广东省乙型肝炎病毒S基因变异与乙型肝炎疫苗免疫失败关系探讨

目的研究广东省儿童乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)携带者中HBV S基因变异对乙肝疫苗免疫效果的影响。方法收集乙肝疫苗免疫后HBsAg阳性的儿童血清标本36份,利用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV S基因片段,对PCR产物进行脱氧核糖核酸(DNA)序列测定。结果在36份标本中,HBV核酸阳性26份,完成测序23份,11份标本S基因片段出现氨基酸变异,其中4份在“α”决定簇片段内出现了氨基酸变异,2种变异形式未见报道,结论广东省免疫失败儿童存在不同位点的HBV S基因变异,可能是导致部分儿童免疫失败的原因。尚未出现稳定的变异株,对现用乙肝疫苗的免疫效果影响不大。     

乙肝疫苗免疫失败者中乙型肝炎病毒感染及S基因变异研究

目的研究乙肝疫苗免疫失败者中乙型肝炎病毒(HBV)隐匿性感染及编码S基因(surface)变异状况。方法选择乙肝疫苗免疫后抗-HBs阴性的儿童血清标本167份,利用聚合酶链反应(PCR)扩增HBVS基因片段,对PCR阳性产物进行脱氧核糖核酸(DNA)序列测定和基因片段分析。结果在167份标本中,HBV核酸阳性63份,在测序42份标本中11份标本S基因片段出现氨基酸变异,共有5个氨基酸位点发生变异,其中一个在"a"决定簇片段内。结论免疫失败儿童HBV隐匿性感染率较高,HBVS基因存在不同位点的变异。     

乙型肝炎病毒"a"决定簇突变对乙型肝炎疫苗保护效果的影响

目的研究乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）“a”决定簇热点突变对乙肝疫苗保护效果的影响。方法根据HBV基因保守序列设计PCR扩增引物,针对“a”决定簇突变设计简并探针,制备检测HBV“a”决定簇16种热点突变的基因芯片,并用克隆测序对芯片检测结果进行验证。基因芯片法检测47对乙肝疫苗阻断失败的母婴配对样本和323例阻断成功的母亲样本。结果克隆测序证明,基因芯片法具有特异性。应用该法检测发现,野生株（阳性率为78．66%）仍为主要流行株,依次为126A（11．27%）、145R（5．76%）、126S-1（5．28%）、126S-2（4．56%）、129H（1．20%）、144A（0．72%）、129R（0．24%）,但126A阳性率显著高于其他突变（P值均＜0．01）。阻断失败组母婴均感染的样本与阻断成功组的126A、126S-1、126S-2和145R检出率的差异无统计学意义。结论现有乙肝疫苗可阻断126A、126S和145R突变株的母婴传播,目前毋需研制针对126和145位点突变的新型乙肝疫苗,但需加强对突变株的流行病学监测。     

乙型肝炎免疫球蛋白阻断乙肝病毒母婴传播过程中病毒S区基因变异的研究

目的了解乙型肝炎免疫球蛋白（HBIG）在阻断母婴传播过程中S基因变异的特点,比较与未予阻断者的差异,探讨基因变异与宫内传播的关系,协助评价HBIG的治疗安全性.方法将18对乙型肝炎病毒（HBV）携带母亲及其宫内感染新生儿按母亲产前处理分为HBIG组8对,母亲于产前3月起肌肉注射HBIG 200～400IU至分娩前;对照组10对,母亲产前不接受HBIG者.巢式PCR扩增HBV S基因片段并直接测序.以每对病例第一份（母亲孕中期）血清HBV株S基因区氨基酸（或核苷酸）作为标准,对每对病例第二份血清（母亲分娩前）和第三份血清（新生儿）HBV株进行分析.结果HBV S区碱基替代突变率和氨基酸变异数在HBIG组和对照组之间的差异均无统计学意义;18例宫内感染儿17例其病毒株与母亲分娩前的优势株一致,其中4例为S区变异株;18例宫内感染儿病毒株分型B型adw2 12例,C型adrq^＋6例.结论无症状携带HBV孕妇产前使用现有剂量HBIG至临产并未增加HBV S区的变异.HBV S区变异株和未变异株均可经宫内传播,宫内感染发生于孕后期;HBV S区变异并非发生宫内感染的主要原因.     

乙型肝炎病毒基因型和前C及基本核心启动子突变与乙型肝炎疫苗阻断母婴传播的关系

目的探讨乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）基因型和前C及基本核心启动子（BCP）突变与乙肝疫苗阻断母婴传播的关系。方法采集江苏省16对乙肝疫苗阻断失败的母婴血清样本32份,以及88对阻断成功的母婴血清样本176份。以型特异性引物PCR法检测16对乙肝疫苗阻断失败的母婴和88例阻断成功的母亲血清样本中HBV基因型,用PCR产物直接测序法检测HBV前C/ BCP突变,采用Clustal W 1．8软件进行序列分析。结果在16例阻断失败的母亲中,15例（93．8%）为HBeAg阳性,且均为C型（15/15,100%）;88例阻断成功的母亲中,51例（58．0%）为HBeAg阳性,其中C基因型占45．1%（23／51）。在HBeAg阳性母亲中,阻断失败组的C基因型检出率明显高于阻断成功组（X~2=14．3,P=0．003）。但在C基因型HBeAg阳性母亲中,阻断成功组与失败组的T1762/ A1764突变率差异无统计学意义（分别为13．3%和33．3%,P=0．4）,且均无A1896突变。结论感染HBV基因C型的母亲可能更易导致乙肝疫苗阻断失败,而前C/BCP基因突变与阻断母婴传播无关。     

乙型病毒性肝炎母婴传播阻断效果观察及病毒基因序列特征分析

目的观察乙型病毒性肝炎(乙肝)母婴传播阻断效果;探讨母婴传播阻断失败的病毒学因素。方法在四川和甘肃省5家医院招募439名慢性乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染孕妇及其新生儿,开展调查并采集血标本。对新生儿接种全程3剂次乙肝疫苗(Hepatitis B vaccine,HepB),检测母婴HBV血清学标志物和母亲病毒载量,扩增母亲HBV基因序列。结果研究地区乙肝母婴传播阻断成功率为93.39%,失败率为2.73%,无应答率为3.87%。母亲HBV基因型为C(43.01%)、B(37.63%)和D(19.35%);血清型为adr(37.63%)、adw(36.56%)、ayw(21.51%)、不确定型别(3.23%)和ayr(1.08%);阻断成功组和失败组的母亲a抗原决定簇突变率分别为30.59%、25.00%;阻断成功组与失败组的母亲HBV基因型构成、血清型构成以及a抗原决定簇突变率均无显著性差异(Fisher’s精确概率法,P0.05)。结论研究地区乙肝母婴传播阻断成功率较高。HBV基因型、血清型差异以及a抗原决定簇突变不是影响母婴传播阻断失败的因素。     

河源市397例乙型肝炎母婴阻断实施效果及影响因素研究

目的 观察乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗联合免疫方案在乙型肝炎病毒（HBV）母婴传播中的阻断效果及影响因素。方法 对397例乙肝表面抗原（HBsAg）阳性产妇及所生婴幼儿进行分析,观察乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白接种的免疫效果,采用多因素Logistic回归方法分析母婴阻断效果的影响因素。结果 397例HBsAg阳性产妇所生新生儿中HBsAg阳性婴幼儿38例,母婴阻断失败率为9.57%。分娩方式、母亲乙肝DNA病毒含量、母亲HBeAg阳性情况不同的婴幼儿免疫效果差异有统计学意义（均P<0.01）。母亲HBeAg阳性（OR=20.323）、阴道自然分娩（OR=4.425）、血清HBV高载量（OR=4.027）增加母婴阻断失败风险。结论 高危新生儿接种乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白后具有显著的母婴阻断效果。母亲HBeAg表达模式、分娩方式及HBV载量为影响阻断的重要因素。     

乙型肝炎病毒基因在宫内传播中的选择性

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因突变与宫内传播的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）方法从HBsAg阳性孕妇及其新生儿血清中扩增得到包括HBV前C／C区和前S／S区基因的2．5kb基因片断或前S／S区1．2kb基因片断,克隆、测序,分析测序结果,比较母婴HBV基因序列的差异。结果4对发生宫内感染的母婴HBV序列共得到43株,都属于HBVC基因亚型、adr血清亚型。HBV前S／S区序列中,新生儿序列的差异性低于母体（P〈0．05）。4对母婴问序列的平均相似率分别为99．47％、99．39％、99．37％和99．46％;母婴序列具有高度一致性;每对母婴序列间的进化距离都比较小,核苷酸差异率分别为0．4、0．8、1．2和0．3。母婴序列间均存在1个或数个核苷酸位点的差异,母体内的优势株和新生儿体内的优势株不完全相同。结论母体内的优势株或弱势株都可以通过宫内传播感染新生儿,可能与其基因突变有密切关系。提示HBV的宫内传播存在基因选择性。     

太原地区孕妇HBV感染者a决定簇的变异

目的 了解太原地区孕妇乙型肝炎病毒（HBV）感染者HBVS基因a决定簇变异情况。方法 2001年11月～2004年7月，采集太原市传染病医院妇产科住院的HBsAg阳性孕妇外周血，采用ELISA法检测血清HBsAg、HBeAg，巢式PCR法检测血清HBVDNA，对41例孕妇标本进行了PCR产物直接测序，与Genebank中HBV中国大陆流行株进行多重序列比对，分析HBVS基因a决定簇变异情况。结果 14．63％（6／41）孕妇携带HBVS基因a决定簇变异株。检出的突变位点中，aa126，aa127，aa131，aa143为较常见的氨基酸变异位点，aa125，aa135，aa137及aa140变异报道较少，大多数位点的变异导致了氨基酸替换。结论 太原地区孕妇HBV感染者携带a决定簇突变株。     

四川省两县(区)乙型肝炎病毒S基因和P基因变异分析

目的 分析四川省两县(区)乙型肝炎(乙肝)病毒(Hepatitis B Virus,HBV)S基因和P基因变异.方法 从乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒e抗原均阳性的血清中提取病毒脱氧核糖核酸,经聚合酶链反应和核苷酸测序后,比较和分析S基因和P基因核苷酸和氨基酸变异.结果 47例慢性HBV感染者血清标本中,12份标本在"a"决定簇内出现氨基酸变异(25.53%),分别为T126A、I126T/S、P127T、T131N、M133L、M133T、T140I;变异主要集中在"a"决定簇的第1环上(92.86%,13/14).1份标本逆转录酶C域中出现rtV2071变异.结论 自然发生的氨基酸变异主要集中在"a"决定簇的第1环上,其抗原性已改变,对乙肝疫苗接种人群构成了潜在的威胁.拉米夫定耐药株也可在未接受核苷(酸)类药物治疗的病人中发现.     

“a”决定簇变异对慢性乙型肝炎患者HBsAg与HBsAb表达的影响

目的研究＂a＂决定簇变异对慢性乙型肝炎患者乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与表面抗体（HBsAb）表达的影响。方法收集HBsAg阳性持续6个月以上的CHB患者866例，其中789例（91．1％）仅HBsAg阳性，77例（8．9％）患者血清HBsAg与HB-sAb均阳性。从77例血清HBsAg与HBsAb双阳患者中，选择14例血清HBsAg与HBsAb双阳患者为Ⅰ组。789例HBsAg阳性患者中随机选择12例HBsAg单独阳患者为Ⅱ组对照。对HBsAg编码基因进行扩增和克隆，每例样本至少克隆15个后进行测序分析。结果Ⅰ组患者S蛋白氨基酸残基改变数量为Ⅱ组患者的2．7倍[9．52变化量／100残基vs2．43变化量／100残基（9．52％VS2．43％），P〈0．01]，且绝大多数发生在主亲水区（MHR）“a”决定簇。MHR区至少出现2残基改变的在Ⅰ组有10例（71％），Ⅱ组3例（25％）。Ⅰ组患者S蛋白残基改变常见位点为s145、s129、s126、s144和s123。这些S基因位点突变，最终形成病毒的免疫逃逸。结论CHB患者HBsAg和HBsAb共存可能与“a”决定簇变异率升高相关。“a”决定簇变异可能为乙型肝炎病毒免疫逃逸突变的一种选择。HBV免疫逃逸对疫苗接种免疫效应、临床疾病诊断和治疗策略革新等有影响。     

携带 HBsAg 孕妇产前注射 HBIG 阻断宫内传播的 Meta 分析

目的评价孕妇产前应用乙型肝炎免疫球蛋白（hepatitis Bimmune globulin,HBIG）阻断乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）宫内传播的效果。方法查阅国内外有关孕妇产前使用HBIG阻断宫内传播的研究,收集出生及1岁婴儿乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）检测情况,通过Stata12．0软件进行Meta分析,获得合并RR值。结果新生儿随机效应模型干预组与对照组合并RR值为0．37,95％CI：0．23—0．61;1岁婴儿随机效应模型干预组与对照组合并RR值为0．48,95％CI：0．27～0．84。结论应用HBIG200IU可以有效阻断乙肝病毒的官内传播。     

2010—2012年福州市乙型肝炎流行病学特征分析

目的掌握福州市乙肝发病特点、流行趋势,为制订预防控制策略和措施提供科学依据。方法对福州市2010—2012年的乙肝疫情资料进行流行病学分析。结果 2010—2012年福州市乙肝年均发病率为211.95/10万,年发病率分别为239.86/10万、203.52/10万、192.47/10万,差异有统计学意义(χ2=387.486,P<0.05),发病年龄组集中在20~50岁年龄组,其中以25~30岁年龄组发病率最高。结论近年来,福州市乙肝发病率有下降趋势,但仍处于较高水平,应在加强新生儿、适龄儿童乙肝疫苗接种工作的基础上,继续扩大疫苗免疫范围。应加强乙肝预防和疫苗接种宣传教育。     

不同HBV DNA水平乙型病毒性肝炎肝硬化患者的临床特征及HBeAg状态比较

目的 研究乙型病毒性肝炎(乙肝)肝硬化活动期患者HBV DNA水平与HBeAg状态的分布和临床特点及意义.方法 调查337例乙肝肝硬化住院患者,采用荧光定量PCR方法检测HBV DNA载量.MEIA法检测HBV血清标志物,常规方法检测肝功能,同时行超声检查.比较不同HBV DNA水平患者中HBeAg阳性和阴性、不同Child-Pugh分级和肝癌患者的比例,以及不同年龄患者中不同HBV DNA水平和HBeAg状态患者的比例.结果 80.4%(271/337)患者HBV DNA阳性,31.5%(106/337)患者HBeAg阳性,68.5%(231/337)患者HBeAg阴性.HBV DNA水平越高者中HBeAg阳性者比例越高,HBeAg阴性者比例越低;不同HBV DNA水平患者中不同Child-Pugh分级患者比例差异无统计学意义,但HBV DNA 3～4 lg拷贝/ml患者中肝癌的比例高于HBV DNA<3 lg拷贝/ml患者(P=0.014)和≥7 lg拷贝/ml患者(P=0.009);HBeAg阴性患者比例随年龄增大而增加,但HBeAg阳性患者与阴性患者的临床特征差异无统计学意义.结论 绝大多数乙肝肝硬化患者HBV DNA阳性,且2/3患者HBeAg阴性.长期抗病毒治疗可能有助于改善乙肝肝硬化患者的病情和预后.     

血清HBsAg和HBeAg定量检测对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者病毒学应答的预测价值

目的：探讨血清HBsAg和HBeAg定量检测对恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者48周病毒学应答的预测价值。方法选取64例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者应用恩替卡韦0.5 mg/d抗病毒治疗48周,采用电化学发光微粒法检测基线及治疗后12周、24周血清HBsAg和HBeAg变化情况,分析其动态变化与治疗应答的相关性,应用ROC曲线比较预测疗效的价值,确定最佳临界值。结果64例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者随访48周有8例患者发生完全病毒学应答。24周HBeAg<9.25COI（OR=45.000,P<0.01,阳性预测值为71.43%,阴性预测值为94.74%）,24周HBeAg较基线下降大于97.1%（OR=71.400,P<0.01,阳性预测值为58.33%,阴性预测值为98.08%）是48周完全应答的预测因素。结论采用恩替卡韦治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者,早期血清HBsAg、HBeAg变化对48周完全应答有预测价值,其中血清HBeAg的下降更有益于疗效的预测。     

乙肝免疫球蛋白与乙肝疫苗联合免疫阻断HBV母婴传播3年效果观察

目的　通过连续 3a的前瞻性观察 ,研究乙肝免疫球蛋白 (HBIG)与乙肝疫苗 (Hep -B疫苗 )联合免疫阻断HBV母婴传播的效果及乙肝疫苗的免疫持久性。方法　该研究设实验组Ⅰ、实验组Ⅱ和 1个对照组 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测HBsAg和抗 -HBs。结果　通过 3a的阻断效果观察 ,实验组ⅠHBsAg阻断率为 10 0 % ,实验组ⅡHBsAg阻断率为91 67% ;对照组HBsAg阻断率为 10 0 %。结论　证实联合免疫对阻断HBV母婴传播有效。通过 3a的实验观察 ,实验组和对照组抗 -HBs阳性率呈逐年下降 ,提示应重视对儿童的乙肝疫苗加强免疫策略和免疫持久性研究     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清HBsAg水平与HBV DNA水平及病情严重程度的关系

目的 探讨HBV相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血清HBsAg水平与HBV DNA水平及病情严重程度的关系.方法 选取慢性乙型肝炎(CHB)患者119例(CHB组)和ACLF患者98例(ACLF组).采用罗氏电化学发光法检测血清HBsAg和HBeAg,荧光定量PCR法检测血清HBVDNA水平.分别比较两组不同HBeAg状态患者的HBsAg和HBV DNA水平差异以及HBsAg和HBV DNA水平的相关性.结果 ACLF组和CHB组患者血清HBeAg阴性患者分别占68.4％(67/98)和42.9％(51/119),差异有统计学意义(P＜0.01).ACLF组血清HBV DNA水平与CHB组比较差异无统计学意义(P＞0.05),两组血清HBeAg阳性患者HBV DNA均高于同组血清HBeAg阴性患者(P＜0.05).ACLF组血清HBsAg水平在血清HBeAg阳性和阴性患者间比较差异无统计学意义(P＞0.05),但均高于CHB组血清HBeAg阳性患者(P＜0.05).血清HBeAg阳性患者血清HBsAg与丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶具有相关性(P＜0.05),血清HBeAg阴性患者血清HBsAg与血清HBV DNA水平及生化指标无显著相关性(P＞0.05).不同HBV DNA水平ACLF患者中不同HBsAg水平患者的比例比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HBV相关ACLF患者血清HBsAg水平与HBV DNA水平及病情的严重程度无直接平行关系.     

慢性乙型肝炎患者胰岛素抵抗与I临床病理特点相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）与临床及病理特点的关系。方法对80例CHB患者进行血清谷丙转氨酶（ALT）、乙肝病毒载量（HBVDNA）及HOMA—IR的检测,并将其与肝组织病理进行相关性分析。结果胰岛素抵抗（IR）随着炎症活动度、纤维化程度的递增而加重。胰岛素水平（FINS）与HOMA-IR在G3级（15．24±7．41,3．51±1．91）高于G2级（10．33±6．28,2．25±1．39）;在S3期（16．65±6．46,3．79±1．50）高于S2期（9．06±4．61,2．02±1．11）。HOMA—IR与年龄、ALT呈正相关（r=0．273,0．224,P〈0．05）。结论CHB患者IR的发生、发展与年龄、肝组织炎症活动度和纤维化程度密切相关。     

15岁以下儿童乙肝血清学检测与乙肝疫苗接种状况分析

目的了解儿童乙肝流行和乙肝疫苗接种状况,为制定或调整乙肝疫苗接种策略提供依据。方法按照两阶段抽样法,抽取8个行政村15岁以下儿童978人,采静脉血3～5ml,ELISA法检测HBVM。结果15岁以下儿童HBsAg阳性率0．92％,与1991年15岁以下儿童HBsAg阳性率10．12％比较,有显著性差异,乙肝疫苗接种保护率90．91％。15岁以下儿童HBsAb阳性率40．49％,地区、城乡和性别分布均衡,乙肝抗体水平有随着年龄增加而下降的趋势,但1～5岁组有低峰。15岁以下儿童乙肝疫苗调查接种率91．82％,报告接种率87．89％,地区差异均有显著性,两者各年龄组之间乙肝疫苗接种率均随年龄增大而降低。结论马鞍山16年乙肝防治效果非常显著,要继续开展新生儿乙肝免费接种,加强流动儿童乙肝疫苗接种工作。