鼻内接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位预防流感病毒感染

霍乱毒素(CT)与某种无关的抗原同时接种时,不但是有效的肠道免疫原,而且还是刺激对无关抗原的IgA和IgG抗体应答的免疫调节剂。本文作者将CT或霍乱毒素B亚单位(CTB)与流感疫苗同时接种小鼠,观察小鼠的免疫应答及流感病毒感染情况。流感HA疫苗由流感病毒A/山形/120/86(H1N1)株和A/PR/8/34(H1N1)株制成。对6～8周龄的雌性BALB/c小鼠鼻腔、腹腔或皮下接种HA疫苗和CTB或CT。4周后测定血清中血凝抑制(HI)抗体和鼻腔内流感特异性和CTB特异性IgA抗体。     

可诱生粘膜IgA的新型佐剂--氧化型甘露聚糖

本文报道甘露聚糖氧化结合于重组蛋白抗原——李斯特杆菌溶血素 O融合蛋白( L LO.FP)构成的 M- LL O.FP能诱导粘膜Ig A应答。与霍乱毒素 ( CT)相比 ,氧化型甘露聚糖作为佐剂能诱导更强的抗体应答。　　作者选用 6～ 8周龄雌性近交系 ( CBA×BALB/ c) F1和 C57BL/ 1 0小鼠作为实验对象。轻度麻醉后每只小鼠鼻腔吸入 50μl(含1 2 μg抗原 )甘露聚糖抗原结合物 ,以非结合抗原作为对照。用 EL ISA测定抗体滴度。　　结果显示 :( 1 )小鼠鼻腔免疫 M- LL O.FP后可产生血清 LL O特异性 Ig A,腹腔免疫小鼠则未测得此抗体。( 2 )鼻…     

微球化粘膜菌苗能抵抗肺炎球菌鼻腔致死性攻击

为了测定粘膜免疫肺炎球菌荚膜多糖(PS)是否能诱生粘膜和全身性免疫应答 ,及粘膜免疫是否能保护小鼠免受肺炎球菌致死性呼吸道感染 ,作者制备了包被 1 9型肺炎球菌 PS或 PS-霍乱毒素 B亚单位 (CTB)结合物 (PS- CTB)的藻酸盐微球 (AM)。　　 BAL B/c小鼠分别间隔两周口服 3次空AM、裸 PS- CTB、微囊化 PS〔AM(PS)〕或微囊化 PS- CTB〔AM(PS- CTB)〕;同时 ,用 AM(PS- CTB)和裸 PS- CTB鼻腔免疫另两组小鼠。最后 1次免疫后 2周采集小鼠血清、支气管肺泡洗液 ,用 EL ISA法测定血清抗 PSIg A、Ig M和 Ig G抗体及支…     

直肠接种含抗原的微球体诱导的Th2应答强于口腔接种

直肠作为诱生全身和局部免疫应答的有效部位很少引起人们的注意。为了解含卵白蛋白 ( OVA)的微球体 ( MS- OVA)作为一种抗原进行直肠接种能否有效地诱导小鼠产生局部和全身性免疫应答 ,作者分别在 0、7、1 4天给予雌性 BALB/ c小鼠口服或直肠接种磷酸盐缓冲盐水 ( PBS)、空微球 ( MS)、OVA或 MS- OVA。第 1次接种后第 7、1 4、2 1、2 8和 35天收集血样 ,第 35天收集小鼠的粪便提取物 ,用夹心 ELISA法检测血清和粪便OVA特异性 Ig A和 Ig G水平 ,用酶联免疫斑点法 ( EL ISPOT)测定抗原特异性抗体形成细胞 ( AFC) ;从小肠、…     

流感病毒体是RSV-F抗原的有效递送系统

亚单位疫苗难以诱生粘膜免疫 ,需要研究开发新的抗原递送系统。为此 ,作者设计了一个配方 ,将呼吸道合胞病毒 ( RSV) F蛋白包埋在流感病毒体 (血凝素成分 )中 ,简称RSV- F/IRIV,并与粘膜佐剂大肠杆菌不耐热毒素 ( HLT)的自然无毒性变异体结合 ,鼻内免疫小鼠。　　试验分三组 ,A组接种 RSV- F/IRIV+HLT,B组接种 RSV- F + HLT,C组接种IRIV+ HL T作为阴性对照。　　 EL ISA和中和试验检测 RSV- F特异性抗体显示 ,A组 Ig G水平较 B组高但无显著差异。Ig G亚型分析两组特异性 Ig G1应答明显而 Ig G2 a应答均很弱。A组…     

流感病毒抗原与合成多聚电解质结合:疫苗的一种新模式

本文介绍以丙烯酸与M-乙烯基吡咯烷酮的根基共聚合成的多聚电解质(P)作为免疫刺激载体多聚体,与从流感病毒分离出的抗原共价结合后,大大提高这种病毒结合物的抗原性和免疫原性。以差速离心、密度梯度离心和Sepharo-se-4B凝胶过滤等方法浓缩提纯甲型流感病毒重组高产株MRC-11和R-5。制备血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)。用乙烷基硫酸钠(SDS)电泳、免疫双向扩散试验和测定HA和NA活性来检测分离到的病毒抗原的纯     

局部涂抹流感DNA疫苗的保护作用

流感疫苗一般采用血凝素 ( HA)和神经氨酸酶 ( NA)作抗原 ,肌肉注射。但 HA基因易突变 ,也有以突变率较小的核蛋白 ( NP)为抗原的疫苗。基质 ( M)基因产物有比 NP更低的突变率和分子量 ,因此作者选用编码流感病毒 M蛋白等的 DNA疫苗 ,研究经皮免疫的效果。　　作者将 6～ 8周龄 BALB/c小鼠背部皮肤用粘胶除去表皮层后 ,分别以 5、2 0、1 0 0μg剂量于 0、7、1 4天三次局部涂抹流感病毒 A/PR/8/34株 M基因 DNA疫苗 p ME1 8S- M。在免疫前和免疫的第 2 1天采集血液和粪便样品 ,用 EL ISA检测抗体滴度 ;通过细胞毒性 T细胞 ( C…     

对用于粘膜免疫的新型气溶胶流感疫苗的评估

作者用喷雾干燥技术制备一种由赋形剂和病毒抗原配制而成的干粉微粒 ( SDM) ,并有效地接种到支气管相关淋巴组织。　　试验所用的动物为 BALB/ c雌性小鼠和 Sprague Dawley大鼠 ;抗原包括灭活流感病毒 WSN株 ( A/ WSN/ 32 H1 N1 )和市售Fluzone流感病毒裂解疫苗〔每剂 0 .5ml,含A/新喀里多尼亚 / 2 0 / 99( H1 N1 )、A/巴拿马/ 2 0 0 7/ 99( H3N2 )和 B/维多里亚 / 50 4 / 2 0 0 0的血凝素 ( HA)共 4 5μg〕。　　采用喷雾干燥法制成直径 1～ 5μm,密度≤ 0 .2 g/ cm3的干粉微粒 ,以饱和脂质 (卵磷脂衍生物 :DPPC、DSPC、EP…     

编码配体-抗原融合体的DNA疫苗的定点免疫应答

作者以结合了淋巴结内皮小静脉 CD34的 L -选择蛋白 (Lsel)和结合了抗原提呈细胞 (APC) CD80和 CD86的 CTL A4作为配体 ,并以 CD5信号肽 (分泌必需 )为非定向对照 ,分别构建表达配体 -人免疫球蛋白 (h Ig)融合体的 Lsel- h Ig、CTL A4- h Ig和 CD5 L-h Ig质粒。分别将 1 0 0μg上述质粒于 0和 1 4天注射 6～ 8周龄雌性小鼠的股四头肌 ,用ELISA检测抗体 ,用51 Cr释放法检测细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL)应答。研究显示 ,抗体和 CD4T细胞的应答均增强 ,且抗体产生速度加快。免后 2周 ,免疫 CTL A4- h Ig质粒的3种不同品系 H- …     

全面防御流感、单纯疱疹、呼吸道合胞病毒共同感染的联合疫苗

为确定由甲型流感病毒血凝素 ( INF-HA)和核蛋白 ( NP)、1型单纯疱疹病毒糖蛋白 D( HSV1 - g D)、呼吸道合胞病毒糖蛋白 F( RSV- F)基因构成的联合疫苗的保护效果作者将 6～ 8周龄雌性 Balb/c小鼠随机分入试验组和对照组 ,试验组于 0、3、6周接种联合基因疫苗 ,对照组按同样免疫程序接种无抗原质粒 ( p CMVi- tpa)、p CMVi- RSV- F或p CMVi- Flu。全程免疫后采血 ,用 ELISA法检测血清中特异性 Ig G抗体 ;免后 1 4～ 2 1天 ,各组用 Flu、HSV、RSV、肺炎支原体( MP)单独或联合攻击 ,观察小鼠的行为改变和死亡率 ;用免疫组…     

由重组口服沙门菌疫苗载体诱导的长期免疫记忆

编码血凝素的 hag B是一种潜在的毒力因子 ,先前的研究证实表达 hag B基因的鼠伤寒杆菌载体可诱导强烈的血清 Ig G和 Ig A抗体应答及显著的唾液、肠道和阴道 Ig A应答。然而尚未对由这种载体诱导的免疫记忆的持续性进行测定 ,因此 ,作者就这一问题进行研究。　　 6～ 8周龄雌性 BL AB/c小鼠于 0周的第 1、3和 5天免疫 1 0 9鼠伤寒杆菌 X40 72 /p DMD1 3次后 ,第 1组动物于 5 2周再加强免疫 1次 ,第 2组动物于 1 4和 5 2周再加强免疫 2次。采集血清、唾液和阴道洗液以EL ISA检测抗 hag B Ig G和 Ig A抗体水平。　　试验结果表明 ,…     

对免疫刺激复合物与水包油乳剂流感疫苗的比较研究[英]

作者将流感病毒H1N1株（A/PR/8/34）人流感疫苗制成免疫刺激复合物（ISCOM）或水包油（O/W）乳剂,皮下免疫BALB/c小鼠后检测其免疫原性和保护作用。ISCOM和O/W乳剂均能增强初次和二次血清抗体应答。在乳剂中加入L121非离子嵌段共聚物可进一步增强O/W乳剂疫苗的免疫应答。初次免疫后4周,以含流感病毒的气溶胶攻击小鼠,根据存活率和体重变化研究小鼠对攻击的抵抗力,结果发现抵抗力与抗体滴度有良好的相关性。     

用霍乱毒素作佐剂的经皮免疫法

经皮接种 (TCI)是一种新颖的免疫接种策略 ,它通过在皮肤表面外敷抗原和佐剂 ,导致血清和粘膜分泌液中抗原 /佐剂特异性Ig G的产生。作者以具有不同 H- 2主要组织相容性复合体 (MHC)基因的 C5 7BL/ 6、BALB/ c和 C3H品系小鼠为对象 ,以霍乱毒素 (CT)为抗原或作为白喉类毒素 (DT)与鸡蛋溶菌酶 (HEL)的佐剂 ,于小鼠背部和耳部TCI,测定抗体水平和 T细胞增殖应答 ,并且分离 CD4 T细胞。　　为评估 CT作为抗原 TCI诱导免疫应答的情况 ,小鼠于 0周接受初免 ,并于 4和 8周后接受加强免疫。结果显示 ,C5 7BL/ 6组的抗 CT Ig G滴度…     

灭活的脑膜炎球菌和百日咳杆菌的免疫原性及对鼻腔接种的流感灭活疫苗的粘膜佐剂作用

作者检测了灭活的全菌体脑膜炎球菌(Nm)和百日咳杆菌 (Bp)的粘膜免疫原性 ,以及对甲型流感灭活疫苗 (INV)的佐剂作用。将 6～ 8周龄的雌性 BALB/c小鼠分成 5组 ,每组 6只 ,间隔 1周鼻腔接种 4次 ,每种抗原的剂量为 1 2 5 μg蛋白 /30 μL。第 1组仅接种 INV;第 2、3组分别接种 INV与 Bp或Nm的混合液 ;第 4、5组分别接种单纯的 Bp或 Nm;第 6组为对照组。分别于末次接种后1周取唾液、粪便和血液进行抗体检测。　　结果显示 ,第 1组小鼠能产生较低的但显著升高的流感特异性 Ig G抗体 ,但与对照鼠相比血清和唾液 Ig A应答无显著性。第…     

鼻内接种单剂新型三价流感灭活疫苗后的群体粘膜和血清免疫应答

作者选用世界卫生组织推荐的 1 997/1 998年流感流行季节使用的流感病毒株 :B/哈尔滨 /7/94、A/南昌 /933/95( H3N2 )和 A/约翰内斯堡 /82 /96 ( H1 N1 ) ,接种于鸡胚 ,蔗糖梯度纯化 ,经不使用福马林及β丙内酯的专利工艺完全灭活后制成不含佐剂和载体的三价全毒粒疫苗。单向辐射状扩散法测定每剂中含前两个病毒株抗原各 2 0 μg,A/约翰内斯堡株为 2 0或 40 μg。采用双盲法对 1 82名试验者和 92名安慰剂对照者进行鼻内接种 ,用血凝抑制 ( HAI)试验和 ELISA分别检测血清中Ig G和鼻粘膜拭子中 Ig A抗体水平。　　结果表明 ,试验组血…     

口服亚单位疫苗预防动物结核杆菌气溶胶感染

由于肺通常是结核杆菌最先感染的器官及病理学的重要部位 ,所以肺部免疫应答在限制结核杆菌初始感染中起显著作用。本研究旨在通过将抗原靶向肠粘膜来诱导有效的肺部免疫应答。　　作者将重组融合蛋白 Ag85B- ESAT- 6加佐剂〔脱毒的单磷酸脂质 A( MPL)、霍乱毒素 ( CT)、大肠杆菌不耐热肠毒素 ( LT)〕口服或常规皮下接种 C57BL /6小鼠。末次免疫接种后两周取小鼠脾细胞作体外培养 ,用ELISA法测定特异性γ干扰素 ( IFN-γ)水平 ,以结核杆菌气溶胶感染免疫动物后 6周 ,测定鼠肺中的结核杆菌数。　　结果 :( 1 )口服 1剂或 2剂 1 0μ…     

产生霍乱毒素B亚单位的重组卡介苗诱导的免疫应答

经粘膜途径接种的抗原的免疫原性通常弱于全身途径接种,因此粘膜抗原接种后需要粘膜佐剂以获得有效水平的免疫应答。已知五聚体形式的霍乱毒素B亚单位( CTB)是有效的粘膜佐剂,当经粘膜途径与抗原一起给予时能增强抗原特异性分泌性Ig A( SIg A)应答,但口服CTB会被粘膜局部的酶和正常菌群快速清除,为延长CTB在呼吸道粘膜的持续时间,作者将含CTB编码基因的p ENCTB转入卡介苗( BCG) 1 1 73P2株,构建出能分泌和产生CTB的重组( r) BCG。用免疫印迹法检测r BCG表达的CTB,用GM1神经节苷脂连接试验检测已装配的CTB的亚单位数。结果…     

单剂病毒体甲型肝炎疫苗对泰国人的安全性、免疫原性和免疫应答动力学研究

作者破碎MRC-5细胞,收集甲型肝炎病毒(HAV)RG-SB株后,超速离心纯化,福马林灭活,然后与磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和来自甲型流感病毒类A/新加坡/6/86(H1N1)株中纯化的血凝素(HA)结合制成病毒体(virosome)悬液,吸附后,适当稀释成无菌、无热原的疫苗悬液(每剂0.5ml,含500放射免疫测定单位的HAV抗原、10μgHA和约300μg总磷脂)。 受试对象为79名年龄在17～35岁的泰国成年志愿者,无肝炎史且肝功能正常。于三角肌肌肉注射0.5ml疫苗,并在免疫前及免疫后30、90、180和360天分别采集静脉血,用ELISA检测抗-HAV。免疫后连续三天记录不良反应,30天后复测肝功能。     

合成肽重组疫苗的抗病毒效力

将编码保护性抗原决定簇的合成寡核苷酸插入合适的表位表达基因中能构成合成重组疫苗。本文报道了对表达流感病毒和曼氏血吸虫抗原决定簇的沙门菌疫苗株重组鞭毛的研究结果。将能诱导 T、B细胞免疫应答的 3个保守的流感病毒血凝素 (HA)和核蛋白 (NP)抗原决定簇表达在鞭毛上 ,并用不加任何佐剂的重组鞭毛鼻腔免疫小鼠。结果表明 ,疫苗能诱生特异性针对流感病毒的体液和细胞免疫应答 ,并能长期保护杂交株小鼠抵抗流感病毒的感染。老年小鼠也能获得抗感染的能力。为了研制人流感疫苗 ,应用了可被高加索人群人类白细胞抗原 (HLA)识别的抗原决定簇 ,并在移植了人外周血单个核细胞 (PBMC)的人 /鼠辐射嵌合型小鼠中评估疫苗。研究表明 ,攻击后疫苗接种小鼠能有效清除病毒 ,并能抵抗致死性感染。对于血吸虫病 ,将表示 9B-肽 1的 1 4个氨基酸残基肽表达在鞭毛上 ,在不加佐剂的情况下鼻腔免疫小鼠 ,获得 40 %的保护率。     

老年人对TI-2抗原的免疫应答

细菌荚膜多糖是 T细胞非依赖性 (TI-2 )抗原 ,抗这些抗原的抗体与保护作用相关。迄今为止研究仅限于检测人体 Ig G、Ig M或Ig A抗体量的变化 ,而未在老年人对 TI- 2应答中提及具有功能活性的抗体轻链和抗体亚类。　　作者用 C群脑膜炎球菌荚膜多糖(MCPS)作为 TI- 2的模型抗原 ,对 2 1名老年人 (6 0～ 88岁 )和 2 2名青年人 (2 0～ 31岁 )(1 970年后无脑膜炎球菌接触史或疫苗接种史的健康志愿者 )皮下接种 0 .5 ml MCPS菌苗 ,分别于接种当天及免疫后 6、1 2周采血。用间接 ELISA法测血清总抗 MCPS抗体滴度 ,用夹心 EL ISA法测…