miR-331-3p在恶性肿瘤中的研究进展

miRNA是一种存在于真核生物细胞中的一类内源性非编码的RNA小分子,miR-331-3p作为miRNA家族中的一员,在细胞生理过程中发挥重要作用。近年来,miR-331-3p在恶性肿瘤中的作用日益受到关注。已有研究显示,miR-331-3p在宫颈癌、肝癌、胶质母细胞瘤及前列腺癌等恶性肿瘤的发生发展及复发转移过程中均发挥着重要作用。这些研究结果对恶性肿瘤的诊断及预后起到帮助作用。     

miR-10a-5p基因甲基化对卵巢癌铂类耐药的影响

目的 卵巢癌是死亡率最高的妇科肿瘤,较强的化疗耐药性是其预后差的主要原因之一,为了阐明卵巢癌对铂类药物的耐药机制,本研究探讨miRNA基因的甲基化水平对卵巢癌铂类耐药的影响.方法 将卵巢癌组织分为敏感组和耐药组,每组各3例;采用基因芯片技术,对比分析了两组微RNA(microRNA,miRNA)的表达差异;采用实时荧光定量PCR,分别在6例敏感和3例耐药组织、铂类药物敏感(CoC1)和耐药的卵巢癌细胞系(CoC1/DDP),检测了候选miRNA的表达差异;应用Massarray技术,检测敏感组织(15例)与耐药组织(6例)中miRNA基因启动子的甲基化差异;应用生物信息学分析,鉴定目标miRNA的潜在靶基因.结果 以铂类药物敏感的卵巢癌组织样本为对照,利用基因芯片筛选,鉴定了6条在耐药组织样本中出现表达上调的miRNA(miR-493-3p、miR-10a-5 p、miR-16-2-3p、miR-1248、miR-451a、miR-628-3p)和6条表达下调的miRNA(miR-509-3p、miR-1197、miR-376a-3p、miR-1273a、miR-550a-3p、miR-19b-3p).组织验证发现,miR-509-3p、miR-493-3p、miR-10a-5p、miR-16-2-3p和miR-451a,与芯片结果一致;培养细胞研究发现,4条miRNA的表达调控方式与组织芯片结果一致,miR-10a-5p、miR-16-2-3p、miR-1248和miR-628-3p在耐药细胞系中高表达.进一步研究发现,与敏感肿瘤组织相比,耐药组织中miR-10a-5p基因启动子的甲基化水平出现显著降低,P=0.04.结合生物信息学预测HOXA1和USF2为miR-10a-5p与耐药相关的靶基因.结论 与敏感组相比,耐药组miR-10a-5p基因启动子甲基化水平显著降低,miR-10a-5p表达升高,通过抑制 HOXA1和USF2,抑制细胞凋亡,导致铂类化疗药物耐受.     

沉默LncRNA HOXD-AS1调控miR-454-3p表达增加H460细胞放射敏感性

目的 探究LncRNA HOXD-AS1靶向调控miR-454-3p表达对肺癌H460细胞放射敏感性影响。方法 qRT-PCR检测HOXD-AS1、miR-454-3p表达量,流式细胞术检测细胞凋亡率,克隆实验检测细胞放射敏感性。蛋白印迹法检测细胞中Caspase-3、Cyclin D1、γ-H2AX的蛋白表达量。结果 照后细胞中HOXD-AS1表达升高(P<0.05),miR-454-3p表达降低(P<0.05)。沉默HOXD-AS1促进细胞凋亡、增加放射敏感性,促进Caspase-3、γ-H2AX蛋白表达,抑制Cyclin D1表达;HOXD-AS1可靶向结合miR-454-3p并可负向调控其表达。结论 沉默HOXD-AS1可靶向调控miR-454-3p促进肺癌细胞凋亡及抑制细胞存活进而提高放射敏感性。     

miRNA在有无淋巴结转移结肠癌中的表达

[目的]分析miRNA在有无淋巴结转移的结肠癌中的差异表达,筛选出与结肠癌淋巴结转移有关miRNA。[方法]选取6例结肠癌患者的冰冻组织标本,其中3例有淋巴结转移,3例无淋巴结转移。提取肿瘤组织标本的miRNAs,采用微阵列法分析有无淋巴结转移结肠癌的miRNAs表达谱。为验证微阵列表达谱的结果,选择miR-142-3p做qRT-PCR。[结果]有淋巴结转移结肠癌与无淋巴结转移的结肠癌相比,上调表达的miRNA有4个,为miR-21＊,miR-212,miR-33b＊和miR-886-3p;下调表达的miRNA有3个,为miR-142-3p,miR-142-5p和miR-362-5p。qRT-PCR结果显示miR-142-3p在有淋巴结转移的结肠癌组织中表达明显下降,与miRNAs微阵列检测结果一致。[结论]有无淋巴结转移的结肠癌具有不同的miRNAs表达谱。     

miR-32-5p通过靶向Dickkopf相关蛋白3的表达调控乳腺癌MDA-MB-231 细胞的生物学行为

目的：通过生物信息学手段筛选乳腺癌中差异表达的关键miRNA及其靶基因,干预其在乳腺癌细胞中的表达并观察对乳腺癌细胞功能的影响。方法：利用GEO数据库筛选在乳腺癌中差异表达的miRNA,ENCORI数据库验证差异miRNA的表达,以选定最显著的差异表达 miRNA 为研究对象;利用 Starbase、miRDB 和 miRWalk 数据库预测 miR-32-5p 的靶基因,利用DAVID数据库对靶基因进行GO分析和KEGG分析,利用String数据库联合Cytoscape3.6.2软件进行PPI网络分析及核心基因的筛选,从核心基因中选择相互联系紧密“度值”最显著的Dickkopf相关蛋白3（DDK3）基因进行后续实验。qPCR检测miR-32-5p在人正常乳腺细胞 MCF10A和人乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231、MDA-MB-453细胞中的表达。向MDA-MB-231细胞中转染miR-32-5p mimic、miR-32-5p inhibitor及各自的对照（NC）序列,分别用CCK-8法、流式细胞术和Transwell实验检测过表达或抑制miR-32-5p对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。结果：从GEO数据库中获取的两个数据集共识别出两个差异miRNA,ENCORI数据库验证差异miRNA的表达发现miR-32-5p的表达水平与GEO数据库的结果一致,故选择其进行研究;预测得到198个miR-32-5p 潜在的靶基因并鉴定出 10 个核心基因（DKK3、WNT2B、SFRP5、SFRP2、SFRP1、LRP6、WNT6、KREMEN1、NEDD4L、TRIP12）,其中DKK3的度值最大可能在乳腺癌中较为重要,于是选择miR-32-5p/DKK3轴进行后续研究。miR-32-5p在3种乳腺癌细胞中的表达水平显著高于正常乳腺细胞（均P<0.01）,其中以MDA-MB-231细胞中表达最高。双荧光素酶基因报告实验验证了miR-32-5p与DKK3基因的靶向结合及其对后者表达的负向调控。转染miR-32-5p mimic、miR-32-5p inhibitor后成功提高或抑制了MDA-MB-231细胞中miR-32-5p的表达。与对照组相比,过表达miR-32-5p可抑制MDA-MB-231细胞的凋亡而促进细胞增殖和侵袭（P<0.05或P<0.01）,敲低miR-32-5p则起相反的作用（均P<0.01）。结论：miR-32-5p/DKK3轴可能是影响乳腺癌发生发展的关键通路,过表达miR-32-5p能够抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的凋亡而促进细胞增殖和侵袭。     

miR-192-5p在恶性肿瘤中作用机制的研究进展

恶性肿瘤是威胁人类健康的常见疾病,其治疗也是加重社会经济负担的主要因素之一。恶性肿瘤患者的死亡率高,预后极差。因此,如何提高恶性肿瘤患者的生存率、改善预后至关重要。miRNA是一类小的非编码RNA,通过参与基因表达的转录后调控,在肿瘤细胞的增殖、分化、迁移和凋亡等过程中发挥重要作用。近年来,人们逐渐开始研究miR-192-5p在恶性肿瘤中的表达及作用,本文将对miR-192-5p在不同恶性肿瘤中作用机制的研究进展进行综述。     

卵巢上皮恶性肿瘤侵袭转移相关miRNA的筛选与鉴定

目的 探索与卵巢上皮恶性肿瘤侵袭转移可能相关的miRNA.方法 采用miRNA芯片,筛选SKOV-3ip和SKOV-3细胞差异表达miRNA.利用生物信息学软件TargetScan、MicroCosm、PicTar和GO,预测差异表达miRNA的靶基因及其功能.采用实时逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)技术,验证与卵巢癌侵袭转移可能相关的5种miRNA(let-7a、let-7e、let-7f、miR-22和miR-886-5p)在SKOV-3ip和SKOV-3细胞的表达.同时,检测这5种miRNA在另外一组侵袭转移能力不同的卵巢癌细胞株HO8910和HO-8910PM中的表达,并进行统计学分析.结果 基因芯片筛选显示,42种miRNA在SKOV-3ip和SKOV-3细胞株表达差异明显.进一步分析显示,let-7a、let-7e、let-7f、miR-22和miR-886-5p等5种miRNA可能与卵巢癌的侵袭转移密切相关.real-time RT-PCR结果证实,let-7f和miR-22在两组侵袭转移能力不同的卵巢癌细胞(SKOV-3和SKOV-3ip细胞、HO-8910和HO-8910PM细胞)表达差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 let-7f和miR-22在侵袭转移能力强的卵巢癌细胞中低表达,可能具有抑癌基因的作用.     

血浆miRNA在肺癌早期筛查中作用的病例对照研究

目的:探讨miR-122-5p等miRNA在早期肺癌患者血浆中的表达水平及其与肺癌发病风险的关联性。方法:运用高通量测序技术筛选在早期肺癌患者和对照者血浆中差异表达的miRNA,通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测miRNA的表达。采用性别、年龄±5岁进行1∶2匹配的病例对照研究,使用条件Logistic回归分析miRNA与肺癌发病风险的关联。结果:早期肺癌组血浆miR-122-5p、miR-199a-5p、miR-221-3p、miR-27b-3p和miR-99a-5p的表达水平均显著高于对照组（P＜0.01）;用于检测早期肺癌时,miR-199a-5p的灵敏度可达95.8%,miR-99a-5p的特异度可达81.2%;血浆miR-122-5p、miR-199a-5p、miR-221-3p、miR-27b-3p和miR-99a-5p的表达与肺癌发病风险升高存在显著关联,第四分位数组的肺癌发病风险较高,分别是第一分位数组的9.613倍（95%CI:1.488~62.118,Ptrend=0.011）、23.863倍（95%CI:2.208~257.938,Ptrend=0.007）、27.416倍（95%CI:2.575~291.919,Ptrend=0.003）、23.626倍（95%CI:2.044~273.070,Ptrend=0.005）和72.504倍（95%CI:3.519~1 493.742,Ptrend=0.004）。结论:miR-122-5p、miR-199a-5p、miR-221-3p、miR-27b-3p和miR-99a-5p是肺癌发病的危险因素。     

miR-509-3p在肝癌组织中的表达及对肝癌细胞迁移侵袭的影响

背景与目的：肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是世界范围内致死率第三高的恶性肿瘤，microRNA（miRNA）被认为在HCC的发病机制中起重要作用。本研究旨在探讨在原发性肝癌中miR-509-3p的表达水平、细胞功能及调控的相关基因。方法：通过实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）技术检测miR-509-3p在46例肝癌患者组织样本、人肝癌细胞系及永生化人正常肝细胞系中的表达水平，采用transwell实验检测miR-509-3p对肝癌细胞转移的影响。采用蛋白质印迹法（Western blot）检测miR-509-3p与上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）相关基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）之间的关系。结果：RTFQ-PCR技术检测结果显示，miR-509-3p在46例肝癌患者的肝癌组织样本以及MHCC97H、HCCLM3和SMMC-7721肝癌细胞系中异常高表达。体外功能实验证实抑制miR-509-3p表达能降低MHCC97H和HCCLM3肝癌细胞的迁移能力。Western blot检测结果显示，在MHCC97H和HCCLM3肝癌细胞中抑制miR-509-3p的表达可以降低MMP-9和MMP-2蛋白的表达。结论：本研究表明miR-509-3p通过正向调控MMP-9和MMP-2蛋白的表达而促进肝癌细胞的迁移和侵袭。     

miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达及对细胞功能的影响

目的:研究miR-367-3p在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）中促进肿瘤生长的作用机制。方法:收集非小细胞肺癌患者的临床标本，检测miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达。利用qRT-PCR、MTT和流式细胞术分别评估miR-367-3p的表达改变对肿瘤细胞增殖和周期的影响。Western blot检测miR-367-3p表达改变对FBXW7的影响。双荧光素酶实验验证miR-367-3p与FBXW7之间的直接关系。结果:miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于对应癌旁组织。miR-367-3p作为促癌的miRNA，在非小细胞肺癌细胞中促进肿瘤细胞增殖和细胞周期进程。miR-367-3p对NSCLC细胞生物学功能的影响部分依赖靶向抑制FBXW7。结论:miR-367-3p通过靶向抑制FBXW7的表达促进NSCLC细胞增殖和周期。     

信号通路相关的microRNA在骨肉瘤中的研究进展

骨肉瘤是原发于骨组织的较常见的恶性肿瘤,好发于儿童和青少年。近年来,microRNA在骨肿瘤发生发展过程中的作用已成为人们研究的热点。大量研究表明,microRNA可以通过MAPK/ERK、PI3K/AKT、Wnt/β-catenin等信号通路影响目的基因表达,从而调控肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭等生物学功能,与骨肉瘤的发生发展、临床治疗及患者预后密切相关。     

Nucleoside analog inhibits microRNA‐214 through targeting heat‐shock factor 1 in human epithelial ovarian cancer

The important functions of heat shock factor 1 (HSF1) in certain malignant cancers have granted it to be an appealing target for developing novel strategy for cancer therapy. Here, we report that higher HSF1 expression is associated with more aggressive malignization in epithelial ovarian tumors, indicating that targeting HSF1 is also a promising strategy against ovarian cancer. We found that a nucleoside analog (Ly101‐4B) elicits efficient inhibition on HSF1 expression and potent anticancer activity on epithelial ovarian cancer both in vitro and in vivo. Moreover, by targeting HSF1, Ly101‐4B inhibits the biogenesis of microRNA‐214, which has been revealed to be overexpressed and to promote cell survival in human ovarian epithelial tumors. These findings demonstrate that Ly101‐4B is a promising candidate for ovarian cancer therapy, and expand our understanding of HSF1, by revealing that it can regulate microRNA biogenesis in addition to its canonical function of regulating protein‐coding RNAs.     

MicroRNA与乳腺癌干细胞的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,尽管目前治疗手段的多样性,乳腺癌的复发及转移仍不断增加,使临床治疗遇到瓶颈,乳腺癌干细胞理论的提出为其治疗提供新的思路。MicroRNA作为一种非编码RNA,通过与靶基因mRNA结合影响转录及表达。随着对MicroRNA和乳腺癌干细胞的进一步研究,MicroRNA在乳腺癌干细胞中的功能日益突出,本文就MicroRNA与乳腺癌干细胞的研究进展及相互作用进行论述。     

ｍｉｃｒｏＲＮＡ影响抗肿瘤药物敏感性相关研究进展

ｍｉｃｒｏＲＮＡ是一类长度为２ｌ～２５ｎｔ非编码蛋白ＲＮＡ,以干扰ｍＲＮＡ翻译的方式负向调控基因的表达。研究发现,ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ在肿瘤发生、发展过程中可能发挥癌基因或抑癌基因样作用,并表现为不同类型的肿瘤有其特异的ｍｉｃｒｏＲＮＡ表达谱。多种ｍｉｃｒｏＲＮＡ与肿瘤发生、分化程度及预后等密切相关。随着ｍｉｃｒｏＲＮＡ家簇与肿瘤的联系逐渐被揭示,越来越多的证据表明肿瘤细胞对抗肿瘤药物的敏感性也受ｍｉｃｒｏＲＮＡ的影响。现对ｍｉｃｒｏＲＮＡ在影响抗肿瘤药物敏感性方面的一些研究做一综述。     

How to Explain the Contradiction of microRNA 200c Expression and Survival in Solid Tumors?: a Meta-analysis

MicroRNA 200c is a microRNA 200 family member that plays an important role in regulation of the epithelialto-mesenchymal transition (EMT). The prognostic value of microRNA 200c in solid tumors remains controversialbecause of inconsistent data. Here, we report a meta-analysis of the association of microRNA 200c expressionand survival in patients with solid tumors. Pubmed was searched up to November 2013 for studies investigatingmicroRNA 200c expression and overall survival (OS) in solid tumors. Hazard ratios (HRs) with 95% confidenceintervals (CIs) for OS were extracted from each study. Pooled HR and CIs were calculated using the Mantel-Haenszel fixed-effects models. A total of five studies evaluating colorectal cancer, gastric cancer, ovarian cancer,pancreatic cancer and endometrial cancer were included in the analysis. Data were divided into tissue microRNA200c expression group and serum microRNA 200c expression group. The combined HRs [95%CIs] estimatedfor OS were 0.62 [0.42-0.91] and 2.16 [1.32-3.52] respectively. Low expression of microRNA 200c in tumor tissueand high expression of microRNA 200c in serum are associated with worse survival in solid tumors. Furtherstudy is needed to elucidate this contradiction.     

miRNA在恶性黑色素瘤中的差异性表达及临床意义

miRNA即微小RNA，是指一类自身具有典型茎环结构且在进化上高度保守的非编码RNA，其无法编码蛋白质，但却被证实是基因表达调节机制中非常重要的成员之一。在细胞的完整生长周期中发挥重要的调节作用。研究表明miRNA约半数都位于癌基因所在的区域,且不同miRNA的表达水平差异性较大，表明miRNA的表达情况与肿瘤的发生具有一定的相关性，明确miRNA在肿瘤发生、发展中的作用，在肿瘤的早期诊断以及确定与之相对应的miRNA靶向治疗方面均具有重要意义。本文就近年来恶性黑色素瘤相关性miRNA及其靶基因的研究进行综述，旨在阐述几种不同类型miRNA在恶性黑色素瘤发生、发展过程中的差异性表达及临床意义，为恶性黑色素瘤的miRNA靶向治疗提供理论基础。     

miR-409-3p在肿瘤中的研究进展

microRNA是一类内源性非编码小RNA,它通过与靶基因的3′端非翻译区(3′UTR)结合,在转录后上调其靶基因的表达,进而调控多种生物学过程。miR-409-3p属于microRNA家族的一员,随着研究的深入,越来越多的证据表明肿瘤中存在异常表达的miR-409-3p,其与肿瘤的发生发展及预后密切相关,在肿瘤细胞增殖、凋亡、血管生成、迁移、侵袭和耐药等过程中发挥重要作用而受到了广泛的关注,近年来其可能作为新的循环标志物而成为研究的热点。本文就miR-409-3p在肿瘤中的研究进展进行综述。     

lncRNA、microRNA在卵巢癌中的研究进展及相互作用关系

人类基因组中大部分为非编码区,转录产生非编码 RNA(ncRNA) 。这些ncRNA可以在表观遗传水平、转录水平及转录后水平调控基因的表达,进而影响肿瘤的发生和发展,是肿瘤诊断、治疗及预后判断的潜在靶标。微小RNA(microRNA ,miRNA) 和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) 是 ncRNA 的两个重要分类。越来越多的研究表明lncRNA、microRNA 参与生物体的各种生理及病理过程,其中恶性肿瘤的相关研究最多。卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤疾病,早期诊断困难、预后差。MicroRNA和 lncRNA 在卵巢癌的发生发展中的研究进展及相互作用关系近年来引起了人们的关注。本文就这两者在卵巢癌的发生发展过程中的相互作用机制及研究进展作一综述。     

Long noncoding‐RNA component of mitochondrial RNA processing endoribonuclease is involved in the progression of cholangiocarcinoma by regulating microRNA‐217

Cholangiocarcinoma (CCA) is a malignant tumor originating from bile duct epithelium and its incidence is increasing year by year. In recent years, long noncoding RNAs (lncRNAs) have been found to play an important role in the occurrence and progression of malignant tumors. In the present study, for the first time, abnormal expression of lnc‐RNA component of mitochondrial RNA processing endoribonuclease (RMRP) and its possible role in CCA were found. We explored the effects of RMRP on various behaviors of CCA cells in vitro and in vivo. In addition, by second‐generation sequencing, we explored the microRNA expression profiles that RMRP may affect in the HCCC‐9810 cell line. We also validated and explored the role of microRNA‐217 (miR‐217) with high differential expression by in vitro experiments. Our findings indicated that RMRP can play a part in promoting cancer by regulating the expression of miR‐217. RMRP is involved in the progression of CCA and can be a novel indicator of poor prognosis in patients with CCA.