洛伐他汀对HL-60细胞bcl-2基因表达的影响

目的 观察HMG-CoA还原酶抑制剂洛伐他汀(lovastatin，LOV)对HL-60细胞bcl-2基因表达的影响，进一步探讨其抑制细胞增殖诱导细胞凋亡的可能分子机制。方法 采用生长曲线测定、流式细胞仪分析、DNA片段化百分率检测以及RT-PCR、Western blot等技术方法，观察LOV对HL-60细胞体外增殖和凋亡的影响，以及bcl-2基因表达的改变。结果 LOV能显著抑制HL-60细胞增殖，使细胞周期阻滞于G0／G1期，细胞凋亡率增加，DNA片段化百分率升高；LOV能下调HL-60细胞bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结论 LOV对HL-60细胞有增殖抑制和诱导凋亡作用，下调节bcl-2基因表达可能是其分子机制之一。     

5-氮-2’脱氧胞苷对急性粒细胞性白血病细胞系HL-60中CDH13基因甲基化的影响

目的分析探讨5-氮-2’脱氧胞苷对急性粒细胞性白血病细胞系HL-60中CDH1基因甲基化的影响。方法5-Aza-dC处理培养的HL-60细胞，用甲基化特异性PCR（MSP）法检测处理前后细胞中CDH13基因的甲基化状态，RT—PCR法检测用药前后细胞中CDH1mRNA表达的变化。结果HL-60中CDH13启动子区发现甲基化，应用5-Aza—dC能使CDH1基因启动子区CpG岛去甲基化，而且经药物处理后CDH13mRNA的表达较前明显增强。结论5-Aza—dC能逆转CDH13基因甲基化状态，从而调控CDH13基因表达。     

胞外Ca2+浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨胞外不同Ca^2＋浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的促进作用.方法对体外培养的HL-60细胞经一定剂量的32P辐射后发现加入不同浓度的Ca^2＋继续培养24、48h,流式细胞仪检测凋亡率.结果胞外Ca^2＋作用于HL-60细胞24、48h后发现对辐射诱导细胞凋亡随Ca^2＋浓度的增加细胞凋亡率增大,Ca^2＋有明显的促凋亡作用,相关性很好r24=0.9001（P=0.0145）,r48=0.9343（P=0.0063）.结论胞外不同浓度的Ca^2＋对辐射诱导HL-60细胞有明显的促进凋亡的作用.     

锌对HL-60细胞凋亡及p53等基因表达影响

目的研究微量元素锌在体外对HL-60细胞凋亡的作用机制。方法HL-60细胞常规培养24h，分为对照组、四吡啶甲基乙二胺N，N，N＇，N＇-tetrakis（2-pyridylmethyl）ethylenediamine（TPEN）处理组、TPEN＋ZnSO4组。以细胞形态学改变、流式细胞仪和DNA凝胶电泳分析为凋亡观察指标，并用mRNA狭缝杂交和Western-blot测定细胞凋亡相关基因的改变。结果细胞内Zn^2＋减少可诱导人髓性细胞白血病细胞系HL-60凋亡，引起bcl-2、c-myc mRNA及蛋白的表达降低，补充ZnSO4（终浓度为20μmol／L）可改善上述现象。结论细胞内Zn^2＋减少诱导HL-60细胞凋亡过程与细胞内下调bcl-2、c-mvc基因的表达有关。     

HL-Ⅲ低周波治疗器常见故障处理

HL-Ⅲ温热式低周波治疗器是日本株社会HOMER、IOL研究所研制的。它治疗舒适，疗效显著，操作简便，被广泛用于理疗科、康复科、骨伤痛疼科，深受广大医务人员及病人的青睐。但此仪器在使用一段时间后，也会出现各种各样的常见故障。有的是仪器本身引起的，有的是因为使用人员操作不当引起的。     

9-羧酸蒽对人白血病细胞株HL-60增殖的影响

9-羧酸蒽anthracene-9-carboxylic acid，(9-AC)属于芳香族单羧酸类物质。以往9-AC研究往往局限在电生理和免疫组化方面。本实验采用体外细胞培养法，结合DNA凝胶电泳法观察9-AC对人髓性白血病细胞株HL-60细胞增殖作用的影响。     

视黄酸类物质诱导HL—60细胞分化过程中CDKs激酶活性变化

应用组蛋白Ｈ１激酶活性分析技术，检测视黄酶和芳维甲诱导ＨＬ６０细胞分化过程中细胞周期素依赖的蛋白激酶ＣＤＫｓ活性变化。结果显示处理３～４天的细胞大部分已向粒系分化，ＣＤＫ２和ＣＤＫ４激酶活性显著降低。推测细胞周期素依赖的蛋白激酶活性下降可能与视黄酸类物质诱导ＨＬ６０细胞分化有关。     

壁虎粉提取物作用于乙型肝炎病毒侵袭的HepG2和HL-7702细胞的实验研究

目的探讨壁虎粉提取物对乙型肝炎病毒侵袭过的人肝癌细胞(HepG2)和人肝细胞(HL-7702)中乙型肝炎病毒的复制能力和细胞生长状况的影响。方法实验分壁虎粉干预组、干扰素干预组、乙肝对照组和正常对照组四组,除正常对照组,其他三组以终浓度为1×107IU/mL含HBV-DNA的患者血清侵袭2小时后,再以一定浓度壁虎粉提取物或干扰素分别作用于上述两种细胞,收集各时段的培养液上清和(或)细胞,检测培养液上清AST、ALT、r-GT和LDH含量;采用荧光定量PCR法检测HBV-DNA;AO/EB进行细胞凋亡染色。结果两种细胞不同组别(除正常对照组外)培养6天、9天较培养3天AST显著增高(P<0.01),以两个干预组增高更为明显;HepG2干预组各时间段LDH含量高于HL-7702干预组(P<0.01),以壁虎粉干预HepG2组增高最为明显,同时凋亡细胞增多也较明显;两干预组细胞HBV-DNA含量较乙肝对照组低约1个数量级。结论壁虎粉提取物和干扰素对HBV复制具有抑制作用,对HL-7702细胞作用更为明显;壁虎粉提取物可诱导肝癌HepG2细胞早期凋亡、坏死。     

苯醌致HL-60细胞增殖方法的研究

目的建立引起该细胞增殖的方法,为以后进一步研究染毒后细胞内结构与功能的变化提供方法基础。方法用苯醌对人早幼细胞系HL-60进行染毒,取对数生长期的HL-60细胞,用不同浓度的苯醌进行染毒,行台盼蓝拒染法测细胞生存率,Alamar blue法测细胞增殖率,流式细胞技术测细胞周期分布。结果苯醌浓度为3μmol/L的剂量组HL-60细胞存活率无明显改变,且增殖率最高,细胞进入S期的比例[(48.23±1.37)%]高于对照组[(42.47±0.45)%]。结论用3μmol/L的苯醌染毒HL-60细胞,可引起该细胞明显增殖。     

二氧化硒诱导的正常肝细胞株及肝癌细胞株的凋亡

目的 :　研究中毒剂量二氧化硒 ( Se O2 )对正常肝细胞 HL- 770 2及肝癌细胞 SMMC-772 1的影响。方法 :　用流式细胞术观察不同浓度硒对两种细胞的损伤作用及对两种细胞 Bcl- 2 ,P5 3蛋白表达的影响。结果 :　 30 μmol/L的硒作用 48h可以明显抑制正常肝细胞株 HL- 770 2及肝癌细胞株 SMMC- 772 1的增生与活力 ,诱导两种细胞的凋亡 ,且两种细胞伴随着不同程度的 Bcl-2蛋白的下调及 P5 3蛋白的上调。结论 :　中毒剂量的 Se O2 诱导正常肝细胞 HL- 770 2和肝癌细胞 SMMC- 772 1的凋亡 ,且这种诱导凋亡作用是无选择性的 ,但两种细胞调亡的机制有一定区别。     

洛伐他汀对人粒系白血病细胞生长的影响

目的观察洛伐他汀(Lovastatin)对体外培养的人粒系白血病细胞株HL-60生长的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测、流式细胞仪分析等技术。结果洛伐他汀可显著抑制HL-60细胞的增殖．且呈剂量一效应关系。流式细胞仪分析结果显示：洛伐他汀不仅能影响该细胞周期进程而且可诱导该细胞凋亡。结论洛伐他汀可能通过影响细胞的生长周期和诱导细胞凋亡来抑制HL-60细胞的增殖。     

漆姑草醇提物对HL-60细胞诱导分化作用

目的 探讨漆姑草醇提物（HSJ）对人早幼粒白血病细胞（HL-60）的诱导分化作用。方法 实验设漆姑草250.0、125.0、62.5 μg/mL组、阳性对照组（吡柔比星100 μg/mL）、对照组;噻唑蓝（MTT）法检测HL-60细胞增殖抑制率;瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态;硝基四氮唑蓝（NBT）还原实验法测定细胞分化能力;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b、CD14阳性细胞的表达;Western blot法检测c-myc蛋白表达。结果 与对照组比较,漆姑草组HL-60细胞核浆比例减小,核仁变为肾形或蚕豆形,出现明显的细胞分化形态,细胞增殖受到不同程度抑制;对照组HL-60细胞NBT还原率为（0.83±0.29）%,CD11b和CD14阳性细胞表达率分别为（41.13±0.42）%、（53.30±7.23）%,c-myc蛋白表达量为（0.71±0.02）;漆姑草250.0、125.0、62.5 μg/mL组HL-60细胞NBT还原率[分别为（16.67±1.76）%、（10.83±1.26）%、（6.00±0.87）%]升高,CD11b和CD14阳性细胞表达率[分别为（66.77±4.27）%、（52.27±0.95）%、（46.27±0.38）%和（96.63±0.23）%、（85.25±3.80）%、（63.84±0.78）%]增加,c-myc蛋白表达量[分别为（0.38±0.01）、（0.45±0.01）、（0.58±0.02）]降低,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论 漆姑草醇提物可诱导HL-60细胞向成熟粒细胞、单核细胞方向分化。     

蟾酥作用后HL-60细胞基因表达谱变化的研究

目的研究蟾酥作用后HL-60细胞基因表达谱的变化，为蟾酥诱导HL-60细胞凋亡的可能机制提供依据。方法采用细胞形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡；应用DNA芯片技术检测蟾酥作用前后HL-60细胞基因表达谱的变化。结果1％(v／v)的蟾酥可明显诱导HL-60细胞凋亡。细胞凋亡发生前，在检测的1152个基因中共有9个基因表达改变，其中8个基因上调，1个基因下调。结论在蟾酥诱导HL-60细胞发生凋亡过程中有多个基因参与，BCL-2下调以及IL-8上调与凋亡的发生关系密切。     

低强度微波对γ射线致人早幼粒白血病HL-60细胞损伤的影响

[目的]探讨低强度微波辐射对γ射线致人早幼粒白血病HL-60细胞的凋亡率、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential, MMP）和胞内游离Ca^2＋浓度改变的影响。[方法]将人早幼粒白血病HL-60细胞随机分为对照组、单纯微波组、单纯γ射线组和联合组（微波＋γ射线）。单纯微波组和联合组给予12gW／cm^2微波照射,每天1h,连续辐照3d;第4天给予单纯γ射线组和联合组8Gγγ射线照射。用钙离子依赖性磷脂结合蛋白-异硫氰酸荧光素／碘化丙啶（Annexin V—FITC／PI）双标记法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测线粒体膜电位和胞内游离Ca2＋浓度。[结果]与对照组相比,单纯γ射线组凋亡率明显增加（P〈0．05）;联合组凋亡率与单纯γ射线组相比显著降低（P〈O．05o与对照组相比,单纯γ射线组线粒体膜电位下降明显（P〈0．05）;联合组线粒体膜电位与单纯γ射线组相比显著升高（P〈0．05o与对照组相比,单纯γ射线组胞内游离Ca2＋浓度明显升高（P〈0．05）;与单纯γ射线组相比,联合组胞内游离Ca2＋浓度明显降低（P〈0．05）。[结论]本实验条件下,8Gyγ射线可以引起细胞凋亡率增加、线粒体膜电位下降和胞内游离Ca2＋浓度增高,导致细胞损伤。预先900MHz、12μW／cm^2低强度微波照射能够显著减轻γ射线引起的细胞损伤,表现为细胞凋亡率减少、线粒体膜电位升高和细胞内游离Ca^2＋浓度降低。     

60Co γ射线诱发人正常肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因表达变化研究

目的 探讨电离辐射诱导人正常肝细胞HL-7702甲型肝炎病毒受体2(HAVCR2)和MXR7基因的表达变化,为寻找辐射致肝脏损伤早期诊断标志物提供实验依据.方法 将对数生长期的人正常肝细胞HL-7702分为10组,利用中国辐射防护研究院钴-60(60Co)照射装置对各组肝细胞照射,吸收剂量率为1.29 Gy/min,吸收剂量分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 Gy,利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因的变化,分析剂量-反应关系.结果 HAVCR2基因表达在照射后4、24 h总体上调;其中,0.2～0.8 Gy剂量组在照射后24 h基因相对表达量与照射剂量具有很好的剂量-反应关系,满足回归方程:y=0.14x2-0.48x+ 1.34;1.0～3.0Gy剂量组在照射后24 h,基因相对表达量与照射剂量呈现很好的剂量-反应关系,满足回归方程:y=0.44x+0.56.MXR7基因表达在照射后4、24 h较对照组显示出明显差异;其中,0.2～0.8 Gy剂量组MXR7基因表达在照射后4h与对照组相比总体上调,但随照射剂量增大,上调幅度降低;照射后24h,其基因表达未见明显规律;1.0～5.0 Gy剂量组MXR7基因表达在照射后24 h整体上调,且基因的表达与照射剂量呈现一定的剂量相关性,满足方程为y=0.57x+0.43.结论 电离辐射可以诱导人正常肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因的差异表达,且基因表达与照射剂量存在一定的剂量相关性.     

二十碳五烯酸联合视黄酸对HL-60细胞株N-ras基因表达的影响

目的 :　研究二十碳五烯酸 (Eicosapentaenoicacid,EPA )是否协同视黄酸 (retinoicacid,RA)影响 HL-60细胞的增殖与分化功能及相应分子机制。方法 :　流式细胞仪 (FCM)测定细胞增殖功能 ;NBT还原实验鉴定 HL-60细胞分化 ;Western blot法分析 p2 1 N- ras表达。结果 :　EPA和 RA联合应用能增强 HL-60细胞的增殖抑制和分化效应 ,同时细胞内 p2 1 N- ras表达降低。结论 :　 EPA和 RA可能通过下调节 N-ras基因的蛋白质表达 ,发挥它们对 HL-60细胞增殖与分化功能的联合效应     

镉诱导HL-7702细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3的表达

镉是一种有毒的重金属元素，易在体内蓄积，镉对机体毒性效应十分复杂。肝脏是镉损伤的主要靶器官之一，目前对镉致肝细胞损伤机制尚不十分清楚。镉可诱导多种细胞发生凋亡，如大鼠肝细胞、人肝癌细胞株和原代培养的鼠肺上皮细胞等。我们就镉诱导人正常肝细胞系HL-7702细胞凋亡作用进行研究，并对其凋亡机制进行了初步探讨。     

肺炎球菌调理吞噬杀菌实验方法建立与应用

目的 建立肺炎球菌多重调理吞噬杀菌实验,并在此基础上评价肺炎球菌疫苗免疫后效果.方法 参照美国阿拉巴马大学多重调理吞噬杀菌实验方法(MOPA),构建7价肺炎球菌结合疫苗血清型的肺炎球菌的工作菌种库和HL-60细胞库,测定工作菌种库抗生素耐药性及稀释度,HL-60分化5～6d后的表面标志表达量及活性,同时测定标准血清00...     

齐墩果酸对白血病HL-60细胞cav-1表达的影响

目的：研究齐墩果酸（oleanolic acid,OA）对白血病HL-60细胞窖蛋白-1（Caveolin-1,CAV-1）表达的影响。方法：OA作用HL-60细胞后,倒置显电镜观察细胞形态;RT-PCR检测HL-60细胞cav-1的mRNA表达;Western blot检测CAV-1蛋白水平。结果：OA作用HL-60细胞后,RT-PCR检测cav-1mRNA表达上调（P〈0.01）;Western blot检测CAV-1蛋白水平升高（P〈0.01）。结论：OA通过上调CAV-1的表达,抑制HL-60细胞增殖。     

SO2和NO2混合气对大鼠呼吸系统的影响

目的探讨二氧化硫(SO2)和二氧化氮(NO2)混合气对大鼠呼吸系统的影响及损伤机制。方法40只成年大鼠随机分为4组，即1个对照组和3个染毒组，静式吸入染毒。3个染毒组sch和N02浓度分别为：低浓度组8，5mg／m^3：中浓度组16，10mg/m^3；高浓度组32，20mg／m^3，对照组吸入正常清洁空气。每天染毒2h，连续21d。乙醚麻醉下腹主动脉取血，做肺泡灌洗(BAL)，测定血清及肺泡灌洗液(BALF)中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-S转移酶(GST)的活性及白蛋白、丙二醛(MDA)含量。结果染毒后大鼠血清和BALF中ACP、AKP活性增强；白蛋白、MDA含量增加；高浓度组BALF中SOD活性明显下降，与对照组比较有显著性差异。结论SO2和NO2混合气可引起肺上皮细胞通透性增加及肺组织氧化损伤。