维甲酸改变人肝癌细胞表面N—糖链的结构及其酶学机制

用３Ｈ－甘露糖标记７７２１人肝癌细胞表面糖蛋白的Ｎ－糖链，经提取和去唾液酸后，用ＣｏｎＡ和ＤＳＡ亲和柱顺序层析将３Ｈ－标记的Ｎ－糖链分成４个类型和天线数不同的组分来研究维甲酸（ＲＡ）对细胞表面Ｎ－糖链的影响。结果：１０ｕｍｏｌ／Ｌ ＲＡ处理细胞３￣５ｄ后，可使Ｃ２Ｃ２二天线复杂型Ｎ－糖链增加，而高甘露糖型及三、四天线，特别是带有Ｃ２，６分支结构的复杂型Ｎ－糖链减少。用ＬＣＡ亲和柱还证明二天线糖链中     

6A8α-甘露糖苷酶的基因克隆、表达与功能研究

糖蛋白中的糖链在细胞-细胞、细胞-基质及细胞-分子间信息交通起重要作用.糖链可以N-连接方式(连接于蛋白质中由天冬酰氨酸、除脯氨酸外的任意氨基酸、丝氨酸/苏氨酸组成的序列子中的天冬酰胺)或O-连接方式(连接于蛋白质中的丝氨酸或苏氨酸)与蛋白质相连.N-连接与O-连接均需要一系列酶的催化.这些酶的识别与特性研究有助于对蛋白质糖基化机制与糖链功能的了解.     

6A8α-甘露糖甘酶的基因克隆、表达与功能研究

糖蛋白中的糖链在细胞-细胞、细胞-基质及细胞-分子间信息交通起重要作用。糖链可以N-连接方式(连接于蛋白质中由天冬酰氨酸、除脯氨酸外的任意氨基酸、丝氨酸/苏氨酸组成的序列子中的天冬酰胺)或O-连接方式(连接于蛋白质中的丝氨酸或苏氨酸)与蛋白质相连。N-连接与O-连接均需要一系列酶的催化。这些酶的识别与特性研究有助     

胃癌组织N-糖苷键型糖蛋白的纯化及其在血清诊断中的意义

N-糖苷键连接的糖链是通过GlcNACβ_1-4GlcNAC和肽链上大冬酰胺残基的酰胺氮连接成糖苷链。在人体内很多属于糖蛋白的激素、酶和肿瘤标志物属这类N-糖苷型糖蛋白。近年来发现许多肿瘤的异常改变与其糖蛋白糖链的变异有关,肿瘤组织中糖链的检测可用于临床诊断,因而肿瘤细胞糖蛋白的研究已引起人们的重视。作者应用可     

维甲酸改变人肝癌细胞表面N－糖链的结构及其酶学机制

用３Ｈ－甘露糖标记７７２１人肝癌细胞表面糖蛋白的Ｎ－糖链，经提取和去唾液酸后，用ＣｏｎＡ和ＤＳＡ亲和柱顺序层析将３Ｈ－标记的Ｎ－糖链分成４个类型和天线数不同的组分来研究维甲酸（ＲＡ）对细胞表面Ｎ－糖链的影响。结果：１０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理细胞３～５ｄ后，可使Ｃ２Ｃ２二天线复杂型Ｎ－糖链增加，而高甘露糖型及三、四天线，特别是带有Ｃ２，６分支结构的复杂型Ｈ－糖链减少。用ＬＣＡ亲和柱还证明二天线糖链中的核心岩藻糖也减少。进一步发现上述改变的酶学机制是ＲＡ降低Ｎ－乙酰氨基萄葡糖转移酶Ｖ和α－１，６－核心岩藻糖转移酶的活力。结论：ＢＡ通过改变某些糖基转移酶活力而改变细胞表面糖链结构，这可能是ＲＡ使７７２１细胞诱导分化的机理之－。     

异常糖链糖蛋白在肿瘤发生发展中的作用及检测进展

异常糖链糖蛋白是蛋白质糖基化异常——糖蛋白糖链结构或糖基转移酶活性的变化而形成的,蛋白质翻译后加工修饰异常与疾病发生、发展存在密切关系,而在多种多样的蛋白质翻译后加工中,糖基化修饰是最普遍的一种,糖基化生物合成状态比蛋白质的改变能更有效地提示疾病状态。因此,异常糖链糖蛋白检测使肿瘤在发生早期即可作出诊断,并为疾病进展的动态监测提供可能。     

肼化辣根过氧化物酶糖蛋白染色法

探索一种简便灵敏的糖蛋白半定量法。在 ｐＨ ５．０，碳二亚胺（ＥＤＣ）催化下，辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）与己二酰二肼反应生成肼化的ＨＲＰ（ＨＲＰ－ＨＺ），固相于硝酸纤维素膜上的糖蛋白（纤连蛋白或转铁蛋白）经过碘酸氧化其糖链中的糖基后生成的醛基可与ＨＲＰ—ＨＺ缩合，用ＨＲＰ的发包底物显色即可检出精蛋白的存在与否。结果：糖蛋白中，１０ ｎｇ的糖即可被检出。结论：与其他糖定量方法相比，该方法灵敏度高，方法简便，能够普遍应用。     

肼化辣根过氧化物酶糖蛋白染色法

探索一种简便灵敏的糖蛋白半定量法。在ｐＨ５．０，碳二亚胺催化下，辣根过氧化物酶与己二酰二肼反应成肼化的ＨＲＰＨＲＰ－ＨＺ），固相于硝酸纤维素膜上的糖蛋白经过碘酸氧化其糖链中的糖基后生成的醛基可与ＨＲＰ－ＨＺ缩合，用ＨＲＰ的发色底物显色即可检出糖蛋白的存在与否。     

肿瘤异常糖链糖蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨分析肿瘤异常糖链糖蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法选择在2018年5月到2019年1月我院收治的49例经过病理学诊断为乳腺癌的女性患者和49例健康女性一起作为研究对象,将乳腺癌患者作为观察组,健康人群作为对照组,观察对比两组人群的肿瘤异常糖链糖蛋白(TAP)的阳性率,同时分析观察组中PR阳性和PR阴性患者的肿瘤异常糖链糖蛋白阳性率。结果观察组患者中的肿瘤异常糖链糖蛋白阳性率要高于对照组,PR阴性患者的肿瘤异常糖链糖蛋白阳性率要高于PR阳性患者的肿瘤异常糖链糖蛋白阳性,对比结果差异明显(P0.05),具有统计学意义。结论肿瘤异常糖链糖蛋白检查对于乳腺癌的诊断有一定的临床意义,可以为乳腺癌的临床诊断提供一些参考。     

PAI—1糖基化位点突变体的构发起家主其在哺乳动物细胞…

Ⅰ型纤溶酶原激活物抑剂是一种Ｍｒ为５０×１０＾３的单链糖蛋白，有３７９个氨基酸线基，３个Ｎ型糖基化位点。构建ＰＡＩ－１糖基化突变化，以便研究糖链的功能。用寡核苷酸定位突变技术将３个糖基化位点２０９，２６５，３２９位进行突变。     

胆管癌胆汁糖蛋白及其糖链结构的初步研究

目的寻找对胆管癌具有诊断价值的特异性标志物。方法应用SDS?PAGE分析41例恶性胆道病变(胆管癌27例、胆囊癌9例、壶腹癌5例)和20例良性胆道病变病人胆管胆汁中蛋白成分的差异。应用糖蛋白定性试验分析差异蛋白是否为糖蛋白。采用制备好的HRP标记凝集素探针(DSA-HRP、WGA-HRP、LCA-HRP、ConA-HRP)对分离出的差异糖蛋白的糖链结构进行初步分析。结果胆管癌胆汁中存在4种差异较明显的蛋白，相对分子质量分别为75×103、63×103、52×103、27×103。前3种为糖蛋白，后一种为非糖蛋白。胆管癌胆汁中分离出的3种差异糖蛋白中糖链结构的变化，主要表现为天线数和核心岩藻糖的明显增多，还可能伴有平分型GlcNAc增多。结论胆汁中某些糖蛋白及其糖链结构的变化可能对鉴别胆道良恶性病变有一定价值。     

蛋白糖基化与细胞毒性T淋巴细胞应答

糖基化是已知的蛋白最重要的翻译后修饰。已知的蛋白糖基化有多种类型 ,其中最常见的是发生在天冬酰胺 (Ａｓ ｐａｒａｇｉｎｅ ,Ａｓｎ)的Ｎ 糖基化 (Ｎ ｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ)和发生在丝氨酸 (Ｓｅｒｉｎｅ ,Ｓｅｒ)和苏氨酸 (Ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ,Ｔｈｒ)的Ｏ 糖基化 (Ｏ ｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ)。糖蛋白中糖基的结构大小不一 ,少者仅一个单糖 ,稍复杂的寡糖链可由 12～ 15个单糖残基衍生物组成 ,甚至可多达 2 0～ 30个单糖残基。糖链的结构类型与其在肽链上共价连接的氨基酸种类有关。蛋白 (肽 )糖…     

糖链加工酶抑制剂地衣霉素和Swainsonine对运铁蛋白受体再循环的影响

作者应用两种糖链加工酶抑制剂,即抑制糖蛋白N-糖链合成的地衣霉素及使糖蛋白N-糖链变为高甘露糖型和杂合型的Swainsonine,来研究SMMC-7721人肝癌细胞表面运铁蛋白受体(TR)N-糖链结构的改变对受体再循环过程的影响。实验结果表明,1μg/ml的地衣霉素处理细胞后,细胞生长、蛋白质合成、DNA合成及细胞膜糖蛋白N-糖链的合成均受到不同程度的抑制,但对TR的再循环并无明显影响。2μg/ml的Swainsonine处理细胞后,对细胞生长、蛋白质合成、DNA合成均无明显影响,它使细胞膜糖蛋白N-糖链中甘露糖的掺入增加,并可加快TR再循环过程。     

唾液酸衍生物的立体选择性硫酸酯化

唾液酸以各种形式存在于生物体中，是连接在细胞表面糖脂和糖蛋白末端的一个九碳糖，具有广泛的生物学活性。Ｋｏｃｈｅｔｋｏｖ［１］和Ｋｕｂｏ［２］等从海胆卵中分离得到Ｎ－羟乙酰基唾液酸的８－硫酸酯衍生物，引起人们对唾液酸硫酸酯衍生物研究的兴趣。最近Ｔａｎａ...     

抗日本血吸虫单克隆抗体制备及其靶抗原性质的研究

为建立两株抗日本血吸虫单克隆抗—ＣＡ－７、ＣＡ－８，（均为ＩｇＭ型）。用单抗ＤＯＴ－ＥＬＩＳＡ方法可检测出血吸虫感染兔血清中的靶抗原。ＣＡ－７的靶抗原存在于虫卵、尾蚴中；ＣＡ－８的靶抗原存在于虫卵、尾蚴和成虫中。用亲和层析的方法分离纯化了这两株单抗的靶抗原。实验结果表明ＣＡ－７和ＣＡ－８的靶抗原是中性糖含量分别为２３．３％和１４．７％，Ｍｒ为２２０×１０３和２００×１０３的糖蛋白。这两种抗原经高碘酸氧化后，都丧失与单抗结合的能力；但经蛋白酶消化后，仍保留抗原活性，表明与单抗ＣＡ－７、ＣＡ－８结合的位点均在糖蛋白的糖链上。ＣＡ－７靶抗原经碱水解去除Ｏ－糖链后，丧失与ＣＡ－７单抗结合的能力；ＣＡ－８靶抗原经碱水解后仍保留抗原活性，说明ＣＡ－７靶抗原决定簇位于Ｏ－糖链上，ＣＡ－８靶抗原决定簇位于Ｎ－糖链上。     

人皮肤成纤维细胞纤连蛋白的纯化及其N-糖链结构

研究人皮肤成纤维细胞纤连蛋白及其片段 Ｎ－糖链结构。用明胶－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和柱纯化培养的人皮肤成纤维细胞所分泌的纤连蛋白（Ｆｎ），用胰糜蛋白酶限制性水解，获得明胶结合片段和肝素结合片段；用肼化的凝集素与经过碘酸氧化后的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）缩合的方法制备 ４种 ＨＲＰ－凝集素（Ｃｏｎ Ａ， ＤＳＡ，ＷＧＡ，ＬＣＡ）探针，用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ法检测明胶结合片段（Ｍｒ４３ × １０３）、肝素结合片段（Ｍｒ３０ ×１０３，２５ ×ｌ０３）在切除唾液酸及平分型 Ｎ－乙酰氨基葡萄糖（ＧＩｃＮＡｃ）前后的 Ｎ－糖链结构。结果： Ｆｎ的 Ｎ－糖链主要存在于 Ｍｒ分别为４３ × １０３、３０ ×１０３、２５ ×１０３的３个片段上，其结构为二、三（主要是Ｃ２Ｃ２６）或四天线的复杂型糖链；糖链末端连有唾液酸（ＳＡ）；都含有核心岩藻糖（ｃ－Ｆｕｃ；平分型 ＧｌｃＮＡｃ只存在于 ４３ × １０３片段所连的糖链中，而且很可能与 Ｃ—Ｆｕｃ共同存在于二天线或Ｃ２Ｃ２６三天线精链上；Ｆｎ的糖链中不含有Ｎ－乙酰乳糖胺重复顺序。结论：在Ｆｎ不同片段上均含有复杂型Ｎ糖链，并存在核心岩藻糖结构，平分型ＧｌｃＮＡｃ只存在于４３ ×１０３片段上。     

人参根多糖化学性质及抗肿瘤活性的研究

作者由人参根中分离出一种葡聚糖和两种酸性杂多糖。ＧＲ－５Ｎ是由葡萄糖组成，而ＧＲ－５ＡＵＬ和ＧＲ－５ＡＵＨ是由半乳糖醛酸，半乳糖，鼠李糖和阿拉伯糖组成。ＧＲ－５Ｎ，ＧＲ－５ＡＵＨ，ＧＲ－５ＡＵＬ的分子量分别为２５０００，７２０００和５５００。糖甙键分析表明，ＧＲ－５Ｎ具有１－４连接的ＧＬＣ为主链，但在其中的６位上有分枝。ＧＲ－５ＡＵＬ和ＧＲ－５ＡＵＨ是果胶类多糖。ＧＲ－５Ｎ具有一定的抗肿瘤作用，它     

糖蛋白抗肿瘤研究进展

糖蛋白是由一个或多个寡糖链通过不同连接方式与蛋白质部分的多肽骨架共价相连而成.在生物体内的糖蛋白种类繁多,广泛存在于动物、植物和某些微生物中,在生物体内它以不同形式存在而发挥作用,是细胞膜、细胞间基质、血浆、粘液、激素等的重要构成成分.糖蛋白中糖链维持蛋白质结构稳定,抵抗蛋白酶水解,参与多肽链在内质网的折叠启动及防止抗体的识别.糖蛋白具有调解和开关激素功能、胞内转运功能,还具有保护与促进物质吸收、参与血液凝固、参与细胞识别等功能.近年的研究表明从动物和植物中提取的糖蛋白具有增强免疫调节、抑制肿瘤、降低血糖、血脂、抗氧化、防衰老等显著的药用功效和保健功能[1].     

测定糖尿病患者尿N—2乙酰—β—D氨基葡萄糖苷酶的临床意义

本文对１０５例糖尿病患者尿中Ｎ－２乙酰－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶、白蛋白、β２－微球蛋白及尿糖进行了检测，结果显示：（１）尿ＮＡＧ和尿Ａｌｂ的检测相比，对早期糖尿病肾病的诊断有相似的敏感性，在早期ＤＮ患者中，尿ＮＡＧ活性与尿Ａｌｂ排泄呈显著正相关，但在临床ＤＮ患者中，尿ＮＡＧ活性与尿Ａｌｂ无相关性     

粘蛋白MRC1及MUC2与胃肠道肿瘤的相关性研究进展

粘蛋白(MUC)是由体内多种上皮细胞分泌的大分子量的糖蛋白,迄今已发现有13种(MUC1-MCR13)。其分子由肽核心和糖链组成,其中糖链约占其重量的50％～90％,肽核心富含苏氨酸、丝氨酸和脯氨酸残基,糖链多以O型糖苷键与肽核心的苏氨酸、丝氨酸残基连接,其最显著的共同特点是它们均有数目不等的串联重复序列。但各种粘蛋白又有其独特结构,重要区别在于内部核心蛋白区域的特异性及外周糖链的变异。粘蛋白在正常人体内主要存在于胃肠道、呼吸道、卵巢及乳腺等多种上皮组织中,其通常在上皮细胞表面分泌,并存在于上皮细胞的极性面,对正常的