超高效液相色谱串联质谱法测定滴眼剂中6种抑菌剂含量

目的 建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC/MS/MS)同时测定滴眼剂中6种抑菌剂含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1mm×100mm, 1.7μm)，以含0.05%甲酸的2.5mmol/L醋酸铵溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.4mL/min，柱温为40℃，以多反应监测负离子模式检测。结果 羟苯甲酯、羟苯乙酯在0.002~0.5μg/mL范围内，羟苯丙酯在0.02~0.5μg/mL范围内，山梨酸在0.4~100μg/mL范围内，苯甲酸在0.1~25μg/mL范围内，硫柳汞在0.75~10μg/mL范围内，线性关系良好(r≥0.995)；6种抑菌剂的回收率均在80%~115%(RSD≤6%, n=9)。结论 该法专属性良好，准确，灵敏，快速，可用于多种滴眼剂中6种抑菌剂的含量测定，为高通量快速分析滴眼剂中抑菌剂及提高滴眼剂质量标准提供借鉴。     

UPLC法测定连翘中连翘苷的含量

目的:建立测定连翘中连翘苷含量的超高效液相色谱法。方法:色谱柱为Zorbax Eclipse PlusC1(8100mm×2.1mm,1.8μm),流动相为乙腈-水(24:76,V/V),流速为0.3mL·min-1,检测波长为277nm,柱温为室温。结果:连翘苷的进样量在5.9424～59.4240ng范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9993);平均加样回收率为99.83%,RSD=1.27%(n=6)。结论:超高效液相色谱法与传统的高效液相色谱法相比,分析速度快、准确度高、重复性好,减少了有机溶剂的使用,可作为连翘药材质量控制的新方法。     

UPLC-Q-TOF-MS分析头孢美唑钠中有关物质

目的 建立UPLC-Q-TOF-MS分析头孢美唑钠原料中有关物质及其可能结构的方法。方法 应用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)对头孢美唑钠原料中有关物质进行分析。采用Agilent XDB-C18 RRHD色谱柱(2.1mm×100mm, 1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸水(13:87)为流动相进行等度洗脱,流速为0.15mL/min,检测波长254nm,柱温40℃。结果 在原料药中共检出并推断出12种有关物质的化学结构,并解析了其裂解规律。结论     

高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱、二羟丙茶碱、多索茶碱的浓度

目的:建立人血清中茶碱、二羟丙茶碱和多索茶碱血药浓度同时测定的高效液相色谱法并应用于患者的个体化治疗。方法:采用蛋白沉淀法对血样进行预处理,以咖啡因为内标。色谱条件:Eclipse XDB-C₁₈(4.6 mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水梯度洗脱,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长273 nm,柱温为30 ℃。结果:茶碱在1.47~47.00 μg·ml^-1范围内线性良好(r=0.998),二羟丙茶碱在1.28~40.80 μg·ml^-1范围内线性良好(r=0.999),多索茶碱在1.44~46.00 μg·ml^-1范围内线性良好(r=0.999)。茶碱、二羟丙茶碱和多索茶碱的平均绝对回收率均达到95%左右,平均相对回收率分别为100.34%~105.48%,97.09%~103.13%和97.61%~101.39%,日内和日间RSD均小于10%。结论:本方法简便、快速、灵敏,可用于茶碱、二羟丙茶碱和多索茶碱的临床血药浓度监测及药动学研究。     

UPLC-MS-MS法测定怀山药中去甲乌药碱的含量

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS-MS)法测定怀山药中去甲乌药碱含量的测定方法。方法:样品用0.1%高氯酸溶液提取、MCX固相萃取柱净化,5%氨水甲醇溶液洗脱,洗脱液水浴上氮吹干后用50%甲醇水溶液(含0.1%甲液)复溶。采用Waters BEH C₁₈超高效液相色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%的甲酸水溶液进行梯度洗脱分离,柱温30℃,流速为0.3 m L·min^-1,以非诺特罗作为内标进行定量。结果:去甲乌药碱的线性范围为1～100 ng·m L^-1(r=0.999 3),检出限为0.3μg·kg^-1,定量限为1μg·kg^-1;样品加标回收率为86.8%～91.8%,相对标准偏差为2.1%。结论:本方法净化效果好,灵敏度高,线性范围广,重复性好,能够满足怀山药中去甲乌药碱含量测定要求。     

苦橘咳喘合剂的质量标准

目的:确定苦橘咳喘合剂的质量标准。方法:采用薄层色谱法对制剂中的麻黄、橘红进行定性鉴别。采用高效液相色谱法测定苦杏仁中苦杏仁苷的含量,采用:Hypersil ODS(Waters eXTerra色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(6:94),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为207 nm,柱温为26℃。结果:薄层鉴别的色谱斑点清晰,且阴性对照无干扰。高效液相苦杏仁苷进样浓度在2.00~32.00μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系,平均回收率达到99.4%以上。结论:本法简便、可靠、专属性强,可以作为苦橘咳喘合剂的质量控制标准。     

UPLC法测定莲菊感冒胶囊中3种成分的含量

 目的: 建立同时测定莲菊感冒胶囊中1,5-O-二咖啡酰基-奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基-奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰基-奎宁酸的超高效液相色谱(UPLC)分析方法。方法：采用Waters Acquity UPLC系统,Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,以流速为0.2 mL?min-1进行梯度洗脱;柱温：45℃;样品经50%乙醇超声提取后用UPLC-PDA进行分析检测,检测波长为325 nm。结果：1,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸3种被测成分在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.999 8);平均回收率在99.1%～101.7%之间,RSD≤2.5%。结论：UPLC分离效果及重复性好,且快速、简便,可作为莲菊感冒胶囊的质量控制方法。     

UPLC-MS/MS法同时测定绞股蓝中16个皂苷类成分的含量

目的:建立超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法(UPLC-MS/MS),在12 min内完成对绞股蓝药材中16个皂苷类成分(人参皂苷CK、F₂、Rb₁、Rb₃、Rd、Rg₂、Rg₃、Rg₅、Rg₆、Rh₄、Rh₈,绞股蓝皂苷A、XLVI、XLIX,三七皂苷Fd和越南人参皂苷R₈)的含量测定。方法:采用UPLC-MS/MS法,正离子多反应监测(MRM)模式进行含量测定。色谱条件：采用Waters CORTECS C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.6μm),流动相为0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速为0.25 mL·min^-1,柱温为45℃。结果:在所设定的色谱条件下,12 min内完成对绞股蓝药材中上述16个成分的含量测定,在考察的浓度范围内均呈良好的线性关系(r>0.997 6),回收率和RSD...     

痔疮熏洗液的质量考察

目的:制定痔疮熏洗液的质量标准。方法:用薄层色谱法定性鉴别功劳木、苦参和黄柏;采用高效液相色谱法同时测定痔疮熏洗液中盐酸小檗碱和苦参碱含量,色谱柱:WondaSil Superb C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液(pH 6.8)-三乙胺(22:22:70:0.1),检测波长:220 nm,流速:1.0 ml·min^-1,柱温:30℃。结果:薄层色谱斑点清晰,分离度好,阴性无干扰;盐酸小檗碱和苦参碱的线性范围分别为5.8~92.8 mg·L^-1(r=0.999 9),6.4~102.4 mg·L^-1(r=0.999 9),平均加样回收率(n=9)分别为98.17%,97.57%,RSD分别为1.57%,1.42%。结论:定性定量分析方法快速、准确、专属性强,本法可控制痔疮熏洗液的质量。     

维药青香茅中芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量测定

目的：测定维药青香茅中芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量。方法：采用高效液相色谱法,使用SinoChrom C₁₈色谱柱（5 μm,250 mm×4.6 mm）,以甲醇-0.2%磷酸水溶液（41：59）为流动相,检测波长324 nm。结果：芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在5.25~52.50 μg·mL^-1范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,方法平均回收率为：97.29%（RSD为1.23%）,平均含量为57.912 1 μg·g^-1。结论：本方法简便,准确,重复性好,可用测定维药青香茅中芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量。     

超高效液相色谱-质谱联用法快速测定生脉饮中7种木脂素的含量

目的：建立生脉饮（红参、五味子、麦冬）中五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酚的含量测定方法。方法：采用超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS）法进行定量分析,色谱柱ACQUITY UPLC BEH C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）,以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱：1~5 min,A-B（40：60）;5~7 min A-B（40：60~70：30）;7~10 min A-B（70：30）;10~11 min 100% A;11~12 min A-B（40：60）,流速为0.3 mL·min^-1,进样量2 μL,柱温30℃,采用ESI离子源在正离子模式下选择离子扫描模式进行定量分析。结果： 7种木脂素在一定范围内线性良好,相关系数均大于0.999,加样回收率在95.15%~100.84%之间。结论：该方法快速、灵敏度高、选择性好,适合测定生脉饮中木脂素的含量。     

Development and validation of a novel UPLC-MS/MS method for the simultaneous determination of fluticasone propionate and salmeterol in human plasma

Combined administration of fluticasone propionate and salmeterol xinofoatehas been widely used for the treatment of asthma in recent decades. In this investigation, we developed and validated a novel and sensitive ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS) method for simultaneous determination of fluticasone propionate and salmeterol xinofoate in human plasma. Following a simple SPE sample extraction in 96-well plate format, chromatography was performed on a Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈ column (1.7 μm, 50 mm×2.1 mm) with mobile phase consisting of 100% MeOH and 0.1% NH₄OH in water on a gradient program at flow rate of 0.5 mL/min. Detection of analytes and internal standards was accomplished using multiple reaction monitoring (MRM) of precursor>product ion pairs of m/z 501.4>313.2(fluticasone propionate), 506.4>293.3 (fluticasone propionate-d5), 416.4>232.1 (salmeterol xinofoate) and 419.3>235.2 (salmeterol-d3). The assay range was 2.50–500 pg/mL for both analytes, and a 1/x² weighted linear regression model was used. The inter-assay accuracy and precision of the method were within ±8.6%. The recoveries from 0.30 mL of plasma were greater than 51.0% and 54.6% for fluticasone propionate and salmeterol, respectively, and the results were consistent across low, middle and high concentration levels. The method was validated following FDA, EMA and CFDA (China Food and Drug Administration)’s guidance on bioanalysis and then successfully applied to support a clinical study in healthy Chinese subjects following inhaled administration of a single combination of fluticasone propionate/salmeterol (250 μg/50 μg).     

精制冠心片超高效液相色谱法特征图谱的研究

目的：建立精制冠心片的特征图谱。方法：采用UHPLC法。采用Dikma Endevaorsil C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,柱温30 ℃,流速0.2 mL·min^-1,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为270 nm。结果：建立了以丹酚酸B,丹参酮IIA为参照峰的精制冠心片的特征图谱,并指认了芍药苷、迷迭香酸、丹酚酸B、藁本内酯、隐丹参酮和丹参酮IIA 6个特征峰。结论：精制冠心片特征图谱的建立,可以更好地控制精制冠心片的质量。     

狼毒大戟配伍大枣合煎液与单煎液主要成分含量的比较研究

目的：建立狼毒大戟与大枣合煎前后提取液中有效成分含量的分析方法,比较2种提取液中岩大戟内酯B和狼毒乙素的含量差异。方法：采用UPLC-DAD方法,对狼毒大戟配伍大枣合煎液与单煎液中的上述2个主要成分进行含量测定。应用Waters ACQUITY BEH C₁₈柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,0.1%甲酸水与色谱乙腈进行梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^-1,检测波长210 nm,柱温为30℃,进样量为5 μL。结果：这两个化合物在测定的范围内表现出良好的线性（r>0.998 4）,方法的回收率在92.6%~103.4%之间。狼毒大戟配伍大枣合煎液中岩大戟内酯B和狼毒乙素的含量均显著低于单煎液。结论：狼毒大戟与大枣合煎可降低有毒成分的溶出。     

超高效液相色谱法测定风湿骨痛丸中5种成分的含量

目的： 采用超高效液相色谱法（UPLC）测定风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱5种成分的含量。方法： （1）乌头碱、次乌头碱、新乌头碱检测方法：色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）,ACQUITY UPLC HSS T3预柱（5 mm×2.1 mm,1.8 μm）,流动相为甲醇-0.3 mol·L^-1三乙胺（65∶35,V/V）,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长235 nm,进样量10 μL;（2）麻黄碱、伪麻黄碱检测方法：色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）,采用梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长210 nm,进样量10 μL。结果： 乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱分离度良好;线性范围依次为4.00~80.04 μg·mL^-1（r=0.999 4）,4.00~80.02 μg·mL^-1（r=0.999 3）,4.03~80.57 μg·mL^-1（r=0.999 6）,6.40~640.25 μg·mL^-1（r=0.999 6）,6.41~641.34 μg·mL^-1（r=0.999 7）;检出限依次为2.03,1.98,1.93,3.67,3.73 μg·mL^-1;定量限依次为3.98,3.87,4.03,6.37,6.41 μg·mL^-1;平均回收率依次为99.06%,98.87%,99.95%,99.92%,100.54%,RSD依次为0.95%,1.55%,1.58%,1.18%,0.91%;风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱的平均含量依次为0.001%,0.004%,0.004%,0.041%,0.027%。结论： 本研究UPLC方法准确,重复性良好,可测定风湿骨痛丸中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、麻黄碱、伪麻黄碱的含量,为风湿骨痛丸的质量控制提供参考。     

高效液相色谱法同时测定夜香牛颗粒中绿原酸和木犀草苷的含量

目的：建立夜香牛颗粒中绿原酸和木犀草苷含量分析的方法。方法：采用FORTIS-C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-0.05%KH₂PO₄溶液为流动相,采用梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长330 nm。 结果：绿原酸在4.82~96.30 μg·mL^-1、木犀草苷在1.62~32.40 μg·mL^-1范围内有良好线性关系（r=0.999 9）,平均加样回收率分别为98.8%和98.4%,RSD分别为1.07%和1.64%。结论：本方法灵敏度高、准确、重复性好、专属性强,可用于夜香牛颗粒的质量控制。     

Development and validation of a sensitive HPLC method for the determination of lisinopril in human plasma after derivatization with 4-fluoro-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole

In this study, we developed a simple and sensitive HPLC method for the determination of lisinopril in human plasma. The sample clean-up was carried out by solid-phase extraction (SPE) using a cation-exchange (Strata-SCX^®) extraction cartridge. After a pre-column derivatization with 4-fluoro-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole, the reaction mixture was analyzed on an Agilent Zorbax SB^®-C₁₈ (150 mm×4.6 mm, 5 μm). The flow rate was set at 1.0 mL/min. Fluorescence detection was performed at an excitation wavelength of 470 nm and an emission wavelength of 530 nm. The mobile phase consisted of a mixture of methanol and 0.02 M sodium dihydrogen phosphate (pH = 3.0, 60:40, v/v). The average extraction recovery of lisinopril and fluvoxamine (internal standard) was >85%. The method exhibited a linear calibration curve over the concentration range of 1–1000 ng/mL with a correlation coefficient (r²) of ≥0.98 and a limit of quantification (LOQ) equal to 2 ng/mL. The within-run and between-run precisions were satisfactory with an RSD of 3.8%–13.7% (accuracy: from 95.0% to 96.4%) and 4.273%–14.3% (accuracy: from 94.4% to 98.5%), respectively.     

超高效液相色谱法同时测定银翘散中4种指标性成分含量

目的：建立超高效液相色谱法（UPLC）同时测定银翘散中绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A、牛蒡苷含量的方法。方法：采用UPLC法,ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,检测波长230 nm,柱温为40℃,同时测定4种指标性成分的含量。结果：绿原酸、连翘酯苷A、连翘苷、牛蒡苷分别在10.75~344.0,7.062 5~226.0,2.375~76.0,9.656 25~309.0 μg·mL^-1线性关系良好（r≥0.999 1）。结论：该方法操作简便快速,结果准确,专属性强,重复性好,可用于银翘散的质量控制。     

高效液相色谱法测定头孢曲松钠中2-巯基苯并噻唑含量

摘要：目的 建立测定头孢曲松钠中基因毒性杂质2-巯基苯并噻唑含量的反相高效液相色谱法。方法 采用十八烷基硅 烷键合硅胶为填充剂(Agilent ZORBAX SB-Aq C18,4.6 mm×250 mm,5 μm)的色谱柱,流动相为1%甲酸溶液-乙腈(60:40, V/V),流速0.5 mL/min,检测波长320 nm,柱温25℃。结果 定量限为0.5 ppm(相当于样品浓度的百分比为0.00005%),检测 限为0.15 ppm。2-巯基苯并噻唑在0.0051~0.2051 μg/mL浓度范围内,线性方程为y=6.4195x-0.0098,r=0.9996＞0.999。回收率为 86.3%~102.3%(RSD＜10.0%,n=9)。结论 该方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可有效检出头孢曲松钠中2-巯基苯并噻唑 的含量。     

二维超高效液相色谱质谱联用技术测定注射用头孢地嗪钠的杂质谱

目的 建立二维超高效液相色谱质谱联用法研究注射用头孢地嗪钠的杂质谱。方法 一维色谱采用Waters HSS T3 C18(100mm×2.1mm, 1.8μm);以磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾0.87g,无水磷酸氢二钠0.22g,加水溶解并稀释至1000mL)为流动相A,乙腈为流动项B,梯度洗脱;柱温：35℃;流速：0.4mL/min;检测波长：215nm;进样量：3μL;二维色谱采用Waters BEH C18(50mm×2.1mm, 1.7μm);以0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸的乙腈为流动项B,切峰后开始B相3min由2%到95%;柱温：35℃;流速：0.4mL/min;质谱采用Xevo G2-XS QTof MS系统,离子源为ESI源,离子源温度：110℃,毛细管电压：3.0KV,雾化器温度：450℃,雾化器流速：800L/h,扫描范围：m/z 100~2000,测定头孢地嗪主要杂质的一级和二级质谱,进行结构解析。结果 采用UPLC梯度洗脱方法可检出多种头孢地嗪异构体、降解杂质和高分子杂质等,检出杂质的个数和总量均较现行法定标准多。结论 本品的杂质在原料合成、制剂分装及运输储藏过程中均可产生,因此,应对原料和制剂生产过程中的关键技术指标和环境条件加以控制。