胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物的制备及其抗肿瘤作用

目的：探讨胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物（LMW－NTS）的理化性质,生物学特性,急性与长期毒性作用。方法：从胎牛肝脏中分离提出取LMW－NTS,用高压液相色谱仪测定其分子量,紫外分光光度法测定OD260及OD280值,采用体外双层软琼脂细胞培养及腹腔注射LMW－NTS治疗荷瘤小鼠,观察共体内外抗肿瘤作用、急性与长期毒性作用。结果：胎牛肝细胞LMW－NTS的分子量为7000－8000,属核酸和多肽类物质,性质稳定。体外培养条件下胎牛肝细胞LMW－NTS对小鼠S－180细胞较对正常小鼠骨髓粒－巨噬系祖细胞有更强的抑制增殖及集落生成作用;腹腔注射胎牛肝细胞LMW－NTS治疗荷瘤小鼠能显著延长小鼠寿命（P＜0．001）。毒性试验证实胎牛肝细胞LMW－NTS无毒副作用,长期应用安全。结论：胎牛肝细胞LMW－NTS是一类分子量小、在体内外均有明显抗肿瘤作用、应用安全可靠的抑瘤物。     

胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物的生物学特性及抗肿瘤作用

目的：探讨胎牛肝细胞低分子天然抑瘤物（ＬＭＷ－ＮＴＳ）的理化性质、生物学特性及体内外抗肿瘤作用。方法：从胎牛肝脏中分离提取出ＬＭＷ－ＮＴＳ。用高压液相色谱仪测定其分子量，紫外分光光度法测定ＯＤ２６０及ＯＤ２８０值。采用体外双层软琼脂细胞培养及腹腔注射ＬＭＷ－ＮＴＳ治疗荷瘤小鼠，观察其体内外抗肿瘤作用。结果：胎牛肝细胞ＬＭＷ－ＮＴＳ的分子量为７０００ＫＤ－８０００ＫＤ，属核酸和多肽类物质，性质稳定。体外琼脂培养条件下胎牛肝细胞ＬＭＷ－ＮＴＳ对小鼠Ｓ１８０细胞较对正常小鼠骨髓粒－巨噬系祖细胞有更强的抑制增殖及集落生成作用。腹腔注射胎牛肝细胞ＬＭＷ－ＮＴＳ治疗荷瘤小鼠能显著延长小鼠存活期（Ｐ＜０．００１）。结论：胎牛肝细胞ＬＭＷ－ＮＴＳ是一类分子量小、在体内外均有明显抗肿瘤作用的抑瘤物。     

胎肝天然低分子抑瘤物对肿瘤细胞增殖和分化的影响

目的：观察胎肝天然低分子抑瘤物（LMW－NTS）对不同组织来源的肿瘤细胞增殖和分化的作用。方法：采用MTT比色法和^3H－TdR掺入技术,测定培养中的肿瘤细胞DNA合成和线粒体琥珀酸脱酶活力,间接反映肿瘤细胞的增殖抑制和诱导分化情况。结果：LMW－NTS对受试的4种肿瘤细胞都有生长抑制作用,但作用强度有所不同,对来源于造血系统的肿瘤细胞作用最为显著。不同浓度的LMW－NTS对肿瘤细胞线粒体琥酸脱氢酶活力的影响不同,低浓度时表现为促进作用,而高浓度时表现为轻度抑制作用。结论：胎肝低分子抑瘤物能够抑制不同各类的肿瘤细胞的增殖,并诱导其分化。     

银莲花素A对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑制作用

背景与目的：有研究证明,从两头尖中分离得到的三萜皂甙银莲花素A在体外具有较好的抑瘤活性。本研究将观察银莲花素A在体内对小鼠移植瘤的抑制活性。方法：MTT法检测银莲花素A对人鼻咽癌KB细胞和人卵巢癌SKOV3细胞的抑制率。体内实验选取小鼠肉瘤S180细胞、小鼠肝癌H22细胞和小鼠宫颈癌U14细胞．观察银莲花素A注射给药对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率,以及灌胃给药对小鼠肉瘤S180移植瘤的抑瘤率。测定银莲花素A的急性毒性。结果：银莲花素A在体外对KB细胞和SKOV3细胞的IC50分别为4．64ug／mL和1.40ug／mL。4．5mg／kg银莲花素A腹腔注射对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率分别为60．5％、36.2％和61．8％。200mg／kg灌胃给药时抑瘤率为64．7％。灌胃给药和腹腔注射银莲花素A的LD50分别为1．1g／kg和16．1mg／kg。结论：银莲花素A在体内外均具有较好的抑瘤作用,体内可抑制小鼠移植瘤的生长,是一个有潜力的抗癌药物。     

银莲花素A对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑制作用

背景与目的:有研究证明,从两头尖中分离得到的三萜皂甙银莲花素A在体外具有较好的抑瘤活性.本研究将观察银莲花素A在体内对小鼠移植瘤的抑制活性.方法:MTT法检测银莲花素A对人鼻咽癌KB细胞和人卵巢癌SKOV3细胞的抑制率.体内实验选取小鼠肉瘤S180细胞、小鼠肝癌H22细胞和小鼠宫颈癌U14细胞.观察银莲花素A注射给药对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率,以及灌胃给药对小鼠肉瘤S180移植瘤的抑瘤率.测定银莲花素A的急性毒性.结果:银莲花素A在体外对KB细胞和SKOV3细胞的IC50分别为4.64 μg/mL和1.40 μg/mL.4.5 mg/kg银莲花素A腹腔注射对S180、H22和U14细胞小鼠移植瘤的抑瘤率分别为60.5%、36.2%和61.8%.200 mg/kg灌胃给药时抑瘤率为64.7%.灌胃给药和腹腔注射银莲花素A的LD50分别为1.1 g/kg和16.1 mg/kg.结论:银莲花素A在体内外均具有较好的抑瘤作用,体内可抑制小鼠移植瘤的生长,是一个有潜力的抗癌药物.     

脐带血树突状细胞对小鼠S-180移植瘤的作用研究

目的 :观察脐带血树突状细胞对小鼠S - 180细胞株移植瘤的作用。方法 :采用脐带血来源的单核细胞制备树突状细胞 ,体外经S - 180细胞肿瘤相关抗原 (TAA)致敏后免疫小鼠 ,一周后接种S - 180细胞株。或先制备荷瘤小鼠模型 ,一周后再接种致敏树突状细胞。结果 :脐带血来源的树突状细胞经胃癌细胞系S - 180的TAA致敏后既能明显保护小鼠该移植瘤的发生 ,又能抑制已发生移植瘤的生长。同对照组相比 ,预防组和治疗组的瘤体积明显缩小 ,细胞免疫功能趋于正常 ,生存期延长 (P <0 0 5 )。结论 :脐带血树突状细胞对小鼠S - 180移植瘤的发生有预防作用 ,对荷瘤小鼠移植瘤的生长有抑制作用 ,为树突状细胞的临床应用提供了进一步的依据     

胎肝细胞因子的分离提取及其抗肿瘤生物效应的实验研究

目的：从胎肝细胞裂解液或上清液中分离提取中分子量的细胞因子和低分子量的细胞因子，并观察其对H7402肝癌细胞增殖和分化的影响。方法：从胎牛肝细胞分离细胞因子，采用^3H-TdR掺入法和MTT比色法。结果：将胎肝细胞因子分成分子量小于10KD的低分子细胞因子和分子量为10－100KD的中分子细胞因子。前者对H7402肝癌细胞的生长，脱氢酶活力以及DNA合成均有明显的抑制作用，半数抑制浓度（IC50）为136mg/L，而后者的作用则相反。结论：低分子胎肝细胞因子具有抑制肿瘤细胞生长的作用，而中分子因子则是促生长和分化作用。     

S180腹水瘤细胞提取物与rIL-2对S180实体瘤生长影响

利用小鼠S180腹水瘤细胞提取物与rIL－2分别单用和并用对S180实体瘤生长影响。经实验观察瘤细胞提取物组，rIL－2组，提取物与rIL－2并用组对S180实体瘤的抑制率分别为27．27％、29．75％、47．93％。采用提取物与rIL－2并用组做重复试验，结果表明此实验组对S180实体瘤生长有明显的抑瘤作用。     

S180腹水瘤细胞提取物与rIL-2对S180实体瘤生长影响

 利用小鼠S180腹水瘤细胞提取物与rIL－2分别单用和并用对S180实体瘤生长影响。经实验观察瘤细胞提取物组,rIL－2组,提取物与rIL－2并用组对S180实体瘤的抑制率分别为27.27％、29.75％、47.93％。采用提取物与rIL－2并用组做重复试验,结果表明此实验组对S180实体瘤生长有明显的抑瘤作用。     

鼠胎肝细胞对S180荷瘤小鼠免疫功能影响及抗肿瘤作用的实验研究

目的 :观察胎肝细胞 (FLC)对肉瘤 180 (S180 )小鼠的免疫功能影响和抗肿瘤作用。方法 :建立S180荷瘤小鼠并以鼠胎肝细胞悬液 (FLC)给予治疗 ,并检测T细胞亚群、巨噬细胞免疫球蛋白Fc受体(IgFcR)的表达、淋巴细胞转化率的程度及抑肿瘤生长率。结果 :鼠胎肝细胞悬液可以提高CD3 、CD4 、CD8的表达 ,分别为 4 0 74± 2 95 (P <0 0 1)、37 5 3± 4 88(P <0 0 2 )、2 4 99± 2 74 (P <0 0 5 ) ;提高巨噬细胞FcR的表达及淋巴细胞转化率 (P <0 0 5 ) ;对肿瘤的抑制率不明显 (P >0 0 5 )。结论 :鼠胎肝细胞悬液可以提高细胞亚群的活化 ,提高细胞免疫功能 ,还可以从体液免疫来提高机体的免疫力 ,从而提高机体对肿瘤的抵抗力 ,但对肿瘤抑制不够显著     

中药香加皮提取物的体内外抑瘤效果研究

背景与目的:研究中药香加皮水提取物(cortex periplocae extract,CPE)的体内、外抗肿瘤效果.材料与方法:采用MTT法和克隆形成实验,检测CPE对6种不同组织来源肿瘤细胞(K562、BGC-823、TE-13、SMMC-7721、MCF-7和HeLa)增殖反应的影响;将CPE灌胃给予S180和colon 26荷瘤小鼠,观察其对肿瘤形成及小鼠生存期的影响.结果:CPE对6种不同肿瘤细胞株均有明显的抑制作用(P＜0.05),其中对K562,BGG-823,TE-13的抑制作用量效关系明显(r分别为0.89、0.71和0.72,P值均＜0.05).将CPE灌胃S180或colon26荷瘤小鼠,可明显抑制肿瘤在体内的生长,并可明显延长荷瘤小鼠的生存期(P＜0.05).结论:CPE对6种不同组织来源的肿瘤细胞均具有抑制作用,可明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠寿命.香加皮作为抗肿瘤药物有待进一步开发研究.     

电离辐射对小鼠腹腔积液型S180细胞凋亡的影响

目的：观察电离辐射诱导小鼠Ｓ１８０细胞凋亡与辐射剂量、照射方式、抑瘤作用及生存期的。方法：将Ｓ１８０荷瘤鼠分为对照组,不同剂量组,以医用直线加速器Ｘ线单次照射和分次照射。采用光镜、电镜、ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳法、以及流式细胞法观察Ｓ１８０细胞凋亡的形态学和生化学特征,并观察不同处理组的小鼠抑瘤情况及生存期。结果：（１）单次照射、分次照射的均能导出典型的凋亡特征。（２）分次照射凋亡率高于次单次照射。     

CIK的体外增殖及体内外杀瘤活性的实验研究

目的:从人骨髓造血前体细胞体外培养扩增树突状细胞(dendritic cells,DCs),测定其表型及T细胞刺激活性.方法:采用Mini-MACS分离技术,从正常人骨髓、脐血分离CD34~ 造血干细胞,体外以重组hGM-CSF,hTNF-α,hIL-3诱导培养2周,流式细胞术检测扩增细胞的表面表型及细胞内IL-12的表达,体外同种混合淋巴细胞反应检测扩增DCs的T细胞刺激活性.结果:从正常人骨髓、脐血分离得到高纯度(>90%)的CD34~ 造血干细胞,经重组hGM-CSF,hTNF-α的共同诱导培养,扩增得到大量DCs,加人hIL-3可以进一步增加DCs产量;FACS检测表明,扩增的DCs表达HLA-DR,CD40,CD54,CD80,CD86分子,细胞内有hIL-12的P35,P40亚基的表达;与外周血单核细胞培养生成的DCs相比,由CD34~ 干细胞扩增的DCs具有更强的激发同种T细胞增殖的能力.结论:人CD34~ 干细胞体外经诱导培养,可以生成大量功能成熟的DCs,从而为进一步开展DCs的基础及临床研究打下了基础.     

人肺癌细胞NHE—1基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

目的:动态观察CIK(cytokine induced killer)细胞的体外增殖,体外的细胞毒活性,及通过动物实验研究其体内的抗肿瘤作用.方法:通过提取健康供血者的PBMC,第0天加入γ-IFN,第1天加入IL-2、抗-CD3单抗和IL-1培养CIK细胞;在流式细胞仪上做动态培养物的表型分析;与LAK细胞作对比,分别用MIT法测定其体外细胞毒活性及对S180荷瘤鼠的体内抗肿瘤作用.结果:CIK细胞在培养2周后获得大量增殖,表型分析表明,CIK细胞属异质性细胞群,在培养的过程中,群体的CD3~ CD56~ 细胞大量扩增达1000多倍,是CIK细胞的主要效应细胞;实验证明,CIK细胞的体外细胞毒活性及对S180荷瘤鼠的体内抗肿瘤作用均强于LAK细胞;其较强的体内抗癌活性可能与荷瘤鼠主体内T细胞活化有关.结论:CIK细胞是一种强于LAK细胞的、新型、高效、具有广谱杀瘤活力的免疫活性细胞.     

Direct and indirect effects of interferon on in vivo murine tumor cell growth

We cloned two sublines (S1 and R1) of murine Meth A fibrosarcoma cells with respect to their sensitivity to a murine alpha/beta-interferon (IFN) preparation. The growth of S1 cells was suppressed and that of R1 cells was hardly affected by IFN in vitro. This was also the case with cells enclosed in cell-impermeable diffusion chambers in peritoneal cavities. Nevertheless, IFN suppressed the growth of not only S1 cells but also R1 cells in mice inoculated i.p. with these cells, and the survival rates of both S1 cell recipients and R1 cell recipients were markedly improved. S1 cells were observed microscopically to be injured by the direct effect of IFN in vitro and in vivo, but R1 cells in in vitro culture with IFN and those surviving in vivo in the presence of IFN appeared to proliferate well. In the peritoneal cavity of R1 recipients treated daily with IFN, the recruitment of macrophages was enhanced in comparison with untreated R1 recipients. Adherent peritoneal exudate cells obtained from IFN-treated, R1-bearing mice were highly suppressive for the in vitro growth of not only R1 cells but also allogeneic and human cells. The role of macrophages in the indirect effect of IFN on tumor cell growth is discussed.     

Polyporus sp.MO5多糖的抗肿瘤作用

目的研究真菌Polyporus sp.M05多糖PSM-a体内对荷瘤小鼠S180的抑瘤作用及其机制.方法 MTT法检测PSM-a体外对S180细胞株的增殖抑制作用.建立S180小鼠模型,灌胃治疗,每日检测肿瘤体积并计算瘤体比和抑瘤率.实验结束后处死小鼠,MTT比色法测定小鼠自然杀伤(NK)细胞及淋巴因子活化杀伤细胞(LAK)的杀伤活性.HE染色检测肿瘤组织细胞坏死情况.结果 PSM-a在体外能抑制S180细胞生长;在体内能显著降低荷瘤小鼠的瘤重和瘤体比,250μg/ml的PSM-a对肿瘤抑制率高达80%以上;PSM-a能促进NK细胞及LAK细胞的杀伤活性;病理切片显示PSM-a作用后引起肿瘤组织坏死.结论 PSM-a对S180荷瘤小鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用,其机制可能与提高机体免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤活性有关.     

Effect of recombinant human interferon-alpha A/D on in vivo murine tumor cell growth

We investigated the effect of human recombinant interferon-alpha A/D A/D-IFN), which is known to delay the growth of murine tumor cells, on the growth of S1 and R1 subline cells of murine Meth A fibrosarcoma in the peritoneal cavity of mice. In vitro growth of S1 cells was sensitive to, and that of R1 cells was resistant to, the direct effect of A/D-IFN, as with murine natural IFN-alpha/beta, which was used originally to isolate these sublines. In vivo, however, the growth of not only S1 cells but also R1 cells was suppressed by the administration of A/D-IFN, and the survival time of tumor-bearing mice was prolonged. Although A/D-IFN had a direct effect on S1 cells in vivo, R1 cells were susceptible only to the indirect effect via the host cells. Macrophages (M phi) harvested from the peritoneal cavity of A/D-IFN-treated mice bearing ascitic R1 cells were very effective in suppressing the in vitro growth of R1 cells; those from non-R1-bearing A/D-IFN-treated mice were less effective. The results of in vitro experiments indicate that M phi are very probably activated by the synergism of A/D-IFN and M phi diameter-activating factor(s) produced by lymphoid cells in tumor-bearing mice.     

特异性转移因子对荷瘤早期和晚期小鼠细胞免疫功能及生存期的影响

目的研究特异性转移因子（ＳＴＦ）对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法在小鼠腹腔内接种Ｓ１８０细胞同时腹腔注射５１８０－ＳＴＦ，测定天然杀伤（ＮＫ）和淋巴因子激活的杀伤（ＬＡＫ）活性、淋巴细胞转化（淋转）、ＬＡＫ特异杀伤活性及生存期。结果荷瘤小鼠ＮＫ和ＬＡＫ活性及淋转较正常小鼠明显低下（分别为１４．５５％±７１３％、１３．８２％±６．６４％、４４．１５±６．９４ＳＩ；２７．７４％±６．６７％、２９．３８％±９．１６％、６９．１４±７．６７ＳＩ），生存期明显缩短（分别为１７．５０±２．００ｄ和＞４５ｄ）。在荷瘤同时应用５１８０－ＳＴＦ，可部分阻止ＮＫ和ＬＡＫ活性及淋转的下降（分别为１８．６４％±７．１８％、２２．８４％±７．２２％和５３．０３±９．１５ＳＩ），延长生存期（２６．２５±４．４０ｄ），还可明显诱导ＬＡＫ特异活性。荷瘤３天后应用５１８０－ＳＴＦ，仅能部分诱导ＬＡＫ特异活性，不能延长生存期。结论ＳＴＦ可能有助于阻止癌前病变向癌转化，而对晚期肿瘤效果不佳。