5-ALA-PDT联合放疗对常氧与乏氧人卵巢癌SKOV3细胞的协同杀伤作用机制

目的：探讨在常氧与乏氧下5-氨基酮戊酸（5-ALA）介导的光动力疗法（PDT）（5-ALA-PDT）联合放疗对人卵巢癌SKOV3细胞的协同杀伤作用机制。方法：实验分为常氧组与乏氧组,两组再各设正常对照组（N）、单纯药物组（0.3 mmol·L^-1）、放射加药组（0.3 mmol·L^-1+6 Gy）、光动力组（0.3 mmol·L^-1+0.5 J·cm^-2）及联合组（6 Gy+0.3 mmol·L^-1-0.5 J·cm^-2）,采用荧光显微镜观察5-ALA转化为原卟啉IX的荧光强度,倒置显微镜结合台盼蓝单染法检测细胞膜破损率,荧光显微镜结合Hoechst 33342单染法检测细胞凋亡,流式细胞仪结合试剂盒检测ROS含量。结果：4 h后细胞膜附近明显出现红色荧光,常氧下的荧光强度显著强于乏氧。24 h或48 h后,联合组细胞膜破损率常氧高于乏氧（P<0.01）,随着时间的延长细胞膜破裂增多（P<0.01）;同时间点同组内联合组细胞膜破损率比单纯放射加药组、光动力组都要高（P<0.01）。24 h或48 h后,联合组细胞凋亡率24 h常氧低于乏氧（P<0.01）,48 h不显著（P>0.05）,随着时间的延长凋亡率不断降低（P<0.01）;同时间点同组内联合组24 h细胞凋亡率比单纯放射加药组、光动力组都要高,而48 h却都要低（P<0.05）。0 h、12 h或24 h后,联合组ROS含量常氧低于乏氧（P<0.01）,随着时间的延长ROS含量先升高后降低（P<0.01）,12 h含量最高;同时间点同组内联合组ROS含量都比单纯放射加药组、光动力组都要高（P<0.05）。结论：常氧下5-ALA-PDT与放疗联用表现出协同作用,可能与产生的ROS导致细胞膜破损造成细胞大量坏死有关;而乏氧下表现出协同作用可能与ROS导致细胞大量凋亡有密切联系。     

5-氨基酮戊酸对人舌麟癌Tea8113细胞株体外光动力杀伤作用的基础研究

目的初步研究体外5-氨基酮戊酸介导的光动力疗法对人舌鳞癌Tea8113细胞的杀伤效应。方法体外培养Tca8113细胞,以5-氨基酮戊酸为光敏剂,半导体激光治疗仪给予光动力疗法,采用MTr法检测光敏剂不同孵育时间、不同光敏剂浓度对Tea8113细胞抑制率的影响。结果5-AIA—PDT作用后,Tea8113细胞生长受到抑制,孵育时间和浓度效应关系显著（P〈0．05）。药物最佳作用浓度为1mmoL／l,最佳孵育时间为6h。结论5-氨基酮戊酸一光动力疗法能有效杀伤Tea8113细胞,光敏剂孵育时间、光敏剂浓度是影响疗效的重要因素。     

Cpd5对人卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制和凋亡诱导作用

目的：观察Cpd5[2-（2-巯基乙醇）-3-甲基-1,4-萘醌,Compound5]对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响。方法：MTT法观察Cpd5对SK-OV3细胞的生长抑制作用,AnnexinV/PI双标记流式细胞术检测Cpd5对SKOV3细胞的凋亡诱导,Hoechst-33258染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态。结果：5、10、20、30、40、50、60μmol/LCpd5处理SKOV3细胞48h,生长抑制率分别为2.77%、5.19%、10.61%、41.15%、71.37%、82.90%、89.81%。不同时间点（12、24、48和72h）检测,细胞生长抑制率存在剂量-时间依赖关系。流式细胞术检测,30μmol/LCpd5处理12、24和48h后,细胞凋亡率分别达9.25%、20.07%、56.16%;50μmol/L组的细胞凋亡率明显高于30μmol/L,且随时间增加而显著增加。用40、50和60μmol/LCpd5处理细胞12h,光镜观察即可见明显的形态学改变。荧光显微镜观察：AnnexinV-EGFP/PI双染显示,实验组比阴性对照组细胞凋亡率明显增多;Cpd5作用24、48h后,Hoechst-33258染色可见细胞出现明显的凋亡形态,20μmol/L浓度组凋亡率增加,30、40、50、60μmol/L各组细胞凋亡率显著增加。结论：Cpd5能以剂量-时间依赖的方式抑制SKOV3细胞增殖并诱导凋亡,是潜在的抗卵巢癌新化合物。     

5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗寻常疣

目的探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗寻常疣的疗效与安全性。方法 20%的5-氨基酮戊酸均匀涂抹在皮损及其周围1cm以内的皮肤,遮光封包4h后,再用红光（633±5nm）照射20min,照射剂量为126J/cm2。每周治疗一次,连续治疗4次后进行疗效评估,治疗结束后4周随访评估复发情况。结果痊愈率96.3%,显效率3.4%,总有效率100%,复发率3.4%。结论 5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗寻常疣疗效好,美容效果好,复发率低,不良反应少且轻微,不影响工作和学习,可成为临床治疗寻常疣的新选择。     

5-氨基酮戊酸光动力疗法在尖锐湿疣治疗中的应用进展

尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒(HPV)感染所引起的良性上皮肿瘤,性接触是其主要传播途径之一.目前尚没有非常理想的治疗药物与技术,传统的激光、冷冻等创伤性治疗给患者带来痛苦,且复发率高,部分特殊部位无法对其治疗.光动力疗法是一门新兴的消融技术,并在2009年被正式列入美国疾病控制和预防中心(CDC)制定的"性病治疗指南".近年来5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣的疗效已获得了普遍的肯定.本文就光动力疗法在尖锐湿疣治疗中的应用进展进行综述.     

5-氨基酮戊酸光动力疗法在尖锐湿疣治疗中的应用进展

尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒（HPV）感染所引起的良性上皮肿瘤,性接触是其主要传播途径之一。目前尚没有非常理想的治疗药物与技术,传统的激光、冷冻等创伤性治疗给患者带来痛苦,且复发率高,部分特殊部位无法对其治疗。光动力疗法是一门新兴的消融技术,并在2009年被正式列入美国疾病控制和预防中心（CDC）制定的＂性病治疗指南＂。近年来5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣的疗效已获得了普遍的肯定。本文就光动力疗法在尖锐湿疣治疗中的应用进展进行综述。     

高频电刀联合5-氨基酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣的疗效观察

目的观察5-氨基酮戊酸光动力(ALA-PDT)疗法联合高频电刀治疗尖锐湿疣的疗效和复发率。方法将入选的70例患者随机分为2组,每组35例,一组为高频电刀联合ALA-PDT治疗组,用高频电刀去除疣体后立即行ALA-PDT疗法治疗;另一组为高频电刀治疗组,在末次治疗后的第1周进行疗效评价,治疗后3个月内对患者进行随访,以评价复发率,比较2组患者的疗效和复发率。结果高频电刀联合ALA-PDT治疗组的治愈率和治疗后3个月后复发率分别是88.57%和11.43%,高频电刀治疗组分别为37.14%和62.86%,2组的治愈率和治疗后3个月时的复发率比较,差异均有统计学意义(P=0.000),2组患者在治疗后均未发生严重的不良反应。结论高频电刀联合ALA-PDT治疗尖锐湿疣的治愈率高,复发率低,且不良反应少,患者的依从性较好。     

5-氨基酮戊酸光动力疗法联合电灼术治疗肛周尖锐湿疣疗效观察

目的 评价5-氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）联合电灼术治疗肛周尖锐湿疣的疗效和复发率.方法 将67例肛周尖锐湿疣患者按门诊就诊顺序随机分为三组,联合治疗组22例用电灼术去除显性疣体后立即进行ALA-PDT治疗,每周1次,连续治疗3～4次;光动力组22例,用ALA-PDT治疗,每周1次,1个月为1个疗程;电灼术组23例,用传统方法电灼术对所有皮损逐个进行电灼气化治疗,每周1次的分批治疗,1个月为1个疗程.末次治疗后随访6个月判定疗效及观察复发率.结果 联合治疗组痊愈率为90.9％（20/22）,复发率为9.1％ （2/22）;光动力组痊愈率为54.5％ （12/22）,复发率为22.7％ （5/22）;电灼术组痊愈率为39.1％ （9/23）,复发率为43.5％ （10/23）.联合治疗组的痊愈率和复发率与电灼术治疗组差异有统计学意义（P =0.000;P =0.017）.结论 ALA-PDT治疗肛周尖锐湿疣治愈率高,复发率低,副作用小.     

5-氨基酮戊酸光动力疗法联合CO_2激光和(或)手术治疗难治性尖锐湿疣45例疗效观察

目的探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)联合CO2激光和(或)手术治疗难治性尖锐湿疣的临床疗效。方法对45例尿道、肛周、肛管、外生殖器难治性尖锐湿疣患者进行ALA-PDT联合局部CO2激光和(或)手术治疗,其中男性25例,女性20例,单纯尿道病变8例,单纯外生殖器病变者18例,尿道合并外生殖器病变者6例,单纯肛周病变8例,肛周合并肛管病变者3例,外生殖器合并肛周病变2例,其中2例为巨大尖锐湿疣,1例发生于外生殖器、1例发生于肛周。7~10 d治疗1次,根据病情不同共治疗3~5次,对每次治疗后的不良反应、疗效等做出评价,并对其进行至少3个月的随访,对其预后及复发情况作出评判。结果 45例难治性尖锐湿疣患者经ALA-PDT治疗后,3~5次治疗后42例患者疣体完全消失,治愈率达93.3%;1例病变发生于龟头及冠状沟部位的患者和1例尿道、阴道、外阴大面积皮疹的患者于治疗后出现治疗部位小水疱,数小时后局部水疱破溃出现浅表糜烂,均未发生严重感染、溃疡、瘢痕和尿道狭窄等不良反应,不良反应发生率为4.44%;随访6~12个月,原位复发3例,复发率为7.14%。结论 ALA-PDT是治疗尿道、外生殖器、肛周、肛管尖锐湿疣的新疗法,具有有效、安全、简便、痛苦小、术后无需特殊护理等特点,尤其适用于尿道、阴道、肛管内等隐蔽部位的病变,联合CO2激光和(或)手术治疗,可明显提高治愈率。     

5-氨基酮戊酸光动力疗法联合液氮冷冻治疗肛周尖锐湿疣疗效观察

目的:探讨5-氨基酮戊酸光动力联合液氮冷冻治疗肛周尖锐湿疣的临床疗效。方法:60例肛周尖锐湿疣患者随机分为对照组和观察组,两组均采用5-氨基酮戊酸光动力治疗,观察组在此基础上加用液氮冷冻治疗。结果:观察组治愈率明显高于对照组,复发率明显低于对照组(P0.027)。结论:5-氨基酮戊酸光动力联合液氮冷冻治疗肛周尖锐湿疣能明显提高疗效,并有效预防尖锐湿疣复发。     

拉帕替尼联合顺铂对人卵巢癌细胞SKOV3生长的影响

目的探讨新型靶向治疗药物拉帕替尼联合顺铂(DDP)对人卵巢腺癌细胞株SKOV3的增殖抑制作用以及对磷酸AKT蛋白表达的影响。方法体外培养人卵巢癌细胞株SKOV3,采用MTT方法检测不同浓度拉帕替尼、DDP单用或者合用对细胞增殖活力的改变;用流式细胞仪进行细胞周期分析;用流式细胞仪检测SKOV3应用拉帕替尼前后磷酸化AKT(P-AKT)蛋白的表达。结果拉帕替尼及顺铂单独使用即对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞有增殖抑制作用,不同浓度的拉帕替尼与顺铂联合应用对人卵巢癌细胞株SKOV3细胞的增殖抑制作用较单药组增强(P<0.05),与对照组相比有统计学意义(P<0.05);应用拉帕替尼前后P-AKT蛋白的表达有显著不同(P<0.05)。结论拉帕替尼联合顺铂可显著抑制SKOV3细胞株的增殖,其作用可能与P-AKT的表达有关,为其在卵巢癌上的应用提供了新的靶点和一定的理论基础。     

5-氨基-3-乙酰丙酸光动力疗法在肿瘤诊断和治疗中的应用进展

5-氨基-3-乙酰丙酸（5-aminolevulinic acid,5-ALA）是一种内源性的光敏剂,肿瘤细胞和其他恶性细胞可以选择性地吸收外源性5-ALA,使细胞内积聚过量的原卟啉。原卟啉在一定波长的光照射下,发生化学反应,使肿瘤细胞或其他增生活跃的细胞坏死、凋亡,这一过程被称为氨基-3-乙酰丙酸-光动力疗法（aminolevulinic acid-photodynamic therapy,ALA-PDT）。本文对ALA-PDT近年来在肿瘤的诊断和治疗中的应用进展作一综述。     

莪术油注射液致人卵巢癌SKOV3细胞胀亡形态变化研究

目的研究莪术油注射液对人卵巢癌SKOV3细胞形态学改变的影响。方法以不同的药物浓度作用人卵巢癌SKOV3细胞株后,采用光学显微镜和透射电镜观察卵巢癌SKOV3细胞形态学变化。结果光镜下可见莪术油低浓度组部分细胞体积开始变大,细胞胞浆空泡化,胞浆内出现致密颗粒,细胞核开始变形。细胞胞浆出现大面积的空泡,细胞核变形明显,细胞质出现颗粒脱落,出现细胞质空泡,核内染色质分散。高浓度组细胞肿胀,胞浆减少,核浆比例增加,细胞质大量颗粒脱落,细胞质空泡明显,有胞膜崩解、细胞核溶解;电镜下可见卵巢癌SKOV3细胞胀亡,且呈浓度依赖性。结论莪术油注射液诱导SKOV3细胞胀亡是其抑制肿瘤细胞生长的机制之一。     

5-氨基酮戊酸光动力疗法与口服异维A酸治疗面部中重度痤疮的疗效对比

目的：比较5-氨基酮戊酸光动力疗法（5-ALA-PDT）与口服异维A酸治疗面部中重度痤疮的疗效。方法：将55例中重度痤疮患者随机分为治疗组及对照组,治疗组予5-ALA-PDT治疗,对照组予口服异维A酸及外用红霉素软膏治疗,治疗后3个月观察疗效,半年观察复发率。结果：治疗后3个月临床治愈率治疗组为59.1%,对照组为29.6%,差异有统计学意义（P＜0.05）;治疗后半年两组均未见复发病例。结论：5-ALA-PDT具有疗程短、起效快、副作用小、操作简单、治愈率高等优点,且无感染、形成瘢痕等风险,安全性高,不易复发,值得临床推广。     

大蒜油与顺铂对人卵巢癌SKOV_3细胞生长抑制的联合作用

目的研究大蒜油(garlicoil,GO)、顺铂(cisplatin,CDDP)对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用及二者合用时的联合作用。方法体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分别用GO、CDDP、GO+CDDP处理24h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GO、CDDP、GO+CDDP对SKOV3细胞的生长抑制作用,用Chou-Talalay联合指数法评价两药合用对SKOV3细胞生长抑制的联合作用。结果单独应用GO作用于SKOV3细胞24h后,MTT检测发现随着GO浓度的增加,抑制率明显增高。GO和CDDP合用时,二者各自对SKOV3细胞的生长抑制作用增强,GO单用时中效浓度(Dm)为670.5mg/L,与CDDP按浓度比1∶1合用时Dm为138.2mg/L,单用时的Dm是合用时的4.852倍;CDDP单用时Dm为7.088mg/L,与GO按浓度比1∶1合用时Dm为1.037mg/L,单用时的Dm是合用时的6.835倍。GO和CDDP合用时,在不同抑制率下联合指数CI均小于1,所以两药合用时对SKOV3细胞的生长起协同抑制作用。结论在本试验条件下,GO能抑制人卵巢癌SKOV3细胞的生长,同时与CDDP合用时表现为协同作用。     

熊果酸对人上皮性卵巢癌 SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究熊果酸(UA)对人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 将处于对数生长期人上皮性卵巢癌SKOV3细胞随机分为5组:正常对照组、熊果酸(40、20、10 mg·L-1)干预组和顺铂(40 mg·L-1)干预组(阳性对照组)。药物干预48 h后,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增值抑制率;通过流式细胞仪分析细胞周期的改变、观察细胞凋亡并计算细胞凋亡率;通过RT-PCR技术检测细胞Bax mRNA和bcl-2 mRNA表达并计算Bax/bcl-2表达比值,Western blot法检测细胞半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达并进行半定量分析。结果 较正常对照组,熊果酸(40、20 mg·L-1)干预组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.01),细胞周期被阻滞于G₂/M期,细胞凋亡率显著升高(P<0.01);熊果酸(40、20 mg·L-1)干预组细胞中bcl-2 mRNA表达显著下调、Bax mRNA表达显著上调,Bax/bcl-2表达比值显著升高(P<0.01),caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论 熊果酸具有抑制人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖并促进其凋亡的作用,其作用机制可能与熊果酸能够有效下调bcl-2 mRNA表达、上调Bax mRNA表达、提高Bax/bcl-2表达比值以及上调caspase-3蛋白表达有关。     

ERCC1基因表达与磁性Fe_3O_4纳米颗粒逆转卵巢癌细胞耐药性的关系

目的探讨磁性Fe3O4纳米颗粒(Fe3O4-MNPs)逆转人卵巢癌顺铂耐药细胞株(SKOV3/DDP)的耐药性的可能性及其机理。方法将SKOV3/DDP分为对照组、顺铂组、Fe3O4-MNPs组、顺铂+Fe3O4-MNPs组等4个组,流式细胞技术测定细胞凋亡、电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测细胞内顺铂的含量,及RT-PCR检测切除DNA修复基因ERCC1 mRNA在SKOV3/DDP中的表达。结果在顺铂+Fe3O4-MNPs组中,细胞凋亡率及细胞内铂含量均高于顺铂组(P<0.05);ERCC1 mRNA的表达明显低于顺铂组(P<0.05)。结论Fe3O4-MNPs可以逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药性,其作用可能是通过提高细胞内铂浓度、下调ERCC1表达来逆转SKOV3/DDP对顺铂的耐药。