胰腺癌GST-π耐药基因表达及意义

目的 检测胰腺癌组织中GST-π耐药基因的表达及其临床意义。方法 采用S-P免疫组织化学方法对150例异常和正常胰腺石蜡切片组织标本（包括原发性胰腺癌97例,胰腺炎32例和正常胰腺组织21例）进行GST-π耐药基因蛋白表达检测。结果GST-π耐药基因在胰腺癌。胰腺炎和正常胰腺组织中阳性率分别为67％、15.6％和14.3％;胰腺癌组织中GST-π阳性率明显高于其它组织（P<0.05）。胰腺癌高分化组织中GST-π耐药基因表达也明显高于低分化组织（P<0.05）。GST-π耐药基因表达与胰腺癌病人的性别、年龄、肿瘤的部位、大小、侵袭性及临床分期等指标无关（P>0.05）,GST-π耐药基因表达阳性病人平均术后生存时间长于GST-π阴性病人。结论 GST-π可能参与胰腺癌的早期癌变过程,并在维护肿瘤的特性中起到一定的作用,GST-π耐药基因有可能成为胰腺癌的早期肿瘤酶标记物;GST-π耐药基因与胰腺癌的“天然性多药耐药”和肿瘤生物学特性有关,它是指导肿瘤化疗和预后的一个重要指标。     

甲基化CpG结合域蛋白1在胰腺癌组织中的表达和意义

目的：检测甲基化CpG结合域蛋白I（MBD1）蛋白在胰腺癌组织中的表达，并探讨其临床意义。方法：应用S-P免疫组织化学法检测38例胰腺癌、17例胰腺癌旁组织、8例胰腺良性肿瘤、3例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织中MBD1蛋白的表达。结果：MBD1在胰腺癌组织、正常胰腺组织、胰腺良性肿瘤、胰腺癌旁组织中的表达阳性率分别是76．32％（29/38）、16．67％（1／6）、25．0％（2／8）、29．41％（5／17），3例慢性胰腺炎标本中未见表达；胰腺癌阳性表达率明显高于正常胰腺、慢性炎症、良性肿瘤和癌旁对照组织（P〈0．05）。MBD1表达水平的高低与病人的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和TNM分期无显著性差异（P〉0．05）；而与淋巴结转移密切相关，有淋巴结转移者胰腺癌组织MBD1的表达阳性率为92．31％（24／26），高于无淋巴结转移者的41．67％（5／12）（P〈0．01）。结论：胰腺癌中MBD1呈高水平表达，并与胰腺癌的高转移侵袭活性有关，其机制可能与MBD1介导抑制多个甲基化相关抑癌基因的表达有关。MBD1的转录调控机制有待进一步研究。     

nm23基因在人胰腺癌中的表达及其意义

目的：探讨nm23/NDPK癌基因在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化SP法，对40例胰腺癌组织及14例正常胰腺组织进行nm23／NDPK癌基因检测。结果：40例胰腺癌组织中有26例nm23/NDPK表达阳性，占65．0％；14例正常胰腺组织中仅4例nm23/NDPK表达阳性，占28．6％，两者差异有显著性意义（P＜0．05）。低分化腺癌nm23/NDPK表达阳性率为90．9％，明显高于高分化胰腺癌（25．0％），P＜0．05。nm23/NDPK表达阳性率在淋巴结转移阳性者为71．4％（10／14），明显高于淋巴结转移阴性者（31．6％，6／19），P＜0．05。提示胰腺癌nm23/NDPK表达与淋巴结转移及肿瘤侵袭性呈正相关，与癌组织的分化程度呈负相关。结论：nm23／NDPK表达可作为胰腺癌恶性程度及预后不良的生物学指标之一。     

人粘连蛋白基因在胰腺癌中的表达

目的：探讨人粘连蛋白（FN）基因在胰腺癌发生和转移中的作用。方法：应用博道4096型cDNA基因芯片和原位杂交技术检测18例胰腺癌标本、8例慢性胰腺炎组织FN基因表达。结果：FN基因在18例胰腺癌基因芯片检测中表达显著增高（Cy5/Cy3＞2．0，P＜0．01），伴有区域淋巴结转移时增高更加明显；在慢性胰腺炎中的表达与正常组织比较差异无显著性（Cy5/Cy3＜2．0，P＞0．05），与原位杂交结果相同。结论：基因芯片技术能够为胰腺癌的相关基因分析提供特异和可靠的数据；人胰腺组织中FN基因表达升高可能与胰腺癌的发生和转移有关。     

TRAIL受体在胰腺癌中的表达

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）受体在胰腺癌中的表达及意义。方法 应用半定量RT～PCR法检测TRAIL受体（死亡受体DR4、DR5和诱骗受体DcR1、DcR2）mRNA在胰腺癌组织及正常胰腺组织中的表达。结果 死亡受体DR4和DR5在所有胰腺癌组织和正常胰腺组织中均有表达，且在胰腺癌组织中的表达明显强于在正常胰腺组织中的表达（P〈0．01）。诱骗受体DcR1和DcR2在所有正常胰腺组织中均有表达，而在胰腺癌组织中仅有18例表达DcR1，有20例表达DcR2；诱骗受体DcR1和DcR2的表达水平在胰腺癌和正常胰腺组织中差异无统计学意义（P〉0．05）。胰腺癌组织中DR5的表达与肿瘤的分化程度和临床分期有关，分化程度越低，DR5的表达量越低，Ⅲ、Ⅳ期肿瘤DR5的表达显著低于Ⅰ、Ⅱ期（P〈0．05）。DR4、DcR1及DcR2在胰腺癌组织中的表达与肿瘤的分化程度和临床分期无关（P〉0．05）。结论 ①胰腺癌组织中普遍存在TRAIL受体的表达，并存在受体类型的表达差异，TRAIL基因受体在胰腺癌凋亡的调控机理中可能发挥重要作用。②胰腺癌组织中DR5的表达与肿瘤的分化程度及恶性程度相关；死亡受体DR4及诱骗受体DcR1和DcR2不能作为判断胰腺癌分化程度及恶性程度的指标。     

Livin mRNA及Bel-2，p53蛋白在胰腺癌中的表达

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin在胰腺癌组织中的表达及其与Bcl-2和p53蛋白表达的关系。方法采用逆转录-多聚酶链反应（RT—PCR）法检测52例胰腺癌和12例正常胰腺组织中Livin mRNA的表达；用免疫组织化学法检测胰腺癌组织中Bcl-2和p53蛋白的表达。结果Livin mRNA在胰腺癌中的表达率为71．2％，明显高于正常胰腺组织（P〈0．01）。Livin基因表达与胰腺癌的分化程度和淋巴结转移有关（P〈0．05）。Livin基因表达与Bcl-2蛋白表达有关，而与p53蛋白无关。结论Livin基因在胰腺癌的发生发展中起重要作用；Livin与Bcl-2的异常表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用；Livin基因过表达与抑癌基因p53的失活无关。     

谷胱甘肽S—转移酶与膀胱癌关系的研究

目的：探讨谷胱甘肽S－转移酶（GST）与膀胱癌的关系。方法：检测58例膀胱癌患者（膀胱癌组）、80例泌尿系非肿瘤患者（泌尿系非肿瘤组）和40例正常对照者（正常对照组）血清中GST活性及24例膀胱癌患者癌组织、配对癌周正常组织和13例正常膀胱组织中GST活性。结果：膀胱癌组织血清中GST活性明显高于泌尿系非肿瘤组和正常对照组（P＜0．01）,泌尿系非肿瘤组与正常对照组之间GST活性差异无显著性意义（P＞0．05）,膀胱癌组癌组织中GST活性明显高于癌周正常组织及正常膀胱组织（P＜0．01）,癌周正常组织与正常膀胱组织之间,GST活性差异无显著性意义（P＞0．05）。各级和各期膀胱癌之间血清中 GST活性及各级膀胱癌组织之间GST活性差异均无显著性意义（P＞0．05）,而Ⅱ-Ⅳ期膀膛癌周期组织中GST活性较I期增高（P＜0．05）。结论：膀胱癌患者GST活性明显增高,GST活性在癌组织中随着癌分期的增高而增加,提示GST与膀胱癌的发生及发展有关。     

胰腺癌SOCS-1基因异常甲基化研究

目的：探索人类胰腺癌中SOCS—1基因是否由于异常甲基化而表达抑制；查询此现象在胰腺癌的发生、发展中的意义。方法：采集25例胰腺导管腺癌病人的肿瘤标本及5例对应的正常胰腺组织，运用甲基化特异性PCR反应研究胰腺癌组织中SOCS—1基因CpG岛甲基化状态，同时运用实时定量PCR分析SOCS—1基因的表达。结果：25例胰腺导管腺癌病人中有9例（36％）SOCS—1基因呈CpG岛甲基化，而正常组织则无SOCS—1基因CpG岛甲基化；SOCS—1基因CpG岛甲基化组的SOCS—1基因表达量与无SOCS—1基因CpG岛甲基化组相比，其基因相对表达量明显减少（P〈0．05），证明SOCS—1基因CpG岛甲基化可以抑制SOCS—1基因表达。与病人临床病理特征相结合比较．发现SOCS—1基因CpG岛甲基化与年龄、性别、肿瘤体积、肿瘤分化程度及TNM分期等因素无关。结论：在胰腺导管腺癌中存在SOCS—1基因CpG岛甲基化，且由于CpG岛甲基化而促使基因表达抑制。SOCS—1基因CDG岛甲基化在胰腺癌的发生、发展中可能具有一定的作用。     

Bax基因表达在胰腺癌组织细胞凋亡中的作用

目的:探讨胰腺癌组织中细胞凋亡与bax基因表达的相互关系及其在肿瘤发生发展中作用。方法：采用原位末端标记法（ISEL）和免疫组织化学技术检测40例胰腺癌组织及14例慢性胰腺炎组织的细胞凋亡（AI），凋亡相关基因bax蛋白的表达。结果：胰腺癌组织中的AI均值明显高于慢性胰腺炎组织（P＜0．01），随肿瘤进展AI逐渐减少。在癌组织中bax 基因阳性表达率为72．50％（29／40），且bax基因高表达组的AI均值明显高于低表达组（P＜0．01）。结论：细胞凋亡相对减少，在胰腺癌发生发展中起重要作用。bax蛋白是调节胰腺癌组织中细胞凋亡的重要因素。     

胰腺癌中VEGF mRNA，bFGF mRNA和PDGF mRNA及相应受体的表达与意义

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）mRNA,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)mRNA和血小板衍生生长因子（PDGF）mRNA及相应受体（flt-1,bFGFR1,PDGFR)与肿瘤微血管（microressel,MV)生成在胰腺癌生成、侵袭、转移中的作用及它们的相互关系。方法 应用原位分子杂交技术检测51例胰腺癌及32例急、慢性胰腺炎病人病变组织中VEGF mRNA,bFGF mRNA,PDGF mRNA的表达,应用免疫组化方法检测相应病例中flt-1,bFGFR,PDGFR的表达和肿瘤微血管计数（MVC）。分析其表达与胰腺癌病理参数及预后的关系。结果 胰腺癌中3种血管生长因子mRNA及受体阳性率明显高于包慢性胰腺炎（P＜0．05或P＜0．01）,它们的高表达与胰腺癌的分化程度呈负相关（P＜0．05）;与肿瘤的浸润、淋巴及血道转移（肿瘤的进展阶段）呈正相关（P＜0．05或P＜0．01）,而与肿瘤大小无关;癌组织中MVC明显高于急慢性胰腺炎（P＜0．01）;3种血管因子及受体与胰腺癌MVC呈正相关（P＜0．05或P＜0．01）;癌组织中3种血管因子mRNA及bFGFR与术后生存率呈显著负相关（P＜0．01）。结论 VEGF mRNA,bFGF mRNA,PDGF mRNA及受体的表达及MVC的测定可作为判定胰腺癌生长、转移及预后的重要指标,阻断3种生长因子及受体有助于胰腺癌的治疗。     

端粒酶基因hTR在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨胃癌中端粒酶hTR基因表达与临床参数的关系，评价hTR表达在胃癌诊断中的价值。方法：用原位杂交的方法检测端粒酶hTR基因在胃癌，癌旁组织和胃良性病变中的表达和分布情况，并分析与各临床参数的关系。结果：57例胃癌中hTR基因表达阳性率为94．7％（54／57），57例癌旁组织中hTR基因表达阳性率为0（0／57），69例胃良性病变中hTR基因表达阳性率为2．9％（2／69）。胃癌组织中hTR基因的表达与癌旁组织，胃良性病变比较差异有显性（P均＜0．001），并与肿瘤分化程度，淋巴结转移相关（P均＜0．05），与肿瘤分期无相关性（P＞0．05）。结论：端粒酶hTR基因表达检测在胃癌诊断中可能有一定的价值。     

胰腺癌中雌激素受体表达与其生物学特性的研究

探讨胰腺癌中雌激素受体（ＥＲ）的表达及与其生物学特性的关系。方法观察２４例胰腺癌切除标本的ＥＲ表达（Ｓ－Ｐ免疫组化染色法）与肿瘤大小、有无血管浸润、淋巴转移关系,并以正常胰腺组织标本作为对照。结果２４例胰腺癌病人ＥＲ阳性１４例（５８．３％）,１２例正常胰腺中仅有１例为ＥＲ阳性（８３％）。胰腺癌的ＥＲ表达明显高于正常胰腺组织（Ｐ＜０．０１）。其中肿瘤越大其阳性表达越低,＞５ｃｍ者ＥＲ阳性率明显低于≤５ｃｍ者（Ｐ＜０．０５）。高分化胰腺癌中ＥＲ阳性率明显高于低分化者,两者之比为８３．３３％：３３．３％,Ｐ＜０．０５。ＥＲ阳性者的血管侵犯率明显低于ＥＲ阴性者（Ｐ＜０．０５）。ＥＲ阳性的胰腺癌转移率低于ＥＲ阴性者,但两者差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。结论胰腺癌组织中ＥＲ有较高的表达率（５３．３％）。ＥＲ的表达与肿瘤的大小、细胞分化程度、血管浸润等生物学特性相关,ＥＲ阳性者多有较好的生物学特性。     

端粒酶hTRT基因在睾丸肿瘤组织中的表达及其意义

目的 研究端粒酶hTRT基因在睾丸肿瘤组织的表达及其意义。方法 应用核酸原位杂交技术对51例男性睾丸肿瘤组织和10例正常睾丸组织中端粒酶hTRT基因的表达进行检测和定位，并应用HRIAS－1000高清晰度图像处理对hTRT阳性信号进行图像分析。结果 端粒酶hTRT基因在睾丸肿瘤组织吸极高的表达，其阳性率为92．16％（47／51），端粒酶hTRT基因表达强度与肿瘤细胞的分化程度显著相关，睾丸良性肿瘤与睾丸恶性肿瘤间差异有显著性（P＜0．05）， 在睾丸肿瘤组织和癌旁组织及正常睾丸组织中的表达强度差异有非常显著性（P＜0．01），并且其强阳性表达水平与肿瘤细胞的分布定位一致。结论 端粒酶hTRT有可能成为睾丸肿瘤诊断的新标志物及治疗的新靶点。     

原位PCR检测胰腺癌中TGF—βmRNA的表达及意义

目的 研究TGF－β1在胰导管癌中的表达及意义。方法 采用RT－PCR、原位PCR杂交技术检测23例胰导管腺癌和4例正常胰腺组织中TGF-βmRNA的表达。结果 正常胰腺组织中无TGF－β1的表达。胰腺癌组织中TGF-βmRNA表达率为69．6％（16／23）,原位PCR杂交显示其表达位于胰腺癌细胞膜上,TGF－β1表达程度与肿瘤的病理分期、淋巴结转移有明显的相关性（P＜0．05）。TGF－β1阳性者1年生存率为13．3％（2／15）,明显低于阴性者（5／6）。结论 TGF－β1与胰腺癌的病理分期、预后相关,临床检测可用于评估其生物学行为。     

人胰腺癌组织中Livin和IGF-2的表达及临床意义

目的：探讨人胰腺癌组织中凋亡抑制蛋白Livin表达情况及其与各临床病理因素的关系，以及与胰岛素样生长因子-2（Insulin-likegrowth factor－2，IGF－2）表达的相关性。方法：应用免疫组织化学SP法检测56例胰腺癌组织中Livin与IGF－2的表达。结果：胰腺癌组织中34例Livin表达阳性，阳性率为60．7％；35例IGF-2表达阳性，阳性率为62．5％；胰腺癌组织Livin、IGF－2的表达阳性率均高于非肿瘤胰腺组织（P〈0．05）。Livin和IGF－2的表达与肿瘤组织学分级、临床病理分期及淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。相关性检验示Livin的表达与IGF－2之间有相关性（P〈0．01）。结论：人胰腺癌组织中Livin与IGF-2表达均上调；IGF－2与Livin相互作用共同参与人胰腺癌的发生、发展。     

TUSC3基因在胰腺癌组织中的表达

目的研究TUSC3基因在正常胰腺和胰腺癌组织中的表达水平。方法利用寡核苷酸基因芯片技术和实时定量PCR技术检测20例胰腺癌组织和6例正常胰腺组织中TUSC3基因的表达。芯片杂交结果进行Ratio值分析,实时定量PCR进一步验证杂交结果,PCR产物的定量方法采用比较Ct法。结果芯片扫描图像信号清晰,具有较低的整体背景和较高的信噪比。与正常胰腺组织相比,TUSC3基因在胰腺癌组织中表达下调,平均Ratio值为0．297±0．38。荧光定量PCR结果：TUSC3基因平均模板量在正常胰腺组织中为0．0387493±0．00965,胰腺癌组织中为0．0206028±0．00401;与正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中TUSC3基因表达下调1．88倍（P〈0．05）。结论TUSC3基因在胰腺癌组织中表达水平明显下调,其可能机制与该基因启动子区过甲基化有关,TUSC3基因在胰腺癌发生发展中的生物学效应值得进一步研究。     

Livin mRNA及Bcl-2，p53蛋白在胰腺癌中的表达

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin在胰腺癌组织中的表达及其与Bcl-2和p53蛋白表达的关系。 方法:采用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）法检测52例胰腺癌和12例正常胰腺组织中Livin mRNA的表达；用免疫组织化学法检测胰腺癌组织中Bcl-2和p53蛋白的表达。 结果:Livin mRNA在胰腺癌中的表达率为71.2%，明显高于正常胰腺组织（P＜0.01）。Livin基因表达与胰腺癌的分化程度和淋巴结转移有关（P＜0.05）。Livin基因表达与Bcl-2蛋白表达有关，而与p53蛋白无关。 结论:Livin基因在胰腺癌的发生发展中起重要作用；Livin与Bcl-2的异常表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用；Livin基因过表达与抑癌基因p53的失活无关。     

Survivin基因在胰腺癌组织中的表达及与bcl-2和p53蛋白表达的关系

目的探讨Survivin基因在胰腺癌中的表达及与bcl 2、p5 3蛋白表达的相互关系。方法用RT PCR法检测 4 9例胰腺癌、5例慢性胰腺炎和 12例正常胰腺组织中SurvivinmRNA的表达 ,免疫组织化学法检测胰腺癌中bcl 2、p5 3蛋白表达。结果SurvivinmRNA在胰腺癌中表达率为76 % ,在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中不表达 (P <0 0 5 )。Survivin基因表达与胰腺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移无相关性 (P >0 0 5 )。Survivin基因表达与bcl 2蛋白表达不相关 ,与p5 3蛋白表达显著相关。结论Survivin基因在胰腺癌中过度表达 ,提示该基因对胰腺癌发生和发展起重要作用 ;抑癌基因p5 3的失活与Survivin基因的表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用。     

胰腺癌组织中增殖细胞核抗原的表达及临床意义

目的 为了探讨增殖细胞核抗原（PCNA）的表达与胰腺癌组织生物学行为及预后的关系。方法 采用LABC法免疫组化染色检测32例胰腺癌和14例慢性胰腺炎组织中的PCNA表达。结果 PCNA在胰腺癌组织中的表达率为100％,胰腺癌组织中的PI明显高于慢性胰腺炎组织（P＜0．01）。PI 值与随肿瘤进展而逐渐增加的趋势,且PCNA表达与胰腺癌的预后呈负相关（P＜0．01）。结论ＰＣＮＡ表达能反映胰腺癌组织的增殖活性,分化程度越低,PCNA表达强度越高,它可作为预测胰腺癌病程和预后的一个有用指标。