Ddit3在小鼠下颌第一磨牙牙胚不同时期的表达研究

目的:检测Ddit3在小鼠下颌第一磨牙牙胚不同时期的表达分布及变化规律,初步揭示Ddit3在小鼠牙胚发育中的作用。方法:取不同胚胎时间点的ICR妊娠小鼠,制备牙胚发育标本,通过免疫荧光和免疫组化的方法显示Ddit3在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育不同时间点的表达分布。结果:Ddit3在牙胚发育的早期主要表达于胞浆中,从钟状期开始,Ddit3不仅在胞浆中有阳性表达,同时也微弱地表达于细胞核中。分布如下:在小鼠下颌第一磨牙发育的板状期,Ddit3几乎没有表达。在蕾状期,Ddit3主要表达于釉上皮的细胞质中,在牙外胚间充质细胞中几乎无表达。在帽状期,Ddit3的表达模式基本和蕾状期相同。在钟状期早期,Ddit3在成釉细胞、前成牙本质细胞和牙乳头胞质中呈阳性表达,在部分细胞核中也检测到了Ddit3的表达。钟状期晚期,Ddit3在新形成的硬组织周围的高柱状成釉细胞、成牙本质细胞和牙乳头细胞的胞浆中有阳性表达,在大多数成釉细胞、成牙本质细胞和牙乳头细胞的细胞核中也有表达。结论:Ddit3可能会调节成釉细胞和成牙本质细胞的分化及其硬组织的生物矿化。     

Versican在ICR胎鼠下颌第一磨牙牙胚发育过程中的表达

目的:检测Versican 核心蛋白及其mRNA在胎鼠磨牙牙胚发育早期的表达,探讨其在牙胚发育过程中的作用.方法:制备胎鼠磨牙牙胚各发育阶段标本,用免疫组化和原位杂交方法分析Versican核心蛋白及其mRNA在牙胚组织中的表达与分布.结果: Versican核心蛋白及其mRNA在胎鼠磨牙牙胚不同发育阶段表达各异,在细胞增生活跃区如增生的牙板、内外釉上皮细胞、颈环以及牙乳头等区域表达明显,而在已分化细胞如成牙本质细胞、成釉细胞等区域无表达,在星网状细胞所在区域也未检测到.结论: Versican核心蛋白及其 mRNA在牙胚发生过程中呈时间-空间特异性模式表达.它可能与上皮-间充质相互作用以及相关细胞的增殖和分化有关.     

Notch1在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育中的表达

目的探讨Notch1在小鼠下颌第一磨牙胚胎发育过程中的组织学分布。方法制作ICR小鼠下颌第一磨牙不同发育阶段的冰冻组织切片,对小鼠下颌第一磨牙自牙胚发育起始期至出生后2天不同发育阶段组织的Notch1分布情况进行免疫组织化学染色。结果 Notch1在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育起始期和蕾状期牙板上皮上方或其包绕的口腔上皮中表达,在牙板上皮中没有表达。自帽状期至钟状期,Notch1在牙胚的中间层表达,而在内釉上皮中无表达。至牙釉质和牙本质分泌期,Notch1仍在颈环部位的中间层表达。此外,Notch1还在牙胚发育不同时期的间充质、牙乳头和早期牙髓中表达。结论 Notch1可能在小鼠下颌第一磨牙发育过程中的牙上皮特别是内釉上皮的细胞分化,以及牙囊和牙乳头细胞分化及分化完成后的牙髓干细胞的稳定性方面有重要作用。     

出生后小鼠第一磨牙牙胚不同发育阶段的Notch1的表达

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C-Met在ICR小鼠下颌第一磨牙牙胚中的表达

目的探讨c-Met在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育中的表达情况。方法采用孕12d、13d、14d、16d、18d ICR胎鼠及出生后2d ICR仔鼠的头部制作冰冻切片,以抗小鼠c-Met多克隆抗体对冰冻切片进行免疫荧光实验,激光共聚焦显微镜观察。结果 c-Met在牙胚蕾状期、帽状期的上皮、钟状期的内釉上皮、成釉细胞和成牙本质细胞中有表达;牙胚和口腔黏膜连接区域两侧的间充质中、牙乳头及蕾状早期颊侧下方下颌的间充质中c-Met也有表达。结论 C-Met对于牙齿的形态发生,成釉细胞和成牙本质细胞的分化,牙乳头细胞的发育可能具有重要作用。     

Pik3cb在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育不同阶段的表达研究

目的:检测Pik3cb在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育不同阶段的表达分布及变化规律,进一步揭示Pik3cb对牙形态发生的影响。方法:制备原位杂交探针,及小鼠牙胚发育标志时间点的牙胚冰冻切片,通过原位杂交方法进一步显示Pik3cb在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育不同时期的表达情况。结果:蕾状期Pik3cb明显表达于牙板上皮,帽状期开始大量表达于釉上皮与牙乳头,进入钟状期表达部位趋于集中,尤以内釉上皮及后续新形成硬组织周围的高柱状成釉细胞处最为明显。结论:Pik3cb在牙源性上皮及成釉细胞表达,并可能通过PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号通路与成釉细胞瘤行为相关。     

小鼠牙胚发育在下颌弓培养模型中的动态观察

目的：建立研究牙胚发生、早期发育的研究模型。方法：取11dpc胎鼠下颌弓，用Trowell培养系统进行培养。培养1、3、5、7、9、11d后进行常规HE染色，观察牙胚的发生发育过程。结果：下颌弓生长良好，可动态地观察到牙胚发生以及发育至帽状期的过程。结论：小鼠下颌弓体外培养模型是研究牙胚形态发生和早期发育的有效工具。     

尼古丁对体外培养鼠磨牙牙胚发育的影响

目的:探讨尼古丁对体外鼠磨牙牙胚发育的影响.方法:采用RPMI-1640半固态培养基,在培养基中加入不同浓度的尼古丁,将15d胎龄的胎鼠的下颌第一磨牙牙胚分别置于各浓度组RPMI-1640半固态培养基表面培养4、8d,每48h更换培养基一次.结果:实验组与对照组相比较,主要表现在实验组发育中的牙胚体积缩小,成牙本质样细胞的分化程度不足、数量和速度均低于对照组,前期牙本质样基质形成减少或不能形成,并且呈时间、浓度依赖性.结论:尼古丁对体外培养胎鼠牙胚的形态、细胞的增殖和分化有抑制作用.     

小鼠磨牙牙胚发育过程中硫酸软骨素硫酸化模式的时空变化

目的:检测硫酸软骨素在小鼠磨牙牙胚发育过程中的硫酸化模式的时空变化。方法:取胎龄分别为E11.5、E13.5、E15.0、E16.5和E18.5d的ICR胎鼠头部,常规组织学处理,制备5μm厚矢状或冠状切片,用免疫组织化学方法检测4-硫酸软骨素、6-硫酸软骨素在下颌第一磨牙牙胚组织中的时空表达。结果:从小鼠牙胚开始发生到帽状期,4-硫酸软骨素只在牙源性上皮外层细胞与基底膜强表达,在牙源性间充质组织中不表达,钟状早期其开始在牙源性间充质组织中表达。6-硫酸软骨素只在牙源性间充质细胞中表达,且其与4-硫酸软骨素呈互补表达模式。结论:硫酸软骨素在牙胚发生过程中其硫酸化模式呈现时间-空间的特异性改变,这种特异性改变可能与小鼠磨牙牙胚的形态发生密切相关。     

表皮生长因子受体在小鼠磨牙牙胚发育过程中的表达及其生物学意义

目的:探讨表皮生长因子受体在小鼠磨牙牙胚发育过程中的生物学作用。方法:用免疫组织化学检测表皮生长因子受体(EGFR)在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育过程中的定位。结果:证实EGFR在鼠牙胚不同发育阶段呈时间-空间特异性分布模式。EGFR特别地在细胞增殖活跃的部位强染,在形态发生和分化晚期染色减弱。结论:EGF及其受体可能在调控蕾状期和帽状期形态发生的上皮-间充质相互作用中以旁分泌模式起作用。     

鼠牙胚的体外培养的实验观察

目的：组织学观察鼠牙胚的体外发育．方法：１７天大鼠（ＳＤ）胚胎的下颌第一磨牙置于微孔滤膜上培养，培养液为ＤＭＥＭ＋１０％ＦＣＳ，５０μｇ／ｍｌＶｉｔＣ．结果：体外牙胚可进一步发育，间质细胞分化为成牙本质细胞和形成前期牙本质．结论：这种培养条件可保持鼠磨牙的体外发育     

MMP-9基因敲除小鼠磨牙牙胚中釉原蛋白和成釉蛋白表达的研究

目的:检测MMP-9基因敲除小鼠(MMP-9^-/-)和野生型小鼠磨牙牙胚中釉原蛋白和成釉蛋白的表达。方法:使用免疫组化方法检测出生后2 d(P2)、5 d(P5)、7 d(P7)野生型小鼠和MMP-9^-/-小鼠下颌磨牙牙胚中釉原蛋白和成釉蛋白的表达分布。结果:在P2时,釉原蛋白主要表达在成熟的成釉细胞胞、及其相邻的成牙本质细胞内,敲除MMP-9后,釉原蛋白的表达可扩散至牙乳头间充质;在P5和P7时,釉原蛋白的表达分布在野生型小鼠和MMP-9^-/-小鼠中无差异,但在MMP-9^-/-小鼠中釉原蛋白在成釉细胞中的表达量明显增强。在P2、P5和P7时,成釉蛋白的表达分布和表达量在野生型小鼠和MMP-9^-/-小鼠中均无差异。结论:MMP-9可能通过酶切釉原蛋白而影响其表达分布。     

半固态培养基法培养鼠磨牙牙胚的实验观察

目的 :观察体外培养的鼠磨牙牙胚发育过程的组织学变化。方法 :用 16d胎龄的昆明小鼠下颌第一磨牙牙胚置于RPMI- 16 40半固态培养基上培养 ,常规组织学观察。结果 :体外培养的牙胚可由帽状期进入钟状期 ,出现成牙本质细胞和成釉细胞的分化及前期牙本质的形成。结论 :半固态培养基法培养牙胚可保持其发育过程。     

高氟环境对小鼠牙齿发育中CD44表达的影响

目的：探讨CD44在正常牙齿发育以及高氟环境中牙齿发育表达变化,从细胞粘附分子与发育学角度揭示氟牙症发病机制。方法：建立小鼠急性氟中毒动物模型,采用免疫组织化学的方法,观察CD44在正常及高氟环境中下颌第一磨牙牙胚发育的钟状形态发生期、分化期、分泌期、成熟期的表达。结果：钟状形态发生期、钟状分化、分泌期实验组和对照组成釉器中间层细胞CD44的表达水平无差异。成熟期实验组CD44的表达水平显著低于对照组。结论：过量氟影响成熟期中间层细胞CD44的表达,使其表达下调,推测影响釉质的矿化。     

下颌有阻生倾向智牙胚与阻生智牙拔除术的比较研究

目的:比较下颌有阻生倾向的智牙胚拔除术与下颌阻生智牙拔除术的手术难度及术后并发症。方法:研究组选取有阻生倾向的下颌智牙胚拔除术病例41例,并随机收集成年下颌埋伏阻生智牙拔除病例40例作对照。收集两组拔牙手术操作时间、术后疼痛、局部肿胀、张口度改变情况的数据,并进行对比分析。结果:下颌有阻生倾向的智牙胚拔除术操作时间短,术后的肿胀、疼痛及开口改变情况,均较对照组轻。结论:下颌有阻生倾向的智牙胚拔除术,操作简单,术后不良反应较轻,恢复快。     

釉原蛋白、釉蛋白及成釉蛋白在小鼠牙胚组织发育过程中的表达

目的:比较小鼠釉原蛋白(amelogenin,AMELX)、成釉蛋白(ameloblastin,AMBN)和釉蛋白(enamelin,ENAM)在牙胚组织发育过程中表达的差异,从而揭示其不同的功能。方法:选择牙胚发育期分别位于钟状期、钟状晚期、釉质成熟期的昆明小鼠头颅切片,使用抗鼠AMELX、AMBN和ENAM多克隆抗体(由美国德州大学健康科学中心Dr.Sim-mer赠送),行免疫组织化学EnVision二步法染色,观察三种蛋白在处于三个不同发育阶段小鼠头颅切片中的表达情况。结果:免疫组化结果显示,三种蛋白在三种小鼠牙胚的成釉细胞、釉质、牙本质中的表达存在时空顺序差异,随着牙胚发育和釉质成熟,AMELX呈递减表达,而AMBN和ENAM则较恒定表达。AMELX在周围发育中的编织状骨组织中也有微弱表达。结论:AMELX、AMBN和ENAM为主要的釉质基质蛋白,在牙胚发育的不同阶段有不同的调节矿化的作用,AMELX在釉质矿化早期促进晶体生长,而其在骨中的表达则进一步表明其在骨修复中可能的作用;AMBN促进釉质基质矿化,并维持晶体形状、大小;ENAM促进和维持晶体生长,并与再矿化有关。     

转化生长因子β2 mRNA在小鼠磨牙牙胚发育过程中表达的研究

目的：探讨转化生长因子β2（transforminggrowthfactor-β2，TGFβ2）mRNA在小鼠磨牙牙胚发育过程中的表达及其意义。方法：制备小鼠磨牙各发育阶段标本，用原位杂交分析TGFβ2mRNA在牙胚中的表达与分布。结果：TGFβ2mRNA在小鼠磨牙牙胚不同发育阶段呈时间一空间特异性模式表达。结论：TGFβ2mRNA在牙形态发生过程中可能通过自分泌和旁分泌机制协同调控上皮一间充质相互作用及成牙本质细胞和成釉细胞的分化。     

口腔癌患者唾液中透明质酸含量的检测及意义

目的:检测口腔癌患者唾液中透明质酸(HA)的含量,探讨HA对口腔癌辅助诊断和治疗效果监测的价值。方法:选择住院治疗的口腔癌患者36例,健康人20例,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定所有标本唾液中的HA浓度。结果:治疗前口腔癌患者唾液中HA含量显著高于健康人(P<0.05),治疗后口腔癌患者唾液中HA含量低于治疗前,但差异不显著(P>0.05)。结论:唾液中HA含量测定对口腔癌可能有辅助诊断价值。唾液中HA的含量变化可作为判断肿瘤预后的参考,但不能用于治疗效果的监测。