核仁素在骨肉瘤组织中的表达及其意义

目的探讨骨肉瘤中核仁素蛋白的表达情况,明确其表达与骨肉瘤临床病理遗传的关系。方法骨肉瘤组织35例,骨软骨瘤组织15例,应用免疫组化技术,检测石蜡包埋组织中核仁素蛋白的表达,并分析核仁素蛋白的表达与骨肉瘤临床病理遗传的关系。结果（1）核仁素蛋白在骨肉瘤组织中的阴性、弱、中、强表达依次为8．6％、20％、34．3％、37．1％,与骨软骨瘤组织（分别为40％,46．7％,13．3％,0）相比,其表达水平显著上调（P〈0．01）。（2）核仁素蛋白在普通型骨肉瘤中阴性、弱、中、强表达依次为6．9％、13．8％、34．5％、44．8％,与骨旁骨肉瘤（分别为16．7％,50％,33．3％,0）相比,其表达水平上调（P〈0．05）。（3）核仁素蛋白在成骨型骨肉瘤中阴性、弱、中、强表达依次为5．9％、5．9％、29．4％、58．8％,成软骨型骨肉瘤中分别为0％、33．3％、33．3％、33．3％,成纤维型骨肉瘤中分别为16．7％、16．7％、50％、16．7％,不同亚型普通骨肉瘤组织中,核仁素蛋白的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论核仁素蛋白的表达与骨组织病变的性质有关,其表达水平与骨肉瘤的病理遗传有关。     

CXCR3／CXCL10在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨趋化因子受体3（CXCR3）及趋化因子配体10（CXCL10）在乳腺癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法及二步法对60例乳腺癌组织、20例乳腺纤维瘤组织及20例乳腺腺病组织分别进行CXCR3、CXCL10检测。结果乳腺癌中CXCR3（40／60,66．7％）、CXCL10（45／60,75％）的表达高于乳腺腺病[CXCR3（8／20,40％）X^2=4．44,P=0．035;CXCL10（10／20,50％）x。=4．36,P=0．037）],乳腺癌中CXCR3的表达与有无腋窝淋巴结转移、临床分期、HER-2的表达有关（X^2=4．15,P=0．042;X^2=7．74,P：0．021;X^2=4．27,P=0．039）,且CXCR3的表达强度与腋窝淋巴结转移数及临床分期目呈正相关（-=0．375,P=0．003;t=0．451,P=0．000）。结论CXCR3可能与乳腺癌的进展及早期转移有关,CXCR3可能作为乳腺癌的一个预后指标。     

miRNAlet7、Ras在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨miRNAlet7（1et7）、Ras在非小细胞肺癌中的表达及临床病理学意义。方法利用原位杂交方法检测let7、免疫组化方法检测Ras在68例非小细胞肺癌（肺癌组）及20例癌旁正常肺组织（对照组）中的表达。结果let7在肺癌组中的阳性表达率（39．7％）低于对照组（75．0％）（P〈0．05）、Ras在肺癌组中的阳性表达率（66．2％）高于对照组（25．0％）（P〈0．01）;let7阳性率与患者年龄、性别及肿瘤组织类型、分化程度、分期无关（P〉0．05）,Ras阳性率与吸烟史、患者性别及肿瘤组织类型有关（P〈0．01）,与肿瘤分化程度、淋巴结转移及临床分期无关（P〉0．05）;let7与Ras在非小细胞肺癌组织中表达呈明显负相关（r=-0．627,P〈0．01）;let7阳性表达组2年生存率明显优于阴性表达组（X2=4．84,P〈0．05）;Ras阳性表达与阴性表达组2年生存率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论let7的低表达、Ras的高表达参与了肺癌的发生发展,let7阳性表达与预后密切相关;Ras可协同参与肺癌的发生发展。     

EGFL7在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤增殖性的关系

目的探讨类表皮生长因子域7（EGFL7）基因在人脑胶质瘤组织中的表达及与肿瘤增殖性的关系。方法收集45例胶质瘤石蜡标本,其中24例低度恶性（Ⅰ-Ⅱ级）、21例高度恶性（Ⅲ-Ⅳ级）,用免疫组织化学检测EGFL7蛋白的表达情况。并分析EGFL7蛋白表达与胶质瘤病理分级及增殖性（Ki-67标记指数）的关系。结果EGFL7在人脑胶质瘤中存在表达,EGFL7蛋白表达主要定位于肿瘤细胞及血管内皮细胞的胞浆。其表达与肿瘤的恶性程度有关（t=4．399,P〈0．01）,与增殖能力呈正相关（r=0．793,P〈0．01）;EGFL7在正常脑组织中无表达。结论人脑胶质瘤中瘤细胞及内皮细胞均存在EGFL7基因的表达,并且与肿瘤恶性程度及增殖能力相关,提示EGFL7在胶质瘤的生长侵袭中发挥重要作用。     

基质金属蛋白酶-7在甲状腺良恶性病变组织中的表达及其意义

目的探讨甲状腺良恶性病变组织中基质金属蛋白酶-7（MMP-7）的表达及其临床意义。方法应用微波-LSAB免疫组化法检测50例甲状腺癌、45例甲状腺腺瘤和20例癌旁甲状腺组织中MMP-7的表达。结果甲状腺癌中MMP-7表达阳性率（64．0％）显著高于甲状腺腺瘤（37．0％）和癌旁甲状腺组织（25．0％）（x^2=8．72,6．52,P〈0．01）。MMP-7表达阳性率与甲状腺癌组织类型无关;有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者（P〈0．05）;病理分期Ⅲ～Ⅳ期病例显著高于Ⅰ-Ⅱ期病例（P〈0．05）。MMP-7阳性的甲状腺癌复发及病死率显著高于阴性者（P〈0．05）。结论MMP-7表达对甲状腺癌恶性程度判断、生物学行为预测和预后评估有一定价值。     

COX-2在骨巨细胞瘤及骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的检测54例骨巨细胞瘤及37例骨肉瘤组织中COX-2的表达,分析其对骨巨细胞瘤及骨肉瘤的临床诊断及预后的意义。方法应用免疫组化方法对54例骨巨细胞瘤及37例骨肉瘤组织中COX-2进行检测。结果54例骨巨细胞瘤组织中有29例COX-2表达阳性,其表达与骨巨细胞瘤分期无关（P〉0．05）,与复发有关（x^2=10．85,C=0．80,P〈0．01）。37例骨肉瘤组织中有32例COX-2表达阳性,其表达与骨肉瘤分期有关（x^2=4．16,C=0．56,P〈0．05）,与肿瘤组织学类型无关。结论COX-2与骨巨细胞瘤的复发及骨肉瘤的分期有关,其可为骨巨细胞瘤和骨肉瘤的临床诊断和预后判断提供帮助。     

CK19、Galectin-3及AAT在甲状腺乳头状病变的表达及其意义

目的 探讨CK19、Galectin-3、AAT在甲状腺乳头状病变中的表达及其意义。方法采用CK19、Galectin-3、AAT作为免疫标记,SP法标记甲状腺乳头状病变组织。结果CK19、Galectin-3、AAT在30例甲状腺乳头状癌中的表达率为93．3％（28／30）、93．3％（28／30）、83．3％（25／30）,且表达均为中度强阳性。在甲状腺乳头状增生中表达率仅为6．7％（2／30）、6．7％（2／30）、10％（3／30）。结论CK19、Galectin-3、AAT对良、恶性的甲状腺乳头状病变具有鉴别作用。     

补体C5aR受体在UUO大鼠模型肾组织中的表达

目的动态检测单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织中补体C5a受体（C5aR）的表达变化,从而探讨其在肾小管间质纤维化发展中的可能作用机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为UUO组及假手术（SOR）组,每组18只,UUO组行左侧输尿管梗阻术,SOR组仅游离左侧输尿管不结扎。术后第5、10、15天分别处死每组中6只大鼠,取左肾行HE和Masson染色,并用免疫组化检测肾组织C5aR的表达,RT-PCR检测C5aR的基因表达情况。结果UUO组第5天肾小管扩张,小管间质细胞部分变性,梗阻后第10天小管间质细胞可见坏死,间质纤维增多,第15天可见弥漫的肾小管基底膜增厚皱缩,纤维化明显,UUO组间质损伤指数与肾纤维化程度在术后不同时间点显著高于SOR组（P〈0．01）。免疫组化结果显示：SOR组大鼠肾组织中仅有少量C5aR表达,UUO组术后第5、10及15天C5aR表达[（7．94±2．67）IOD,（12．39±2．64）IOD,（13．37±0．98）IOD]显著高于对应时间点的SOR组[（4．50±2．32）IOD,（5．69±1．73）IOD,（4．30±1．45）IOD]（P〈0．05,P〈0．01）,术后第10天明显高于第5天（P〈0．01）,而从第10天到第15天仅稍有增高。C5aRmRNA在UUO组从术后第5天到第10天梗阻侧肾脏C5aRmRNA表达明显增多（0．10±0．02到0．34±0．10）,而从第10天到第15天表达未见明显增多,甚至有降低的趋势（第15天为0．32±0．06）。结论实验大鼠梗阻侧肾组织中C5aR的表达在早期随着梗阻时间延长而上调,晚期则增多缓慢,其基因水平表达情况同蛋白基本一致,提示C5aR可能在肾脏局部通过与循环系统中的C5a结合在肾间质纤维化早期起作用。     

骨肉瘤中雌,孕激素受体的表达及意义

探讨骨内瘤中雌激素受体（ＥＲ）,孕激素受体（ＰＲ）的表达及其与骨肉瘤临床特征的关系。应用免疫组化ＳＰ方法（改良ＳＰ法）对６５例骨肉瘤蜡块组织进行了ＥＲ、ＰＲ检测。所有病人术前均未接受内分泌治疗。骨肉瘤中ＥＲ表达的阳性率为４０％（２６／６５）,ＰＲ表达的阳性率为３２．３％（２１／６５）;阳性颗粒分布于胞浆和胞核;临床无转移,存活时间长的骨肉瘤中ＥＲ,ＰＲ表达的阳性率高于临床有转换,存活时间短者,差异     

CD4、CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在 HIV-1感染者及正常人晚孕胎盘及早孕绒毛的表达

目的 明确CD4、CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在HIV-1不同感染状态晚孕胎盘和早孕绒毛的存在及表达情况,为探索HIV-1宫内传播的分子机制提供理论依据.方法 收集11例HIV-1感染孕妇胎盘、13例正常孕妇胎盘和10例早孕流产绒毛,免疫组化检测并比较3组孕妇胎盘或绒毛组织中HIV-1相关受体CD4、CCR5、CXCR4和DC -SIGN分子的存在情况及其表达强度.结果 CD4在早孕绒毛和晚孕胎盘中的表达存在个体差异,早孕组、对照组和病例组CD4阳性率分别为70.00％、61.54％、72.73％,3组阳性率差异无统计学意义(P=0.902).CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在胎盘均有表达,均定位于滋养细胞和绒毛间质细胞和/或Hofbauer细胞,且在早孕绒毛中的表达强度均低于晚孕胎盘组,差异均有统计学意义(t1=-4.09,P1＜0.001;t2=-4.80,P2＜0.001;t3=-4.57,P3=0.001).结论 胎盘组织中存在多种HIV-1受体相关分子,具备感染的分子基础.胎盘滋养细胞上是否存在CD4分子具有个体差异;CCR5、CXCR4和DC-SIGN分子在晚孕胎盘中的表达高于早孕的绒毛,可能是HIV-1感染宫内传播多发生于孕晚期的原因之一.     

HBV基因瞬时和稳定转染HepG2细胞的TLR4表达

目的观察HBV基因瞬时和稳定转染HepG2细胞后表达TLR4的变化。方法采用免疫荧光流式细胞术检测TLR4在肝癌细胞株HepG2和HepG2．2．15上表达的平均荧光强度（MFI）及阳性细胞率,将前期试验获得的HBV全基因组,采用脂质体瞬时转染肝癌细胞株HepG2,采用免疫荧光流式细胞术检测TLR4在细胞上表达的MFI及阳性细胞率,台盼蓝计数检测细胞增殖活性,并分析其与细胞表达TLR4的关系。结果HepG2．2．15细胞上TLR4表达的MFI及阳性细胞率均明显高于HepG2（均为P’〈0．01）,HepG2细胞于转染HBVDNA各剂量组48h后TLR4表达的MFI和阳性细胞率与无HBVDNA脂质体转染对照组相比均显著升高（均P’〈0．01）,并且MFI和阳性细胞率与转染剂量均呈正相关（均P〈0．01）,与细胞存活数均呈负相关（均尸〈0．01）。结论瞬时和稳定转染HBV的HepG2细胞,都存在细胞TLR4的上调,这种上调伴随着细胞存活的减少,并可能参与了急慢性乙型肝炎的免疫损伤。     

高糖刺激对HK-2细胞脂联素受体基因及蛋白表达的影响

目的 了解体外高糖刺激对肾小管上皮细胞（HK-2）脂联素受体（adipoR）表达的影响.方法 将HK-2细胞在含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液中培养至贴壁且80%融合时,无血清培养24 h,改用含葡萄糖1、2,4、6、8 mg/ml的培养液继续培养48 h,RT-PCR及westernblot检测ad-ipoR的表达.将HK-2细胞分别在含10%胎牛血清的高糖（4 mg/ml）、低糖（1 ms/ml）DMEM培养液中培养0、12、24、48、72、96 h后提取总RNA,RT-PCR检测adipoR mRNA的表达.结果 adipoR1/R2基因在HK-2细胞上均有表达,且adipoR1（0.63±0.12）基因表达量是adipoR2（0.16±0.03）的3.9倍,差异有统计学意义（P〈0.01）.各不同浓度葡萄糖及作用时间对HK-2细胞adipoR的基因表达无明显影响（P〉0.05）.westernblot检测到HK-2细胞上adipoR1的蛋白表达,其表达量不受葡萄糖浓度的影响（P〉0.05）.结论 adipoR1/R2基因在HK-2细胞上均有表达,且以adipoR1为主,提示adipoR1在肾脏疾病中具有更重要的意义.HK-2细胞adipoR的表达不受高糖的影响.     

寻常型银屑病T细胞CCR7表达的报告基因分析

目的 构建人外周血T细胞CCR7报告基因载体并初步验证IL-18对其作用的影响.方法 提取健康献血员全基因组DNA,克隆包含人CCR7上游启动子的基因序列,酶切、连接形成重组质粒后转化感受态细菌,酶切及测序后构建报告基因质粒,瞬时转染真核细胞COS,荧光素酶报告基因分析.结果 pGL3-basic报告基因质粒与空白对照相比可以检测到荧光素酶基因表达0.024±0.008;含有启动子基因的荧光素酶活性明显高于pGL3-basic(P＜0.01);IL-18作用后报告基因荧光素酶基因的表达明显增加比单独使用pGL3-2233或pGL3-1037质粒DNA转染COS时明显增加(P＜0.01).结论 成功构建包含有人CCR7启动子的报告基因载体,并且初步验证IL-18可以直接激活CCR7基因上游调控区的启动子,激活CCR7基因表达,从基因水平直接找到IL-18对CCR7表达调控的证据.     

共刺激分子CD86在急性髓性白血病细胞的表达及其临床意义

目的探讨共刺激分子CD80、CD86在急性髓性白血病细胞中的表达及其临床意义。方法采用细胞培养白血病细胞（HL60,U937,NB4及I（562）及流式细胞仪检测共刺激分子CD80、CD86在急性髓性白血病患者骨髓细胞中的表达及其在急性髓性白血病细胞HL-60细胞、U937细胞、NB4细胞和K562细胞的表达。结果CD80在急性髓性白血病骨髓细胞中的表达很低或不表达,CD86在急性髓性白血病骨髓细胞表达[（27．86±19．65）％]高于对照组[（1．21±0．13）％,t=3．55,P〈0．01]。其中CD86在M4型（48．65±21．92）％、M5型（39．25±18．67）％表达较高,但与对照组单核细胞表达（50．204-20．31）％比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。CD86在HL-60细胞、U937细胞和NB4细胞的培养24h后表达分别为（30．624-5．35）％、（24．12±5．23）％、（21．25±3．78）％,与培养48h后表达[（29．43±4．67）％、（26．564-6．54）％、（23．21±6．98）％]比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。CD80在HL一60细胞、U937细胞和NB4细胞的表达很低或不表达,K562细胞不表达共刺激分子CD80和CD86。结论CD86在HL-60细胞、U937细胞和NB4细胞和急性髓性白血病患者骨髓细胞中表达。     

胃癌组织中半胱氨酸蛋白酶-8的表达及临床意义

目的研究胃癌组织中半胱氨酸蛋白酶-8（Gaspase-8）的表达特点及其与临床病理学特征的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应法及免疫组化法检测54例胃癌及其癌周组织中Caspase．8mRNA及蛋白的表达。结果胃癌组织中Caspase-8mRNA表达明显低于癌周组织（0．154±0．065vs0．3944-0．107,t=14．04,P〈0．01）,与淋巴结转移、肿瘤分期、分化程度有关（P〈0．01）;胃癌组织中Caspase-8蛋白的阳性率也明显低于癌周组织（31．48％vs85．19％,X^2=32．04,P〈0．01）,与肿瘤分期、分化程度有关（P〈0．05）。结论胃癌组织中Caspase-8表达下调,可能与胃癌发生发展密切相关。     

多囊卵巢综合征患者增生期子宫内膜ER、PR含量变化的研究

目的探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者增生期子宫内膜ER、PR含量的变化,为治疗提供理论依据。方法选择PCOS不孕患者32例为实验组,选同期输卵管性不孕患者20例为对照组,在宫腔镜下取子宫内膜标本,行病理学检查,分析免疫组化检测子宫内膜增生早、中、晚期雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）在子宫内膜腺体和间质细胞的细胞核内的表达变化。结果PCOS组中腺体细胞和间质细胞ER和PR的表达在增生早、中、晚期组的免疫组化积分3组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。对照组中腺体细胞和间质细胞ER和PR的表达随月经周期子宫内膜增生而逐渐增加,差异均有统计学意义（P〈0．05）。增生早期,ER、PR在腺体细胞和间质细胞表达的免疫组化积分比较,2组差异均无统计学意义（P〉0．05）。但增生中期,ER在腺体细胞和间质细胞表达的免疫组化积分PCOS组均较对照组减少（P〈0．05）;增生晚期,ER、PR在腺体细胞和间质细胞表达的免疫组化积分PCOS组均较对照组减少（P〈0．05）。结论PCOS患者的ER、PR缺乏周期性改变;子宫内膜增生中期ER和增生晚期ER、PR含量减少。