视网膜母细胞瘤内多种凋亡相关蛋白的检测

目的 探讨survivin在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达及其与RB临床分期、组织分化程度及p53、bcl-2蛋白表达的关系。 方法 应用抗surv ivin、p53和bcl-2单克隆抗体，采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组织化学法对38例RB常规石蜡标本行survivin、p53和bcl-2蛋白表达的测定，对6例正常视网膜组织行survivin表达的测定。 结果 38例RB组织中20例survivin蛋白呈阳性表达，占52.6％，6例正常视网膜组织内均无survivin蛋白表达，两组比较差异有显著性的意义(P＜0.05)。survivin的阳性表达与患者的性别、临床分期、组织学分型无关(P＞0. 05)。38例RB组织中，25例p53阳性表达，18例bcl-2阳性表达，阳性表达率分别为65.8％和 47.4％。p53、 bcl-2阳性表达组中survivin阳性表达率均显著高于p53、 bcl-2阴性表达组(P均<0.05)。 结论 survivin在RB中表达上调，提示该基因可能在RB的发生发展中起一定作用；survivin、p53和bcl-2可能通过相互作用共同参与RB的发生发展。 （中华眼底病杂志，2004，20：215-217）     

视网膜母细胞瘤组织芯片中PTEN、mdm2、p53表达及与组织病理特征关系的研究

目的 探讨视网膜母细胞瘤组织芯片中PTEN,murine double minute 2(mdm2)及p53蛋白的表达及与肿瘤临床组织病理特征的关系.设计实验性研究.研究对象 64例视网膜母细胞瘤和6例正常视网膜组织.方法 免疫组化方法检测视网膜母细胞瘤组织芯片和正常视网膜组织石蜡标本中PTEN,mdm2及p53的表达情况,将肿瘤分为球后视神经受侵袭组和球后视神经未受侵组,检测两组间mdm2及p53表达差异,并结合肿瘤的组织病理学特征进行综合分析.主要指标视网膜母细胞瘤组织芯片中PTEN,mdm2和p53表达率.结果 视网膜母细胞瘤中PTEN,mdm2与p53的阳性表达率分别为53.13%,48.43%和53.13%.球后视神经受侵袭组较球后视神经未受侵组mdm2(P=0.027)及p53(P=0.017)表达均明显增高.视网膜母细胞瘤中PTEN与p53表达呈负相关(r=-0.384,P=0.045),mdm2与p53蛋白表达呈正相关(r=0.281,P=0.018).结论 视网膜母细胞瘤中mdm2和p53的过度表达与视神经侵袭程度存在一定相关性.mdm2及p53蛋白的检测可能成为视网膜母细胞瘤恶性程度的参考指标.     

p21^WAF1/CIP1在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的探讨p21^WAF1/CIP1在视网膜母细胞瘤（RB）中的表达及其与肿瘤的病理分期、组织分型、浸润深度的关系。方法利用免疫组织化学法检测p21^WAF1/CIP1在46例RB组织和15例正常视网膜组织中的表达。结果p21^WAF1/CIP1主要表达于细胞核及细胞浆内,在RB中的阳性表达率为47.83%,与正常视网膜组织相比差异有统计学意义（P=0.007）,并随肿瘤病理分期的进展而下降,与组织分型和浸润深度有关（P〈0.05）。结论p21^WAF1/CIP1在RB的发生发展过程中起重要作用,表达的下降与肿瘤恶化及预后不良相关。     

基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤中的表达

　　目的　观察基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9和血管内皮生长因子(VEGF)在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达及其与RB分化程度和视神经浸润的关系。方法　经病理检查确诊的40例RB眼球石蜡标本纳入研究。按照RB细胞中有无菊形团排列以及RB肿瘤细胞是否浸润视神经分为分化型、未分化型以及视神经浸润、视神经无浸润组。其中,分化型15例,未分化型25例;视神经浸润13例,视神经无浸润27例。采用免疫组织化学方法检测其MMP-2、MMP-9和VEGF的表达,对比分析MMP-2、MMP-9和VEGF表达与肿瘤病理组织分型和视神经是否侵润之间的关系。结果　40例RB中,MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达率分别为52.5%、57.5% 和72.5% 。未分化型RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达均高于分化型RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达,差异有统计学意义(χ²=9.037,9.253,8.095;P＜0.05);有视神经浸润的RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性水平均高于无视神经浸润RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性水平,差异有统计学意义(χ²=11.045,10.243,8.956;P＜0.05)。RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的表达呈正相关关系(r=0.126,0.314;P＜0.05)。结论　RB细胞内有MMP-2、MMP-9和VEGF的表达。MMP-2、MMP-9表达与VEGF表达存在相关性。MMP-2、MMP-9和VEGF的表达水平与视神经浸润存在密切的关系。       

视网膜母细胞瘤中血管内皮生长因子的免疫组织化学研究

目的 研究视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达与RB组织学分裂和浸润能力的关系。 方法 应用链霉亲和素蛋白 生物素酶标免疫组织化学方法(labell streptavidin biotin method,LSAB法)，对40例RB组织中VEGF的表达进行分析。 结果 分化型RB(13例)组织VEGF表达低于未分化型(27例)(P＜0.05); 视神经浸润组(14例)VEGF表达明显高于视神经未浸润组(26例)(P＜0.05)。 结论 VEGF表达与RB组织学分型及浸润能力相关。 (中华眼底病杂志, 1999, 15: 238-240)     

精子蛋白32/OY-TES-1在视网膜母细胞瘤中的表达

　　目的　观察精子蛋白（SP）32/OY-TES-1在视网膜母细胞瘤(RB)组织中的表达。方法　病理科收检并经病理学检查确诊的30例RB患儿的石蜡标本纳入研究。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测15例RB组织、12例非肿瘤病变视网膜组织及22例眼部正常组织中SP32/OY-TES-1 mRNA的表达;免疫组织化学技术对30例RB组织和24例正常视网膜组织中SP32/OY-TES-1蛋白的表达进行检测,对比分析SP32/OY-TES-1 mRNA和蛋白表达与RB患儿年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分化程度和临床分期的相互关系。结果　RB组织、非肿瘤病变视网膜组织、眼部正常组织SP32/OY-TES-1 mRNA的表达率分别为86.7%、16.7%和36.4%。不同性别（χ²=0.744）、年龄≤2岁和＞2岁（χ²=1.178）、临床分期（χ²=1.188）、肿瘤大小（χ²=0.216）、肿瘤分型（χ²=1.885）之间SP32/OY-TES-1基因阳性表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。SP32/OY-TES-1蛋白在RB中的表达率为73.3%,在正常视网膜组织中则不表达。不同性别（χ²=1.000）、年龄≤2岁和＞2岁（χχ²=0.403）、不同肿瘤大小（χ²=2.274）、不同肿瘤分型（χ²=0.138）之间SP32/OY-TES-1蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;不同临床分期（χ²=6.193）、视神经是否浸润（χ²=4.535）之间SP32/OY-TES-1蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　SP32/OY-TES-1高表达于RB组织中;SP32/OY-TES-1蛋白在RB组织中的表达率与视神经浸润和临床分期存在密切的关系。      

视网膜母细胞瘤中EphB4和EphrinB2的表达及意义

目的 探讨EphB4和EphrinB2的蛋白在视网膜母细胞瘤中的表达及其意义.方法 应用免疫组织化学SP法测定10例正常视网膜组织和40例视网膜母细胞瘤标本中EphB4和EphrinB2的表达水平,分析其与性别、临床分期、分化程度和视神经浸润的关系.结果(1)EphB4和EphrinB2蛋白表达的阳性率,在正常视网膜组织中分别为5％和2.5％,40例视网膜母细胞瘤标本中分别为77.5％和67.5％.EphB4和EphrinB2在视网膜母细胞瘤组织中的阳性率与显著高于正常视网膜组织中的阳性率(P＜0.05).(2)EphB4和EphrinB2的蛋白在视网膜母细胞瘤的阳性表达率与肿瘤组织的临床分期、分化程度及视神经浸润显著相关(P＜0.05).(3)EphB4和EphrinB2的蛋白在视网膜母细胞瘤组织中的阳性表达显著相关(P＜0.05).结论 EphB4和EphrinB2可能在视网膜母细胞瘤的发生和发展过程中起重要作用,可作为评价视网膜母细胞瘤的浸润及预后的标志物.     

转化生长因子-β在视网膜母细胞瘤中的表达

转化生长因子-β(TGF-β)作为细胞生长的负调控因子,参与了许多肿瘤的发生、进展和转移[1].由于国内外对TGF-β在视网膜母细胞瘤(RB)发病机制上所起作用的研究较少.因此,我们用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)检测了TGF-β在RB中的表达,探讨其与RB病理分期、组织分型、视神经浸润深度的关系.现将结果报道如下.     

凋亡相关基因在眼眶腺样囊性癌组织中的表达意义

目的:分析凋亡相关基因p53和bcl-2在眼眶腺样囊性癌组织中的表达,分析其关系及临床意义。方法:免疫组化法检测51例眼眶腺样囊性癌临床标本和10例正常眼眶组织中P53和Bcl-2蛋白的表达状况。结果:P53和Bcl-2在眼眶腺样囊性癌组织中的表达阳性率分别为53%和65%,显著高于眼眶正常组织(53%,65%vs10%,P<0.01)。实性型腺样囊性癌中P53的表达率显著高于其在腺样-管状型中的表达率(86%vs30%,P<0.01);P53和Bcl-2在复发组中的表达率显著高于其在初发组中的表达率(85%vs42%,P<0.01),(100%vs53%,P<0.01);P53和Bcl-2二者在表达上具有相关性(χ2=1.461,P>0.05)。结论:P53和Bcl-2蛋白的检测对于判断肿瘤对化疗的敏感性和预后有参考价值。     

基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和血管内皮生长因子(Vascular endothehal growth factor,VEGF)在视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma,RB)中的表达及其与RB分化程度和视神经浸润的关系,探讨它们在RB浸润、转移过程中的作用和临床意义.方法:采用免疫组化方法检测40例RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的表达.结果:40例RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达率分别为52.5%、57.5%和72.5%.未分化型RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达均高于分化型(P＜0.05);有视神经浸润的RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性水平均高于无视神经浸润的RB(P＜0.05).RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的表达呈正相关关系(P＜0.05).结论:RB中MMP-2、MMP-9和VEGF高表达与RB的浸润和转移相关,且MMP-2、MMP-9表达与VEGF表达存在相关性.联合检测MMP-2、MMP-9和VEGF的表达可作为反映RB浸润、转移潜能的生物学指标,有助于筛选转移高危病例及评价患者预后.     

视网膜母细胞瘤和正常视网膜组织中基质调控蛋白表达及其意义(英文)

目的:研究视网膜母细胞瘤(RB)和正常视网膜组织中EMMPRIN、MMP1、MMP9和TIMP2表达水平及其临床病理意义和相互联系。方法:收集30例RB眼球摘除手术标本和15例正常视网膜组织标本。常规制作石蜡包埋切片,EMMPRIN、MMP1、MMP9和TIMP2染色方法均为Envision免疫组织化学法。结果:RB组织中EMMPRIN、MMP1、MMP9表达阳性率均高于正常视网膜组织(P<0.01),TIMP2则低于正常视网膜组织(P<0.01)。临床分期I期、分化型、未侵犯视神经及生存期≥2aRB病例EMMPRIN、MMP1、MMP9表达阳性率低于临床分期III期、未分化型、侵犯视神经和生存<2a病例(P<0.05或P<0.01);分化型、未侵犯视神经及生存期≥2aRB病例TIMP2表达阳性率明显高于未分化型、侵犯视神经和生存<2a病例(P<0.05或P<0.01);RB中,EMMPRIN、MMP1、MMP9表达呈高度一致性(P<0.05),TIMP2与EMMPRIN、MMP1、MMP9表达水平呈高度不一致性(P<0.05)。结论:EMMPRIN、MMP1、MMP9和TIMP2的表达水平可能是反映RB进展、侵袭能力及预后的重要标记物,它们之间存在着内在的相互调控关系。     

视网膜母细胞瘤p53、c-myc及增殖细胞核抗原表达的研究

目的 探讨Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ及增殖细胞核抗原在视网膜母细胞瘤中的表达及其与Ｒｂ分化和蔼和视神经浸润的关系。方法 应用抗人Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ的单克隆抗体,采用锭霉卵白素－生物素免疫组化法,对３１例Ｒｂ常规石蜡标本行ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ表达的测定。结果 ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ在Ｒｂ中的表达阳性率分别为５１．６％、４５４．２％及６７．７％,且均与Ｒｂ的分化程度有关。ＰＣＮＡ的表达     

视网膜母细胞瘤组织中热休克蛋白与Survivin表达关系及其对肿瘤细胞增生活性的影响

目的 探讨视网膜母细胞瘤（RB）组织中热休克蛋白（HSP）70、90的表达及其与凋亡调控因子Survivin表达关系,以及两者共同表达对RB细胞增生活性的影响。方法 采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学法检测43例RB及6例正常视网膜石蜡组织切片HSP70、HSP90、Survivin和Ki-67蛋白表达水平,以Ki-67蛋白标记指数作为肿瘤细胞增生活性标志,结合病理学特征分析HSPs-Survivin协同表达与肿瘤细胞增生活性关系。结果 43例RB组织中HSP70阳性表达28例,占65.12%,HSP90阳性表达37例,占86.05%,Survivin阳性表达27例,占62.79%;6例正常视网膜组织中均无HSP70、HSP90及Survivin表达;HSP90阳性表达组中Survivin阳性表达率明显高于阴性表达组（P＜0.05）;HSP90阳性表达组及Survivin阳性表达组Ki-67蛋白标记指数均较表达阴性组明显增高（P＜0.05）,HSP90-Survivin共同阳性表达组Ki-67蛋白标记指数较HSP90-Survivin共同表达阴性或表达不一致组明显增高（P＜0.05）。但HSP70表达与Survivin相关性无统计学意义（P＞0.05）,且对Ki-67蛋白标记指数无明显影响（P＞0.05）;HSPs、Survivin表达及Ki-67蛋白标记指数与RB组织学分型无关（P均＞0.05）。结论 RB组织中HSP90与Survivin表达存在明显相关性,HSP90-Survivin共同阳性表达可能在RB细胞增生机制中具有重要意义。     

视网膜母细胞瘤增殖细胞核抗原的免疫组织化学研究

目的：研究视网膜母细胞瘤(retinoblastoma，RB)细胞的增殖活性与RB组织学分型和浸润能力的关系。 方法：应用链霉亲和物素蛋白-生物素酶标免疫组织化学方法(LSAB法)对48例RB组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)的表达进行分析。 结果：12例分化型RB组织平均PCNA标记指数(labelling index，L1)明显低于36例未分化型(P<0.05)；22例视神经浸润组RB组织平均PCNA LI明显高于26例视神经未浸润(P<0.05)。表明PCNA LI与RB组织学分型及浸润能力相关。 结论：测定PCNALI对于判断RB的组织学特性和生物学行为具有一定意义。 （中华眼底病杂志，1997，13：10-11）     

P53蛋白及P21蛋白在视网膜母细胞瘤表达的研究

目的：探讨P53和P21在视网膜母细胞瘤发生中的作用,及其与预后的关系。方法：应用抗人P53,P21抗体,采用链霉素亲生物素蛋白一过氧化霉（SP）免疫组化方法。对30例RB常规石蜡标本进行P53和P21蛋白的测定,结果：P53和P21在RB中的阳性表达率分别为60％和80％,P53的表达与临床分期有关（P＜0．05）,P53和P21的表达均与生存时间有关,P53阳性组生存时间低于P53阴性组（P＜0．05）,P21阳性组生存时间高于P21阴性组（P＜0．01）,P53阳性组的2年生存率低于P53阴性组,而P21阳性组的2年生存率高于P21的阴性组,结论：在RB的发生中P53和P21起着重要的作用,P53和P21的表达可以作为临床预后的一个参考指标。     

Expression of matrix metalloproteinase-2,matrix metalloproteinase-9 and vascular endothdial growth factor in retinoblastoma and its clinical significance

PURPOSE: To study the expression of matrix metalloproteinase-2(MMP-2), matrix metalloproteinase-9(MMP-9) and vascular endothelial growth factor(VEGF) in retinoblastoma (RB) and its relationship with the differentiation and optic nerve infiltration of RB. METHODS: Immunohistochemical technique was used to detect the protein expression of MMP-2, MMP-9 and VEGF in 40 RB cases. RESULTS: The MMP-2, MMP-9 protein and VEGF protein expression were detected as positive in 52.5%, 57.5% and 72.5% of 40 RB cases respectively. The expression of MMP-2, MMP-9 and VEGF was significantly higher in the undifferentiated pattern than in the rosetted pattern(p<0.05); and the expression of MMP-2, MMP-9 and VEGF was significantly higher in tumors with optic nerve invasion than in those without optic nerve invasion(p<0.05). In RB, the expression of MMP-2, MMP-9 had a positive correlation with the expression of VEGF. CONCLUSIONS: In RB, high expression of MMP-2, MMP-9 and VEGF is related to the invasion and metastasis of RB. The expression of MMP-2, MMP-9 is positively correlated with the expression of VEGF. The expression of MMP-2, MMP-9 and VEGF may act as a biological marker for the invasion and metastasis of RB. The method may help screen and identify the cases with high risk for metastasis and to predict the prognosis of patients.     

HIF-1α、HPSE、VEGF共同促进视网膜母细胞瘤的恶性进程

目的 探讨视网膜母细胞瘤(RB)中乙酰肝素酶(HPSE)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其与血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)的关系.方法 应用免疫组织化学法检测34例RB石蜡标本及10例正常视网膜组织中HIF-1α、VEGF蛋白表达,用CD34抗体进行肿瘤血管内皮染色,计数肿瘤微血管密度(MVD);应用RT-PCR检测18例RB组织中 HPSE mRNA、HIF-1α mRNA、VEGF mRNA的表达,分析RB组织中HPSE、HIF-1α、VEGF表达情况及其与肿瘤微血管形成、临床及病理特征的关系.计量资料采用成组设计定量资料t检验、方差分析和q检验;计数资料采用χ~2检验、Fisher检验及秩和检验;相关性采用Spearman等级相关分析及kappa检验.结果 34例RB石蜡标本中HIF-1α、VEGF阳性表达率为58.8%、64.7%,明显高于正常对照组(χ~2=10.784,P<0.05;χ~2=9.269,P<0.05).18例RB中HPSE、HIF-1α、VEGF mRNA阳性率为55.6%、44.4%、72.2%,与正常组比较有统计学意义(χ~2=8.642,P<0.05;χ~2=6.222,P<0.05;χ~2=9.956,P<0.05).HIF-1α、VEGF与MVD的表达呈正相关(r=0.664,P<0.05;r=0.590,P<0.05);RB中HIF-1α mRNA、HPSE mRNA表达与VEGF mRNA表达呈相关性(Z=2.350,P=0.009;Z=2.940,P=0.002).结论 HIF-1α、HPSE可共同作用于VEGF这种促血管生成重要因子,在肿瘤血管形成中起一定作用.