特异性乙型肝炎病毒X基因反义核酸体外抗病毒作用

为了观察互补于乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因的三段硫代反义核酸（ＡＳＯＮ）体外抗病毒作用，采用ＥＬＩＳＡ和ＰＡＰ－ＥＬＩＳＡ法检测ＡＳＯＮ作用前后２，２，１５细胞上清中乙型肝炎病毒表面抗原、ｅ抗原及Ｘ抗原（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｘＡｇ）含量变化及细胞原位杂交检测细胞内ＨＢＶＤＮＡ含量变化。结果表明，三段ＡＳＯＮ均可抑制ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｘＡｇ的表达，其抑制率分别为８０．６５％、６２．７６％和７８．０７％；细胞内ＨＢＶＤＮＡ也明显减少。据此认为，ＨＢｘＡｇ表达量下降可能系ＡＳＯＮ序列特异性封闭作用所致，而ＨＢ－ｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ表达量以及ＨＢＶＤＮＡ含量降低，可能是通过ＨＢｘＡｇ对ＨＢＶＤＮＡ启动子的反式激活功能降低而实现的。     

干扰素对慢性乙型肝炎血清IL-1β、IL-6和TNF-α活性的临床研究

通过检测慢性乙型肝炎患者经干扰素的治疗前后血清ＩＬ－１β,ＩＬ－６和ＴＮＦ－α活性的变化规律,探索干扰素抗病毒作用的机制,用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ抗ＨＢｓ,抗ＨＢｃ,ＨＢｅＡｇ抗ＨＢｅ,用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＨＢＶ－ＤＮＡ,用双抗体夹心检测ＩＬ－１β,ＩＬ－６,ＴＮＦ－α。结果１．干扰素治疗组治疗后ＩＬ－１β,ＩＬ－６和ＴＮＦ－α均显著低于治疗前,而对照组则无明显差异。２．治疗组ＨＢｅＡ     

反义乙肝病毒S基因真核载体构建及体外抗乙肝病毒作用

目的：探讨反义ＲＮＡ抗乙肝病毒（ＨＢＶ）作用。方法：构建了正，反义ＨＢＶＳ基因重组ＥＢ病毒载体ｐＭＥＰ４ｓ，ｐＭＥＰ４Ｓａｓ，ＤＮＡ－磷酸钙共沉淀法将重组载体ＤＮＡ转染２．２．１５细胞，潮霉素筛选１个月得到抗性细胞克隆，ＥＬＩＳＡ，斑点杂交法分别检测抗性细胞上清ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇＨＢＶＤＮＡ水平，结果：转染后１，２月，反义载体ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ的抑制率分别达７５％，５１．６％，７０％，４６     

三螺旋形成寡核苷酸抑制乙型肝炎病毒复制及抗原合成的实验研究

目的 探讨三螺旋形成寡核苷酸抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用。方法 针对ＨＢＶ核心启动子ＳＰ１位点,合成２１ｍｅｒ硫代磷酸三螺旋形成寡核苷酸及２１ｍｅｒ无关对照寡核苷酸。采用ＬＥＩＳＡ,斑点杂交法分别检测了经寡核苷酸处理的ＨｅｐＧ２．２．１５细胞及空白对照组细胞培养上清ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶ ＤＮＡ水平。结果 ＴＦＯ２１组２．２．１５细胞ＨＢｓＡｇ及ＨＢＶ ＤＮＡ分泌量明显低于空白对照组。ＴＦ     

干扰素抗体与干扰素α-2a治疗慢性乙型肝炎疗效的关系

干扰素抗体与干扰素α－２ａ治疗慢性乙型肝炎疗效的关系许正锯王崇国李旭红杨红张启华附表慢性乙型肝炎抗－ＩＦＮ阳性与阴性对重组干扰素α－２ａ治疗后ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ转阴效果的比较（％）组别例数ＨＢｓＡｇ转阴ＨＢｅＡｇ转阴ＨＢｃＡｇ转阴治疗...     

PCR技术检测HBV DNA评价

目的 为评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＨＢＶ ＤＮＡ较之传统酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）的优越性,评价ＨＢｓＡｇ阴性消化科住院病人携带ＨＢＶ的状态,方法 我们使用ＰＣＲ技术检测了１１９例ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性的消化科住院病人的ＨＢＶ ＤＮＡ,并与１０３例ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性传染科住院肝炎病人相比较。结果：５２．１％的消化科住院病人ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｅ、抗－Ｈ     

慢性乙型肝炎干扰素疗法的适应证选择

目前用于慢性乙型肝炎抗病毒治疗的干扰素主要是ＩＦＮ α，其适应证基本只有一个，即ＨＢＶ复制活跃的活动性慢性乙型肝炎。 慢性乙型肝炎有经典型（ｃｌａｓｓｉｃａｌ）和异型（ａｔｙｐｉｃａｌ）之分。经典型的血清病毒学标志特征是血清Ｈ ＢｓＡ ｇ ＋、ＨＢｅＡｇ＋和抗－ＨＢｃ＋、血清ＨＢＶＤＮＡ十，由野生株ＨＢＶ感染所致，也称ＨＢｅＡｇ阳性慢性乙型肝炎；异型的血清病毒学标志特征是血清ＨＢＳＡｇ＋、抗ＨＢｅ＋和抗ＨＢｃ＋，血清ＨＢＶ ＤＮＡ＋，主要由前Ｃ基因变异株或Ｘ区Ｃ基因启动子变异株ＨＢＶ感染所致，也称抗－…     

抗HBsAg Fab片段和α-干扰素融合蛋白的克隆及表达

目的 为深入研究乙型肝炎的生物导向治疗，构建以人抗乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）抗本Ｆａｂ片段国导向作用，αＡ－干扰素（ＩＦＮ－αＡ）为治疗作用的融合蛋白Ｆａｂ／ＩＦＮ－αＡ原核表达载体ｐＨＳ／ＩＦＮ－αＡ。方法 用ＰＣＲ体外扩增目的基因ＩＦＮ－αＡ，并在其ＤＮＡ两端引入酶切点及５′端人工合成的Ｌｉｎｋｅｒ，重组人抗ＨＢｓＡｇ缺本Ｆａｂ片段功体ｐＨＳ相应酶切位点，酶切位点，酶切和ＤＮＡ测序鉴定筛选     

乙型肝炎病毒基因组S区编码产物的检测及临床意义

为了进一步明确 ＨＢＶ基因组 Ｓ区编码产物对乙型病毒性肝炎诊断的临床价值，用双抗体夹心 ＥＬＩＳＡ法检测 ９０份乙型病毒性肝炎患者血清标本ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ、Ｐｒｅ－Ｓ１和 Ｐｒｅ－Ｓ２，并与 ＨＢＶＭ及 ＨＢＶＤＮＡ ＰＣＲ进行对比分析。结果以抗 ＨＢｃ、ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ、ＨＢＶＤＮＡ（ＰＣＲ）及 Ｐｒｅ－Ｓ２的阳性检出率为最高，分别为８７．８％、７３．３％、７２．２％和６４．４％，以ＨＢＶＤＮＡ作为ＨＢＶ感染的金标准，无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；其中ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ与 ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ的符合率最高，分别为 ７６．７ ％和 ７４．７ ％；ＭＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ与 ＨＢＶＤＮＡ具有高度相关性。ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ做为早期诊断ＨＢＶ感染及判断是否具有传染性方面，是一项非常重要的血清学指标，Ｐｒｅ－Ｓ２也可作为ＨＢＶ复制活跃的标志之一，用于急慢性肝炎的预后判断．     

血清HBeAg阴性与HBeAg/IC及A1896变异的关系

目的探讨血清ＨＢｅＡｇ阴性（双抗体夹心法）与ＨＢｅＡｇ／ＩＣ形成及ＨＢＶ变异株Ａ１８９６的关系，评价ＨＢｅＡｇ／ＩＣ检测的临床意义．方法单克隆抗ＨＢｅ固相ＥＬＩＳＡ检测血清中ＨＢｅＡｇ／ＩＣ；套式多聚酶链反应检测ＨＢＶＤＮＡ；３＇碱基特异多聚酶链反应判断Ａ１８９６变异；ＥＬＩＳＡ检测ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ，研究对象为１１７例慢性ＨＢＶ感染者，２０例健康对照统计处理采用卡方检验．结果ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ检出率明显高于ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性血清，Ｐ＜０００１（９１３％ｖｓ３６２％）；２９份ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性血清中仅５例（１７２％）检出Ａ１８９６，而且其中２例与野毒株（Ｇ１８９６）混合感染并伴ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性．２９份中１７份（５８７％）为ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性的Ｇ１８９６感染；血清抗ＨＢｅ阳性组Ａ１８９６检出率高于抗ＨＢｅ阴性组，Ｐ＜００５（２５％ｖｓ３２％）．结论ＨＢｅＡｇ／ＩＣ为ＨＢＶ活跃复制指标；临床ＨＢｅＡｇ阴性、ＨＢＶＤＮＡ阳性患者仍多数为Ｇ１８９６感染，ＨＢｅＡｇ／ＩＣ形致双抗体夹心法不能检出ＨＢｅＡｇ；抗ＨＢｅ应答可能为促使前Ｃ变异的重要因素     

用PCR技术检测HBV－DNA的临床意义

用ＰＣＲ技术对３２３例肝病患者和５０例健康献血员血清进行ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，同时用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢＶＭ。结果：５０例健康献血员有８％ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，表明ＨＢＶ－ＤＮＡ单项阳性的携带者对于乙肝的传播具有很大的危险性；ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｃ阳性者ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为８８．７％，说明ＨＢＶ－ＤＮＡ与ＨＢｅＡｇ阳性呈正相关；抗ＨＢｅ阳性的慢性肝病患者有４３．６８％ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，提示不能把抗ＨＢｅ作为无传染性的指标。     

国产精制人白细胞α－干扰素体外抗－HBV活性的测定

本研究利用ＨＢＶ体外细胞培养系统（２．２．１５细胞株），观察了国产精制人白细胞α－干扰素的体外抗－ＨＢＶ活性。结果显示：当精制人白细胞α－干扰素达到５Ｘ１０３单位／毫升时，能够明显降低２．２．１５细胞内及细胞培养上清中ＨＢＶＤＮＡ的含量，提示其能够抑制ＨＢＶ复制，具有一定体外抗．ＨＢＶ活性，可以在临床推广使用。但国产精制人白细胞α－干扰素对２．２．１５细胞分泌ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ未见明显抑制作用，其机理尚待进一步研究。     

HBV DNA含量及干扰素抗体对抗乙型肝炎病毒疗效的影响

抗病毒治疗是对乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染者的病因治疗 ,α干扰素 (ＩＦＮα)是目前疗效较肯定的药物。患者体内ＨＢＶＤＮＡ水平对治疗效果有影响 ;患者体内干扰素抗体 ,特别是抗体类型和出现的时间也可影响治疗效果。我们测定 38例慢性乙型肝炎 (ＣＢＨ )患者治疗前后血清干扰素抗体 (抗 ＩＦＮ )和ＨＢＶＤＮＡ水平 ,并观察抗病毒效果 ,初步探讨其中的关系及意义。对象与方法一、病例选择及治疗方案患者 38例 ,血清ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｃ和ＨＢＶＤＮＡ均阳性。诊断按 1995年北京第 5次全国传染病和寄生虫学术会议标准。…     

不同修饰的左氧氟沙星体外抗乙型肝炎病毒的作用及其作用机理的 …

本文用２．２．１５细胞研究不同修饰的左氧氟沙星体外抗乙型肝炎病毒的作用及其作用机理。方法以ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及细胞存尖率为观察指标，综合评价不同修饰的左氧氟沙星体外抗ＨＢＶ效果，进一步用荧光定量ＰＣＲ方法测细胞内ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＢＶＲＮＡ及细胞上清ＨＢＶ ＤＮＡ的拷贝数，推测药物体外抗乙型肝炎病毒的作用机理。结果 结果提示磺酸左氧氟沙星对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的ＩＤ５０分别为６３．１ｇ／ｍ     

HBV感染者血清HBeAg/IC和HBV DNA间的关系

资料与方法：ＨＢＶ感染者１１７例,正常对照２０例,研究对象排除其它肝炎病毒感染,半年内未经抗病毒及免疫治疗。采用ＥＬＩＳＡ及Ｎａｓｔｅｄ－ＰＣＲ方法分别检测ＨＢＶ感染者血清中ＨＢｅＡｇ／免疫复合物（ＩＣ）和ＨＢＶ ＤＮＡ。 结果：１１７例ＨＢＶ感染者血清中共检出ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性２３例,ＨＢＶＤＮＡ阳性 ５５例, ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阳性者中 ＨＢＶＤＮＡ阳性率为９１．３％（２１／２３例）,而ＨＢｅＡｇ／ＩＣ阴性的９４例中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性３４例,阳性率为３６．２％,两组差异有非常显著性,ｘ２＝８．１５…     

HBV—DNA在各型乙肝中的分布规律探讨

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测乙肝患者的血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，商时用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢＶ各抗原抗体指标。结果显示，９０４例乙肝患者的ＨＢｅＡｇ阳性率为３７．９％，而ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率达６８．８％，血清ＨＢＶＤ－ＮＡ阳性率明显高于ＨＢｅＡｇ（Ｐ〈０．０５）。在ＨＢｅＡｇ阴性病例中，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率达５４．４％，其中有活动性肝病者阳性率为７２．３％，肝病静止期仅１９．９％，差异极显著（Ｐ〈０     

干扰素α的抗病毒作用机理

干扰素α（ＩＦＮα）治疗慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）的目的是持久清除血液中的病毒复制标志物。但是ＩＦＮα治疗后的ＨＢｓＡｇ转阴率低,而ＨＢｓＡｇ的清除表示乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）携带状态的结束。因此,当前抗病毒治疗的终点只能抑制ＨＢＶ复制而缓解炎症活动,对病毒复制模板无作用,停药后可再度复制,对整合病毒无作用,较难清除ＨＢｓＡｇ。１　干扰素抗病毒的机理ＩＦＮα的抗病毒作用包括抗病毒和免疫调节两个方面。其一,ＩＦＮα抗病毒活性,ＩＦＮα与效应细胞膜上ＩＦＮα受体结合,通过ＩＦＮα受体将信号转导至细胞内,激…     

α-干扰素治疗乙型肝炎病毒前C/C基因突变株感染的疗效

血清ＨＢｅＡｇ阴性、抗ＨＢｅ和ＨＢＶＤＮＡ阳性的肝炎被认为与ＨＢＶ前Ｃ／Ｃ（ｐｒｅＣ／Ｃ）基因突变株感染有关。患者多表现为重型或持续反复发作型肝炎,病程进展快,对α－干扰素（α－ＩＦＮ）治疗反应差。系统复习文献后提示,α－ＩＦＮ治疗ＨＢＶｐｒｅＣ／Ｃ...     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的临床意义

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ法对２７３７例乙肝患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和乙肝病毒标志物进行检测，结果发现各组ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率：①ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为９９．２７％；②ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｅ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４４．７７％；③ＨＢｓＡｇ（＋）和抗ＨＢｃ（＋）组为４２．８６％；④ＨＢＶ标志物均阴性为１５．９２％。结果表明ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ检出先于其它乙肝病毒标志物，可早期发现乙肝。ＰＣＲ法直接检测ＨＢＶ－ＤＮＡ更有利于临床对乙肝的诊断和治疗。     

感染乙型肝炎病毒MT2淋巴细胞表达Fas

目的：观测Ｔ淋巴细胞－ＭＴ２细胞对乙型肝炎病毒感染的敏感性，了解病毒感染对淋巴细胞表达Ｆａｓ的影响。方法：体外培养ＭＴ２细胞，用ＨＢＶ ＤＮＡ阳性血清直接感染，用酶联免疫和斑点杂交，ＰＣＲ法检测感染后的细胞病毒复制与表达状况，用酶联免疫法检测了Ｆａｓ抗原表达。结果：ＭＴ２细胞于阳性血清感染后第八天可测到ＨＢｅＡｇ，ＨＢｓＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ同时出现Ｆａｓ表达信号，结论：ＭＴ２细胞对ＨＢＶ易感，ＨＢＶ