熟地黄多糖对血虚模型小鼠的影响

目的 :观察熟地黄多糖 (RGP)对模型小鼠外周血象、骨髓造血干细胞、骨髓有核细胞的影响。方法 :各组小鼠连续灌胃 8～ 9d ,腹腔注射环磷酰胺 (CY)致化学损伤血虚模型 ,取全血测外周血象、骨髓有核细胞计数 ;各组小鼠尾静脉注射同种供体小鼠骨髓细胞悬液 ,取脾脏固定 ,观察外源性脾结节形成 ,各组小鼠以⁶⁰Coγ全身照射7.25Gy ,取脾脏观察内源性脾结节形成 ;各组小鼠⁶⁰Coγ全身照射 7.5Gy ,复制出放射性损伤模型 ,测外周血象和骨髓有核细胞数量。结果 :RGP各组对CY血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 ,与模型组比较 ,有显著差异。对小鼠脾结节的形成有明显的促进作用 (P<005,P<001) ,对于小鼠外周血象的放射性损伤 ,RGP高剂量组可明显抑制小鼠全血细胞减少 (P<005) ,RGP低剂量组虽可提高损伤小鼠血细胞数量 ,但无统计学意义。结论 :熟地黄多糖对于不同血虚模型小鼠外周血象、骨髓有核细胞下降均有拮抗作用 ,对小鼠造血干细胞具有促进增殖、分化作用。     

黄花倒水莲对辐射损伤小鼠防护作用的研究

目的: 初步探讨黄花倒水莲提取物对小鼠辐射损伤的防护作用。方法: 以辐射损伤小鼠作为研究对象,分别以黄花倒水莲提取物2,4,8 g·kg^-1·d^-1灌胃,阴性对照组、辐射模型组给予等量生理盐水。灌胃5 d后,除阴性对照组外各组小鼠接受6 Gy的⁶⁰Co γ射线一次性全身均匀照射,然后再继续灌胃10 d,最后1次灌胃24 h后,检测各组小鼠外周血中红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、淋巴细胞数(Lymph),计算脾指数和胸腺指数,用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠脾细胞、骨髓细胞的DNA损伤。结果: 与阴性对照组比,辐射模型组、黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显减少(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的尾部DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail Moment)明显增大(P<0.01或P<0.05);但与辐射模型组比, 黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显增加(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的Tail DNA%和Tail Moment明显减少(P<0.01),存在剂量-反应关系。结论: 黄花倒水莲提取物对辐射所致小鼠造血系统和免疫器官损伤有一定的防护作用。     

四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用机理。用⁶⁰Coγ射线全身照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34⁺细胞在骨髓有核细胞中的比例;细胞固定后PI染色测定细胞周期;Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡。结果:四物汤对小鼠骨髓造血干祖细胞、外周血细胞的恢复有明显促进作用;有保护骨髓和促进骨髓细胞由G₁期进入S期的效应;四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡;促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一     

猫眼草水提物对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及机制探讨

目的:探讨中药猫眼草对小鼠Lewis肺癌的生长抑制、免疫调节、血液系统、细胞周期的影响,并对其抗癌作用机制进行探讨。方法:选择C₅₇BL/6小鼠移植性Lewis肺癌为实验模型进行试验,观察猫眼草对肺癌的抑制、免疫调节以及对小鼠血细胞的影响,同时采用流式细胞仪检测瘤组织的细胞周期、凋亡率,应用TUNEL法观察猫眼草对肺癌细胞凋亡的影响。结果:①猫眼草7.5,15,30,60 g.kg^-1组抑瘤率分别为0.61%,16.93%,32.81%和58.26%,与模型组相比30,60 g.kg^-1组有显著性差异(P<0.05)。②猫眼草各组对荷瘤小鼠胸腺指数无明显影响,60 g.kg^-1组可显著降低荷瘤小鼠脾指数(P<0.05)。③猫眼草各组对荷瘤小鼠血液系统无影响。④流式细胞仪检测猫眼草30,60 g.kg^-1组可使Lewis肺癌组织肿瘤细胞S期细胞比例增高,凋亡率分别为(16.43±18.69)%,(24.37±15.48)%,与模型组相比有显著性差异(P<0.05)。⑤TUNEL法测定猫眼草30,60 g.kg^-1组的凋亡指数(AI)分别为(4.00±7.15)%,(5.93±5.96)%;60 g.kg^-1与模型组相比有显著性差异,有明显诱导细胞凋亡的作用(P<0.01)。结论:猫眼草可抑制Lewis肺癌生长,对小鼠血液系统无明显毒副作用,其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关。     

卷柏有效部位对辐射损伤小鼠的保护作用

目的 观察卷柏有效部位对60Co-γ射线所致小鼠辐射损伤的防护作用.方法 设正常组、模型组、雌激素组和卷柏组;除正常组外,其他各组小鼠均接受6.0 Gy60Co-γ射线全身照射1次;各组小鼠分别于照射前72、48、24 h和照射后即刻ig药物或蒸馏水;照射后6、12、24 h立即分批断头处死小鼠,观察卷柏有效部位对辐照小鼠胸腺、脾脏指数及胸腺、脾脏和骨髓细胞凋亡率的影响.结果 辐射损伤后,受照射小鼠的胸腺、脾脏指数明显下降,胸腺、脾脏和骨髓细胞凋亡率明显升高;卷柏有效部位可促进受照射小鼠胸腺脾脏指数的恢复,并明显降低其胸腺、脾脏和骨髓的细胞凋亡率.结论 卷柏有效部位对60Co-γ射线所致小鼠辐射损伤有一定的防护作用.     

模拟失重和辐射对大鼠脾T细胞和胸腺的影响及中药太空燮理汤的作用

目的:观察模拟失重和辐射对大鼠脾脏T淋巴细胞功能和胸腺细胞凋亡的影响,及中药太空燮理汤的调节作用。方法:大鼠随机分为正常对照、悬吊、悬吊加辐射、中药共4组。后3组大鼠头低位-30度尾部悬吊连续16d,其中悬吊加辐射组和中药组大鼠于悬吊第8天接受单次总量为4.5Gy的⁶⁰Co-γ射线照射,中药组大鼠从实验第1天开始按7g·kg^-1.d^-1给予中药太空燮理汤灌胃,其余各组大鼠灌服等容积的生理盐水。实验第16天处杀各组大鼠,采用MTT比色法、放免法检测脾T淋巴细胞增殖率和分泌IL-2水平,利用流式细胞仪检测胸腺细胞凋亡。结果:较之正常对照组,悬吊组和悬吊加辐射组大鼠脾淋巴细胞增殖率和分泌IL-2水平显著降低(P<0.01),胸腺细胞凋亡率显著升高(P<0.05);悬吊组和悬吊加辐射组之间无显著差异(P>0.05);较之于悬吊加辐射组,中药组大鼠脾淋巴细胞增殖率显著增加(P<0.05),T淋巴细胞分泌IL-2水平呈增加趋势(P>0.05),胸腺细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:单纯失重和失重加辐射均可引起机体淋巴细胞功能降低,太空燮理汤对失重加辐射条件下的机体免疫功能具有调节作用。     

芪蛎消瘿汤对NOD.H-2h4小鼠甲状腺CD4+T细胞亚群影响的实验研究

目的：从CD4⁺T细胞亚群角度,探讨芪蛎消瘿汤治疗自身免疫甲状腺炎（AIT）的作用机制。方法：60只SPF级NOD.H-2^h4小鼠,随机分成以下4组：正常（NC）组、模型（MC）组、常规剂量芪蛎消瘿汤组（ZY1,20.8 g·kg^-1）、和3倍剂量芪蛎消瘿汤组（ZY3,62.4 g·kg^-1）,正常组饲以双蒸水,其余各组自由饮用含0.05%碘化钠水8周,8周后自发形成AIT动物模型,再给处理因素8周后处死小鼠,留取各组NOD.H-2^h4小鼠血清、甲状腺。放免法（RIA法）测小鼠血清总三碘甲状腺原氨酸（TT3）、总甲状腺素（TT4）,固相化学发光酶免疫法（IRMA法）测定小鼠血清促甲状腺激素（TSH）;光镜下观察甲状腺细胞形态;免疫组化法测定小鼠甲状腺γ-干扰素（INF-γ）、白细胞介素-4（IL-4）蛋白表达;RT-PCR法检测小鼠甲状腺INF-γ,IL-4 mRNA表达;Western blot法测定小鼠甲状腺组织叉头翼状螺旋转录因子（Foxp3）蛋白表达。结果：各组间血清TT3,TT4及TSH值比较无明显差异。HE染色显示MC组甲状腺组织淋巴细胞浸润,MC组AIT的发生率明显高于NC组（P<0.01）。MC组INF-γ,IL-4 mRNA及蛋白表达较NC组显著下降（P<0.01）;与MC组比较,ZY1,ZY3组INF-γ,IL-4的蛋白表达升高（分别P<0.01,P<0.05）;且ZY1组,ZY3组INF-γ,IL-4mRNA表达显著升高（P<0.01）。MC组甲状腺组织Foxp3的蛋白表达量较NC组明显下降（P<0.01）;ZY1,ZY3组Foxp3表达较MC组明显升高（P<0.01）。结论：芪蛎消瘿汤治疗AIT的机制可能与上调INF-γ,IL-4,Foxp3的表达,影响NOD.H-2^h4小鼠Th1,Th2,Treg细胞亚群水平相关。     

三氧化二砷对MRL/lpr小鼠CD4+T细胞增殖和IFN-γ、IL-4分泌的调节作用

 目的探讨三氧化二砷(ATO)对MRL/lpr狼疮小鼠脾脏CD4^+T细胞增殖以及IFN-γ和IL-4转录和翻译水平的影响。方法免疫磁珠分别分选15只MRL/lpr狼疮小鼠和15只C57BL正常对照小鼠脾脏CD4⁺T细胞,进而将CD4⁺T细胞随机分为空白组(RPMI1640),对照组(PHA20mg·L^-1+IL-21000u·mL^-1),ATO组[PHA20mg·L^-1+IL-21000u·mL^-1(48h)后+ATO1.0μmol·L^-1],体外共培养至72h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测3组CD4⁺T细胞的增殖和抑制水平;酶联免疫吸附反应(ELISA)检测上清液中IFN-γ和IL-4水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测上述细胞因子基因的转录水平。结果①分选后获得的CD4⁺T细胞纯度为(94.12±1.08)%,细胞存活率为(95.82±3.41)%;②MRL/lpr小鼠对照组CD4⁺T细胞的增殖水平(A值)(0.343±0.019)较空白组(0.054±0.008)高(P<0.001);却低于C57BL小鼠对照组的水平(0.375±0.018)(P<0.05);③MRL/lpr和C57BL小鼠ATO组CD4⁺T细胞增殖水平(A值)分别为(0.324±0.013)和(0.362±0.013),均低于对照组(P<0.05,P<0.05);④MRL/lpr小鼠对照组IFN-γ的表达水平[(562.287±60.345)ng·L^-1]明显高于C57BL小鼠对照组[(253.208±59.434)ng·L^-1](P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γ的抑制程度大于C57BL小鼠(P<0.05);MRL/lpr小鼠对照组的IL-4表达水平[(41.332±8.039)ng·L^-1]与ATO组[(23.046±3.253)ng·L^-1]和C57BL小鼠对照组[(29.303±8.038)ng·L^-1]比较,也具有明显的统计学差异(P<0.05和P<0.05);ATO对MRL/lpr小鼠IL-4的抑制程度高于C57BL小鼠(P<0.05);⑤在转录水平上,与C57BL小鼠相比,ATO对MRL/lpr小鼠IFN-γmRNA和IL-4mRNA的抑制程度更加明显(P<0.05和P<0.05);ATO对IFN-γ和IL-4表达水平的抑制和转录水平的抑制正相关,r=0.720(P<0.001)和r=0.557(P<0.01)。结论MRL/lpr小鼠存在CD4⁺T细胞的异常增殖,ATO能在不影响细胞存活率的浓度下抑制MRL/lpr小鼠CD4⁺T细胞的异常增殖活化,通过抑制其细胞因子IFN-γ和IL-4的mRNA分泌影响两者的表达,且对MRL/lpr小鼠抑制程度大于C57BL小鼠,表明ATO能抑制狼疮鼠的异常免疫功能,可进一步用于SLE的治疗。     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对60Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用

目的 以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路为靶点,探讨左归丸对⁶⁰Co-γ射线早衰大鼠的保护作用。方法 采用⁶⁰Co-γ射线一次性照射（6.0 Gy,LD₄₀）性成熟雌性SD大鼠60只,随机分成模型组、补佳乐组（0.18 g·kg^-1·d^-1）、补佳乐（0.09 g·kg^-1·d^-1）+左归丸高剂量（23.625 g·kg^-1·d^-1）组、左归丸高剂量（23.625 g·kg^-1·d^-1）组、左归丸中剂量（9.45 g·kg^-1·d^-1）组和左归丸低剂量（4.725 g·kg^-1·d^-1）组,每日1次,治疗21 d,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清［卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和雌二醇（E₂）］,苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢的组织形态变化,原位末端标记法（TUNEL）检测颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织磷酸化（p）-PI3K、p-Akt、p-mTOR和B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白表达结果。结果 与正常组比较,模型组大鼠血清FSH显著上升（P<0.01）,E₂明显下降（P<0.05）,卵巢早期卵泡和黄体数量减少（P<0.01）;颗粒细胞凋亡率显著增加（P<0.01）;卵巢组织p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达显著增加（P<0.01）;与模型组比较,各给药组干预后卵巢内早期卵泡数量增加,颗粒细胞凋亡率降低,p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达有增加趋势,Bax蛋白表达有下降趋势,尤以补佳乐+左归丸高剂量组差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 左归丸对辐射损伤卵巢的保护作用机制可能是通过活化卵巢组织PI3K/Akt/mTOR蛋白表达,增加Bcl-2蛋白量和抑制Bax蛋白表达。     

小鼠非清髓单倍体造血干细胞移植物中脾细胞对植入及移植物抗宿主病的影响

目的: 采用小鼠非清髓单倍体造血干细胞移植移植物抗宿主病(GVHD)模型,将单倍体相合供鼠的骨髓细胞和脾细胞混合移植给受鼠,探讨脾细胞数量对嵌合体形成及GVHD的影响。 方法: 30只受鼠CB6F1(H2Kd/b)分为A,B,C组,均接受⁶⁰Co 4Gy全身照射,实验组4~6 h后混合输入供鼠C57BL/6(H2Kb)脾细胞(依组次分别输注1×10⁷,3×10⁷,6×10⁷个)和骨髓细胞(1×10⁷个)。测定受鼠嵌合体水平,观察各组GVHD临床表现,进行评分,并观察生存期。 结果: A及B组移植后3周达完全供者植入,C组于移植后2周达完全供者植入。A组小鼠未观察到GVHD表现,B组小鼠全部出现GVHD,其中部分小鼠有严重GVHD,C组小鼠均出现严重GVHD。各组小鼠临床GVHD评分有显著差异(各组间 P <0.01),且C组＞B组＞A组。移植后全部存活超过90 d。 结论: 增加小鼠单倍体造血干细胞移植物中脾细胞数量,有利于促进尽早形成完全供者嵌合体,但同时增加GVHD发生的可能性及严重程度。     

麋鹿角醇提液对正常小鼠IL-2和IFN-γ的影响

目的：观察麋鹿角醇提液对正常小鼠细胞因子白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的影响。方法：30只ICR小鼠随机分成3组：正常组、麋鹿角醇提液低剂量组(2 g·kg^-1·d^-1)、高剂量组(4 g·kg^-1·d^-1),灌胃给药,连续7 d。采用ELISA法检测血清中细胞因子IL-2,IFN-γ的浓度,RT-PCR法检测脾淋巴细胞IL-2,IFN-γ mRNA的表达。结果：麋鹿角醇提液高剂量组小鼠血清中IL-2和IFN-γ的浓度升高,脾淋巴细胞IL-2,IFN-γ mRNA的表达增强。结论：麋鹿角醇提液能促进正常小鼠细胞因子IL-2,IFN-γ的分泌与表达,增强其细胞免疫功能。     

淡豆豉异黄酮通过PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路改善动脉粥样硬化小鼠脂质代谢的作用

目的 通过卵巢切除结合高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化小鼠模型，观察淡豆豉异黄酮（ISSP）对小鼠脂质代谢的影响，并从调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ/肝X受体α/腺苷三磷酸结合盒转运体A1（PPARγ/LXRα/ABCA1）信号通路的角度进一步探讨其作用机制。方法 将50只载脂蛋白E敲除（ApoE^-/-）小鼠随机分为模型组、西药组（阿托伐他汀钙，3.03 mg·kg^-1）、中药低、中、高剂量组（淡豆豉异黄酮，2.5、5、10 mg·kg^-1），每组10只，以手术切除双侧卵巢同时喂食高脂饲料的方法制备动脉粥样硬化模型小鼠，另取10只ApoE^-/-小鼠，以手术切除卵巢旁脂肪同时喂食高脂饲料的方法作为假手术组，其中部分小鼠因术后感染死亡，最终确定每组为6只小鼠，术后1周开始各组灌胃相应药物或等量生理盐水。12周后检测血清及肝脏组织中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、游离脂肪酸（NEFA）的含量；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的含量；苏木素-伊红（HE）及油红O染色观察主动脉斑块形成及肝脏脂质沉积情况；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、ABCG1 mRNA及蛋白表达。结果 与假手术组比较，模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α及IL-6含量显著升高（P<0.01），HDL-C水平显著降低（P<0.01）；肝脏指数明显升高（P<0.05），肝脏脂肪空泡明显，脂质沉积显著，肝脏中TC、TG、NEFA含量显著增多（P<0.01）；肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA表达明显降低（P<0.05，P<0.01），ABCG1 mRNA及蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，服用阿托伐他汀钙和淡豆豉异黄酮中、高剂量组可使小鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α和IL-6含量显著降低（P<0.01），HDL-C水平显著降低（P<0.01）；肝脏指数显著降低（P<0.01），肝脏脂肪空泡及脂质沉积显著减少，肝脏中TC、TG、NEFA含量明显增多（P<0.05，P<0.01）；肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA及蛋白表达明显上调（P<0.05，P<0.01）。结论 淡豆豉异黄酮可能通过PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路调节脂质代谢，减少血清炎症表达及肝脏脂质沉积从而改善动脉粥样斑块的形成。     

龙胆苦苷通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路减轻小鼠急性肝损伤的作用

目的 探究龙胆苦苷（GPS）对四氯化碳（CCl₄）诱导的急性肝损伤小鼠模型是否有保肝疗效及其对Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的影响。方法 将60只小鼠随机分为6组,每组10只,分别为正常组、模型组、水飞蓟素（150 mg·kg^-1）组及GPS高、中、低剂量组（200,100,50 mg·kg^-1）。给药组的小鼠按10 mL·kg^-1灌胃处理,正常组和模型组灌胃相同量的蒸馏水,每天1次,连续灌胃给药10 d后,除正常组腹腔注射花生油（10 mL·kg^-1）,其余各组腹腔注射0.12% CCl₄花生油（10 mL·kg^-1）溶液建立小鼠急性肝损伤模型。腹腔注射后禁食16 h,摘除小鼠眼球取血,收集肝脏组织。苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织病理学改变。生化法检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,总胆红素（TBIL）,碱性磷酸酶（ALP）,总超氧化物歧化酶（T-SOD）,γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）的水平,肝组织中丙二醛（MDA）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠肝脏组织中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）含量。蛋白免疫印迹法（Western blot）测定肝脏组织中TLR4,MyD88,NF-κB蛋白表达情况;免疫组化检测磷酸化NF-κB（p-NF-κB）的表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠的ALT,AST,ALP,TBIL,γ-GT及MDA水平显著升高（P<0.01）,T-SOD,GSH-Px活性显著降低（P<0.01）;与模型组比较,GPS中、高剂量组小鼠的ALT,AST,ALP,TBIL,γ-GT及MDA水平降低（P<0.05,P<0.01）,T-SOD、GSH-Px活性明显上升（P<0.05,P<0.01）;与正常组比较,模型组小鼠肝组织中TNF-α,IL-1β,IL-6含量显著升高（P<0.01）,TLR4,MyD88,p-NF-κB蛋白表达显著上升（P<0.01）;与模型组比较,GPS中、高剂量组小鼠肝组织中TNF-α,IL-1β,IL-6含量明显降低（P<0.05,P<0.01）,TLR4,MyD88,p-NF-κB蛋白表达明显下调（P<0.05,P<0.01）。结论 GPS对CCl₄引起的急性肝损伤小鼠具有一定的保肝效果,其作用机制可能与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及减弱氧化应激反应相关。     

潜阳育阴颗粒调控NR3C2/ROS/ERK信号通路抑制醛固酮诱导足细胞损伤的机制

目的 探讨潜阳育阴颗粒对醛固酮干预的小鼠足细胞的保护机制。方法 将30只C57BL/6J小鼠随机分为5组：正常组、模型组、潜阳育阴颗粒低、高剂量组、螺内酯组,每组6只;除正常组外其余小鼠均植入微型渗透泵持续注入醛固酮（300 μg·kg^-1·d^-1）,诱导小鼠肾损伤,造模后给药组分别给予潜阳育阴颗粒低剂量、高剂量（2.6、5.2 g·kg^-1·d^-1）,螺内酯（18 mg·kg^-1·d^-1）连续干预28 d。苏木素-伊红（HE）染色及马松（Masson）染色观察小鼠肾脏病理改变;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠肾脏组织足细胞裂孔膜结构蛋白Nephrin、足细胞丝结蛋白Desmin、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）、剪切的胱天蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）、核受体亚家族3C组成员2（NR3C2）、细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）的表达水平;原位末端标记法（TUNEL）染色观察小鼠肾脏组织的凋亡水平;检测小鼠肾脏组织超氧化物歧化酶（SOD）水平;体外研究分为5组：正常组、模型组（醛固酮浓度200 nmol·L^-1）、潜阳育阴颗粒低、中、高质量浓度组（25、50、100 mg·L^-1）。细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同浓度潜阳育阴颗粒对醛固酮诱导的足细胞相对活力的影响;Western blot检测足细胞中Nephrin、Desmin、Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、NR3C2、p-ERK/ERK表达水平;流式细胞术结合异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙啶（PI）检测足细胞的凋亡水平;2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法（DCFH-DA）观察足细胞的活性氧（ROS）水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠肾脏结构病变、出现纤维化情况,凋亡程度升高（P<0.01）,SOD水平显著下降（P<0.01）;醛固酮浓度在200 nmol·L^-1时足细胞活性明显下降（P<0.05）,模型组足细胞形态病变、细胞间微丝结构排列错乱,凋亡水平升高（P<0.01）,细胞内ROS水平显著升高（P<0.01）,小鼠肾脏组织及足细胞中Nephrin、Bcl-2、p-ERK/ERK蛋白表达明显下降（P<0.05,P<0.01）,Desmin、Bax、cleaved Caspase-3、NR3C2蛋白表达明显上升（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,潜阳育阴颗粒各剂量改善小鼠肾脏结构损伤和纤维化情况,减轻小鼠肾脏凋亡水平（P<0.05,P<0.01）,提高肾脏SOD含量（P<0.05,P<0.001）,改善足细胞活性（P<0.05,P<0.01）,恢复足细胞足突结构,改善足细胞凋亡（P<0.01）,下调足细胞ROS水平（P<0.01）,上调小鼠肾脏组织和足细胞中Nephrin、Bcl-2、p-ERK/ERK蛋白表达（P<0.05,P<0.01）,下调Desmin、Bax、cleaved Caspase-3、NR3C2蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 潜阳育阴颗粒通过调节NR3C2/ROS/ERK信号通路改善醛固酮诱导的小鼠足细胞损伤。     

酸枣仁汤通过抑制神经炎症和改善神经营养水平促进APP/PS1痴呆小鼠海马神经发生＊

目的 观察酸枣仁汤对APP/PS1痴呆小鼠海马促炎性因子和神经营养因子的影响，并探讨其改善神经发生的可能机制。方法 32只APP/PS1小鼠随机分为模型组（Model，20 mL·kg^-1）、多奈哌齐组（Donepezil，0.92 mg·kg^-1）、酸枣仁汤低剂量组（L-SZRD，12.96 g·kg^-1）和酸枣仁汤高剂量组（H-SZRD， 25.92 g·kg^-1），8只相同月龄和相同品系的C57BL/6JNju小鼠设为空白组（Control，20 mL·kg^-1）。灌胃30天后，采用HE染色观察小鼠海马病理形态变化，采用免疫荧光（IF）对小鼠海马中5-溴脱氧尿苷（BrdU）、肾上腺皮质激素（DCX）、神经元核抗原（NeuN）进行标记，采用免疫印迹（Western blot）检测各组小鼠海马中肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素6（Interleukin-6，IL-6）、c-fos、表皮细胞生长因子（Epidermal growth factor，EGF）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）、脑源性神经营养因子（Brain derived neurotrophic factor，BDNF）的蛋白表达水平。结果 Control组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列整齐，细胞染色均匀，细胞数量较多且细胞连接紧密。Model组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列欠整齐，细胞核固缩明显，细胞数量明显减少。Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列稍整齐，细胞核固缩减少，细胞数量有所增加。与Control组比较，Model组小鼠海马DG区BrdU、DCX、NeuN标记的阳性细胞数明显减少（P < 0.01），与Model组比较，Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马DG区BrdU、DCX、NeuN标记的阳性细胞数增加（P < 0.01，P < 0.05）。与Control组比较，Model组小鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、c-fos的蛋白表达水平明显升高（P < 0.01），而EGF、VEGF、BDNF的蛋白表达水平明显下降（P < 0.01），与Model组比较，Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、c-fos的蛋白表达水平降低（P < 0.01，P < 0.05），而EGF、VEGF、BDNF的蛋白表达水平升高（P < 0.01，P < 0.05）。结论 酸枣仁汤可通过抑制神经炎症和改善神经营养促进APP/PS1痴呆小鼠海马神经发生。     

通心络对高脂饮食诱导内质网应激致小鼠血管内皮细胞凋亡的保护作用＊

目的 探讨通心络（TXL）对高脂喂养小鼠肥胖模型内质网应激（ERs）相关蛋白的调节及细胞凋亡的干预作用。方法 将5-6周龄C57BL/6J小鼠随机分为低脂对照组（LFD + CMC）、模型组（HFD + CMC）和通心络组（HFD + TXL），18周后检测小鼠体重和血脂水平。制备小鼠离体肠系膜动脉血管环，进行血管张力测试，比较各组血管张力的变化。RT-PCR检测小鼠肠系膜动脉内质网应激相关因子GRP78、PERK、CHOP及凋亡相关因子Bax、Bcl-2 mRNA表达；用同型半胱氨酸（Hcy）建立细胞损伤模型，将HUVEC分为正常对照组（control group）、模型组（Hcy group，2 mmol·L^-1 Hcy）、通心络组（TXL组，200 μg·mL^-1通心络），检测各组GRP78，Caspase-3，Caspase-7，Caspase-9蛋白表达情况。结果 与LFD组比较，HFD组小鼠血总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平显著升高（P < 0.01）；与HFD组比较，TXL组小鼠TC、TG、LDL-C水平显著降低（P < 0.05）；在加入去甲肾上腺素（NE）诱发最大收缩程度后，按浓度依次加入Ach，与LFD组相比，HFD组小鼠肠系膜动脉舒张功能明显受损， TXL组小鼠肠系膜动脉舒张功能较HFD组有明显改善（P < 0.01）；与HFD组相比，TXL组的GRP78、PERK、CHOP、Bax mRNA表达下调（P < 0.05），Bcl-2 mRNA表达上调（P < 0.01）；与正常对照组比较，Hcy组细胞生存活性明显降低；HUVEC细胞Caspase-3，Caspase-7， Caspase-9蛋白表达上调（P < 0.05）；与模型组比较，通心络组GRP78及凋亡相关蛋白表达下调（P < 0.05）。结论 通心络可改善肥胖小鼠血脂水平，缓解内质网应激，并通过抗凋亡途径发挥血管保护作用。     

不同疗程电针对放射性脑损伤模型小鼠认知功能及海马神经元凋亡的影响＊

目的 从海马区神经元凋亡的角度探讨不同疗程电针干预在放射性脑损伤小鼠认知功能的作用及相关机制。方法 50只30日龄C57BL/6J小鼠随机分成对照组、放射性脑损伤模型组（8Gy）、电针组1（1周），电针组2（2周），电针组3（3周），每组10只。新物体认知方法检测各组小鼠认知功能，TUNEL方法检测凋亡细胞数，免疫组化方法检测各组小鼠海马区神经元凋亡相关指标caspase-3、凋亡诱导因子（AIF）平均光密度值。结果 与对照组比较，模型组小鼠认知功能显著受损，表现为对新物体探索时间缩短（P < 0.01，P < 0.001），物体认知指数明显下降（P < 0.05）；而与模型组比较，电针1周、2周及3周组在90 min和24 h时探索新物体时间均不同程度增加（P < 0.05，P < 0.05，P < 0.01）、（P < 0.01，P < 0.01，P < 0.05），认知指数均不同程度提高（P < 0.05，P < 0.01，P < 0.05）。TUNEL方法结果显示与对照组比较，模型组小鼠海马区神经元凋亡显著性增加（P < 0.01）；而与模型组比较，电针2周及3周组细胞凋亡数量明显减少（P < 0.01，P < 0.05）；免疫组化结果显示与对照组比较，模型组小鼠海马区caspase-3阳性细胞数显著增加（P < 0.01），而电针2、3周组阳性细胞数较模型组显著减少（P < 0.01，P < 0.05）；与对照组比较，模型组AIF阳性细胞数显著增加（P < 0.001），而电针各组较模型组均显著减少（P < 0.001，P < 0.01，P < 0.01）。结论 不同疗程电针干预可改善放射线照射对小鼠认知功能的损伤，可能与抑制海马区神经元凋亡有关，其中电针2周及3周效果最为显著。     

知母总皂苷对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞Bcl-2表达的影响

目的: 观察知母总皂苷对β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)Aβ_25-35诱导的PC12细胞中抗凋亡基因Bcl-2表达的影 响。方法: 培养PC12细胞,分为6组:正常组、模型组、知母低、中、高剂量组、盐酸多奈哌齐组。模型组加入终浓度为20 μmol·L^-1 Aβ_25-35 的培养基,作用48 h;知母低、中、高剂量组和盐酸多奈哌齐分别加入含有低、中、高剂量知母总皂苷 (5,10,20 mg·L^-1) 及盐酸多奈哌齐(1 μmol·L^-1)和Aβ_25-35(终浓度为20 μmol·L^-1)的培养基共同作用于PC12细胞48 h。然后采用MTT检测各组细胞活力的变化;采用RT-PCR检测各组细胞中Bcl-2的mRNA表达变化;采用Western blotting技术检测各组细胞中Bcl-2蛋白的表达变化。结果: 和正常组比较,模型组细胞活力降低(P<0.01);和模型组比较,高、中、低剂量知母总皂苷能显著升高PC12细胞活力(P<0.05);和正常组比较(0.476±0.072,0.14±0.02),模型组抗凋亡基因Bcl-2的mRNA(0.316±0.026)和蛋白(0.08±0.01)表达水平降低(P<0.01);和模型组比较,高、中、低剂量知母总皂苷能显著性升高抗凋亡基因Bcl-2的mRNA(0.447±0.016,0.465±0.043,0.472±0.023)和蛋白(0.17±0.01,0.19±0.02,0.13±0.01)的表达水平(P<0.05)。结论: 知母总皂苷能升高Aβ_25-35诱导的PC12细胞的活力降低,其机制可能是升高Bcl-2的表达水平。     

不同剂型表没食子儿茶素没食子酸酯对中波紫外线辐射后BALB/C小鼠表皮细胞凋亡的影响

 目的观察不同剂型表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对慢性中波紫外线(UVB)辐射后BALB/C小鼠表皮细胞凋亡的影响。方法不同剂型EGCG(溶液、乳膏及脂质体)局部外用于小鼠背部皮肤后给予30mJ·cm^-2的UVB照射,每天1次持续30d,TUNEL法检测小鼠表皮中的凋亡细胞。结果不同剂型的EGCG均表现为促凋亡作用,乳膏和脂质体组效果强于溶液组(P<0.05),乳膏组和脂质体组之间未显示统计学差异(P>0.05)。结论EGCG对慢性低剂量UVB辐射后的小鼠表皮细胞有促凋亡作用,乳膏和脂质体效果较溶液显著。     

黄芪多糖对1型糖尿病小鼠胰腺β细胞总质量的影响

目的：研究黄芪多糖对1型糖尿病小鼠胰腺β细胞总质量的影响。方法： 以低剂量链脲菌素(STZ)多次腹腔注射,建立1型糖尿病小鼠模型,每天分别用黄芪多糖(APS)100,200,400 mg·kg^-1或生理盐水腹腔注射,15,30 d时将小鼠处死。以免疫组织化学染色并复染观察胰岛炎性细胞浸润,以间接荧光免疫双标法检测Insulin/Ki67(Hoechst33258复染)、Insulin/Cleaved caspase-3的表达,观察胰腺细胞(包括β细胞)增生、β细胞新生、β细胞凋亡和β细胞总质量的变化,以半定量RT-PCR检验胰腺再生蛋白1 mRNA的表达水平,以ELISA法检测脾细胞IFN-γ和IL-4的分泌。结果：与对照组比较,APS处理组胰岛炎症减轻、β细胞总质量增加、新生胰岛增多、β细胞凋亡减少、Th1/Th2分泌因子比值下调,所有这些均与APS的剂量和使用持续时间密切相关。但关于胰腺的细胞增殖和β细胞增殖,APS处理组与对照组没有明显差别。结论：APS通过改善1型糖尿病小鼠的免疫功能增加胰腺β细胞总质量。