急性白血病髓外浸润传变的机制。方法:首先选取急性白血病患者骨髓单个核细胞注入经过铯-137源照射的NOD/SCID小鼠体内,建立人白血病NOD/SCID小鼠髓外浸润模型;对实验小鼠随机分组,用Real-time PCR及Western Blot检测PESV治疗后小鼠体内MMP2、MMP9 mRNA和蛋白表达水平,用ELISA法检测小鼠血清uPA及uPAR表达水平。结果:PESV能够抑制模型小鼠体内MMP2、MMP9 mRNA及蛋白水平表达,能够抑制uPA及uPAR过度表达,其抑制效果与PESV浓度具有相关性。结论:PESV通过干预细胞外基质降解机制,阻抑急性白血病髓外浸润传变进展。