醋酸甲羟孕酮联合甲硝唑对子宫内膜炎大鼠炎性因子及TLR4/NFκB通路的影响

【摘要】目的 研究醋酸甲羟孕酮联合甲硝唑对子宫内膜炎大鼠炎性因子及TLR4/ NF κB信号通路的影响。方法将40只SPF级SD大鼠随机分为5组,每组8只。空白组不做处理,其余4组均先构建子宫内膜炎大鼠模型,造模成功后的第2天起,模型组（不给药）,其余3个组（醛酸甲羟孕酮组、甲硝唑组、联合用药组）分别按醋酸甲羟孕酮（4 mg〖DK〗·kg-1〖DK〗·d-1）、甲硝唑（002 g〖DK〗·kg-1〖DK〗·d-1）、醋酸甲羟孕酮联合甲硝唑（4 mg〖DK〗·kg-1〖DK〗·d-1+002 g〖DK〗·kg-1〖DK〗·d-1）灌胃治疗,连续14 d后处死,采样待检。HE染色观察子宫组织病理学变化;免疫组化检测子宫组织MMP 2、MMP 9表达;ELISA检测血清IL 1、PGE2、MDA、NO、SOD水平;Western Blot检测子宫组织NF κB p65、TLR4表达。结果 不同给药组均可减轻子宫内膜炎大鼠子宫组织病理损伤;与空白组比较,模型组大鼠IL 1、PGE2、MDA、NO、NF κB p65、TLR4表达明显升高,SOD、MMP 2、MMP 9表达明显降低（均P＜005）;与模型组比较,联合用药可明显降低子宫内膜炎大鼠IL 1、PGE2、MDA、NO、NF κB p65、TLR4表达,明显升高SOD、MMP 2、MMP 9表达,且联合用药组IL 1表达明显低于甲硝唑组,TLR4表达明显低于醋酸甲羟孕酮组及甲硝唑组,MMP 2表达明显高于甲硝唑组,MMP 9表达明显高于醋酸甲羟孕酮组及甲硝唑组（均P＜005）。结论 醋酸甲羟孕酮联合甲硝唑通过影响TLR4/NF κB信号通路,改善炎性指标,发挥对子宫内膜炎大鼠的治疗作用。     

全氟化碳对脂多糖诱导肺泡上皮细胞炎性反应及单免疫球蛋白白介素1相关蛋白表达的影响

【摘要】 目的 探讨全氟化碳（PFC）对脂多糖（LPS）诱导人肺泡上皮A549细胞炎性反应及单免疫球蛋白白介素 1受体相关蛋白（SIGIRR）表达的影响。方法 实验分为正常细胞组、全氟化碳+脂多糖（PFC+LPS）组、全氟化碳（PFC）组及脂多糖（LPS）组。各组细胞经相应处理24 h后,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养上清中的TNF α、IL 6和IL 10含量,用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测核转录因子 κB （NF κB）和SIGIRR的表达。结果 ELISA结果显示,LPS组TNF α、IL 6水平较正常细胞组升高（P＜005）;PFC+LPS组TNF α、IL 6水平较LPS组下降（P＜005）;与正常细胞组相比,PFC组IL 10水平升高（P＜005）,PFC+LPS组IL 10水平较LPS组升高（P＜005）。Western blot 结果显示,与正常细胞组相比,LPS组核内磷酸化NF κB p65表达上调（P＜005）,PFC+LPS组核内磷酸化NF κB p65表达水平较LPS组降低（P＜005）;与正常细胞组相比,LPS组SIGIRR表达水平下调（P＜005）,PFC+LPS组SIGIRR表达水平较LPS组上调（P＜005）。PFC本身对TNF α、IL 6含量及NF κB p65表达无影响,但PFC可促进A549细胞释放IL 10及上调SIGIRR表达（P＜005）。结论 PFC可减轻A549细胞对LPS诱导的炎性反应,促进抗炎因子IL 10分泌及上调负调控分子SIGIRR表达是可能的分子机制。     

甲强龙对脑出血后灶周MMP 9 表达及其神经损伤的保护作用

【摘要】目的 探讨甲强龙对脑出血后灶周基质金属蛋白酶 9（MMP 9）表达及神经损伤保护作用的实验研究。方法〓通过立体定向仪建立稳定的SD大鼠高血压脑出血模型,将实验动物30只随机分为假手术对照组、脑出血组、甲强龙干预组、空白对照组,每组各7只。甲强龙干预组于术后1小时及24小时后给予35mg/kg的甲强龙腹腔注射,空白对照组腹腔注射等量的生理盐水。在术后第1、3、7天检测各组大鼠的脑含水量、神经功能评分及MMP 9蛋白表达;在术后第3天检测各组大鼠的细胞凋亡、活化小胶质细胞数量。 结果〓甲强龙干预组术后第1、3、7天的脑组织含水量明显低于及空白对照组,组间比较差异有统计学意义(P＜005);甲强龙干预组术后第1、3、7天的神经功能评分明显高于空白对照组,组间比较差异有统计学意义(P＜005);术后第3天的OX 42免疫组化染色显示甲强龙干预组活化小胶质细胞数量少于空白对照组,组间比较差异有统计学意义(P＜005);甲强龙干预组术后的MMP 9蛋白表达明显低于空白对照组,组间比较差异有统计学意义(P＜005)。 结论〓甲强龙能抑制大鼠脑出血后MMP 9的高表达且能减轻脑水肿和炎性反应,具有神经功能保护作用。     

NLRP3对病毒感染心肌细胞凋亡及炎症反应的作用

【摘要】目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）对病毒感染的心肌细胞炎症及凋亡的影响。方法 分离培养SD乳鼠心肌细胞,采用基因沉默的方法敲减NLRP3基因的表达,然后随机分为4组,分别包括正常对照组、Scrambled siRNA组、CVB3+Scrambled siRNA组、CVB3+NLRP3 siRNA组。ELISA检测心肌损伤标志物CK MB、cTnI及IL 1β、IL 18等炎症因子水平,RT qPCR、Western blot检测NLRP3炎性小体通路的激活情况以及细胞内外源凋亡途径caspase 8、Bcl 2、Bax、caspase 9、caspase 3等的水平。结果 与正常对照组相比,CVB3+Scrambled siRNA组中NLRP3通路被激活,其下游的caspase 1被活化,IL 1β、IL 18表达增加（P＜005）,caspase 8、caspase 3、caspase 9活化增强,Bcl 2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增高,Bax/Bcl 2比值增大（P＜005）,心肌细胞凋亡及CK MB、cTnI均增加（P＜005）。敲减NLRP3基因表达后,与CVB3+Scrambled siRNA组比较, caspase 1活性被抑制,IL 1β、IL 18表达降低（P＜005）,caspase 3、caspase 9活性降低,Bcl 2下降程度减弱,Bax/Bcl 2比值降低（P＜005）,但对caspase 8、Bax的蛋白表达无明显影响（P＞005）。结论 NLRP3信号通路在病毒感染早期导致心肌细胞损伤过程中起重要作用,抑制NLRP3过度激活会减轻心肌细胞炎症损伤及细胞凋亡,可能是治疗病毒性心肌炎的潜在靶点。     

Jagged1 Notch1与NF κB蛋白在寻常型银屑病中的表达

【摘要】 目的 检测寻常型银屑病患者皮肤组织中Jagged1、Notch1与NF κB蛋白的表达,探讨Notch信号通路的异常激活与银屑病发病机制的关系。方法 收集2012年7月~2014年7月年西南医科大学附属医院皮肤科寻常型银屑病40例患者的病理标本（病例组）及40例正常人的皮肤标本（对照组）,采用免疫组织化学法分别检测银屑病患者皮损区、非皮损区及对照组皮肤标本的Jagged1、Notch1与NF κB表达。结果 Jagged1、Notch1与NF κB在银屑病皮损区组比其他两组表达明显升高,差异有统计学意义（P＜005）;非皮损区组与对照组表达相似,差异无统计学意义（P＞005）。且银屑病皮损区组Jagged1、Notch1和NF κB三者间阳性表达呈正相关（P＜001）。结论 Jagged1、Notchl、NF κB蛋白在寻常型银屑病患者中均呈现高表达,且银屑病皮损区Jagged1、Notch1和NF κB三者阳性表达呈正相关,因此Jagged1、Notchl、NF κB蛋白可能在银屑病的发病机制中占有重要地位。     

抑制TNFR/RIPK信号通路对神经细胞凋亡的影响及机制研究

【摘要】 目的 研究抑制TNFR/RIPK信号通路对急性脊髓损伤（ASCI）大鼠神经细胞凋亡的影响及作用机制。方法 160只雄性SD大鼠,随机分为空白对照组、假手术组、模型组、Nec 1组,每组又根据时间点分为12h、24h、3d、7d四个亚组。采用动脉夹钳夹法制作ASCI模型,空白对照组不做任何处理,假手术组仅暴露脊髓,不损伤脊髓,模型组和Nec 1组用动脉瘤夹脊髓全横截面1min,缝合伤口。空白对照组、假手术组和模型组注射给予生理盐水,Nec 1组注射坏死性凋亡抑制剂Necrostain 1（Nec 1）溶液1μl/kg,1次/d,分别给药12h、24h、3d、7d。给药后以BBB评分对各组大鼠后肢神经功能恢复情况进行评分,完成评分后,取10只给药7d的大鼠脊髓,进行HE染色、Nissl染色、碘化丙啶（PI）染色、Tunel染色;另取10只给药7d的大鼠,取脊髓,用Western Blot检测RIP1、RIP3、Bcl 2蛋白表达情况。结果 模型组和Nec 1组各时间点的BBB评分均显著低于空白对照组和假手术组（P＜005）,Nec 1组各时间点的BBB评分显著高于模型组（P＜005）。造模7d后,模型组脊髓出现坏死、空洞现象,大量炎性细胞浸润,坏死区域面积显著高于假手术组（P＜005）;尼氏体呈细颗粒状,神经元数量减少、染色浅、排列无序,坏死性凋亡细胞较多;PI红染细胞、Tunel阳性细胞数、凋亡小体数量,以及RIPK1、RIPK3、Bcl 2蛋白表达水平显著多于假手术组（P＜005）。给予Nec 1治疗7d后,Nec 1组脊髓坏死组织较模型组少,空洞现象得到改善,炎性细胞浸润现象好转,Nec 1组坏死区域面积显著低于空白对照组和假手术组（P＜005）;尼氏体着色的神经元细胞染色较深,颗粒变粗,存活神经元数量显著高于模型组（P＜005）;PI红染细胞数、凋亡小体数,以及RIPK1、RIPK3蛋白表达水平显著少于模型组（P＜005）,Bcl 2蛋白表达水平显著高于模型组（P＜005）。结论 坏死性凋亡抑制剂Nec 1能通过抑制TNFR/RIPK信号通路,下调RIPK1、RIPK3、上调Bcl 2的表达来缩小ASCI损伤面积,缓解炎症浸润,减少损伤周围神经元数量,改善神经元功能,提高损伤神经元及胶质细胞存活率,改善大鼠BBB评分,抑制坏死性凋亡。     

JAK2/STAT3通路在脑缺血再灌注损伤炎性反应中的作用

【摘要】 目的 研究JAK2/STAT3通路在脑缺血再灌注损伤炎性反应中的作用。方法 采用线栓法建立SD大鼠脑缺血再灌注模型,造模成功后将其随机分为模型组、AG490组,每组各24只,根据再灌注时间分为再灌注后6 h、12 h、 24 h、72 h四个亚组,每个亚组动物6只,同时随机挑选24只正常SD大鼠经假手术处理为假手术组。分别于再灌注后6 h、12 h、24 h、72 h四个时间点进行神经功能缺损评分;在相应时间点处死后取脑组织,采用免疫组化测定脑组织中JAK2、STAT3、IL 1β、TNF α蛋白水平。结果〓假手术组各个时间点比较,神经功能缺损评分及JAK2、STAT3、IL 1β、TNF α蛋白表达均无明显差异;模型组神经功能缺损评分及上述蛋白表达在24小时内呈上升趋势,并于24小时达最高峰,72小时降低;AG490组神经功能缺损评分及上述蛋白表达则一直呈下降趋势,并且神经功能缺损评分再灌注后24 h、72 h均低于模型组（P＜005）。AG490组4个时间点JAK2、STAT3、IL 1β、TNF α的蛋白表达均低于模型组（P＜001）,高于假手术组（P＜001）。结论 脑缺血再灌注后激活JAK2/STAT3通路能通过增加IL 1β及TNF α的表达促进炎性反应,加重脑缺血再灌注损伤;AG490能通过降低脑缺血再灌注损伤后JAK2、STAT3、IL 1β、TNF α蛋白水平,保护神经功能。     

电针结合脑内注射VEGF修复大鼠脑缺血后再灌注损伤的机制研究

目的 观察电针及电针结合脑内注射血管内皮生长因子（VEGF）对脑缺血后再灌注损伤大鼠caspase12、caspasse3、 葡萄糖调节蛋白-78 (GRP78)的影响,探讨电针结合脑内VEGF对脑缺血后再灌注损伤的修复机制。方法 将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、电针+VEGF组,每组15只。后3组采用线栓法进行大脑中动脉缺血（MCAO）法制作脑缺血后再灌注损伤模型。电针组及电针+VEGF组造模后1 d开始电针干预（穴位:百会、曲池、足三里）,1次/d,每次30 min,共14 d。电针+VEGF组大鼠于造模成功后24 h行第一次电针干预后,向侧脑室内一次性注入10 μL VEGF165 (0.025 μg/μL)。每组于0 d（造模后1 d,开始电针干预前）、7 d、14 d时,各取5只大鼠进行神经功能评分（mNSS）后处死取材,尼氏染色观察脑梗死区组织形态,免疫组化法检测大鼠缺血脑组织GRP78活性,real-time PCR法检测大鼠缺血脑组织caspase12、caspase3、GRP78 mRNA表达量。结果 0 d、7 d、14 d时,与假手术组比较,模型组大鼠mNSS评分升高（ P<0.05),镜下可见脑梗死征象（尼氏小体数量明显减少且排列混乱,结构不清晰）,GRP78免疫阳性细胞数量增多,GRP78 mRNA表达升高（ P<0.05),caspase12及caspase3 mRNA表达升高（ P<0.05)。7 d和14 d时,与模型组比较,电针组以及电针+VEGF组大鼠的mNSS评分降低（ P<0.05）,镜下脑梗死征象减轻,GRP78免疫阳性细胞数量增多,GRP78 mRNA表达增多（ P<0.05）,caspase12、caspase3 mRNA表达降低（ P<0.05),电针+VEGF组上述指标变化均较电针组明显（ P<0.05）。假手术组各时点间上述指标差异无统计学意义（ P>0.05）,其余3组mNSS评分（ P<0.05)、脑梗死征象、caspase12、caspase3 mRNA表达随治疗时间降低（ P<0.05),GRP78免疫阳性细胞数量随治疗时间增多,GRP78 mRNA表达随治疗时间升高（ P<0.05）。结论 电针结合脑内注射VEGF可促进脑缺血损伤组织修复,其机制可能与下调caspase12、caspase3基因,上调GRP78基因的表达有关,且其效果比单纯使用电针法更具优势。     

金雀异黄酮对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

【摘要】目的 探讨金雀异黄酮对心肌缺血再灌注损伤(MI/RI)大鼠心肌细胞凋亡Bcl 2、Bax和Caspase 3蛋白及mRNA表达的影响。方法 60只雄性SD大鼠分别为假手术组、模型组、阿司匹林组（10 mg·kg-1·d-1）、金雀异黄酮低剂量组（20 mg·kg-1·d-1）、中剂量组（40 mg·kg-1·d-1）和高剂量组（80 mg·kg-1·d-1）,每组10只。给药2周后经典方法构建MI/RI大鼠模型后HE染色检测心肌组织;采集血清测乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同功酶(CK MB)和α 羟丁酸脱氢酶（α HBD）,采集心脏检测丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力(T AOC)和一氧化氮合酶（NOS）;同时,RT PCR和Western Blotting检测心肌组织中Bcl 2、Bax和Caspase 3蛋白及mRNA表达。结果 假手术组心肌排列整齐无断裂,模型组出现大量断裂;与模型组相比,各治疗组明显改善;模型组大鼠血清LDH、CK、CK MB、α HBD高于假手术组（P＜005）,心肌MDA水平高于假手术组（P＜005）,心肌SOD、T AOC及 NOS水平均低于假手术组（P＜005）;与模型组比较,金雀异黄酮三个剂量组和阿司匹林组血清LDH、CK、CK MB、α HBD明显降低（P＜005）,心肌MDA明显降低（P＜005）,心肌SOD、T AOC及NOS明显升高（P＜005）;模型组大鼠心肌Bcl 2蛋白和mRNA表达均低于假手术组（P＜005）,Bax和Caspase 3蛋白和mRNA表达均高于假手术组（P＜005）,而金雀异黄酮三个剂量组和阿司匹林组Bcl 2显著上调（P＜005）,Bax和Caspase 3显著下调（P＜005）。结论 金雀异黄酮可抑制心肌细胞凋亡,同时提高心肌抗氧化能力,抑制MI/RI给心肌带来的损伤。     

右美托咪定调控miR 126对高糖诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的影响

【摘要】目的 探讨右美托咪定（DEX）对高糖诱导的心肌细胞氧化应激及凋亡的影响及作用机制。方法 体外培养心肌细胞H9C2,分别用葡萄糖浓度为55、35 mmol/L的DMEM培养基培养,分别作为对照组和高糖损伤模型组。分别使用不同浓度（5、10、20 μg/L）DEX处理心肌细胞记为实验1组、实验2组、实验3组。检测各组乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT PCR）检测微小RNA 126（miR 126）的表达量。分别将miR NC、miR 126 mimicis转染至心肌细胞,使用含有葡萄糖浓度为35 mmol/L的DMEM培养基培养24 h,分别记为miR NC组、miR 126组。分别将miR NC、miR 126 mimcis、anti miR NC、anti miR 126转染至心肌细胞,采用含有葡萄糖浓度为35 mmol/L与DEX浓度为20 μg/L的 DMEM培养基培养,分别记为实验3+miR NC组、实验3+miR 126组、实验3+anti miR NC组、实验3+anti miR 126组。流式细胞术检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3的前体蛋白（pro caspase 3）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cl caspase 3）水平。结果 与对照组比较,高糖损伤模型组LDH、MDA含量显著升高（P＜005）,SOD含量显著降低（P＜005）,miR 126的表达水平显著降低（P＜005）,细胞凋亡率显著升高（P＜005）,cl caspase 3蛋白水平显著升高（P＜005）,pro caspase 3蛋白水平显著降低（P＜005）。与高糖损伤模型组比较,实验1组、实验2组、实验3组LDH、MDA含量显著降低（P＜005）,SOD含量显著升高（P＜005）,miR 126的表达水平升高（P＜005）,细胞凋亡率显著降低（P＜005）,cl caspase 3蛋白水平显著降低（P＜005）,pro caspase 3蛋白水平显著升高（P＜005）,实验1组、实验2组、实验3组间各指标比较差异有统计学意义（P＜005）。与miR NC组比较,miR 126组LDH、MDA含量显著降低（P＜005）,SOD含量显著升高（P＜005）,细胞凋亡率显著降低（P＜005）,cl caspase 3蛋白水平显著降低（P＜005）,pro caspase 3蛋白水平显著升高（P＜005）。miR 126过表达能增强DEX对高糖诱导心肌细胞氧化应激及凋亡,抑制miR 126表达能逆减弱DEX对高糖诱导心肌细胞氧化应激及凋亡。结论 DEX可通过上调miR 126的表达从而抑制高糖诱导的心肌细胞氧化应激及细胞凋亡。      

银杏黄酮对哮喘大鼠缺氧诱导因子 1α表达水平和气道重塑的影响

【摘要】目的 探讨银杏黄酮对哮喘大鼠缺氧诱导因子 1α表达水平和气道重塑的影响。方法 选择SD大鼠40只,随机分为对照组、模型组、高剂量治疗组（2mg/d）和低剂量治疗组（05mg/d）四组,每组10只。除对照组外其余三组采用卵蛋白（OVA）等致敏物构建大鼠哮喘模型。哮喘模型构建后对照组用生理盐水激发,其余三组采用吸入卵蛋白等激发,银杏黄酮治疗组在激发前30min腹腔注射相应剂量的银杏黄酮溶液。哮喘激发3周后,HE染色观察肺组织的病理学改变,测量支气管壁厚度、平滑肌厚度。免疫组化染色,检测肺组织切片HIF 1α和VEGF的组织含量;western blot检测大鼠肺部组织HIF 1α和VEGF蛋白水平。结果 对照组气道上皮完整,无明显改变,模型组和治疗组气道壁及平滑肌明显增厚,上皮中见黏膜脱落,且高剂量治疗组病理改善程度明显优于低剂量治疗组和模型组;与对照组相比,其余三组的支气管壁和平滑肌显著增厚（P＜005）,但高剂量治疗组增厚程度显著小于低剂量治疗组和模型组（P＜005）;模型组和治疗组中HIF 1α和VEGF的蛋白水平明显增加（P＜005）,高剂量治疗组蛋白水平增加量显著低于低剂量治疗组和模型组（P＜005）。 结论 高剂量的银杏黄酮能够抑制哮喘大鼠肺组织的HIF 1α和VEGF的表达,影响组织平滑肌的增殖及支气管壁的增厚,干预气道重塑。     

海昆肾喜胶囊对慢性肾衰竭大鼠肾功能的保护作用

【摘要】 目的 探讨海昆肾喜胶囊对慢性肾衰竭（CRF）大鼠肾功能病理状态的治疗作用。方法 在45只清洁级大鼠中选取10只作为对照组,其余35只仅25只造模成功,将造模成功大鼠随机分为模型组（12只）和实验组（13只）,模型组和实验组采用腺嘌呤建立CRF模型。实验组给予海昆肾喜胶囊溶液（011g/100g·d）灌胃,对照组与模型组动物给予等量生理盐水灌胃。给药4周后,测定肾功能相关指标血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）水平、机体炎症因子、肿瘤坏死因子 α（TNF α）、白介素 6（IL 6）水平、肾组织中纤维连接蛋白（FN）、层黏链蛋白（LN）、α 平滑肌肌动蛋白（α SMA）和转化生长因子 β（TGF β）蛋白表达情况,采用Masson染色法测定肾组织纤维化情况。结果 与对照组相比,模型组和实验组中BUN、Scr、TNF α和IL 6含量显著升高（P＜005）,α SMA和TGF β蛋白表达量明显增多（P＜005）;与模型组相比,实验组中BUN、Scr、TNF α和IL 6含量显著降低（P＜005）,α SMA和TGF β蛋白表达明显减少（P＜005）,Masson染色中实验组肾组织纤维化情况明显改善;免疫组化实验中,实验组FN与LN蛋白表达明显减小。结论 海昆肾喜胶囊可通过抑制肾组织纤维化进程、降低炎症因子分泌,从而对大鼠慢性肾衰竭状态起到治疗作用。     

大黄素通过PPARγ/NF κB信号通路抑制LPS诱导的RAW2647细胞炎症反应

【摘要】 目的 研究大黄素对LPS诱导的炎症反应的抑制作用及其相关的信号通路。方法 将小鼠巨噬细胞RAW2647细胞分为6组,即Control组、LPS组、大黄素组(Emodin组)、LPS+大黄素组(LPS+Emodin组)、LPS+大黄素组+siRNA PPARγ (LPS+Emodin+siRNA PPARγ组)、LPS+大黄素组+siRNA scrambled (LPS+Emodin+siRNA scrambled组)。使用ELISA测定TNF α水平,qPCR和western blot测定ICAM 1、MCP 1和PPARγ mRNA和蛋白水平,并使用western blot测定NF κB p65磷酸化水平。结果 与Control组相比较,LPS干预6小时后RAW2647细胞TNF α、ICAM 1和MCP 1的表达以及NF κB p65磷酸化水平均明显升高,PPARγ表达水平明显下降,差异均有统计学意义(P均<005);与LPS+Emodin组相比较,LPS组TNF α、ICAM 1和MCP 1的表达以及NF κB p65磷酸化水平升高更明显,PPARγ表达水平下降更明显,差异均有统计学意义(P均<005);同时siRNA PPARγ可以有效阻断Emodin的作用,差异均有统计学意义(P均<005);且LPS+Emodin组和LPS+Emodin+siRNA scrambled组间各分子表达及磷酸化水平未见明显差别,差异均无明显统计学差异(P>005)。结论〓大黄素可能通过PPARγ/NF κB信号通路抑制LPS诱导的RAW2647细胞炎症反应,为大黄素应用于支气管哮喘及ARDS等炎症相关性疾病的临床治疗奠定了基础。     

术前血清肿瘤标志物水平对浸润性膀胱癌根治术后生存率的预测价值

【摘要】 目的 探讨术前血清VEGF、CXCL5和MMP 9水平对浸润性肌层膀胱癌（MIBC）根治术后生存率的预测价值。 方法 选择2012年11月~2015年11月在本院行浸润性膀胱癌根治术的82例MIBC患者，分析患者的年龄、性别、T分期、分化程度以及有无淋巴结转移等，采用ELISA检测血清样品中VEGF、CXCL5和MMP 9表达水平；采用单因素生存分析Kaplan Meier绘制生存曲线；采用Pearson相关性分析血清VEGF、CXCL5与MMP 9之间的相关性。 结果 与对照组相比， MIBC患者术前血清中VEGF、CXCL5和MMP 9的表达水平显著升高（P＜005）；术前血清VEGF、CXCL5和MMP 9的表达水平与肿瘤直径、分化程度、T分期以及是否合并淋巴结转移有关（P＜005）；生存分〖JP2〗析显示，VEGF低表达患者生3年总生存率和无病生存率显著高于VEGF高表达患者（7317% vs 5122%，Log rank2=〖JP〗4548，P=0033；5610% vs 3415%，Log rank2=4701，P=0030）；CXCL5低表达患者3年总生存率和无病生存率显著高于CXCL5高表达患者（7561% vs 4878%，Log rank2=6639，P=0010；5854% vs 3171%，Log rank2=7212，P=0007）；MMP 9高表达患者生3年总生存率和无病生存率显著低于MMP 9低表达患者（7561% vs 4878%，Log rank2=6340，P=0012；5610% vs 3415%，Log rank2=5037，P=0025）；相关性分析显示，血清VEGF、CXCL5水平均与MMP 9的表达呈显著正相关关系（r=0594，P＜0001；r=0658，P＜0001）。 结论 术前血清VEGF、CXCL5或MMP 9高表达MIBC患者3年总生存率和无病生存率明显降低，有望应用于临床预后评估。     

身痛逐瘀汤对大鼠变性腰椎间盘内TNF α、IL 1α、IL 6、MMP 3的影响

【摘要】 目的 观察身痛逐瘀汤对大鼠变性腰椎间盘内肿瘤坏死因子 α（TNF α）、白介素 1α(IL 1α)、白介素 6(IL 6)、基质金属蛋白酶 3(MMP 3)水平的影响,研究中药调节炎性细胞因子分泌、延缓腰椎间盘变性的发生机制。 方法 本实验纳入8月龄雄性SD大鼠80只,按照随机分组法分为4组,20只SD大鼠作为正常对照组,60只建立腰椎间盘变性大鼠模型,随机分为空白对照组（BC）、西医治疗组（NASID）、中医实验组（ST）3组,每组各20只,西医治疗组选择双氯芬酸钠片连续灌胃给药,中医实验组以身痛逐瘀汤（泽兰合剂）进行灌胃给药,西医治疗组、空白对照组、正常对照组大鼠均给予等量生理盐水灌胃。通过分子生物学技术等观察相关指标,定性、定量分析TNF α、IL 1α、IL 6、MMP 3水平。结果 与空白对照组相比,西医治疗组和中医实验组治疗后TNF α、IL 1α、IL 6、MMP 3水平均不同程度降低（P均<005）;与正常对照组相比,TNF α、IL 1α、IL 6、MMP 3水平有一定程度增高（P均<005）;中医观察组与西医治疗组相比,TNF α、IL 1α、IL 6、MMP 3下降更低（P<005）。结论 身痛逐瘀汤与非甾体止痛抗炎药物均能减少大鼠变性腰椎间盘内TNF α、IL 1α、IL 6、MMP 3的分泌,延缓腰椎间盘变性的进程,身痛逐瘀汤减少炎性因子分泌要好于非甾体类药物,不良反应也更少。     

DRG神经元P2X3受体在神经病理痛大鼠疾病中的作用及其与磷酸化p38 MAPK的相关性

【摘要】目的 探讨背根神经节（DRG）神经元P2X3受体在神经病理痛（NP）大鼠疾病发生和进展中的作用,并分析其与磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（p38 MAPK）的相关性。方法 60只大鼠采用体质量排序法随机分为假手术组、模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组4组,每组各15只。采用坐骨神经缩窄性损伤法建立NP大鼠模型,假手术组仅分离坐骨神经不结扎。建模成功大鼠假手术组14只、模型组12只,分别鞘内注射20 μL无菌生理盐水;P2X3受体拮抗剂组12只,鞘内注射10 μL无菌生理盐水+10 μL A 317491;P2X3受体激动剂组13只,鞘内注射10 μL无菌生理盐水+10 μL ATP。评估各组大鼠手术前后各时间点热刺激缩足反射潜伏期（PWTL）、机械缩足反射阈值（MWT）;检测各组术后7、14 d DRG中P2X3受体、p p38MAPK蛋白表达情况,并采用Pearson相关性系数法分析P2X3受体与p p38MAPK的相关性。结果 模型组术后患肢出现明显痛觉过敏体征,P2X3受体激动剂组更为严重,P2X3受体拮抗剂组有所改善。与假手术组比较,模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组术后1 d PWTL较术前缩短,且术后1~14 d保持平稳（P＜005）;与模型组比较,术后1~14 d P2X3受体拮抗剂组PWTL均延长,P2X3受体激动剂组均缩短,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组仍短于假手术组（P＜005）。模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组术后1 d开始MWT降低,且分别于术后14、7 d降至最低（P＜005）;与模型组比较,术后1~14 d P2X3受体拮抗剂组MWT均升高,P2X3受体激动剂MWT均降低,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组仍低于假手术组（P＜005）。与模型组比较,P2X3受体拮抗剂组术后7、14 d DRG中P2X3受体、p p38MAPK蛋白相对表达量均降低,P2X3受体激动剂组均升高,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组均高于假手术组（P＜005）。经Pearson相关性分析,术后7、14 d DRG中P2X3受体相对表达量与p p38MAPK蛋白相对表达量呈正相关（P＜0001）。结论 DRG神经元P2X3受体激活参与促进NP大鼠疾病发生和进展,且P2X3受体激活可促进p38 MAPK磷酸化量增多。     

熊果酸治疗急性胰腺炎大鼠的效果及作用机制

【摘要】目的 探讨熊果酸(UA)对急性胰腺炎(AP)大鼠的治疗作用以及可能的作用机制。方法 30只雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、急性胰腺炎组（AP组）和熊果酸组（UA组）,每组10只。除假手术组外,其余两组采用逆行胰胆管注射5%牛黄胆酸钠（1 mL/ kg）诱导大鼠AP模型,假手术组注射等量生理盐水,造模30 min后,UA组给予熊果酸150 mg/kg灌胃,其余两组灌等体积蒸馏水,灌胃12 h后处死大鼠,收集胰腺和血清。酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中白介素1β（IL 1β）、白介素6（IL 6）、肿瘤坏死因子α（TNF α）含量,全自动生化分析仪测定血清中淀粉酶含量,HE和TUNEL染色观察胰腺病理和凋亡情况,蛋白免疫印迹实验检测胰腺Bcl 2、Bax、cleaved caspase3、p38MAPK、p p38MAPK表达情况,实时荧光定量PCR检测p38MAPK mRNA表达水平。结果 与AP组相比,UA组血清淀粉酶、TNF α、IL 1β、IL 6水平显著下降（P＜001）,胰腺病理情况好转,凋亡细胞减少,Bax/Bcl 2、p p38MAPK/ p38MAPK比值和cleaved caspase3表达量显著降低（P＜001）。结论 熊果酸能降低血清炎性因子和淀粉酶水平,改善胰腺病理损伤和凋亡,其作用机制可能与抑制p38MAPK活性有关。     

在肠缺血再灌注下骨形成蛋白 4下调IL 7/IL 7R

【摘要】目的 探讨小鼠小肠在肠缺血再灌注（I/R）条件下骨形成蛋白（BMP 4）通过下调IL 7/IL 7R信号通路促进IELs凋亡的机制。方法 建立小鼠小肠I/R损伤模型,随机分为手术组(I/R组)、假手术组(Sham组),每组各16只,免疫荧光检测IECs中IL 7蛋白和流式细胞术检测IELs中IL 7受体(CD127)及STAT5蛋白磷酸化水平变化;外源性BMP 4蛋白刺激IEC 6培养6小时后,Western blot检测IEC 6中IL 7蛋白表达变化;分离培养正常小鼠IELs,分别加入外源性BMP 4蛋白及BMP4拮抗剂NOGGIN蛋白刺激,流式细胞术观察BMP4对IELs中IL 7受体(CD127)及STAT5蛋白磷酸化变化; 分离培养正常小鼠IELs,分别加入外源性BMP 4蛋白及IL 7蛋白刺激,观察IELs凋亡率的变化。结果 在I/R刺激下,IECs中IL 7蛋白表达I/R组较Sham组明显减少（P＜005）;IELs中IL 7受体(CD127)及STAT5蛋白磷酸化水平均较Sham组表达减少(P＜005）;体外培养实验发现：IECs中IL 7蛋白表达在BMP 4刺激下明显减少,IELs单独培养给予BMP4蛋白刺激后CD127及P STAT5较Sham组减少(P＜005）;给予BMP特异性拮抗剂RNOGGIN可逆转BMP对IL 7/IL 7R信号通路的抑制作用;BMP 4促进IELs的凋亡率增加(P＜005）,给予外源性IL 7蛋白刺激后,有效的抑制IELs的凋亡率增加(P＜005）,BMP 4抑制IL 7对IELs的增殖作用,促进IELs的凋亡。结论 小肠在I/R条件下,肠上皮细胞中BMP 4蛋白抑制IL 7/IL 7R信号通路,使IELs的保护性细胞因子减少,从而促进IELs的凋亡率增加,进一步加重肠免疫屏障损伤。
     

大鼠心肌梗死后与FSTL1和miRNA 200的表达及其机制

【摘要】 目的 探讨SD大鼠急性心肌梗死（AMI）与血清卵泡抑素样蛋白1（FSTL1）及其相关miR 200b 3p的表达情况。方法 20只SD大鼠分为AMI组和Sham组,AMI组结扎大鼠左冠状动脉前降支,而Sham组不结扎,术后1d收集两组大鼠静脉血和心脏组织,采用ELISA法检测大鼠血浆cTnI和FSTL1的表达,用qRT PCR法检测大鼠血浆、组织rno miR 200b 3p和组织FSTL1的表达,采用Western blot法检测组织FSTL1的表达。结果 AMI组大鼠心肌梗死后1d血浆FSTL1的表达较Sham组明显升高（P＜005）,其ROC曲线AUC为1000（P＜005）;而AMI组大鼠心肌梗死后1d心脏组织中FSTL1的表达无论在基因水平还是蛋白水平都较Sham组明显降低（P＜005）;AMI组大鼠术后1d血浆中rno miR 200b 3p的表达较Sham组明显降低（P＜005）,而AMI组大鼠术后1d心脏组织中rno miR 200b 3p较Sham组明显升高（P＜005）。结论 FSTL1和rno miR 200b 3p都可能与大鼠AMI有关,FSTL1可以作为AMI的心肌标志物,rno miR 200b 3p可能通过调控FSTL1的表达而参与AMI发病机制的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡等过程。     

六合丹对家兔皮肤感染创面愈合过程中SPMMP1及bFGF表达的影响

【摘要】〓目的〓探讨六合丹对家兔创伤感染创面愈合过程中P物质（SP）、金属基质蛋白酶 1（MMP 1）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响,揭示六合丹促进伤口愈合的机制。方法〓麻醉满意后对40只兔子造模,每只兔子背部做5个直径2cm的圆形感染性创面,分为空白组、模型组、治疗组（六合丹）、西药组（藻酸钙敷料）、中药组（紫草油）,术后第1d起开始每天换药。结果〓换药后第7、14和21d治疗组、西药组和空白组创面愈合率明显优于模型组和中药组(均P<005)。治疗组的愈合时间优于模型组、中药组（均P＜005）;治疗组的P物质（SP）在换药后3、7、14和21d有较强的表达,与模型组和中药组比较,差异均有显著性（P<005）。治疗组和西药组的MMP 1在换药后7、14和21d均有较强的表达,与模型组和中药组比较,差异均有显著性（P<005）。治疗组的bFGF在换药后3、7和14d表达均强于中药组和模型组(P<005)。结论〓六合丹能显著促进家兔感染性创面中SP、MMP 1、bFGF的分泌,刺激和诱导家兔感染性创面更快修复。