脓毒症大鼠肺组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂受体的表达及其与肺损伤程度的相关性研究

目的探讨脓毒症大鼠肺组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂受体（uPAR）表达变化及其与肺损伤的关系。 方法将48只雄性成年大鼠分为假手术组及脓毒症组,每组各24只大鼠。采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症损伤模型,假手术组大鼠只行开腹手术、不行结扎及穿孔,各组分别在术后6、12、24 h各取8只大鼠分批处死后收集肺泡灌洗液并留取肺脏。观察所有大鼠各时间点肺组织病理变化,测定肺组织干湿重比及肺泡灌洗液中蛋白变化,并采用免疫组织化学染色测定uPAR表达情况。 结果光镜下可见,假手术组大鼠肺组织肺泡结构完整,术后24 h只有少量炎症细胞浸润;脓毒症组大鼠肺泡腔内大量炎症细胞浸润,肺泡结构破坏,并以术后24 h最明显。两组大鼠各时间点肺组织干湿重比、肺泡灌洗液蛋白水平及uPAR表达比较,差异均有统计学意义（F = 32.000、97.770、72.780,P均< 0.001）。与假手术组相比,脓毒症组大鼠6、12、24 h肺组织干湿重比[（0.75 ± 0.03）vs.（0.78 ± 0.03）;（0.77 ± 0.04）vs.（0.83 ± 0.05）;（0.78 ± 0.04）vs.（0.89 ± 0.05）]、肺泡灌洗液蛋白水平[（79 ± 22）mg/L vs.（110 ± 40）mg/L;（79 ± 23）mg/L vs.（168 ± 36）mg/L;（94 ± 24）mg/L vs.（199 ± 56）mg/L]及uPAR表达[（2.2 ± 1.3）分vs.（4.6 ± 1.9）分;（2.3 ± 0.9）分vs.（6.4 ± 1.8）分;（2.4 ± 0.9）分vs.（7.0 ± 1.8）分]均明显升高（P均< 0.05）;且脓毒症组大鼠12、24 h亚组肺组织干湿重比、肺泡灌洗液蛋白水平均显著高于6 h亚组,而uPAR表达仅24 h亚组显著高于6 h亚组（P均< 0.05）。同时,肺组织中uPAR表达与肺组织干湿重比、肺泡灌洗液蛋白浓度均呈正相关（r = 0.618,P< 0.001;r = 0.652,P< 0.001）。 结论与假手术组相比,uPAR在脓毒症大鼠肺组织中表达明显增加,并且与肺损伤程度呈正相关。     

高压氧对重症中暑大鼠认知障碍的保护作用

目的研究高压氧（HBO）治疗对大鼠重症中暑脑损伤模型认知功能障碍的保护作用。 方法将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组（Control组,10只）、重症中暑组（HS组,10只）、重症中暑＋高压氧治疗组（HS＋HBO组,10只）、重症中暑＋高压空气对照组（HS＋HBA组,10只）、高压氧对照组（HBO组,10只）、高压空气对照组（HBA组,10只）,将HS组、HS＋HBO组、HS＋HBA组大鼠持续暴露于40℃热舱中,当核心体温达到42℃后取出复温,HS＋HBO组与HS＋HBA组复温30 min后分别给予HBO（2.5ATA,60 min）或高压空气（2.5ATA,60 min）处理,通过Morris水迷宫实验评估认知功能（航行距离和时间、目标象限航行时间百分比和通过次数）,并检测各组大脑海马组织病理、神经功能评分及病死率变化。 结果HS组大鼠水迷宫寻找平台潜伏期较Control组明显延长［（45.84±0.13）s vs （22.16±1.40）s,t=-2.4,P=0.04］,寻找平台航行距离延长［（815.70±36.80）cm vs （177.71±21.00）cm,t=-3.3,P=0.01］,通过次数［（1.90±0.16）次 vs （5.80±0.20）次,t=3.7,P=0.04］和目标象限航行时间百分比［（32.12±0.19）% vs （57.12±1.60）%,t=2.8,P=0.02］明显减少;HBO治疗缩短了寻找平台的潜伏期［（30.21±1.50）s］与航行距离［（165.58±7.04）cm］,增加了穿越次数［（4.40±0.18）次］和目标象限航行时间百分比［（41.87±1.17）%］;HBO改善了HS组大鼠海马组织病理损伤程度,降低了中暑后2 h、24 h神经功能评分［2 h：（7.70±0.42）分 vs （9.60±0.31）分,t=6.3,P=0.00;24 h：（3.90±0.20）分 vs （5.60±0.23）分,t=2.4,P=0.02］及病死率（20.0% vs 40.0%,P=0.08）,HS＋HBA组较HS组无明显改变,HBO组、HBA组较Control组无明显改变。 结论HBO可能是通过减轻重症中暑对海马的损伤来改善大鼠重症中暑模型的认知功能障碍。     

血必净对脓毒性急性肾损伤大鼠肾小管细胞凋亡和相关蛋白表达的影响

目的探讨早期应用血必净对脓毒性急性肾损伤大鼠肾小管细胞凋亡,及相关蛋白B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的影响。 方法54只雄性大鼠分为假手术组（Sham组）、脓毒症组（CLP组）、血必净组（CLP + XBJ组）三组,每组18只;以术后12、24和48 h作为时间观察点,将各组再分为3个亚组,每组6只。在各时间点检测大鼠的肌酐清除率（CrCl）、肾脏血流灌注量,并留取肾脏组织观察病理学变化,计算肾小管损伤评分,采用原位末端标记（TUNEL）法并通过计算积分光密度值（IOD）测定肾小管凋亡细胞,采用Western-blotting法测定肾脏髓质Bcl-2、Bax的变化。 结果三组大鼠的CrCl和肾脏血流灌注量在术后各时间点差异均有统计学意义（F = 6.405、18.821,P < 0.05）;且CLP + XBJ组在术后48 h时CrCl和肾脏血流灌注量明显高于CLP组[（2.1 ± 0.5）ml/min/100 g vs.（1.1 ± 0.3）ml/min/100 g,（159 ± 38）BPU vs.（79 ± 32）BPU;P均< 0.05]。三组大鼠肾小管损伤评分比较,不同时间点差异存在统计学意义（F = 5.461,P < 0.05）;且CLP + XBJ组与CLP组比较,24、48 h时评分均有显著下降[（1.6 ± 0.5）vs.（2.8 ± 0.8）,（1.8 ± 0.8）vs.（3.6 ± 0.6）;P均< 0.05]。三组大鼠各时间点凋亡细胞IOD值,差异存在统计学意义（F = 7.259,P < 0.05）;CLP + XBJ组各时间点的IOD值均明显小于CLP组[（26.6 ± 6.9）vs.（34.4 ± 5.0）,（38.2 ± 5.3）vs.（48.0 ± 5.8）,（37.6 ± 2.2）vs.（53.8 ± 6.7）;P均< 0.05]。同时,CLP + XBJ组能升高大鼠肾脏髓质Bcl-2的表达,抑制Bax的表达,维持Bcl-2/Bax的平衡,24、48 h时其Bcl-2[（1.30 ± 0.09）vs.（0.76 ± 0.09）,（2.12 ± 0.38）vs.（0.51 ± 0.07）;P均< 0.05]和Bax[（1.19 ± 0.37）vs.（1.95 ± 0.90）,（1.48 ± 0.15）vs.（2.69 ± 0.39）;P均< 0.05]的表达水平与脓毒症组相比差异均有统计学意义。 结论早期应用血必净可以减少肾小管细胞在脓毒症进程中的凋亡,改善脓毒性急性肾损伤大鼠肾脏的病理学改变,维持Bcl-2/Bax的平衡,减轻脓毒症导致的肾功能损害。     

类风湿关节炎共病抑郁症大鼠模型的建立及评价

目的建立并评价类风湿关节炎（RA）共病抑郁症动物模型。 方法通过复合造模思路,在Ⅱ型胶原诱导关节炎（CIA）大鼠模型基础上联合慢性不可预知温和刺激抑郁症模型,建立RA共病抑郁症大鼠模型。采用糖水消耗和旷场测试进行大鼠行为学测定。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定外周血清IL-27、IL-17和IL-10水平。采用单因素方差分析比较大鼠体质量、糖水饮用量、旷场实验得分以及血清因子水平的差异,组间两两比较采用LSD-t检验。 结果RA共病抑郁症组大鼠踝关节肿大、畸形,伴有运动迟缓、快感缺乏等抑郁状态。造模后第28天时大鼠体质量方面抑郁症组［（63.6±2.5）g］、RA共病抑郁症组［（152.2±3.2）g］均低于正常对照组［（179.5±3.7）g］,差异均有统计学意义（t=-2.383,P=0.019;t=-3.887,P=0.010）。慢性应激刺激后第22天时,大鼠饮用糖水量方面抑郁症组［（19.8±0.3）g］、RA共病抑郁症组［（18.9±0.1）g］明显小于正常对照组［（31.7±0.8）g］,差异具有统计学意义（t=6.71,P=0.016;t=5.12,P=0.023）。抑郁症组大鼠刺激后旷场实验水平得分、垂直得分均低于正常对照组［（54.41±6.42）分vs（98.34±4.83）分;（19.83±2.31）分vs（36.03±2.75）分］,差异均有统计学意义（t=5.31,P=0.023;t=2.34,P=0.042）。RA共病抑郁症组大鼠刺激后水平得分、垂直得分均低于正常对照组［（38.35±3.28）分vs（98.34±4.83）分;（12.73±3.42）分vs（36.03±2.75）分］,差异均有统计学意义（t=3.96,P=0.032;t=3.26,P=0.035）。IL-27、IL-17和IL-10水平在RA共病抑郁症组均高于正常对照组［（297.97±34.23）ng/L vs （212.43±14.52）ng/L;（184.62±33.71）ng/L vs （109.40±9.81）ng/L;（162.74±25.38）ng/L vs （131.51±20.43）ng/L ］,差异均具有统计学意义（t=4.78,P=0.0291;t=2.57,P=0.032;t=5.33,P=0.023）。 结论RA共病抑郁症组大鼠模型符合临床上RA共病抑郁症患者特征,该模型具有重复性高、易操作特点,是研究RA共病抑郁症理想动物模型。     

急性缺血性脑卒中取栓治疗后联用替罗非班静脉维持的临床研究

目的探讨替罗非班治疗作为补充手段用于未接受静脉溶栓的急性缺血性脑卒中（AIS）患者机械取栓（MT）后静脉维持治疗的可行性与安全性。 方法入选不符合静脉溶栓条件且CT血管成像证实为大动脉闭塞的87例AIS患者,其中MT+替罗非班维持（MT+ T）组44例,MT组43例。MT+ T组患者采用支架取栓并在术后立即静脉泵入0.1 μg·kg^-1·min^-1替罗非班维持24 h,之后口服抗血小板聚集药物;MT组患者采用支架取栓治疗,术后口服抗血小板聚集药物。比较两组患者术前基线资料、血管再通情况、神经功能恢复情况、术后并发症及死亡情况。 结果MT+ T组与MT组患者术后14 d美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分[（7.7 ± 2.2）分vs.（8.8 ± 3.3）分]、术后并发症[4.55%（2/44）vs. 6.98%（3/43）]及病死率[2.27%（1/44）vs. 2.33%（1/43）]比较,差异均无统计学意义（P均> 0.05）;而MT+ T组患者术后90 d改良Rankin量表（mRS）评分低于MT组[（1.7 ± 1.0）分vs.（2.2 ± 1.1）分,t = 2.479,P = 0.015]。亚组分析显示,MT+ T组取栓次数> 3次的患者术后14 d NIHSS评分[（8.6 ± 3.1）分vs.（12.5 ± 3.5）分]及术后90 d mRS评分[（1.7 ± 1.5）分vs.（2.8 ± 1.0）分]均低于MT组（t = 2.996、2.172,P = 0.006、0.040）;MT+ T组及MT组取栓次数≤ 3次的患者术后14 d NIHSS评分[（7.4 ± 1.6）分vs.（7.2 ± 1.5）分]及术后90 d mRS评分[（1.7 ± 0.7）分vs.（2.0 ± 1.1）分]比较差异均无统计学意义（t= 0.441、1.362,P= 0.661、0.178）。 结论替罗非班可作为未接受静脉溶栓的AIS患者行3次以上支架取栓治疗后的补充手段,可有效改善患者的神经功能及预后,且不增加脑出血转化风险。     

超声引导下腹横肌平面阻滞用于≥70岁患者腹股沟疝修补术术后镇痛的临床观察

目的观察超声引导下腹横肌平面（TAP）阻滞对于≥70岁患者开放性腹股沟疝修补术术后镇痛的影响。 方法选择择期行开放性腹股沟疝无张力修补术患者60例,采用蛛网膜下腔阻滞麻醉,均为男性,年龄≥70岁,美国麻醉师协会分级Ⅰ~Ⅱ级,采用随机数字表法将患者分为对照组和试验组,每组30例。试验组于手术结束后于患侧行超声引导下TAP阻滞。观察2组患者术中、术后有无恶心、呕吐、心慌、胸闷、呼吸困难及头晕、嗜睡等不良反应;记录试验组术中、术后有无血管、神经及腹腔脏器损伤,局部麻醉药物中毒、穿刺部位感染等不良事件发生;记录2组患者术后4、6、8、12、24 h时静息状态下和咳嗽时视觉模拟量表（VAS）评分;记录术后下床时间、术后住院天数、总住院天数、麻醉费用以及住院总费用,记录2组术后非甾体类镇痛药的使用例数。 结果2组患者术中、术后均无恶心、呕吐、心慌、胸闷、呼吸困难及头晕、嗜睡等不良反应。试验组患者术中、术后无血管、神经及腹腔脏器损伤,无局部麻醉药物中毒及穿刺部位感染等不良事件。对照组在静息状态下［4 h：（3.8±1.2）分vs （1.6±0.5）分;6 h：（4.2±1.5）分vs （1.8±0.8）分;8 h：（4.8±1.5）分vs （2.0±0.7）分;12 h：（5.2±1.4）分vs （2.2±0.6）分;24 h：（3.2±?.?）分vs （1.6±0.6）分］和咳嗽时［4 h：（3.9±1.3）分vs （1.8±0.8）分;6 h：（4.6±1.5）分vs （2.0±0.8）分;8 h：（5.5±1.6）分vs （2.2±0.9）分;12 h:（5.8±1.8）分vs （2.4±0.8）分;24 h：（4.6±1.4）分vs （1.8±0.7）分］不同时间点的VAS评分均大于试验组（P<0.01）;2组住院总费用差异无统计学意义,试验组麻醉费用高于［（780.06±63.10）元vs （566.69±93.23）元］、下床活动时间早于［（5.26±1.43）天vs （8.62±1.62）天］、非甾体类药物使用例数少于（2 vs 28）对照组（P<0.01）。 结论超声引导下TAP阻滞因其镇痛效果确切,且操作简单,相关并发症少,对于≥70岁患者的开放性腹股沟疝修补术是一种安全有效的术后镇痛方法。     

终末期肝病模型评分与Child-Turcotte-Pugh分级对非生物型人工肝治疗乙型肝炎相关性肝衰竭患者预测价值的研究

目的应用终末期肝病模型（MELD）评分和Child-Turcotte-Pugh（CTP）分级系统评估和预测非生物型人工肝支持系统（NB-ALSS）治疗乙型肝炎相关性肝衰竭患者疗效和预后的临床价值。 方法将210例乙型肝炎相关性肝衰竭患者分为人工肝组（115例）和对照组（95例）,并进行MELD和CTP评分。根据评分将每组进一步分成MELD< 20分、20分≤ MELD< 30分、30分≤ MELD< 40分和MELD> 40分四个亚组。观察两组患者治疗前后各亚组MELD分值的变化和人工肝组患者治疗前后临床生化指标的变化,并对各亚组实际病死率与预期病死率及不同CTP评分分级进行比较。同时,绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析比较不同MELD评分的短期生存率和病死率。 结果人工肝治疗后各亚组患者的临床生化指标中凝血酶原时间国际标准化比值（INR）[（1.3 ± 0.3）vs.（1.4 ± 0.3）;（2.2 ± 0.8）vs.（2.6 ± 0.8）;（4.1 ± 1.5）vs.（5.2 ± 1.7）;（9.6 ± 2.8）vs.（12.2 ± 4.8）,t = 4.303、3.152、3.545、3.130,P均< 0.05]和总胆红素（TBIL）水平[（152 ± 74）μmol/L vs.（287 ± 118）μmol/L;（266 ± 160）μmol/L vs.（422 ± 114）μmol/L;（370 ± 144）μmol/L vs.（517 ± 126）μmol/L;（564 ± 180）μmol/L vs.（628 ± 121）μmol/L,t = 4.960、5.951、4.915、2.577,P均< 0.05]均低于治疗前。人工肝治疗后MELD分值除MELD ≥ 40分组外,其他三组较治疗前均显著下降[（10.2 ± 3.4）分vs.（16.6 ± 2.5）分;（18.2 ± 4.2）分vs.（24.7 ± 2.6）分;（30.1 ± 7.5）分vs.（36.2 ± 2.3）分,t = 7.036、9.094、5.476,P均< 0.05],并且此三组的人工肝组与对照组治疗前后MELD下降分值（△MELD）的比较,差异均有统计学意义（t = 2.286、2.906、2.021,P均< 0.05）。20分≤ MELD< 30分及30分≤ MELD< 40分,人工肝组病死率低于预期病死率（40.8% vs. 76.0%、51.4% vs. 83.0%,χ² = 12.119、8.880,P均< 0.05）,且均低于对照组病死率（40.8% vs. 61.9%、51.4% vs. 82.4%,χ² = 4.030、4.710,P均< 0.05）;20分≤ MELD< 30分及30分≤ MELD< 40分,CTP C级人工肝组患者病死率均低于对照组（38.8% vs. 59.6%、51.4% vs. 76.5%,χ² = 3.900、4.400,P均< 0.05）。同时,Kaplan-Meier生存曲线显示,20分≤ MELD< 30分及30分≤ MELD< 40分的人工肝组患者短期生存率均高于对照组（χ² = 3.890、5.700,P均< 0.05）。 结论在MELD评分系统基础上引入CTP分级可指导NB-ALSS治疗乙型肝炎相关性肝衰竭患者的预后评判。     

肝X受体β在电针治疗慢性脑缺血炎性损伤中的作用研究

目的探讨肝X受体β（LXRβ）在电针治疗慢性脑缺血炎性损伤中的作用。 方法将40只雄性大鼠采用随机数字表法分为假手术组、模型组、激动剂组和电针组,每组各10只。假手术组大鼠麻醉切开颈部皮肤后,仅分离双侧颈总动脉,不进行结扎。模型组、激动剂组和电针组大鼠均给予经典二血管闭塞（2-VO）制备慢性脑缺血大鼠模型,激动剂组大鼠造模成功后喂食LXRβ激动剂T0901317（1 mg/kg,每日1次,连续7 d）,电针组大鼠造模成功后给予电针治疗,持续1周。于术后2周从各组中分别选取1只大鼠采用快速断头取脑法进行模型病理性评估。各组大鼠于术后第4周采用Morris水迷宫考察认知功能情况。水迷宫实验结束5 d后,采用苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠脑组织海马CA1区的病理形态变化,采用酶联免疫吸附测定检测海马CA1区白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达水平,采用Western-blotting法检测海马CA1区LXRβ、核因子κB1（NF-κB1）P50及NF-κB1 P105蛋白表达。 结果各组大鼠在定位航行实验中的平台距离与爬上平台所需时间（F = 2.960、2.945,P = 0.045、0.046）,在空间探索实验中第一次到达平台时间与穿越平台的次数间比较（F = 7.627、3.512,P = 0.001、0.024）,差异均有统计学意义。且与模型组相比,电针组及激动剂组大鼠平台距离均减小[（1 136 ± 857）、（760 ± 629）、（699 ± 702）cm],爬上平台所需时间[（49 ± 41）、（36 ± 28）、（34 ± 33）s]及第一次到达平台时间[（38 ± 19）、（29 ± 25）、（24 ± 18）s]均缩短（P均<0.05）,但在穿越平台的次数上仅电针组大鼠显著增多[（2.0 ± 1.4）vs.（3.9 ± 1.8）,P<0.05]。HE染色提示模型组大鼠海马CA1区神经元胞核染色加深,排列松散,细胞层数减少;电针组与激动剂组大鼠的神经元细胞形态结构有明显改善,神经元数量增多,细胞层数显著增多。各组大鼠海马CA1区脑组织IL-1β（F = 18.350,P < 0.001）、IL-6（F = 4.235,P = 0.018）和TNF-α（F = 4.190,P = 0.019）水平的比较差异均有统计学意义。且与模型组相比,电针组和激动剂组大鼠IL-1β[（357 ± 38）、（278 ± 45）、（232 ± 54）ng/L]、IL-6[（287 ± 45）、（188 ± 54）、（213 ± 54）ng/L]和TNF-α[（383 ± 45）、（236 ± 54）、（251 ± 91）ng/L]表达水平均显著下降（P均<0.05）。Western-blotting显示,各组大鼠海马CA1区脑组织LXRβ及NF-κB1 P50蛋白的比较,差异均无统计学意义（F=0.661、0.315,P=0.586、0.815）。而各组间NF-κB1 P105蛋白表达的比较,差异有统计学意义（F=3.940,P=0.023）,且与模型组相比,电针组及激动剂组的NF-κB P105蛋白表达显著减少[（4.0 ± 0.7）× 10^-2、（2.8 ± 1.0）× 10^-2、（2.7 ± 1.1）× 10^-2,P均<0.05]。 结论LXRβ受体的激活在抑制慢性脑缺血过度炎症反应过程中发挥重要作用,电针能起到抑制慢性脑缺血炎性损伤的作用,但电针不具备上调LXRβ表达的作用。     

萝卜硫素对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织Toll样受体4/核因子κB信号通路的影响

目的评价萝卜硫素对于脓毒症急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织炎症反应以及Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）信号通路的影响。 方法将30只雄性Sprague Dawley大鼠按随机数字表法分成假手术组、模型组和治疗组,每组各10只。模型组和治疗组大鼠采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制备大鼠脓毒症模型,治疗组大鼠在术后立即腹腔注射50 mg/kg的萝卜硫素注射液,其余两组注入等量等渗NaCl溶液;于术后24 h大鼠右侧颈总动脉采集动脉血标本,然后处死大鼠取肺组织测定肺组织湿/干比。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测三组大鼠肺组织匀浆标本肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、NF-κB p65表达水平;荧光实时定量PCR检测三组大鼠肺组织TLR4 mRNA的表达。 结果假手术组、模型组及治疗组大鼠肺组织湿/干比[（4.00 ± 0.13）、（6.10 ± 0.05）、（5.80 ± 0.08）]、氧合指数[（315 ± 11）、（177 ± 7）、（200 ± 12）mmHg]、TNF-α[（6.05 ± 0.29）、（45.06 ± 0.52）、（27.09 ± 0.85）ng/L]、IL-1β[（8.02 ± 0.21）、（38.23 ± 0.81）、（32.73 ± 1.12）ng/L]及NF-κB p65[（0.375 ± 0.013）、（1.230 ± 0.045）、（0.988 ± 0.043）ng/L]表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 480.891、255.309、4 245.262、1 918.168、564.842,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,模型组和治疗组大鼠肺组织湿/干比、TNF-α、IL-1β、NF-κB p65表达水平均较假手术组大鼠显著升高（P均< 0.05）,治疗组大鼠肺组织湿/干比、TNF-α、IL-1β、NF-κB p65表达水平均较模型组大鼠显著降低（P均< 0.05）;而模型组和治疗组大鼠氧合指数均较假手术组大鼠显著降低（P均< 0.05）,治疗组大鼠氧合指数较模型组大鼠显著升高（P < 0.05）。荧光实时定量PCR结果显示,三组大鼠肺组织TLR4 mRNA表达水平比较,差异具有统计学意义（F= 224.538,P < 0.001）。进一步两两比较发现,与假手术组比较,模型组及治疗组大鼠肺组织TLR4 mRNA表达均显著升高（P均< 0.05）;而治疗组大鼠肺组织TLR4 mRNA表达较模型组显著降低（P < 0.05）。 结论萝卜硫素可减轻脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织炎症反应、肺水肿程度,改善缺氧状态,对于肺组织具有一定保护作用,且其作用机制可能与干预TLR4/NF-κB信号途径相关。     

醒脑静注射液对颅脑损伤大鼠神经功能的影响及机制研究

目的探讨醒脑静注射液对颅脑损伤大鼠神经功能的影响及相关机制。 方法108只大鼠采用随机数字表法分成假手术组、创伤组和治疗组,每组36只。采用改进的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠颅脑损伤模型,假手术组和创伤组大鼠腹腔注射1 mL等渗NaCl溶液,治疗组大鼠按5 mL/kg的剂量腹腔注射醒脑静注射液,1次/d,连续7 d。每组6只大鼠用于神经功能检测,另外每组分别在12、24、48、72和168 h时点断头处死6只大鼠,分离海马组织。采用Western-blotting检测Survivin蛋白表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法（TUNEL）检测神经细胞凋亡情况。采用前肢放置试验评分和平衡实验评分对术后7、14、21和28 d大鼠进行行为测试,改良神经功能缺损程度评分测定各组大鼠神经功能损伤情况。 结果三组间大鼠海马组织Survivin蛋白表达和神经细胞凋亡比例比较,差异有统计学意义（F=262.495、203.219,P均< 0.05）。12、24、48、72和168 h创伤组及治疗组大鼠海马组织Survivin蛋白表达和神经细胞凋亡比例均较同时间点假手术组显著升高（P均< 0.05）;与同时间点创伤组比较,48、72和168 h治疗组大鼠海马组织Survivin蛋白表达均显著升高（P均< 0.05）,而48、72和168 h神经细胞凋亡比例均较同时间点创伤组显著下降。三组前肢放置试验评分和平衡实验评分比较,差异均有统计学意义（F=60.876、23.143,P均< 0.05）。术后7、14、21和28 d治疗组大鼠前肢放置试验评分和平衡实验评分均较同时间点创伤组显著下降（P均< 0.05）。三组大鼠改良神经功能缺损程度评分比较,差异有统计学意义（F=24.046,P < 0.001）。术后7、14、21和28 d治疗组大鼠改良神经功能缺损程度评分均较同时间点创伤组显著下降（P均< 0.05）。 结论醒脑静注射液可能通过上调Survivin蛋白表达抑制神经细胞凋亡,从而发挥保护颅脑损伤大鼠神经功能的作用。     

联合应用免疫抑制剂治疗大鼠急性脊髓损伤效果观察

目的探讨联合应用免疫抑制剂他克莫司(FK506)和FTY720对大鼠急性脊髓损伤的神经保护作用。方法采用Allen′s打击法制备大鼠脊髓损伤模型,84只大鼠分成4组:FK506+FTY720联合治疗组(A组)、FK506治疗组(B组),脊髓损伤组(C组)和正常对照组(D组)。A组通过尾静脉注射0.3 mg/kg FK506,并予鼻饲0.3 mg/kg FTY720,B组通过尾静脉注射0.5 mg/kg FK506,C组注射生理盐水。伤后6 h、24 h和48 h取伤段脊髓行HE染色分析和Tunel凋亡分析;伤后第1、3和7天行体感诱发电位(SEP)检测;伤后第1、3、7和14天行BBB评分和斜板试验评分。结果联合治疗组和FK506治疗组伤后各个时间取材点的脊髓损伤出血坏死区均轻于损伤组,在第6、24和48小时时间点脊髓Tunel神经细胞凋亡检测明显轻于损伤组,有显著差异性(P<0.05),但2组之间比较无显著差异性(P>0.05)。联合治疗组和FK506治疗组伤后各时间点SEP、BBB评分和斜板试验评分均优于损伤组,有显著性差异(P<0.05),但是2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠急性脊髓损伤早期联合应用FK506和FTY720具有良好的保护神经功能和促进神经功能恢复的作用。     

远端肢体缺血后处理通过线粒体自噬减轻大鼠局灶型脑缺血再灌注损伤的研究

目的探讨远端肢体缺血后处理通过线粒体自噬减轻大鼠局灶型脑缺血再灌注损伤的作用。 方法将105只成年雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术组、缺血再灌注组（A组）、缺血再灌注+远端缺血后处理组（B组）、缺血再灌注+远端缺血后处理+等渗NaCl溶液组（C组）和缺血再灌注+远端缺血后处理+线粒体分裂抑制剂（Mdivi-1）组（D组）,每组各21只大鼠。假手术组仅暴露和游离右侧颈动脉,A、B、C、D组采用大脑中动脉阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。B、C、D组大鼠于再灌注开始夹闭双侧股动脉实行3个循环的10 min缺血/10 min再灌注,C、D组大鼠在缺血前5 min分别腹腔注射等容量的等渗NaCl溶液和3 mg/kg的Mdivi-1。比较各组大鼠神经功能缺陷量表（NDS）评分、脑梗塞体积百分比、脑缺血半暗区细胞凋亡率、微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/Ⅰ比值、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛及15-F_2t-Isoprostane的表达水平。 结果假手术组大鼠未发生神经功能缺损和脑梗塞。A、B、C、D组大鼠NDS评分[（2.8±0.6）、（1.6±0.4）、（1.6±0.5）、（2.5±0.5）分]和脑梗塞体积百分比[（48±3）%、（28±4）%、（28±4）%、（41±3）%]比较,差异均有统计学意义（F = 39.237、53.278,P均< 0.001）,且B、C组大鼠NDS评分和脑梗塞体积百分比均较A、D组显著降低（P均< 0.05）。假手术组、A组、B组、C组及D组大鼠脑缺血半暗区细胞凋亡率[（2.3±0.8）%、（54.6±5.2）%、（29.3±3.1）%、（29.8±3.3）%、（51.2±4.5）%]、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值[（0.13±0.03）、（0.32±0.05）、（0.53±0.06）、（0.48±0.08）、（0.35±0.06）]、SOD [（168±19）、（92±13）、（162±21）、（165±23）、（94±15）U/mg]、丙二醛[（4.22±0.28）、（8.41±0.42）、（5.14±0.27）、（5.26±0.31）、（7.93±0.44）nmol/mg]及15-F_2t-Isoprostane [（179±86）、（389±105）、（208±89）、（215±85）、（364±103）mg/g]的表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 54.658、32.358、59.677、46.195、193.962,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,A、B、C、D组大鼠脑缺血半暗区细胞凋亡率、LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、丙二醛及15-F_2t-Isoprostane表达水平均较假手术组显著升高,A、D组大鼠SOD表达水平均较假手术组显著降低（P均< 0.05）;与A、D组比较,B、C组大鼠LC3-Ⅱ/Ⅰ比值和SOD表达水平均显著升高,脑缺血半暗区细胞凋亡率、丙二醛及15-F_2t-Isoprostane表达水平均显著降低（P均< 0.05）。 结论远端肢体缺血后处理可能通过增加线粒体自噬水平抑制氧化应激反应,从而减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。     

前列地尔注射液对缺血性脑卒中患者神经功能恢复、血液流变学及血清炎症因子的影响

目的探讨前列地尔注射液对缺血性脑卒中患者神经功能恢复、血液流变学及血清炎症因子的影响。 方法选取2018年3月至2019年5月深圳市第二人民医院收治的缺血性脑卒中患者100例,按照数字随机表法将患者分为观察组（50例）及对照组（50例）。对照组行神经内科常规性治疗,观察组在对照组基础上联合前列地尔注射液进行治疗,对比分析2组患者治疗前后神经功能、血液流变学［纤维蛋白原（FIB）、血浆黏度（PV）、全血低切黏度（LBV）、红细胞刚性指数（ERI）］及血清炎症因子［人高前移率族蛋白B1（HMG-B1）、白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）］水平的变化。 结果在治疗前,2组患者各项基线资料差异不显著（P＞0.05）。治疗后,观察组治疗总有效率（96%）显著高于对照组（78%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。2组患者治疗后神经功能、血液流变学以及血清炎症因子各项指标与治疗前相比均得到显著改善（P＜0.05）。治疗后观察组与对照组NIHSS评分［（13.43±4.08）分 vs（19.67±4.06）分,P＜0.05］、MoCA评分［（28.75±2.76）分 vs（26.06±2.64）分,P＜0.05］、ADL评分［（90.26±5.27）分 vs（76.16±5.82）分,P＜0.05］比较,差异有统计学意义。治疗后,观察组FIB［（2.07±0.32）g/L］、PV［（2.04±0.65）mPa.s］、LBV［（15.06±3.42）mPa.s］、ERI（2.42±0.11）较对照组［FIB（3.35±0.41）g/L、PV（3.56±0.70）mPa.s、LBV（18.44±3.18）mPa.s、ERI（3.47±0.24）］显著降低（P＜0.05）。治疗后,观察组血清HMG-B1［（4.54±1.12）μg/ml］、IL-8［（64.62±11.54）pg/ml］、TNF-α［（36.17±4.67）mmol/L］较对照组［HMG-B1（8.65±1.67）μg/ml、IL-8（88.64±9.17）pg/ml、TNF-α（59.45±4.09）mmol/L］显著降低（P＜0.05）。 结论前列地尔注射液能有效改善缺血性脑卒中患者血液流变学,抑制血清炎症因子释放,减轻患者脑损伤程度,有助于患者神经功能恢复,改善患者预后。     

依布硒啉对大鼠心肌缺血再灌注损伤后磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路的影响

目的探讨依布硒啉预处理对大鼠心肌缺血再灌注后磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B（P13K/Akt）信号及其内质网应激的影响。 方法将30只大鼠分成对照组,缺血再灌注组及依布硒啉组,每组10只。对照组大鼠冠状动脉左室支左心耳下缘约0.5 cm处只穿线,不结扎,常规腹腔注射生理盐水2 ml;缺血再灌注组大鼠缺血再灌注前30 min腹腔注射生理盐水2 ml;依布硒啉组大鼠缺血再灌注前30 min腹腔注射依布硒啉溶液5 mg/kg。每组各取8只大鼠,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组血清炎症因子高迁移率族蛋白1（HMGB1）、丙二醛、超氧化物歧化酶（SOD）、天冬氨酸转氨酶（AST）及乳酸脱氢酶（LDH）的表达,Tunel法检测缺血心肌细胞凋亡指数,Western-blotting检测各组心肌心肌葡萄糖调节蛋白78（GRP78）蛋白表达及P13K/Akt通路磷酸化水平。 结果三组大鼠间HMGB1、丙二醛、SOD、AST及LDH水平比较,差异均有统计学意义（F = 63.755、73.023、99.220、110.439、120.557,P均< 0.05）,进一步比较发现,缺血再灌注组及依布硒啉组的HMGB1[（9.2 ± 2.7）、（5.5 ± 1.1）、（2.2 ± 0.3）U/L]、丙二醛[（7.2 ± 0.4）、（5.6 ± 0.7）、（4.1 ± 0.9）μmol/L]、AST [（1 011 ± 226）、（813 ± 82）、（671 ± 60）U/L]及LDH [（2 783 ± 674）、（2 043 ± 489）、（1 528 ± 524）U/L]水平较对照组均明显升高,SOD水平[（249 ± 28）、（149 ± 10）、（172 ± 17）kU/L]较对照组明显降低（P均< 0.05）。三组大鼠间的凋亡指数（F = 139.942,P < 0.001）、GRP78蛋白表达（F = 177.846,P < 0.001）及P13K/Akt磷酸化水平（F = 86.286,P < 0.001）比较差异均存在统计学意义,进一步比较发现,缺血再灌注组和依布硒啉组凋亡指数[（38.1 ± 4.6）、（25.4 ± 3.9）、（8.2 ± 1.5）%]明显高于对照组,且I/R组更高（P均< 0.05）。 结论依布硒啉预处理可以抑制大鼠内质网应激,可能与调节P13K/Akt信号通路磷酸化水平有关。     

超声造影定量评价脓毒症急性肾损伤肾血流灌注及其参数与炎症因子的相关性

目的探讨超声造影定量评估脓毒症相关急性肾损伤（S-AKI）大鼠肾血流灌注及其参数对大鼠炎症反应的监测价值。 方法选取健康SD大鼠32只,平均分为模型组和对照组,模型组采用盲肠结扎穿孔术制作脓毒症大鼠,对照组仅开腹游离盲肠末端,不结扎穿孔,直接还纳关闭腹腔。于术后12 h、24 h两个时间点每组取8只大鼠行超声造影检查,并选取感兴趣区绘制时间强度曲线进行定量分析,下腔静脉取血检测血清肌酐（Scr）、尿素（Urea）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素10（IL-10）,留取肾标本进行病理检查。采用独立样本t检验和非参数检验（Mann-Whitney U）统计不同时间点两组各指标的差异,采用Spearman相关分析超声造影定量参数［造影剂到达时间（AT）、达峰时间（TTP）、上升斜率（AS）、峰值强度（PI）、降半时间（DT/2）、下降斜率（DS）、曲线下面积（AUC）］与炎症因子的相关性。 结果（1）模型组肾功能指标Scr、Urea、炎症因子指标IL-6、TNF-α、IL-10于两个时间点均显著高于对照组,差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。（2）造影剂团注后2~4 s,肾血管快速增强,随后皮质、髓质依次显影,髓质、皮质依次消退。与对照组相比,模型组12 h肾皮质TTP增加［（10.47±1.25）s vs（8.30±1.53）s］,DS、PI减小［（-0.13±0.02）dB/s vs（-0.17±0.04）dB/s;（23.90±1.36）dB vs（27.26±1.88）dB］,髓质TTP、DT/2增加［（11.66±1.99）s vs（9.00±1.28）s;（62.49±4.56）s vs（52.15±7.70）s］,DS减小［（-0.13±0.02）dB/s vs（-0.17±0.03）dB/s］,差异均有统计学意义（t=-3.105、-3.121、4.102、-3.180、-3.268,-2.915,P=0.008、0.008、0.001、0.007、0.007、0.011）,模型组24 h肾皮质AS、DS增加［（0.99±0.17）dB/s vs（0.61±0.19）dB/s;（-0.23±0.03）dB/s vs（-0.15±0.04）dB/s］,DT/2、AUC减小［（42.41±3.03）s vs（61.07±6.52）s;（2477.89±113.37）dB·s vs（3024.93±253.81）dB·s］,髓质AS、DS、AT增加［（1.00±0.27）dB/s vs（0.66±0.17）dB/s;（-0.23±0.06）dB/s vs（-0.15±0.04）dB/s;（4.30±0.34）s vs（3.77±0.29）s］,DT/2、AUC减小［（42.73±7.02）s vs（59.64±9.23）s;（2335.75±189.77）dB·s vs（2689.72±285.45）dB·s］,差异具有统计学意义（t=-4.262、5.138、7.344、5.566、-3.061、3.108、-3.349、4.124、2.921,P=0.001、＜0.001、＜0.001、＜0.001、=0.008、=0.008、=0.005、=0.001、=0.011）。（3）肾皮质超声造影定量参数PI、AUC与血清IL-6、TNF-α、IL-10呈显著相关（r=-0.562、-0.398、-0.512;-0.540、-0.638、-0.430,P均＜0.05）。（4）肾病理切片行过碘酸雪夫染色显示,模型组大鼠肾出现肾小管轮廓不清、扩张、刷状缘脱落、肾小管上皮细胞扁平化、脱落表现,24 h模型组部分肾小管管型形成;对照组大鼠病理表现正常。 结论超声造影可以实时动态观察大鼠肾血流灌注过程,定量评价血流灌注水平,初步监测机体的炎症反应状态。