雌激素神经元保护作用的相关机制

阿尔茨海默病（Alzheimer's disease,AD）是一种中枢神经系统退行性疾病,主要表现为β-淀粉样蛋白（Beta amyloid protein,Aβ）的沉积和神经纤维的缠结,而且女性的发病率明显高于男性。目前认为AD的发生和发展与雌激素的减少密切相关,然而,雌激素的神经保护作用机制尚不明确。研究发现雌激素可与其受体结合,调节Trx-1和Ask-1的活性,抑制死亡结构域相关蛋白（Death domain associate protein,Daxx）向细胞质转移,阻断Ask-1/JNK信号转导途径从而发挥抗氧化应激和凋亡;激活MAPK/ERK信号途径,促进淀粉前体蛋白（Amyloid precursor protein,APP）的非淀粉源途径,阻止Aβ的形成;此外,研究还发现被活化的雌激素受体与小窝蛋白相互作用,激活代谢型谷氨酸受体（metabotropic glutamate receptors,mGluRs）,促进环磷腺苷效应元件结合蛋白（cAMP-response element binding protein,CREB）磷酸化;介导第二信使对抗谷氨酸的神经兴奋毒性而发挥神经保护作用。本文将对雌激素发挥神经保护作用的具体机制进行总结分析,为AD的预防和治疗提供一定的理论基础。     

Angiopep-2修饰的装载不同药物的纳米系统在胶质瘤中的应用

脑胶质瘤是常见的原发性颅内肿瘤,其难以治愈的主要原因为血脑脊液屏障（blood-cerebrospinal fluid barrier）的存在阻碍了化疗药物进入脑内,大大降低了有效药物浓度。此外,肉眼可见的肿瘤已经处于中后期,失去了最佳的治疗时机。Angiopep-2为低密度脂蛋白受体相关蛋白（low density lipoprotein receptor related protein, LRP）的配体,血脑脊液屏障和胶质瘤细胞表面都高度表达LRP受体。Angiopep-2具有靶向性,将其修饰到装载化疗药物和显像剂的纳米粒子表面,可以实现靶向释药,提高胶质瘤成像效果。本文综述了以Angiopep-2修饰的装载不同药物的纳米系统在胶质瘤中的应用,为胶质瘤的诊断和治疗提供了思路和方法。     

脑缺血再灌注损伤后血脑屏障通透性研究进展

血-脑屏障(blood brain barrier,BBB)为中枢神经系统毛细血管腔与神经组织之间存在的所有结构,是脑与血液及脑脊液之间的一种屏障,与中枢神经的变性、损伤和炎     

脑脊液转铁蛋白、免疫球蛋白G、C反应蛋白和α1-微球蛋白检测在血-脑脊液屏障损伤评价中的应用

目的探讨脑脊液转铁蛋白、免疫球蛋白G（IgG）、C反应蛋白（CRP）和α1-微球蛋白（α1-MG）检测在血-脑脊液屏障（Blood-brain barrier,BBB）损伤评价中的应用价值。方法采用散射比浊法检测BBB不同程度损伤患者脑脊液中的清蛋白、转铁蛋白、IgG、CRP和α1-MG的水平。结果随着BBB损伤的加重,脑脊液中转铁蛋白和IgG水平均增高,且不同程度BBB损伤组间脑脊液转铁蛋白和IgG水平比较差异有统计学意义（P〈0.01）;脑脊液转铁蛋白和IgG与清蛋白商值均呈正相关（r值分别为0.853和0.834,P〈0.01）;脑脊液转铁蛋白和IgG的受试者工作特征曲线（ROC）下面积（AUC）分别为0.992和0.970;脑脊液转铁蛋白和IgG在BBB损伤诊断中的灵敏度、特异度分别为94.2%和95.5%、94.2%和91.9%;6例患者脑脊液CRP水平增高,但所有患者α1-MG水平〈5.29mg/L。结论脑脊液转铁蛋白测定是反映BBB损伤的良好指标;在排除中枢神经系统内无免疫球蛋白产生的情况下,脑脊液IgG测定可以反映BBB的功能状态;脑脊液中出现CRP表明BBB损伤且外周血中CRP水平增高;脑脊液α1-MG检测在BBB损伤评价中无意义。     

建立体外血脑脊液屏障模型方法学研究

目的：采用原代分离培养Sprague-Dawley（SD）大鼠脑微血管内皮细胞（brain microvascular endothelial cells,BMECs）和星形胶质细胞（astrocyte,As）建立相对简单可靠、重复性好、接近在体状态的体外血脑脊液屏障（blood-cerebrospinal fluid barrier,blood-CSF barrier）模型。方法：原代分离、纯化和培养BMECs 和As,通过细胞形态学和免疫细胞化学染色方法鉴定原代培养的细胞;通过培养在具有特殊质材和孔径的Transwell 小室上建立体外血脑脊液屏障实验模型,采用倒置显微镜观察细胞形态结构,经跨内皮电阻值（trans endothelialelectrical resistance,TEER）、4 h 液面试漏实验、两种特征性酶检测、荧光素钠通透性（sodium fluorescent,Na-FLU）评价模型的屏障功能。结果：原代培养的BMECs 具有典型的“铺路石”样外观,Ⅷ因子鉴定细胞纯度在95% 以上;As 有细长突触,胞质较浅,胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic portein,GFAP）鉴定细胞纯度在95% 以上。通过测定TEER 值共培养模型组显示高电阻值（378.97±11.38） Ω·cm2;4 h 液面试漏试验阳性;γ- 谷氨酰转肽酶（γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT）和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）表达分别为（30.88±2.87） μmol·min-1·mL-1 和（2.51±0.88）金氏单位·100 mL-1;Na-FLU 跨膜渗透系数（2.228±0.85）×106 cm·s-1。结论：建立的体外血脑脊液屏障模型在形态学、电阻和通透性方面具备了血脑脊液屏障的基本特性。     

原代大鼠脑微血管内皮细胞培养方法的改进

<正>血脑脊液屏障(blood brain barrier,BBB)是机体的内部屏障之一,由介于血循环与脑实质间的软脑膜、脉络丛的脑毛细血管壁和包于壁外的胶质膜所组成,是中枢神经系统的重要解剖结构基础[1]。血脑脊液屏障主要是由脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs)和周细胞构成,星形胶质足突包绕毛细血管的外周,覆盖其95%~99%的表面积。其中,血管内皮细胞是构成血脑脊液屏障的关键组织细胞位     

脂肪因子参与阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）又称老年痴呆,是一种最常见的老年中枢神经退行性疾病。其主要病理改变有：神经元外β- 淀粉样蛋白（β-amyloid protein,Aβ）沉积形成的老年斑、神经元内tau 蛋白异常磷酸化形成的神经原纤维缠结以及神经元大量丢失或损伤。近年研究发现,脂肪因子与Aβ沉积、tau 蛋白过度磷酸化以及神经元凋亡之间具有紧密的联系。该文主要针对脂联素（adiponectin,APN）、瘦素（leptin,LP）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）等脂肪因子对AD 的作用机制做一综述,为AD 的临床治疗提供新的思路。     

中药对中枢神经退行性疾病信号通路影响的研究进展

随着对中药防治中枢神经系统衰老相关疾病发病机制的深入探讨,发现中药通过信号分子Wnt、β-catenin、TCF/ LEF、磷脂酰肌醇3 激酶（ phosphatidylinositol-3 kinase,PI3K）、蛋白激酶B（ protein kinase B,AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、核因子-κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）,细胞色素C（cytochrome,Cyt-C）、B 淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）家族蛋白、Caspases 酶等,调节Wnt/β-catenin、PI3K/Akt、线粒体凋亡信号通路,发挥对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）、帕金森病（Parkinson’s disease,PD）、脑缺血等衰老相关中枢神经系统疾病的防治作用。该文着重从以上三条信号通路,对中药在中枢神经系统退行性疾病的防治现状做一阐述。     

成年海马神经再生与阿尔茨海默病关系的研究进展

海马神经再生持续于哺乳动物整个成年期。在生理刺激以及脑外伤等病理因素的刺激下,神经干细胞可发生增殖、迁移、分化,最终整合到神经元网络中。阿尔茨海默病（Alzheimer^,s disease,AD）是一种中枢神经系统退行性疾病,主要病理学特征为细胞内外β淀粉样蛋白（β-amyloid peptide, Aβ）沉积、细胞内神经原纤维缠结（neurofibrillary tangles, NFT）,以及由这些引发的神经元变性、坏死。目前,应用海马神经再生治疗AD已成为极具潜力的治疗手段。该文综述了最近成年海马神经再生与AD关系的研究进展。     

血脑脊液屏障功能障碍与中枢神经系统疾病的相关性

中枢神经系统(CNS)受到血脑脊液屏障(BCSFB)的保护,可免受血液中有害物质的侵害.血脑脊液屏障主要由脉络丛(CP)单层上皮细胞组成,它将血源性物质与脑脊液分离.血脑脊液屏障功能障碍会诱导中枢神经系统功能紊乱,并导致多种神经系统疾病的发生.本文简要综述了血脑脊液屏障功能障碍和神经系统疾病的相关性.     

血脑屏障损伤与阿尔茨海默病关系的研究

阿尔茨海默病(AD)是老年人认知障碍最重要的病因,严重危害老年人健康,最终可以导致患者丧失生活能力及多种并发症的发生。但目前为止其发病机制尚未研究清楚,仍缺乏有效的治愈及预防手段。因此,研究其发病机制是为其提供行之有效的治疗方法的关键。近期,血脑屏障破坏成为AD研究的热点之一。现就血脑屏障损伤与AD关系的相关研究进行综述。     

被动免疫重症肌无力模型中枢神经系统损害的探讨

目的：探讨乙酰胆碱受体抗体（AchRab）与重症肌无力（MG）中枢神经系统（CNS）损害之间关系。方法：将MG患者血中提取的IgG注入大量鼠尾静脉，建立大鼠被动免疫重症肌无力模型，应用免疫细胞化学技术观察Fas在脑组织中的表达，结果：模型大鼠表现出类MG症状，在MG大鼠脑内Fas抗原主要表达于大脑皮质区和海马的神经元胞膜和突起上，而在正常和空白对照组脑内没有神经细胞呈Fas抗原阳性。结论：外周注入的AchRab可能造成模型处于免疫应激状态，改变血脑屏障通透性而入脑诱发CNS损害，Fas介导的细胞凋亡可能参与MG CNS损害。     

脑脊液中皮质醇正常水平及其临床意义的初步探讨

本文报告35例正常人脑脊液皮质醇(CF)含量及其与血浆皮质醇(BF)含量之比值。发现CF约为BF的10％,且有昼夜节律变化。16例急性脑血管病患者CF/BF值高于正常组,昼夜节律消失;6例脑瘤患者中,4例CF/BF值和正常组相似,2例显著升高,表明某些中枢神经系统疾病可增加血——脑脊液对皮质醇的通透性。     

小胶质细胞在神经精神性狼疮发病机制中的研究进展

 神经精神性狼疮（neuropsychiatric systemic lupus erythematosus,NPSLE）是系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）累及神经系统而产生各种神经、精神症状的一组严重并发症。目前NPSLE的发病机制尚不明确,可能与多种免疫反应相关。小胶质细胞（microglia,MG）是中枢神经系统（central nervous system,CNS）的免疫细胞。本文总结了MG参与SLE中枢神经受累的证据,并对MG通过吞噬作用和神经毒性作用参与NPSLE发生发展的相关研究进行综述,以期为进一步探索NPSLE的发病机制,研究NPSLE的有效治疗方法提供新的思路与线索。     

Serum level of MMP-2, MMP-9 and Ox-LDL in Alzheimer＇s disease with hyperlipoidemia

Objective：To investigate serum levels of MMP-2,MMP-9, oxidized low-density lipoprotein （ox-LDL） in Alzheimer＇s disease （AD） patients and study the possible pathway and mechanism of AD with abnormal lipid metabolism. Methods： Subjects in this study were divided into 4 groups ： normal lipid group without AD （N）, hyperlipoidemia group without AD （H）, normal group with AD （A）, hyper- lipoidemia group with AD （AH）. There were 15 individuals in each group. MMP-2, MMP-9, ox-LDL was measured by enzyme linked immunosorbent assay （EL1SA）. Serum lipids levels were measured by biochemical methods. Results： The serum levels of MMP-2, MMP-9, ox-LDL were significantly higher in H, A and AH groups than those in N group. Those of ox-LDL in H, AH groups was higher than that of in A group. The serum level of MMP-2, MMP-9 in AH groups were higher than that of in H group. The score of mini-mental state examination （MMSE） in A and AD groups was negatively correlated with the serum level of ox-LDL. Relationship between the score of MMSE and the serum level of ox-LDL in AD groups and non-AD groups had statistical significance. Conclusion： MMP-2, MMP-9, ox-LDL and abnor- mal lipid metabolism may participate in pathogenesis of AD, in which abnormal lipid metabolism induces expressions of MMP-2,MMP-9 and ox-LDL. Oxidative stress and blood-brain barrier disruption might ac- celerate the process of AD.     

中枢肾素-血管紧张素系统与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病（Alzheimer's disease,AD）是全球共同关注的重大公共卫生课题和日益严重的社会问题,发掘防治AD的新靶标和新药物是当今医药领域亟待破解的难题。越来越多的研究显示,中枢肾素-血管紧张素系统（central rennin-angiotensin system,CRAS）与AD密切相关。本文根据相关文献报道,综述CRAS中血管紧张素II（angiotensin II,Ang II）及其受体（angiotensin II type 1 receptor,AT₁R;angiotensin II type 2 receptor,AT₂R）,血管紧张素IV（angiotensin IV,Ang IV）及其受体（angiotensin II type 4 receptor,AT₄R）以及血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）在AD发生发展中的作用,揭示可能成为防治AD的新靶标,提出开发新型抗AD药物的新思路。     

可穿越血脑屏障的新型神经生长因子TAT-BDNF神经保护作用研究

目的 研究合成的新型神经生长因子TAT-BDNF融合蛋白兼具穿越血脑屏障及神经保护双重活性,为使用功能蛋白质治疗中枢神经损伤提供研究基础.方法 采用分子克隆方法构建表达载体胡AT.HA-BDNF,原核表达获得TAT-BDNF融合蛋白.利用体外培养的大鼠大脑皮层神经元谷氨酸兴奋性损伤模型,通过检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,免疫荧光染色观察TAT-BDNF的神经保护作用.尾静脉注射TAT-BDNF后,通过免疫组化检测其穿透血脑屏障的活性;Nissl染色验证TAT.BDNF急性脊髓压迫损伤神经保护作用.结果 TAT·BDNF融合蛋白由重组质粒能有效表达.在神经元谷氨酸损伤模型中,使用TAT-BDNF后各组间培养液中LDH的漏出量差异有统计学意义(F=24 27,P＜0 05).形态学观察显示,TAT.BDNF可改善神经元的存活状态,减少谷氨酸诱导的细胞凋亡坏死比例(t=4.59,P:0 001).大鼠体内实验显示TAT-BDNF能有效透过血脑屏障,分布于脑与脊髓组织.脊髓损伤7 d后Nissl染色显示TAT-BDNF注射组髓内神经元存活状态优于对照组.结论 合成的新型神经生长因子TAT-BDNF具有穿透血脑屏障活性及神经保护作用.

Abstract：

Objective To identify the dural activities of neuroprotection and penetrating blood-brain barrier (BBB) for TAT-BDNF (transactivating-brain-derived neurotrophic factor) fusion protein to explore an alternative treatment for the injury of central nerve system (CNS). Methods With molecular cloning techniques, a recombinant vector termed pTAT-BDNF was constructed to encode both TAT protein transduction domain and human BDNF. Purified TAT-BDNF fusion protein was generated from Escherichia coli BL21 (DE3). The injury model was established with in vitro cultured cortical neurons of neonatal rats.To observe the neuroprotective effects of TAT-BDNF fusion protein on glutamate-mediated excitotoxic insults,the contents of lactate dehydrogenase (LDH) were measured by spectrophotometry. Immunofluorescence and Hoechst33342 analyses were used to observe the morphological changes. Immunocytochemical and Nissl stain analysis of TAT-BDNF content in CNS tissue were performed after an intravenous injection of TAT-BDNF fusion protein in normal or spinal cord injured rats. Results During the study of glutamate-induced excitotoxic insults, as compared with the control group, TAT-BDNF could decrease the apoptotic ratio,reduce the leakage of LDH and enhance the survival of neurons (P＜0.05) . As demonstrated by immunohistochemistry, TAT-BDNF fusion protein was efficiently delivered into rat brain and spinal cord tissues at 4 h post-injection. At Day 7 post-injury, Nissl stain show that the number and morphology of neurons in the TAT-BDNF group were better than those in the control group. Conclusion The synthetic neotype TAT-BDNF possess the dual biological effects of neuroprotection and penetrating BBB.     

血脑屏障开放方法研究进展

治疗中枢神经系统疾病药物研发失败的主要原因之一是由于血脑屏障的阻碍作用,使得药物无法递送到中枢神经系统,未能在脑内聚积达到足够的药效剂量和产生相应的治疗作用。因此,中枢靶向药物研发成功的一个关键因素就是需要克服血脑屏障,这使得研究开放血脑屏障的方法成为脑内给药的热点。本文综述了近10余年研究和应用促进药物透过血脑屏障的手段,探索各种药物载体的给药策略,并详细阐述了开放血脑屏障的研究方法,为开发新型中枢靶向药物提供思路和帮助。本文认为从血脑屏障的结构特点入手,研究血脑屏障开放机制,深入了解转运系统、转运载体和细胞信号转导通路,设计更有效开放血脑屏障的策略,才能实现药物安全、高效、可控地透过血脑屏障,在脑内发挥治疗作用。     

多发性硬化病人体内高水平cICAM-1和TNF-α的研究

目的 研究多发性硬化（ＭＳ）免疫异常过程中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）和循环细胞间粘附分子－１（ｃＩＣＡＭ－１）的变化及与血脑屏障（ＢＢＢ）的相关性。方法 用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）及单项琼脂扩散（ＳＩＲＤ）检测临床确诊为ＭＳ的３１例病人血清及脑脊液（ＣＳＦ）中ＴＮＦ－α、ｃＩＣＡＭ－１及白蛋白（Ａｌｂ）比值。结果 ①例ＭＳ虱中Ａｌｂ比值轻度异常８例（２５％）,正常者２３例;ＩｇＧ指数增高（〈