重离子辐照对舌癌Tca8113细胞中转移相关基因RhoC的作用

目的：：探讨重离子辐照对舌癌侵袭转移相关基因RhoC的作用。方法：应用不同剂量重离子束(12 C6+)对体外培养的舌癌Tca8113细胞进行辐照,采用荧光实时定量PCR法及Western Blot法观察细胞中RhoC mRNA及蛋白的表达变化。结果：与空白对照组比较,12C6+辐照后4h,各实验组细胞中RhoC mRNA的表达降低(P<0.05);辐照后12 h,2 Gy及4 Gy组细胞中RhoC mRNA表达增加,随后各组细胞中RhoC mRNA表达再次下降(P<0.05);辐照后12 h,细胞中RhoC蛋白表达量随辐照剂量的增加而增高,在4 Gy时达到高峰;24 h后随剂量的增加逐渐降低;在相同辐照剂量下,细胞中RhoC蛋白的表达随时间推移呈下降趋势,RhoC蛋白表达和RhoC mRNA表达的趋势相同。结论：12 C6+重离子束可以下调舌癌Tca 8113细胞中RhoC基因的表达。     

LAK细胞杀伤人舌鳞癌Tca8113细胞的形态学观察

通过光镜和电镜观察了淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）杀伤人舌鳞癌Ｔｃａ８１１３细胞的过程和超微结构变化，结果表明，ＬＡＫ细胞杀伤Ｔｃａ８１１３靶细胞的过程与传统杀伤细胞相似，即通过效应细胞与靶细胞的直接接触，释放细胞毒颗粒而杀伤、溶解靶细胞。     

钾离子通道阻滞剂4-AP 对人舌鳞癌 Tca8113细胞增殖的影响

目的：检测4-氨基啶（4-AP）对 Tca8113细胞株增殖的影响。方法：采用 CCK-8法检测不同浓度4-AP 作用于 Tca8113细胞株12、24、48 h 后对细胞的增殖抑制率;流式细胞术（FCM）检测各组细胞周期变化。采用 SPSS19．0软件对数据进行统计学分析。结果：随着4-AP 浓度的增加和干预时间的延长,Tca8113细胞形态发生改变。在浓度5～100 mmol／L 范围内作用于细胞12～48 h,4-AP 浓度和时间依赖性地抑制了 Tca8113细胞的增殖（P ＜0．01）。不同浓度4-AP 作用于 Tca8113细胞株24 h后,G0／G1期的细胞所占的比例显著升高（P ＜0．01）;S 期细胞所占的比例显著降低（P ＜0．01）;4-AP 阻滞 Tca8113细胞株于G0／G1期。结论：4-AP 可能通过调控细胞周期抑制 Tca8113细胞株的增殖对细胞株分布有影响。     

舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株醛脱氢酶高表达亚群细胞生物学特性的研究

目的检测醛脱氢酶（ALDH）在舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株中的表达,研究ALDH高表达（ALDHhig）亚群细胞的生物学特性。方法采用流式细胞仪检测Tca8113细胞株中ALDH的表达;分选ALDHhig与ALDHlow亚群细胞,体外培养观察其增殖、分化及在无血清培养基中的成球能力;利用抑制消减杂交（SSH）技术筛选ADLHhig亚群细胞高表达基因。结果舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株中仅有1.3%的细胞高表达ADLH;分选出的ADLHhig肿瘤细胞增殖能力高于ALDHlow细胞和未分选的肿瘤细胞;随着培养时间的延长,体外培养的ALDHhig细胞比例逐渐下降至分选前水平;ALDHhig亚群细胞能够在无血清培养基中悬浮生长形成肿瘤球,且高表达干细胞相关基因。结论舌鳞状细胞癌Tca8113细胞株中有一小群细胞高表达ALDH,具有干细胞的生物学特性;ALDH可能是舌鳞状细胞癌干细胞的标志物之一。     

半导体量子点对舌鳞状细胞癌Tca8113系生物学行为影响的研究

目的：研究新型发光纳米材料半导体量子点（semiconductor quantumdots，QD）对舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113生物学行为的影响。方法：用不同浓度最大发射波长为605nm的QD与Tca8113共培养，观察QD对Tca8113细胞生长的影响。用QD标记Tca8113细胞（Tca8113-QD），利用transwell小室法和冲刷实验，观察Tca8113-QD细胞侵袭、黏附和趋化运动能力的变化。结果：Tca8113细胞与不同浓度QD共培养后，其细胞的生长曲线基本一致，差异无统计学意义。Tca8113-QD细胞和Tca8113细胞的侵袭、黏附和趋化运动能力差异无统计学意义。结论：用QD标记Tca8113细胞后，不影响肿瘤细胞生长、侵袭和转移能力，为半导体量子点在活体生理条件下用于肿瘤细胞和细胞内分子成像及示踪研究提供了科学依据。     

脂质体介导hES基因转染人舌鳞癌Tca8113细胞及其蛋白表达

目的　建立转人内皮抑素(hES)基因舌鳞癌Tca8113细胞,检测体外培养的转基因细胞基因蛋白表达。方法　为了建立携带hES基因的舌鳞癌Tca8113细胞克隆,选用阳离子脂质体Lipofectamin为载体,将含hES基因的质粒---pBLAST-hES转染Tca8113细胞,以Blasticidin S抗生素筛选阳性克隆。免疫组织化学S-P方法检测体外培养的转基因Tca8113细胞克隆中ES的表达。结果　经Blasticidin S抗生素筛选,转染hES基因的Tca8113细胞由于具有 bsr抗性基因,可以在含有50μg/ml Blasticidin S的培养基中生长和传代,从而得到携带hES基因的Tca8113细胞克隆。该细胞在体外培养传代96 h后,经免疫组织化学检测,hES表达的强阳性(+++)率为100%。结论　以脂质体介导hES基因转染Tca8113细胞效率高,转基因细胞具有高效表达活性目的基因产物的能力。     

尼美舒利对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞ang-2基因表达的影响

目的 探讨环加氧酶(COX) -2抑制剂尼美舒利(NIM)对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中ang-2基冈表达的影响及其意义.方法 以25、50、100和200 μmol·L-1浓度的NIM处理Tca8113细胞48 h,半定量RTPCR检测其ang-2 mRNA的表达.结果 Tca8113细胞中ang-2 mRNA...     

高温联合平阳霉素对人舌鳞状细胞癌Tca8113系细胞协同作用的研究

本文选用细胞的生长曲线、集落形成实验、~3H-TdR 掺入试验并结合光镜下细胞受损程度的形态学观察等方法,用国产平阳霉素联合高温(43℃)对建株的人舌鳞状细胞癌 Tca8113系细胞进行体外实验,观察加温与平阳霉素是否具有协同杀伤作用。实验结果对口腔颌面部肿瘤的高温治疗,以及制定综合治疗方案有一定的指导意义。     

三氧化二砷诱导舌鳞状细胞癌Tca8113细胞凋亡的实验研究

目的：观察三氧化二砷对舌癌细胞系Tca8113的诱导凋亡作用。方法：以人舌鳞癌细胞Tca8113为研究对象，使用荧光染色光镜、透射电镜观察三氧化二砷不同浓度、不同时间作用后的肿瘤细胞的形态学变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：一定浓度的三氧化二砷作用Tca8113细胞24h、48h后，细胞形态学观察可见有明显的细胞凋亡发生；流工细胞仪检测Tca8113细胞的基础凋亡率为0．5％－1．2％，三氧化二砷作用后肿瘤细胞的凋亡率可提高到15％－20％。结论：三氧化二砷可诱导人舌鳞癌细胞系细胞凋亡。     

人内皮抑素基因转染对舌鳞癌Tca8113细胞生长的影响

目的 探讨人内皮抑素(hES)基因导入舌鳞癌Tca8113细胞后的表达情况及其抑制肿瘤生长效应。方法 以脂质体为载体将hES基因导入Tca8113细胞,通过动物实验观察转基因Tca8113细胞移植瘤生长情况,免疫组织化学检测肿瘤组织中hES及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达,Weidner法行肿瘤微血管密度(MVD)计数,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率。结果 移植瘤生长第27天,实验组肿瘤组织中hES的表达率高于对照组(P<0.01);VEGF的表达率低于对照组(P<0.01)。实验组MVD计数低于对照组(P<0.01),而肿瘤细胞凋亡率则明显高于对照组(P<0.01)。hES基因转染对肿瘤生长的抑制率78.9％。结论 hES基因转染舌鳞癌细胞可体内诱导hES蛋白高效表达并具有抑制移植瘤生长的效应。     

放疗对舌鳞癌Tca 8113细胞多药耐药蛋白及耐药性的影响

目的：探讨放疗对舌鳞癌Tca 8113细胞和耐药的Tca 8113／CBDEA细胞耐药性的影响。方法：应用免疫组化SP法检测放疗对P-糖蛋白（P-glycoprotein,P—gP）、多药耐药相关蛋白1（muhidrug resistance associate protein 1,MRP1）和谷胱甘肽硫-转移酶π（glutathione S—tranferase π,GST-π）表达的影响和检测放疗对细胞内阿霉素浓度的影响。结果：Tca 8113／CBDEA细胞在放疗后4hP—gP,MRP1,GST-π耐药蛋白表达无明显上升,24h耐药蛋白的表达明显升高（P〈0．01）,Tca8113细胞的耐药蛋白表达在4h和24h时均有明显上升（P〈0．01）。放疗以后肿瘤细胞内阿霉素（ADM）浓度有明显下降。结论：放疗可引起舌鳞癌细胞的耐药。提醒我们对舌癌患者进行放疗和化疗的方案设计时应考虑此点。     

百安对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系作用的初步研究

目的:研究中药提取物百安(活血化瘀抗肿瘤药)对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的抑制作用。方法：采用细胞形态观察法、MTT法及活细胞计数法观察百安对Tca8113细胞的作用，同时以常用化疗药物顺铂为对照。结果：1：50稀释的百安对Tca8113细胞的抑制率1d为50％，且随时间增加而增加，百安联合顺铂对Tca8113细胞的协同作用不明显。结论：中药提取物百安对人舌鳞状细胞癌Tca8113有直接杀伤作用，且有时间依赖性，在人舌鳞状细胞癌的治疗方面有一定意义。     

加热对人舌癌Tca8113细胞尿激酶型纤溶酶原激活物表达的影响

目的　研究加热对人舌癌Tca8113细胞尿激酶型纤溶酶原激活物(UPA)表达的影响。方法　采用免疫组织化学染色和流式细胞术检测Tca8113细胞在不同加热温度下(37℃、40℃、43℃、45℃)UPA表达情况。结果　与37℃组相比,40℃、43℃组加热后Tca8113细胞UPA表达明显下降(P<0·05),而45℃组UPA表达下降,但无统计学意义(P>0·05)。结论　口腔鳞癌局部热疗不会促进侵袭、转移,还会对肿瘤的侵袭、转移有抑制作用。     

A型钾离子通道对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响

目的:探究A型钾离子(Potassium,K⁺)通道抑制后对舌鳞状细胞癌株(Tca8113)细胞的影响。方法:全细胞膜片钳技术记录和分析A型K⁺通道阻滞剂4-氨基吡啶(4-AP)对Tca8113细胞K⁺电流的影响;MTT检测A型K⁺通道对细胞增殖的作用。结果:在终浓度为2 mmol/L 4-AP作用下,A型K⁺电流的峰值从(267.04±13.84) pA降到(124.81 ±5.24) pA。在一定范围内,不同浓度4-AP能抑制Tca8113细胞在体外的增殖,且抑制程度随药物浓度和作用时间的增加而增强。结论:A型K⁺通道参与Tca8113细胞增殖的过程,且A型K⁺通道阻滞剂能抑制Tca8113细胞的增殖。     

热疗对舌鳞癌Tca8113细胞及其耐药细胞株耐药性的影响

目的 探讨热疗对舌鳞癌Tca8113细胞和耐药的Tca8113/CBDEA细胞耐药性的影响。方法 采用实时定量逆转录PCR（RT-PCR）检测42 ℃,0.5 h热疗对Tca8113细胞 和耐药的Tca8113/CBDEA细胞多药耐药基因1（MDR1）、多药耐药相关蛋白1基因（MRP1）和谷胱甘肽硫-转移酶π基因（GST-π）表达的影响以及检测热疗对细胞内阿霉素浓度的影响。结果 Tca8113/CBDEA细胞在热疗后4 h和24 hMDR1、MRP1、GST-π耐药基因表达量明显下降（P<0.01）,Tca8113细胞的MDR1、MRP1耐药基因表达在4 h和24 h时亦有明显下降（P<0.05）,GST-π在24 h有明显下降（P<0.01）。热疗以后肿瘤细胞内阿霉素（ADM）浓度有明显上升（P<0.01）。结论 热疗抑制了耐药基因的表达,增加了细胞内的药物浓度, 热疗可能是逆转肿瘤细胞耐药,提高化疗效果的一种有效手段。     

乏氧对人舌癌Tca8113细胞尿激酶型纤溶酶原激活物表达的影响

目的　研究乏氧对人舌癌Tca8113细胞尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)表达的影响,探讨乏氧与口腔鳞 癌侵袭、转移的关系。方法　采用免疫组化染色和流式细胞术,对Tca8113细胞在不同乏氧时间(0、3、6、12、24 h)下 的uPA蛋白表达进行染色和定量分析。结果　乏氧可促进人舌癌Tca8113细胞uPA蛋白表达,而且随着乏氧时间 3 h→6 h→12 h→24 h的延长,uPA表达逐渐增高。结论　乏氧可通过激活肿瘤细胞高表达uPA而促进口腔鳞癌侵 袭和转移。     

PD184352对舌鳞状细胞癌细胞增殖及ERK蛋白表达的影响

目的:体外观察PD184352对人舌癌细胞Tca8113细胞增殖及ERK蛋白表达的影响。方法:采用MTT比色试验法观察PD184352对Tca8113细胞增殖的影响,免疫细胞化学观察ERK蛋白的表达。结果:随着PD184352作用浓度和作用时间的增加,其对舌癌细胞增殖抑制率显著增高(P<0.05)。当100μmol/L的PD184352刺激Tca8113细胞72h后,对舌鳞状细胞癌细胞抑制率达到69.2%。加入PD184352后ERK蛋白在舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113中表达降低(P<0.05),随着浓度的增加而更为明显。结论:体外PD184352对Tca8113细胞增殖有抑制作用,该作用可能与及抑制ERK蛋白表达有关。     

Tca-8113细胞系单细胞体外增殖的实验观察

目的:观察舌鳞癌Tca-8113细胞系的单细胞体外增殖能力,寻找肿瘤干细胞存在的依据,从而为鉴定其表面标记物奠定理论基础。方法:采用有限稀释法对舌鳞癌Tca-8113细胞进行单细胞体外培养,了解舌鳞癌细胞(Tca-8113)的分裂、增殖特点。结果:单细胞培养8d后,舌鳞癌Tca-8113细胞株中具有持续增殖能力的细胞占肿瘤细胞的10.85%,12d后,继续分裂增殖的细胞比例为5.23%,16d后,仅有5.09%的细胞继续增殖。结论:舌鳞癌Tca-8113细胞具有异质性,仅有少量细胞具有持续增殖能力,而这部分细胞是否就是舌鳞癌Tca-8113细胞的肿瘤干细胞。还有待进一步的实验研究证实。     

二维及三维培养对人舌鳞状细胞癌TCA8113细胞株生物学特性的影响

目的: 比较二维及三维方式培养的人舌鳞状细胞癌(简称鳞癌)TCA8113细胞株对细胞的增殖、组织形态及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性的影响,为体外舌鳞癌的研究提供培养方法。方法: 倒置显微镜和苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察二维及三维培养的人舌鳞癌TCA8113细胞的形态;噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法观察两种培养体系中细胞的增殖;酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测两种培养体系中LDH活性的改变。结果: 倒置显微镜和HE染色观察到三维培养体系中TCA8113细胞成团生长;与二维培养体系比较,三维培养体系中细胞较长时间保持良好的增殖状态,LDH的活性较二维培养的细胞活性显著增高。结论: TCA8113细胞藻酸盐凝胶三维培养体系较二维培养体系能更好地体现细胞的生物学特性。     

MAb225对Tca8113舌鳞癌细胞放射敏感性的影响

目的　探索表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体MAb225对舌鳞癌细胞Tca8113的放射敏感性的调控作 用。方法　不同浓度的MAb225处理Tca8113舌鳞癌细胞,通过集落形成实验单靶多击模型拟合放射生存曲线,分 析细胞的增敏比(SERD0)和存活分数(SF2)的变化。同时,建立裸鼠移植瘤模型,单独及联合应用MAb225和放射处 理裸鼠移植瘤,通过生长延缓实验观察肿瘤生长变化,并进行统计学分析。结果　MAb225有明显的放射增敏作 用,0·5 mg/LMAb225作用后的SERD0为1·23,在一定的范围内,其增敏作用与剂量存在正相关;MAb225明显提高放 射对裸鼠移植瘤的杀伤作用(P<0·05)。结论　MAb225可以提高舌鳞癌细胞Tca8113的放射敏感性。