区分NZB/WF1狼疮鼠不同体质的实验研究

目的 检测划分NZB/W F1狼疮鼠体质,将其分为寒、常、热3种体质,并证实这些体质差异的客观存在。     

狼疮静对NZB/NZW F1小鼠病情发展的动态观察

狼疮静颗粒是由补肾化毒中药组成 ,前期临床研究及部分疗效机理的实验研究已获肯定和证实〔1～ 3〕,为进一步研制和开发新药 ,并提供模型动物症状学改变的实验依据 ,我们运用狼疮静颗粒剂型 ,对 3～ 6月龄雌性 NZB/ NZWF1小鼠 (自发性狼疮小鼠 )显性发病的部分症状及病情变化情况进行了研究观察 ,现将结果总结报告如下。1　材料与方法1 .1　实验动物 :2 8只 3月龄雌性 NZB/ NZWF1小鼠由复旦大学实验动物科学部提供 (从美国 Jacsion实验室引种 ,SPF级环境下繁殖 F1代 )。1 .2　试验药物 :狼疮静颗粒 ,1 0 g/袋装 (南京中医药大学附属…     

狼疮静颗粒对NZB/W F1小鼠肾脏组织CD54表达的影响

目的:观察狼疮静颗粒对NZB/WF1小鼠肾脏组织细胞黏附分子-1(CD54)表达的影响,探讨中药狼疮静颗粒治疗活动性SLE的免疫调节机理,进而了解CD54在NZB/WF1狼疮鼠发病机制中的作用。方法:选用先天发病的自发性狼疮模型NZB/WF1小鼠,分别给予中、西药物灌胃治疗,采用免疫组织化学法观察肾脏组织CD54的表达。结果:除狼疮静小剂量组外,各给药组均能明显抑制CD54着色面积和相对着色面积的升高。狼疮静大剂量组的抑制作用优于狼疮静小剂量组,存在量效依存关系;中西药结合组优于狼疮静中剂量组。结论:狼疮静颗粒具有类激素样或抗黏附分子样作用,结合西药后可协同发挥疗效并显示出疗效优势。     

狼疮静颗粒对自发性狼疮小鼠肾狼疮样改变抑制作用的实验研究

目的 探讨中药狼疮静颗粒对自发性狼疮(NZB/NZW F1)小鼠狼疮样改变的抑制作用及其机制。方法 应用狼疮静颗粒、泼尼松及狼疮静合泼尼松3组药物,对3月龄雌性BW狼疮模型小鼠进行干预治疗6～12周,观察对各组小鼠病情发展动态变化、CD4^+、CD8^+细胞和CD54表达改变及对肾小球病理变化的影响。结果 中西药物均能改善系统性红斑狼疮(SLE)模型小鼠狼疮样改变的部分症状和血浆CD4^+、CD8^+细胞分布,抑制血清细胞黏附分子-1(ICAM-1)含量升高和外周血淋巴细胞表面CD54的高表达,抑制肾小球萎缩和系膜细胞的增殖,以狼疮静结合泼尼松组效果明显为优。结论 狼疮静颗粒能有效控制并改善模型小鼠狼疮样发病及进程,并能调节模型小鼠细胞免疫功能,抑制过亢的免疫反应,对狼疮样肾炎的病理变化有改善作用,结合西药后可协同发挥疗效并显示出疗效优势。     

不同体质MRL/lpr狼疮鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达

目的:观察不同体质MRL/lpr雌性狼疮鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达情况,证实狼疮鼠体质差异的物质基础。方法:将3月龄狼疮鼠按体质分为常体、热体、寒体,饲养1月后,采用RT-PCT、Western Blot方法检测不同组别狼疮鼠血清ds-DNA,肾脏RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达。结果:不同体质MRL/lpr雌性狼疮鼠间RORγt mRNA的表达无明显差异,RORγt蛋白质的表达、Foxp3 mRNA及蛋白质的表达存在明显差异。MRL/lpr热体组小鼠RORγt、Foxp3 mRNA及蛋白水平均偏低。结论:MRL/lpr狼疮鼠体质差异与RORγt、Foxp3基因及蛋白质的表达有关。     

狼疮静颗粒对狼疮样小鼠外周血CD4+、CD8+及CD54表达的影响

目的 探讨狼疮静颗粒不同剂量对自发性狼疮小鼠部分免疫调节作用机制。方法 运用狼疮静颗粒3种不同剂量，对3月龄雌性NZB／NzW F1狼疮模型小鼠进行干预治疗6周，观察其对各组小鼠CD4^ 、CD8^ 细胞及CD54表达的影响。结果 中药狼疮静不同剂量有升高模型小鼠外周血CD4^ 、CD8^ 细胞的倾向，能降低血清CD54含量，抑制血浆淋巴细胞表面及单核细胞表面CD54的高表达，其作用以中、高剂量明显。结论 狼疮静颗粒能改善和调节自发性狼疮小鼠细胞免疫功能，抑制过亢的免疫反应。     

狼疮鼠模型的研究分析

SLE动物模型研究主要有自发性小鼠模型和诱导性小鼠模型,自发性小鼠模型侧重研究遗传因素对SLE发病的影响,诱导性小鼠模型侧重于研究环境因素、性激素、感染等因素对SLE发病的影响。对狼疮鼠模型的研究,有助于探索SLE的发病机制,并为SLE治疗提供了可靠的实验基础。     

益气破血解毒小复方对NZB／WF1狼疮鼠淋巴细胞IFN-γ、IL-10基因表达影响的初步研究

目的：运用Realtime PCR技术观察益气破血解毒小复方干预对NZB／WF1狼疮鼠脾淋巴细胞IFN-γ、IL-10基因表达的影响。方法：58只5月龄雌性NZB／WF1狼疮鼠随机分配至3组：空白组20只、中药组20只和西药组18只。空白组灌胃无菌生理盐水0．5ml／d,中药组灌胃益气破血解毒小复方0．5ml／d,西药组灌胃骁悉溶液0．5ml／d,中药组灌胃益气破血解毒小复方0．5ml／d,西药组灌胃骁悉溶液0．5ml／d（浓度1．3mg／ml）,干预时间为60天。无菌条件下取出小鼠脾脏,机械分离、梯度离心法分离淋巴细胞。恒温培养72h后收获细胞,抽提总RNA,用RealtimePER法行IFN-γ、IL-10基因表达检测。结果：空白组的IFN-γ基因表达量显著高于西药组（P〈0．01）,而与中药组间无统计学差异（P〉0．05）。空白组IL-10基因表达量显著高于中药组（P〈0．05）和西药组（P〈0．05）,两治疗组间未见统计学差异（P〉0．05）。     

补肾复方对围绝经期大鼠卵巢VEGF影响的实验研究

如何延缓卵巢功能衰退,恢复卵巢的功能,提高生活质量,是目前临床及科研工作者研究的重要课题之一。为探索补肾复方治疗围绝经期卵巢衰老的机理,笔者观察了补肾复方对围绝经期大鼠卵巢血管内皮生长因子(VEGF)的影响。1材料1·1实验动物所有动物均为W istar雌性大鼠,由沈阳医学院实验动物中心提供。质量合格证号:SCXK(辽)2003-0016。微生物控制等级一级。11~12月龄大鼠50只,体重(321.36±29.37)g,根据阴道脱落细胞检查,无规律性动情周期变化,确定为围绝经期大鼠。4月龄青年大鼠10只,体重(210±10.54)g;18月龄老年大鼠10只,体重(380±30.18…     

狼疮方2号对狼疮模型血清中几种细胞因子的影响

 目的研究中药复方狼疮方2号(LCF-2)对BXSB狼疮模型鼠血清中细胞因子的作用及对脾指数、胸腺指数的影响,探讨其对SLE的作用机制。方法 将BXSB狼疮模型鼠随机分为空白对照组、中药组、西药组、中西药合用组。重量法测定小鼠脾指数及胸腺指数;双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中IL-2,IL-6,TNF-a的含量。结果 LCF-2组能够升高已降低的胸腺指数,与空白对照组比差异有显著性,对已升高的脾指数作用不明显,而中西药组可以降低升高的脾指数(P<0.01),升高降低的胸腺指数(P<0.05);中药组能显著抑制TNF-a(P<0.05),上调IL-2水平(P<0.01),对IL-6的降低作用无统计学意义;中西药合用药组能抑制TNF-a(P<0.01),上调IL-2水平(P<0.05),抑制IL-6(P<0.05)。结论 中药复方LCF-2与西药泼尼松均对BXSB狼疮小鼠有明显的治疗作用,但两者的作用机制不同。中西药合用组疗效优于中药、西药组。     

滋阴清热方对狼疮鼠脾淋巴细胞的核蛋白质的影响

目的:探讨滋阴清热方和泼尼松对狼疮鼠脾淋巴细胞的核蛋白质的影响。方法:用生理盐水(对照组)、中药、西药和中西药等不同的干预措施处理狼疮鼠5周,提取脾淋巴细胞核蛋白质,运用表面增强激光解析离子化-飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测各处理组狼疮鼠核蛋白质的表达差异,揭示滋阴清热方以及联合泼尼松治疗SLE的作用环节。结果:在脾淋巴细胞的核蛋白质中发现对照组出现一些加重自身免疫的蛋白质,而西药组出现一些抑制免疫反应的蛋白质;中西药组和西药组对脾淋巴细胞的核蛋白质影响的结果是相似的。结论:滋阴清热方中药和或泼尼松可能通过影响脾淋巴细胞细胞的分化和蛋白质的表达达到治疗目的。     

狼疮平颗粒对BXSB狼疮性肾炎小鼠B淋巴细胞活化因子表达的影响

目的研究B淋巴细胞活化因子(Blymphocyte activating factor,BAFF)在BXSB狼疮性肾炎小鼠血清和外周血B淋巴细胞(PBBC)中的表达,并观察中药狼疮平颗粒的治疗作用。方法将11周龄雄性BXSB狼疮性肾炎小鼠18只随机分为狼疮对照组、激素治疗组、狼疮平治疗组,每组6只;另取11周龄雄性C57BL/6小鼠6只作为正常对照组。分别给予灌胃生理盐水(10mL/d)、甲泼尼龙[5mg/(kg·d)]、狼疮平颗粒[4g/(kg·d)]、生理盐水(10mL/d),治疗4周,测定各组尿蛋白、ds-DNA和体重,分别应用ELISA、RT-PCR方法检测血清中可溶性BAFF(sBAFF)和外周血B细胞中BAFF-mRNA的表达及变化,并观察肾脏病理活动性计分、24h尿蛋白定量、ds-DNA与sBAFF的关系。结果狼疮性肾炎小鼠血清sBAFF、PBBC中BAFF mRNA水平、24h尿蛋白定量、血清ds-DNA含量均较正常小鼠明显升高。激素和狼疮平治疗组治疗后sBAFF、BAFF mRNA较治疗前明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),两组治疗后sBAFF、BAFF mRNA水平无明显差异(P>0.05)。狼疮性肾炎小鼠血清sBAFF水平与肾病理活动性计分、24h尿蛋白定量、ds-DNA成正相关(r=0.8098、0.8220、0.8535,P<0.01)。结论 BAFF在狼疮性肾炎的发生发展中起着重要的作用,可以监测病情变化并预测复发,是狼疮性肾炎治疗的理想靶点之一。中药狼疮平可以通过降低BAFF水平而改善狼疮性肾炎病情,值得进一步临床推广应用。     

活血配方的抗血小板活性及对昆明山海棠的增效作用

目的:研究活血配方的抗血小板活性,评估其与昆明山海棠配伍用于系统性红斑狼疮(systemic lupus eythematosus;systemic lupus erythematosus,SLE)治疗的价值。方法:通过血小板体外聚集实验和实验性血栓形成实验研究活血配方对血小板释放、聚集的影响;通过鹿角菜胶所致鼠尾血栓实验研究活血配方对凝血系统的影响;通过比较昆明山海棠、活血配方及二者合用对降植烷(pristane)所致实验性狼疮小鼠血清中SLE标志物抗双链DNA(double stranded DNA,dsDNA)抗体、B细胞活化因子(B cellactivation factor,BLYS)和血小板活化标志物sCD154、CD62P水平的影响,研究活血配方用于提高昆明山海棠疗效的可能性。结果:活血配方0.1～0.5g/kg均能不同程度降低血小板聚集率、提高聚集抑制率、抑制鼠尾血栓形成,0.5g/kg对实验性体外血栓形成有显著抑制作用;活血配方0.5g/kg及与昆明山海棠合用(狼疮平)1g/kg均可有效抑制实验性狼疮小鼠血清中血小板活化标志物水平,但其单独应用对血清中SLE标志物无明显影响。结论:活血配方可有效抑制血小板活化,且对凝血系统有一定影响,可增强昆明山海棠对SLE的治疗作用。     

狼疮静颗粒对NZB／NZWF1小鼠外周血CD4＋、CD8＋细胞及ICAM-1表达的影响

目的探讨狼疮静颗粒对自发性狼疮小鼠的免疫调节作用机制。方法运用狼疮静颗粒、强的松及狼疮静合强的松三组药物，对3月龄雌性NZB／NZWF1狼疮模型小鼠进行干预治疗6周，观察各组小鼠CD4 、CD8 细胞及ICAM-1表达的影响。结果中西药物均能改善模型小鼠CD4 、CD8 细胞分布，抑制血清和血浆淋巴细胞表面ICAM-1的高表达，以申狼疮静结合强的松组效果明显为优。结论狼疮静颗粒能有效改善并调节自发性狼疮小鼠细胞免疫功能，抑制过亢的免疫反应，结合西药后可协同发挥疗效并显示出疗效优势。     

补肾复方对围绝经期大鼠血清NO-NOS水平的影响

本研究观察了围绝经期大鼠卵巢衰老与一氧化氮(nitric oxide,NO)的关系,现报告如下。1材料与方法1·1材料1·1·1动物Wistar雌性大鼠,由沈阳医学院实验动物中心提供,质量合格证号:SCXK(辽)2003-0016。11~12月龄大鼠50只,体重321·36g±29·37g,根据阴道脱落细胞检查,无规律性动     

狼疮3号颗粒治疗系统性红斑狼疮的实验研究

目的通过研究中药狼疮3号颗粒(Langchuang-3 granule,LC-3)对BXSB系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)模型鼠体重、自身抗体、脾指数、胸腺指数以及肾脏免疫复合物沉积的影响,探讨其对SLE的作用机制。方法将BXSBSLE模型鼠随机分成4组:对照组、中药组、西药组、中西药组。采用动态观察法测定小鼠体重变化,重量法测定小鼠脾指数及胸腺指数;双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清中抗核抗体(ANA)的含量;直接免疫荧光法测定小鼠肾脏中免疫球蛋白G(IgG)、补体C3的含量。结果中药组及中西药组小鼠体重增长明显,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);中药组已降低的胸腺指数升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义,对已升高的脾指数作用不明显,西药组脾指数及胸腺指数均下调,而中西药组升高的脾指数降低(P0.01),降低的胸腺指数升高(P0.05);各给药组自身抗体(ANA)水平均降低,转为阴性(P0.01);小鼠肾脏IgG、补体C3的荧光强度均降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论 LC-3与西药类固醇激素均对BXSB狼疮模型鼠有明显的治疗作用,中西药合用疗效优于单独应用中药或西药。     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮鼠淋巴细胞亚群和细胞因子表达的影响

 目的探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对MRL/lpr狼疮鼠淋巴细胞亚群和细胞因子表达的影响。方法MRL/lpr狼疮鼠随机分为ATO组(0.4mg·kg^-1·d^-1,ip)、环磷酰胺(CTX)组(50mg·kg^-1每周1次,ip)和生理盐水(NS)组(按体重取量,ip),给药2个月。取脾脏制成脾细胞悬液,加入佛波醇酯(PMA)和ionomycin活化,同时加monensin抑制蛋白转运,于37℃,5%CO₂培养4h后,用四色流式细胞术测脾脏CD3⁺(T)细胞和CD3⁺CD4⁺(Th)细胞的百分率以及CD3⁺CD4⁺(Th)细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的水平;分离血清,用ELISA法测血清中抗ds-DNA抗体、IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的浓度。结果①给药后,ATO组小鼠血清的抗ds-DNA抗体水平较给药前明显下降(P<0.01),而NS对照组则明显升高(P<0.05)。②ATO组CD3⁺细胞和CD3⁺CD4⁺百分率均显著低于NS组(P<0.01);③ATO组的血清IFN-γ和IL-12浓度均低于NS组(前者P<0.01,后者P=0.018);④ATO组Th细胞内IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12表达均显著低于NS组(P<0.01)。结论三氧化二砷能显著降低MRL/lpr狼疮鼠血清抗ds-DNA抗体的水平,抑制T细胞和Th细胞增生和活化功能,降低IFN-γ和IL-12的血清水平和Th细胞内IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的水平。     

10种雌性大鼠的中医体质学初步研究

目的：探讨常用实验动物的中医体质学的差别，为中医动物实验的动物选择和实验动物饲育管理提供依据。方法：对10种北京市常用的雌性实验大鼠进行外观、大便、舌象观察，并测定动物的体温以及肾上腺、胸腺、脾脏重量和与中医体质学有关的生物化学指标。结果：不同品系、同品系不同微生物等级的实验大鼠间在某些指标上有一定的差异。结论：不同品系、同品系不同微生物等级的实验大鼠间在中医体质学方面存在一定的差异。     

4种小鼠的寒、热体质研究

目的研究4种品系小鼠的寒、热体质。方法8～9周龄昆明、BALB/c、C57BL/6J、ICR小鼠,以及4～5周龄昆明小鼠,同步系统检测其生物学特性,然后以统一的评价标准评价4种品系小鼠的寒、热体质。并对BALB/c小鼠给予参桂理中丸和利血平做药物反证。结果①4～5周龄昆明小鼠与8～9周龄昆明小鼠比较体质明显偏热;②BALB/c小鼠与C57BL/6J小鼠比较体质偏寒;③8～9周龄雄性BALB/c小鼠、雄性和雌性C57BL/6J小鼠与8～9周龄相应性别昆明小鼠比较体质无明显差异;8～9周龄雌性BALB/c小鼠与8～9周龄雌性昆明小鼠比较体质偏寒;④8～9周龄ICR小鼠与8～9周龄BALB/c小鼠、C57BL/6J小鼠比较体质偏热;8～9周龄雄性ICR小鼠与8～9周龄雄性昆明小鼠比较体质偏热。结论4种品系小鼠存在寒、热体质差异。     

槐杞黄颗粒对MRL/Lpr狼疮小鼠肾损伤治疗作用的影响

目的研究槐杞黄颗粒对MRL/Lpr狼疮小鼠肾损伤病理进程发展的影响。方法正常饲养C57BL/6小鼠8只为正常组。8~10周龄MRL/Lpr狼疮小鼠24只随机分为模型组、槐杞黄颗粒组(HQH组)、地塞米松组(DXM组),每组8只。MRL/Lpr狼疮小鼠12周龄左右开始发病,HQH组与DXM组分别给予槐杞黄颗粒(4 g/kg)及地塞米松(2.5 mg/kg)灌胃治疗,每天1次,共治疗15天。检测各组小鼠体重,24 h尿蛋白、白蛋白、SCr、BUN及抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(ds DNA)含量水平,HE染色观察肾脏组织病理,免疫荧光发检测IgG及C3。结果与正常组比较,模型组体重增长差值减少,ANA、ds DNA、白蛋白、SCr、BUN水平升高(P0.01)。与模型组比较,DXM组及HQH组体重差值增加(P0.01),ANA、ds DNA、白蛋白、SCr、BUN水平下降(P0.01)。与治疗前比较,治疗后DXM组及HQH组24 h尿蛋白量明显下降(P0.05,P0.01)。HE染色可见模型组肾小球细胞增生,且肾小球毛细血管壁有明显损伤,肾小球和肾间质炎细胞浸润,同时肾小管肿胀明显;DXM组和HQH组炎性细胞浸润明显减少,肾小管肿胀有所减轻。免疫荧光检测显示与正常组小鼠比较,模型组小鼠肾脏中IgG表达上升,C3的表达下降;DXM组及HQH组小鼠肾脏中IgG表达下降,C3表达上升。结论槐杞黄颗粒有改善MRL/Lpr狼疮小鼠肾脏病理的作用。