PRF复合组织工程骨修复牙周骨缺损中基因的表达及意义

目的探讨组织工程煅烧骨复合富血小板纤维蛋白(PRF)修复牙周骨缺损中BMP-2、骨保护素(OPG)和核因子B受体活化因子配体(RANKL)的表达及意义。方法将36只新西兰大白兔随机均分为4组,制备单侧牙周骨缺损模型,其中3组于骨缺损处分别植入煅烧骨、Bio-oss骨和煅烧骨/PRF复合物,以未植入任何材料者作为空白对照。术后4,8,12周处死动物,获取完整标本,进行大体、Masson染色及免疫组化观察。结果 Masson染色:煅烧骨/PRF组术后8周时即见部分鲜红色成熟骨形成,骨成熟速度明显优于其他3组。免疫组化观察:术后4周时煅烧骨/PRF组BMP-2、OPG、RANKL强阳性表达,数目高于其他3组,差异具有统计学意义(P<0.05)。RANKL阳性细胞的表达在骨改建过程中有不同程度的降低,煅烧骨/PRF组中组中RANKL下降最为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论煅烧骨/PRF组修复牙周骨缺损会增加BMP-2、OPG、RANKL的表达,通过促进成骨细胞分化成熟而刺激OPG表达升高,抑制破骨细胞,有助于加快牙周骨改建,缩短骨愈合过程。     

富血小板纤维蛋白在骨缺损修复中引导成骨能力的动物实验研究

目的:探讨富血小板纤维蛋白(PRF)对骨缺损早期引导骨生成的能力,为PRF在口腔种植学中的应用及研究提供依据。方法:12只大白兔分Ⅰ组、Ⅱ组,每组6只12侧下颌骨骨缺损。Ⅰ组应用方法 A、B充填各6侧。Ⅱ组应用方法 C、D充填各6侧。(A:PRF覆盖骨粉,B:胶原膜覆盖骨粉,C:PRF混合骨粉,D:骨粉)。术后2周、4周、8周处死Ⅰ,Ⅱ组各2只进行大体标本观察、HE染色及CT骨密度值检测。结果:(1)各时间段大体观察骨愈合硬度A组与C组相似,较B组、D组硬度强,B组优于D组。(2)各时间段HE染色比较A组及C组新生骨组织及再血管化相似,均优于B组、D组,新生骨排列较B组、D组规则。(3)骨密度测量2周、4周A与C组无统计学差异,A、C组与B、D组之间分别具有统计学差异,8周A组与C、B组之间无统计学差异,与D组分别存在统计学差异。讨论:PRF的作用机制及效果对比研究。结论:(1)PRF联合骨粉引导骨再生早期效果优于单独使用骨粉或覆盖胶原膜。(2)PRF覆盖骨粉及PRF混合骨粉引导骨再生效果基本相同。     

富血小板纤维蛋白膜(PRF)引导成骨能力的比较研究

目的:探讨及比较富血小板纤维蛋白膜(PRF)、海奥生物膜联合骨粉用于新西兰大白兔下颌骨缺损处早期引导骨生成的能力。方法:选取雌性新西兰大白兔9只,在其双侧下颌骨下缘上2mm做圆形骨缺损,A组植入骨粉后覆盖PRF,B组植入骨粉后覆盖海奥生物膜,C组植入骨粉。术后2,4,8周分期分组处死动物,取下颌骨缺损植骨区标本。标本行大体观察、CT及组织学观察成骨情况。结果:大体观察,骨缺损区早期骨愈合坚硬度A组>B组>C组。CT观察,骨缺损区骨密度早期A组>B组>C组,统计学分析,2周、4周时A组B组C组之间骨密度值分别具有统计学差异,8周组A组B组无统计学差异,与C组分别存在统计学差异。组织学观察,同期比较A组新生骨组织及再生血管化均优于B组、C组,新生骨排列较B组、C组规则。结论:PRF在骨缺损的修复中能够促进新骨的形成,提高新骨形成的时间和质量,对引导成骨起到有效促进作用。     

富血小板纤维蛋白联合天然煅烧骨对颅骨缺损修复作用研究

［摘要］ 目的 探讨富血小板纤维蛋白（platelet rich fibrin,PRF）和天然煅烧骨（calcined natural bovine bone,CBB）对颅骨缺损修复疗效,为骨缺损修复提供依据。 方法选18只成年兔在颅骨左右侧分别制作10 mm直径大小圆形骨缺损,分为实验1组（植入CBB）、实验2组（植入PRF和CBB）和对照组（不植骨）。在术后4周、12周、20周取颅骨标本,分别行甲苯胺蓝染色、四环素荧光染色、影像学CT测定各组骨缺损区新骨形成面积、成骨速度、移植物吸收和骨密度值。 结果 在术后4周、12周和20周时实验1组和实验2组新骨形成速度、成骨面积、成骨钙化程度及骨密度值均大于对照组;实验2组成骨面积和骨密度大于实验1组（P<0.05）,中央网孔内成骨明显;对照组在12周和20周新骨形成明显减少。结论 CBB对颅骨缺损修复有明显疗效,PRF可促进CBB对骨缺损修复作用,可能与PRF的骨诱导作用有关。     

Bio-Oss骨复合富血小板纤维蛋白修复兔牙周骨缺损

目的探讨组织工程骨Bio-Oss骨复合富血小板纤维蛋白（PRF）修复牙周骨缺损中骨形成蛋白2（BMP-2）、骨保护素（OPG）和核因子κB受体活化因子配体（RANKL）的表达及意义。 方法3月龄雄性新西兰大白兔36只,采用随机数表法分为4组,每组9只,制备单侧牙周骨缺损模型,于骨缺损处分别植入Bio-Oss骨（Bio-Oss组）、PRF（PRF组）和Bio-Oss/PRF复合物（Bio-Oss/PRF组）,以未植入任何材料者作为空白对照。术后4、8和12周处死动物,行大体观察、Masson染色及BMP-2、OPG、RANKL免疫组化观察,并对其表达进行析因设计的方差分析。 结果Masson染色结果显示,Bio-Oss/PRF组术后8周时见部分成熟骨,12周见骨板形成,骨成熟度较高。析因分析显示Bio-Oss组在4、8和12周时BMP-2表达量逐渐增高,差异有统计学意义（F = 51.30,P<0.001）;OPG表达量随时间延长先升高后减低,差异有统计学意义（F = 167.03,P<0.001）;RANKL表达量随时间延长逐渐减低,差异有统计学意义（F = 5.39,P = 0.046）。PRF组在4、8和12周时BMP-2表达量无统计学意义（F = 0.68,P = 0.544）;OPG和RANKL表达量随时间延长逐渐减低,差异有统计学意义（F_OPG = 1070.93,P_OPG<0.001;F_RANKL = 2306.15,P_RANKL<0.001）。Bio-Oss/PRF组在4、8和12周时BMP-2、OPG和RANKL表达量逐渐降低,差异有统计学意义（F_BMP-2 = 13.29,P_BMP-2<0.001;F_OPG = 237.91,P_OPG<0.001;F_RANKL = 132.48,P_RANKL<0.001）。空白对照组在4、8和12周时BMP-2和OPG表达量先升高后减低,差异有统计学意义（F_BMP-2 = 88.33,P_BMP-2<0.001;F_OPG = 30.06,P_OPG<0.001）,RANKL表达量随时间推移逐渐减低,差异有统计学意义（F = 56.52,P<0.001）。 结论Bio-Oss骨复合PRF应用可促进成骨以修复牙周骨缺损。     

复合ADSCs/β-TCP组织工程骨与PRF修复下颌骨缺损的实验研究

目的:探讨脂肪干细胞/β-磷酸三钙(ADSCs/β-TCP)组织工程骨复合富血小板纤维蛋白(PRF)在修复下颌骨缺损中的作用。方法:新西兰大白兔27只,采用随机对照动物实验,随机分为3组,每组9只,培养家兔自体ADSCs,制备自体PRF。在每只兔子的双侧下颌骨制备下颌骨缺损模型。A组:将单纯的β-磷酸三钙(β-TCP)植入双侧下颌骨缺损区,B组:将ADSCs/β-TCP植入双侧下颌骨缺损区,C组:将ADSCs/β-TCP与PRF植入双侧下颌骨缺损区。分别于术后2、4、8周分别处死9只大白兔,并通过大体观察、X线片、以及组织切片观察下颌骨缺损的修复情况。结果:C组在2、4、8周3个时间点的成骨情况明显优于其他2组(P<0.01)。A组与B组之间的成骨情况差异无显著性(P>0.05)。结论:ADSCs/β-TCP复合物与PRF联合应用可促进下颌骨缺损的修复。     

富血小板纤维蛋白在牙周植骨术中应用进展

富血小板纤维蛋白（PRF）是自体全血离心的产物,含有大量的生长因子,同时为组织细胞提供迁移、增殖和分化的场所,利于组织的再生和重建。近年来有学者将PRF用于牙周植骨术,获得良好的效果。本文就PRF及其在牙周植骨术中应用进展做一综述。     

富血小板血浆与富血小板纤维蛋白在牙周组织再生中的应用

富血小板血浆（platelet-rich plasma,PRP）与富血小板纤维蛋白（platelet-richfibrin,PRF）因其促进组织再生的能力,在临床口腔创伤及缺损的修复中逐渐被重视及应用,并取得了令人较为满意的效果,鉴于PRP与PRF的制作较简便,且不易出现疾病传染及免疫排斥的不良反应,两者在口腔临床中的应用越来越广泛。牙周炎是目前造成牙周骨缺损最为常见的疾病之一,国内外的学者们为了探寻促进牙周组织再生的方法,将PRP与PRF用于牙周治疗中,本文即将近年来有关PRP与PRF在牙周组织再生中的临床应用作一综述。     

富血小板血浆与富血小板纤维蛋白在牙周组织再生中的应用

富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)与富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)因其促进组织再生的能力,在临床口腔创伤及缺损的修复中逐渐被重视及应用,并取得了令人较为满意的效果,鉴于PRP与PRF的制作较简便,且不易出现疾病传染及免疫排斥的不良反应,两者在口腔临床中...     

骨形态蛋白复合物联合引导组织再生技术修复牙周骨缺损的实验研究

目的评价骨形态蛋白复合物联合引导组织再生技术修复牙周骨缺损的效果。方法选择6只新西兰兔，制备下前牙牙周骨缺损模型，将其分为3组：GTR组(牙周骨缺损处植入胶原膜)、BMP组(牙周骨缺损处植入骨形态蛋白复合物和胶原膜)和OFD组(牙周骨缺损处未植入任何物，对照组)。术后12周分别观察各组缺损处的组织学变化。结果BMP组骨缺损处只见少量的软组织，新生骨组织的量及其成熟程度明显优于GTR组和OFD组，显示骨组织修复良好。结论骨形态蛋白复合物联合GTR技术修复牙周骨缺损，与传统的GTR术和牙周翻瓣术相比，更能有效促进牙周骨组织再生与修复。     

组织工程用于修复慢性牙周组织缺损的动物实验研究

目的:应用细胞型和/或非细胞型组织工程化牙周组织移植修复慢性牙周缺损的动物实验,探讨其用于牙周再生治疗的可行性。方法:人工构建5只成年杂种狗慢性牙周缺损病变模型,分别随机采用:引导组织再生治疗术+富血小板血浆+B ioOss(GTR+PRP+B ioOss)、引导组织再生治疗术+富血小板血浆+B ioOss+自体牙周膜细胞(GTR+PRP+B ioOss+PDLCs)、引导组织再生治疗术+自体牙周膜细胞(GTR+PDLCs)和GTR治疗,其中GTR组6颗牙,其余3组各为8颗牙。12周后作病理切片,HE染色观察牙周组织再生情况。结果:动物实验发现GTR组的新生牙槽骨、牙骨质和牙周组织高度分别为(0.52±0.21)mm、(0.8±0.13)mm、(1.9±0.10)mm。而另外3组的新生牙槽骨、牙骨质和牙周组织高度分别为GTR+PRP+B ioOss组:(1.36±0.17)mm、(1.92±0.18)mm、(2.62±0.16)mm;GTR+PRP+B ioOss+PDLCs组:(1.42±0.22)mm、(2.07±0.19)mm、(2.68±0.20)mm;GTR+PDLCs组:(1.39±0.19)mm、(1.82±0.16)mm、(2.55±0.12)mm,这3组牙槽骨、牙骨质和牙周组织的修复再生效果均明显优于GTR组(P<0.05),而它们之间的差别无显著性。结论:应用GTR技术结合组织工程可显著促进狗牙周组织缺损的再生。     

PRF复合自体骨髓间充质干细胞修复兔牙槽骨缺损的研究

目的:观察富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin, PRF)复合自体第3代骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells, BMSCs)修复牙槽骨缺损的能力。方法:取健康雄性2月龄新西兰兔36只,随机分为4组:PRF+BMSCs组、PRF组、BMSCs组、空白对照组,均在全麻下微创拔除下颌左侧中切牙。4组实验动物分别在4、8、12周处死。取其下颌骨进行牙槽骨标本测量,X线观察,组织学观察。结果:牙槽骨标本测量比较:4组牙槽嵴宽度、高度丧失值均存在差异(P＜0.05);析因分析示PRF与BMSCs复合使用修复牙槽骨的效果优于单独使用PRF或BMSCs(P<0.05)。X线、组织学观察表明术后4、8、12周时拔牙窝骨吸收程度:PRF+BMSCs组＜PRF组＜BMSCs组＜空白对照组,PRF+BMSCs组成骨情况均优于PRF组、BMSCs组、空白对照组。结论:PRF复合自体BMSCs可以促进牙槽骨的再生与修复,具有潜在的临床应用价值。     

贝壳多孔羟基磷灰石基骨修复材料和骨形成蛋白-2联合应用引导犬牙周组织再生效果初步评估

目的初步评估贝壳多孔羟基磷灰石基骨修复材料及该材料和骨形成蛋白-2联合应用引导比格犬牙周组织再生的效果。方法选取18月龄比格犬6只,牙周基础治疗后1周,在下颌第二、三、四前磨牙,建立急性牙周骨缺损模型,依照分组情况进行不同治疗。实验组（T组）植入骨修复材料和骨形成蛋白-2;阴性对照组（NC组）植入骨修复材料;空白对照组（BC组）不植入任何材料。实验设计采取同颌同名牙对照,同一只比格犬的3对同颌同名牙分别为：空白对照组和阴性对照组,阴性对照组和实验组,空白对照组和实验组。术后12周,处死动物,Micro-CT检查并对数据进行统计学分析。结果材料植入后,未见材料溢出,植入局部和全身都未见明显不良反应。3组缺损都有一定程度骨再生,以T组再生组织量最多,BC组最少。Micro-CT结果显示：T组、NC组和BC组的骨再生平均高度为（4.50±0.47）mm（、1.75±0.42）mm和（0.87±0.31）mm。NC组和BC组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。T组与NC组和BC组相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）,且有临床意义。结论贝壳多孔羟基磷灰石基骨修复材料和骨形成蛋白-2联合应用于比格犬,可以获得更好的引导组织再生效果。     

两种骨移植材料治疗牙周骨内缺损的3年临床回顾性观察

目的：评价牙周翻瓣刮治术联合移植生物活性玻璃（PerioGlas）或多孔无机骨（Bio-Oss）,治疗患重度牙周炎前牙的三年临床效果。方法：回顾19例前牙有深牙周袋,存在牙周骨内缺损的慢性牙周炎患者,在行牙周翻瓣刮治术后分别移植PerioGlas或Bio-Oss,记录术前,术后1年,术后3年的临床牙周指数和检查牙周X线片表现。结果：两组病例术后1年和术后3年与基线比较牙周探诊深度（PD）和临床附着丧失（CAL）显著降低,牙龈退缩水平（GR）略有增加。PerioGlas组术后1年PD减少4.94 mm;CAL减少3.94 mm;GR增加1.00 mm。Bio-Oss组术后1年PD减少5.15 mm;CAL减少3.95 mm。GR增加1.10 mm。各组病例术后1年和3年的PD、GR、CAL比较差异均无统计学意义。术后3年PerioGlas组和Bio-Oss组间各项牙周指数PD、GR、CAL比较差异无统计学意义。结论：牙周翻瓣刮治联合骨移植术治疗前牙重度牙周骨内缺损,显著改善临床牙周状态,使牙周骨内缺损再生,3年后临床效果稳定。两种骨移植材料Bio-Oss和PerioGlas均可以引导牙周骨再生,显著改善临床牙周...     

The Influence of PRP on Early Bone Formation in Membrane Protected Defects. A Histological and Histomorphometric Study in the Rabbit Calvaria

Background: Platelet rich plasma (PRP) has been proposed to be a useful adjunct to bone grafting. Purpose: The aim of the present study was to assess new bone formation in bone regeneration procedures using platelet rich plasma (PRP) alone or in combination with autogenous bone. Materials and Methods: Four surgically created, monocortical defects 5 mm in diameter in the calvariae of 15 New Zealand rabbits were grafted with a coagulum‐filled control, PRP, particulated autogenous bone alone (A), or combined with PRP (A‐PRP). Results: Mean platelet concentration of 1,761,930 ± 680,200/µl was achieved (5.30 ± 2.63 × fold of baseline). Animals were sacrificed 1, 2, and 4 weeks later. Histomorphometric analysis showed no statistical difference for total new bone formation at any time point, however, a detailed analysis revealed a statistically significant higher percentage of lamellar bone than woven bone for the autogenous bone group at 2 weeks; all other groups demonstrated equal percentages of either bone type. At 4 weeks, all groups revealed a statistically greater component of lamellar bone over woven bone. Graft resorption rate was similar for both A and A‐PRP. PRP platelet concentration was significantly positively correlated with TGF‐beta1 but not with PDGF‐AB. Conclusions: Within the limits of the chosen animal model, this study demonstrated that PRP during early healing, whether alone or mixed with autogenous bone, did not lead to greater bone remodelling, as compared to coagulum. In contrast, autogenous bone alone demonstrated accelerated bone remodelling at 2 weeks.     

富血小板血浆与富血小板纤维蛋白联合冻干法研究进展

手术使用的浓缩血小板是再生医学的创新材料,富血小板血浆(PRP)是第一代富含血小板的浓缩物,已广泛应用于促进软硬组织愈合。富血小板纤维蛋白(PRF)是由法国学者Choukroun等首次提出的新一代血小板浓缩物,较传统富血小板血浆更具有应用优势。冻干法是保存生物制品的常规方法,也是控制支架空隙大小并保存其原有成分的有效手段。本文就于富血小板血浆和富血小板纤维蛋白结合冻干法应用于组织发育与再生作一综述。     

Use of platelet concentrates in oral and maxillofacial surgery: an overview

Objective: To describe and provide a comprehensive overview on the development, use and efficacy of autologous platelet concentrates in different in vitro and in vivo studies focusing on oral and maxillofacial pathologies.

Materials and methods: Present work employs an extensive critical overview of the literature on the development and application of platelet concentrates.

Results: Platelet concentrates are innovative endogenous therapeutic agents which gained a lot of interest in different medical and dental disciplines due to their potential ability to stimulate and increase regeneration of soft and hard tissues. The effect of platelet-derived products is considered to be a result of the high number of platelets which contain a wide range of growth factors. They are not just therapeutic products but autologous blood concentrates containing active molecules. The quality of platelet concentrates may vary according to the individual physical state of donors making it difficult to to compare the outcomes of their application. Although, there are many studies analyzing the properties of these biomaterials both in vivo and in vitro, a consensus regarding their efficacy still has to be reached.

Conclusion: Evidences described in the literature on the efficacy of platelet concentrates in procedures in oral and maxillofacial region are controversial and limited. In order to clarify the real advantages and priorities for the patients, when the blood-derived products are applied, further in vitro and in vivo research about the activity of PRP and PRF on the dental cells biology should be conducted.     

BMSCs复合PRP修复牙种植体周围骨缺损的实验研究

目的:探讨骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)复合富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)修复牙种植体周围骨缺损的可行性。方法:拔除6只Beagle犬双侧下颌8颗前磨牙,术后1个月抽取犬骨髓,采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,并向成骨细胞诱导,将BMSCs与PRP、β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)分别复合形成组织工程化复合物。术后2个月,在实验犬每侧下颌缺牙区分别植入BLB4mm×11mm种植体4颗,同时在每个种植体的近中制造4mm×4mm×5mm大小的骨缺损,分别植入BMSCs-PRP复合凝胶、自体骨、BMSCs-β-TCP复合物以及空白对照,分别于种植术后4、8、12周各处死2只犬,行大体、环境扫描电镜及组织学检查,观察各个时期各组骨缺损区的成骨情况以及新生骨与种植体间骨结合情况。结果:3个实验组在术后4、8、12周均有不同程度的骨组织再生,而空白对照组只有少量骨组织再生。各个时期内扫描电镜观察显示BMSCs-PRP组新生骨与种植体间的骨结合较其他三组多。结论:BMSCs-PRP复合凝胶是一种良好的骨修复材料,具有促进新骨形成及种植体骨结合的效应。